EQUIPO AUTOMATIZADO HEMATOLOGIA

Imagen N° 6: “Grupos sanguíneos”

Fuente: Hospital Provincial General Docente de Riobamba

DHSS (Sistema Secuencial Hidrodinámico Doble) asociado a la citoquímica y la citometría:

Citoquímica

Proporciona una excelente diferenciación celular gracias a la tinción citoquímica con

Negro de Clorazol de los componentes internos celulares a temperatura regulada.
Estabilidad de la muestra de 48h tras la extracción. Citómetro de flujo

Identificación celular precisa al inyectar la muestra preparada en un citómetro de doble

hidrofocalización: impedancia (medida del volumen celular) y óptica (análisis de la
estructura interna medida por absorbancia de la luz). Eficacia gracias al ratio de dilución
personalizada, CDR. Permite una extensión de la linealidad automática en caso de
muestras fuera de rango. Se asocia una alarma a las muestras, se reprocesan diluidas para
obtener así un resultado dentro de la linealidad ampliada (Medical, 2017).

Principios del modo automático

 Carga de bandejas
El Pentra 80 permite cargar bandejas de tubos de muestra continuamente durante todas
las fases de funcionamiento. Se colocan las bandejas y luego se arrastran a un mecanismo
que permite mezclar y tomar muestras de cada tubo en una bandeja. Unos interruptores
microscópicos permiten detectar las bandejas cuando se colocan en la bandeja de carga
El tubo de muestra es detectado y su altura se ajusta mediante 2 detectores giratorios
dentrodel mecanismo. Además, existen unos sensores en el mecanismo que permiten
indexar la posición de bandeja en cualquier posición dentro del cargador.
 Agitación de las muestras
La rotación de 360º durante un minuto, aproximadamente, asegura una agitación óptima
de las muestras. La pinza de agitación consta de 2 pinzas que trabajan en combinación
con la toma de muestras del tubo. La primera pinza de agitación agita y mezcla el primer
tubo durante 30 segundos. Luego el tubo se coloca otra vez en la bandeja. Se ejecuta el
mismo proceso con el segundo tubo en la bandeja. Posteriormente, se agitan los tubos nº 1
y nº 3 a la vez durante 30 segundos más. Los tubos se devuelven a la bandeja. A
continuación, se toman y agitan los tubos nº 2 y nº 4, y así sucesivamente (Medical, 2017).
 Identificación del tubo de muestra
Un lector interno de código de barras identifica las bandejas y los tubos de muestra para
garantizar la identificación correcta y asegurar los resultados.
 Perforación de tapones de muestras
Con el fin de mantener el volumen de la muestra reducido, aproximadamente 60 ml,
HORIBA ABX utiliza una aguja de muestras de doble aguja. Esta aguja consiste en una aguja
perforadora exterior y una aguja de muestreo interna estrecha que aspira la muestra
cuando se perfora el tapón.
Principios de medición
Sistema de muestreo de distribución múltiple (MDSS, MultiDistribution Sampling System)
 Modo CBC
En el modo CBC, el sistema aspira 30 μl de sangre total y la transporta a las cámaras de la
siguiente manera:
Una parte de la muestra va a la cámara de dilución, que se utiliza para la dilución ERI/PLA
y para medir la hemoglobina. La otra parte se utiliza para contar LEU/BASO. Distribución de
partes en modo CBC
 Modo DIFF
En el modo DIFF, el sistema aspira 53 μl de sangre total y la transporta a las cámaras de la
siguiente manera:
Una parte de la muestra va a la cámara de dilución, que se utiliza para la dilución ERI/PLA
y para medir la hemoglobina. La segunda parte se utiliza para contar LEU/BASO. La última
parte de la muestra se utiliza para la cámara LMNE, desde la cual la muestra pasa a la
célula de flujo para el recuento de LMNE.
Distribución de muestras
Cada parte de la muestra se distribuye a las cámaras mediante un reactivo (de flujo
tangencial). El flujo garantiza la perfecta agitación de cada dilución y evita los problemas
de viscosidad. Este proceso de flujo tangencial está patentado por HORIBA ABX .
Principios de detección CBC
 ERI/PLA
Los ERI y las PLA se miden según el principio de variación de impedancia electrónica. Esto
significa que se genera un campo electrónico alrededor de la microapertura en la cámara
a través de la cual pasan las células sanguíneas. La muestra se diluye con un diluyente
electrolítico (fluido conductor de corriente electrónica), que la agita y la pasa a través de
la microapertura calibrada. A cada lado de la apertura hay dos electrodos entre los cuales
no deja de pasar corriente eléctrica. A medida que las células sanguíneas pasan por la
apertura, crean resistencia (impedancia) en el campo electrónico entre los dos electrodos.
El voltaje que mide las células es proporcional al tamaño de la célula. Dado que la corriente
es constante y no se modifica, mientras más grande sea la célula, mayor resistencia tendrá.
Mientras más pequeña sea la célula, menos resistencia tendrá
Medición HB
Durante el ciclo de análisis, el reactivo lisante se libera en la cámara de dilución.
Alphalyse. Este reactivo rompe la membrana celular de ERI y libera hemoglobina en el
interior de la célula. La hemoglobina liberada por el reactivo lisante se combina con el
cianuro de potasio del reactivo lisante para formar un compuesto cromogénico de
cianometahemoglobina. A continuación, se mide este compuesto en la parte óptica de la
cámara de la primera dilución usando una técnica espectrofotométrica a una longitud de
onda de 550 nm.
Lysebio. Reactivo utilizado para la lisis de los eritrocitos y la determinación sin cianuro de
hemoglobina. Todo el ferrohem se oxidiza y se estabiliza produciendo especies
cromogénicas para la cuantificación mediante espectrofotometría a una longitud de onda
de 550 nm
Medición HCT
Todos los impulsos de ERI se agrupan por tamaños. Luego se calcula el promedio de altura
de impulso de cada grupo. A continuación se calcula el promedio de todos los promedios
de altura de impulso de ERI. Esta función es una integración numérica de VCM.
Los resultados HCT se indican como porcentaje de esta integración.
Cálculo IDE
El IDE (Índice de Distribución de Eritrocitos) se utiliza para determinar anomalías en los
eritrocitos relacionadas con la anisocitosis. El IDE permite al usuario realizar un seguimiento
de la evolución de la anchura del histograma ERI en relación con el número y el volumen
medio de células. El IDE es un cálculo derivado del histograma ERI.
Los cálculos son:
– IDE = (K X SD) / VCM
Donde:
K = Sistema constante
SD = Desviación estándar en función de los estudios estadísticos sobre la distribución de
células dentro del histograma ERI.
VCM = Volumen corpuscular medio de eritrocitos
Cálculo VCM, HCM, CHCM
El VCM (volumen celular medio) se calcula directamente a partir del histograma ERI
completo.
La HCM (hemoglobina corpuscular media) se calcula a partir del valor HB y el recuento de
ERI. El peso medio de hemoglobina en cada ERI se calcula con la fórmula:
– HCM (pg) = HB/ERI x 10
El CHCM (contenido de hemoglobina corpuscular medio) se calcula a partir de los valores
ERI y HCT. La concentración ERI media en el volumen total de ERI se calcula con la fórmula:
– CHCM (g/dl) = ERI/HCT x 100
3.2.6. Medición VPM
El VPM (volumen de plaquetas medio) se deriva directamente del análisis de la curva de
distribución de plaquetas.
Cálculo IDP
El IDP (índice de distribución de plaquetas) se calcula a partir del histograma PLA. El IDP se
representa con la anchura de la curva entre el 15% del número de plaquetas a partir de 2
fl (S1) y el 15% del número de plaquetas que empiezan con el umbral superior variable (S2)
Recuento LEU y diferencial
Principios generales de recuento
El recuento LEU se realiza dos veces según dos métodos de análisis distintos que utilizan el
recuento LEU total en ambas áreas:
 En la cámara de recuento BAS a la vez que se realiza el recuento BAS.
 En la cámara óptica a la vez que se realiza el recuento LMNE.
El recuento LEU de referencia
es el que se obtiene en la cámara de recuento de LEU/BASO.
Recuento LEU/BASO
Resultados LEU: el número de células contado durante un tiempo determinado por volumen
x coeficiente
de LEU de calibración.
BASO: número de células contado durante un tiempo determinado por volumen x
coeficiente de LEU de calibración como porcentaje del número total de leucocitos
(basófilos y núcleos LEU). El principio de medición es el mismo que para medir ERI/PLA. La
diferenciación entre BASO y otros leucocitos se obtiene gracias a la acción lisante
específica del reactivo ABX Basolyse II. El recuento de todos los LEU se realiza entre los
umbrales eléctricos <0> y <BA3>. Los basófilos se cuentan entre los umbrales <BA2> y <BA3>
Recuento de matriz LMNE.
Los recuentos de LEU y del diferencial en 5 partes en la célula de flujo se basan en 3
principios básicos:
• El sistema hidrodinámico secuencial doble (DHSS) permite un flujo lineal de las células a
través del haz de luz (patentado por HORIBA ABX).
• El volumen de la célula se mide mediante la corriente eléctrica
(cambios en la impedancia).
• La medición de la luz transmitida con un ángulo de 0 aumentos permite una respuesta
medida de acuerdo con la estructura interna de cada célula y su absorbancia, ya que la
luz no absorbida pasa a través de los espacios en el material nuclear de cada célula. Esto
es lo que se conoce como luz difusa. Se proporcionan 25 μl de sangre total a la cámara
LMNE en un flujo tangencial de Eosinofix. Este reactivo lisa los ERI, estabiliza los LEU en sus
formas originales y tiñe los núcleos de los eosinófilos con una coloración específica para
medirlos en la matriz. La solución se estabiliza con diluyente y se transfiere a la célula de flujo
LMNE. Se miden la absorbancia (citoquímica) y los cambios en la impedancia de resistencia
(volumen) de cada célula.
EQUIPO AUTOMATIZADO URIANALISIS
Analizador de orina integrado totalmente automatizado AUTION HYBRID AU4050.
El AU-4050 es un instrumento de estudio clínico para realizar análisis predestinado al
diagnóstico in vitro. Este solo puede utilizarse para realizar análisis de orina humana y lleva
a cabo análisis CHM (análisis de tiras de ensayo) y análisis FCM (análisis de partículas en la
orina) mientas que los resultados del análisis y los gráficos se muestran en la pantalla de la
IPU (Unidad de procesamiento de información) la misma que puede imprimirse o enviarse
a un equipo. El análisis de las muestras automáticamente inicia desde la aspiración de la
muestra hasta la obtención de los resultados, utilizando la unidad del muestreador
facilitada . Este instrumento realiza dos tipos de pruebas tanto el análisis CHM como los
análisis FCM, lo que permite estudiar los resultados del análisis de un modo exhaustivo.
Parámetros de análisis CHM y FCM.
Parámetros de análisis (análisis CHM) Parámetros de análisis (análisis FCM)

GLU: Glucosa RBC: Eritrocito

PRO: Proteína WBC: Leucocito
BIL: Bilirrubina EC: Célula epitelial
URO: Urobilinógeno pH: pH CAST: Cilindros
BLD: Sangre oculta
BACT: Bacterias
KET: Cuerpos cetónicos
X’TAL: Cristal
NIT: Nitrito
YLC: Células levaduriformes
LEU: Leucocito
SRC: Célula redonda pequeña
CRE: Creatinina
Path. CAST: Cilindros patológicos
ALB: Albúmina (cilindros patogénicos incluidos
Gravedad específica componentes celulares)
MUCUS: Mucosidad
Turbidez
SPERM: Espermatozoides
Matiz del color

Principio del Análisis CHM

Consiste en el análisis de tiras de ensayo, gravedad específica, matiz del color y turbidez.

Análisis de tiras de ensayo.

Las tiras se analizan a través de un método de reflectancia de longitud de onda dual. La

tira de ensayo reaccionará en un plazo de 60 segundos desde el descenso, cambiando de
color, y su reflectividad se medirá en este paso. Las tiras de ensayo que hayan completado
el análisis se desecharán en el contenedor de residuos.
Análisis de gravedad específica.
Se mide a través del método de refractometría de transmisión. Se utiliza un prisma que entra
en contacto con la muestra de orina para medir el índice de refracción de la muestra, y
esto se utiliza en una fórmula para hallar la gravedad específica.
Medición del matiz del color.
Para medir el matiz del color, las luces R (635 nm), G (525 nm) y B (470 nm) brillan sobre la
muestra de la célula cilíndrica, y el matiz y la sombra de la muestra se analizan a partir de
las distintas cantidades de los colores transmitidos a través de la muestra.
Análisis de turbidez.
Para analizar la turbidez, la luz de la longitud de onda de 635 nm brilla sobre la muestra en
la célula cilíndrica y la turbidez .
Principios del Análisis FCM
Este instrumento emplea la citometría de flujo para analizar los elementos contenidos en la
orina.
Citometría de Flujo.
El analizador de orina integrado totalmente automatizado AU-4050 usa la tecnología de la
citometría de flujo (FCM) para obtener los parámetros de la luz dispersa frontal y la luz
fluorescente frontal de las células de la orina. Después de la reacción de tinción, la luz del
láser se proyectará sobre el flujo de la muestra dentro del flujo envolvente de la célula de
flujo, generando una señal de luz dispersa frontal, una señal de luz dispersa lateral y una
señal de luz fluorescente de cada partícula de orina. Se transforman en señales eléctricas,
que se divisan y utilizan para identificar cada partícula.
El análisis de citometría de flujo que realiza este instrumento clasifica las partículas de la
orina en cinco categorías: eritrocitos, leucocitos, célula epitelial, cilindros, bacterias y
produce expresiones cuantitativas para las mismas .
Requisitos de las Muestras
 Las muestras deben ser orina reciente (menos de una hora después de la recogida).
 Utilice las muestras recogidas tal cual sin añadir conservantes, desinfectantes ni
detergentes.
 Mantenga las muestras alejadas de la luz solar directa de lo contrario pueden
deteriorarse, por lo que los resultados de los análisis no serán precisos.
 Las muestras deben mezclarse bien antes del análisis. Nunca centrifugue las muestras.
 Los datos analizados pueden ser incorrectos si se utilizan las siguientes muestras:
Muestras de elevada densidad con piuria, hematuria, una alta concentración de
pequeñas trazas de mucosidad o restos.
Recipientes de Muestras
El equipo ARKRAY AU 4050 utiliza recipientes, tubos de muestra de orina denominados BD

Vacutainer UA Preservative Tube (REF 364992) es un tubo de base cónica de plástico de 8.0
ml, con conservantes para el análisis de orina denominados clorhexidina, etilparabeno y
propionato de sodio componentes no mercúrial los cuales mantiene el espécimen hasta
las 72 horas sin refrigeración e impide el crecimiento excesivo de bacterias. Cumplen con
los requerimientos de la Agencia de Protección Ambiental de EE.UU. y la Asociación
Americana de Hospitales para un entorno de eliminación libre de mercurio .
Tiras de Ensayo
Uriflet TM S 9HA.
Es una tira para el análisis de orina con almohadillas reactivos para la detección de
glucosa, proteínas, bilirrubina, urobilinógeno, pH, sangre, cetonas, nitritos y leucocitos. El uso
de Uriflet TM S 9HA está indicado solamente con el AUTION HYBRID. Este producto es
únicamente para uso diagnostico in vitro. Cabe resaltar que en el HPGDR hacen uso de
esta marca de tiras de ensayo para el análisis CHM .

Imagen N° 11: “Equipo automatizado uroanalisis”

Fuente: Hospital Provincial General Docente de Riobamba