Objetivos

 Identificar la enzima catalasa en tejidos animales y vegetales, así como también

observar cualitativamente que tejido contiene un mayor volumen de esta enzima.
 Estudiar la cinética de manera cualitativa en la reacción de la enzima catalasa del
hígado de pollo a diferentes temperaturas y calcular la temperatura óptima.
 Calcular el pH óptimo para la actividad de la enzima amilasa y su comportamiento
frente a diferentes pH.
Fundamento teórico
Enzima
Todas las enzimas son proteínas que actúan como catalizadores de reacciones
químicas, es decir, aceleran la velocidad de reacción. Las enzimas modifican la
velocidad de reacción, sin afectar el equilibrio de la misma. La mayoría de
procesos en las células necesitan enzimas. A las reacciones donde interviene una
enzima se las denomina reacciones enzimáticas. Como cualquier catalizador, al
finalizar la transformación del sustrato (reactivo) y liberarse el producto del sitio
activo, la enzima regresa a su estado original y puede involucrarse en un nuevo
ciclo de catálisis. (bioquímica, 2006)

Figura 1. Ciclo de catálisis que realiza una enzima sobre un

sustrato para obtener un producto.

Clasificación de las Enzimas

Las enzimas se dividen en seis clases:
 Oxidorreductasas: Catalizan reacciones de oxidorreducción, es decir,
transferencia de hidrógeno (H) o electrones (e-) de un sustrato a otro. Ejemplos
son el succinato deshidrogenasa o el citocromo c oxidasa.
 Transferasas: Catalizan la transferencia de un grupo químico (distinto del
hidrógeno) de un sustrato a otro. Un ejemplo es la glucoquinasa.
 Hidrolasas: Catalizan las reacciones de hidrólisis. Un ejemplo es la lactasa,
lipasas, esterasas, sacarasa, celulosa.
 Liasas: Catalizan reacciones de ruptura o soldadura de sustratos. Un ejemplo
es la acetacetato descarboxilasa.
 Isomerasas: Catalizan la Inter conversión de isómeros. Son ejemplos la
fosfotriosa isomerasa y la fosfoglucosa isomerasa.
 Ligasas: Catalizan la unión de dos sustratos con hidrólisis simultánea de un
nucleótido trifosfato (ATP, GTP, etc.). Un ejemplo es el piruvato carboxilasa.
(bioquímica, 2006)
Factores que afectan la actividad enzimática
 pH: Las enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH;
amino -NH2; tiol -SH; imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus
aminoácidos. Según el pH del medio, estos grupos pueden tener carga
eléctrica positiva, negativa o neutra Existe un pH en el cual la conformación
será la más adecuada para la actividad catalítica. Desviaciones de pocas
décimas por encima o por debajo del pH óptimo pueden afectar drásticamente
su actividad.
 Temperatura: En general, los aumentos de temperatura aceleran las reacciones
químicas, por cada 10ºC de incremento. Sin embargo, como las enzimas son
proteínas, a partir de cierta temperatura, se empiezan a desnaturalizar por el
calor. La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama
temperatura óptima.
 Presencia de cofactores: Algunas enzimas requieren para su función la
presencia de sustancias no proteicas que colaboran en la catálisis: los
cofactores. Los cofactores pueden ser iones inorgánicos como el Fe++, Mg++,
Mn++, Zn++ etc.
 Concentracion del sustrato: La velocidad de una reacción enzimática depende
de la concentración de sustrato.
 Presencia de inhibidores: Ciertas moléculas pueden inhibir la acción catalítica
de un enzima. (Tortora, Funke, & Case, 2007)
Enzimas a identificar en el laboratorio
α-Amilasa
Esta enzima acelera la hidrólisis (rompimiento) de los enlaces α-glucosídicos de
los polisacáridos de alto peso molecular, tales como el almidón y el glucógeno,
formando así simples unidades de glucosa, que representan la fuente de energía
consumida. La amilasa es más prominente en el jugo pancreático y saliva. La
actividad de la amilasa se ve frenada por el efecto del calor y el medio donde se
encuentre. (Peña, 2004)

Catalasa
La catalasa es una enzima antioxidante presente en la mayoría de los organismos
aerobios. Cataliza la dismutación del peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua y
oxígeno. El peróxido de hidrógeno es un residuo del metabolismo celular de
muchos organismos vivos y tiene, entre otras, una función protectora contra
microorganismos patógenos, pero no puede permanecer dentro del organismo por
un largo tiempo debido a su toxicidad , por lo que al enzima catalasa actúa sobre
esta y lo descompone en agua y oxígeno. (Peña, 2004)

Polifenol oxidasas
 Las enzimas polifenol oxidasas (PPOs) son enzimas ubicuas que catalizan la
reacción dependiente de oxígeno que transforma o-difenoles en o-quinonas. Estas
quinonas son reactivas y capaces de modificar covalentemente un amplio abanico
de especies nucleófilas, del interior de las células, que conduce a la formación de
polímeros marrones, conocido como pardeamiento enzimático. (Morante, 2013)

Bibliografía
bioquímica, L. P. (2006). Principios de bioquímica. Mexico: Ediciones Omega.

Peña, A. A. (2004). Bioquímica. Ciudad de mexico: Limusa noriega.

Tortora, G., Funke, B., & Case, C. (2007). Introducción a la microbiología. Buenos aires:
Panamericana.