PRACTICA NUTRICIÓN DE MICROORGANISMOS

ANYELA PATRICIA MENDOZA PEÑA COD.1611247

BRAYAN ANGEL VILLABONA COD. 1611212
DUVAN CAMILO RANGEL TAMARA COD
HENRI ALEXANDER LEAL SANCHEZ COD.
MARISOL CONTRERAS JIMENEZ COD. 1611233

PRESENTADO A:
PAOLA ANDREA ROMAN HERNANDEZ

UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER

INGENIERIA BIOTECNOLOGICA
MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

INTRODUCCIÓN
La microbiología ha venido teniendo diferentes roles importantes en la

ciencia, el estudio de los microorganismos desde un punto de vista molecular,

revisando cada una de las reacciones químicas de los procesos metabólicos

por lo que atraviesan. Su morfología y composición bioquímica, propiedades

antigénicas, características genéticas y culturales han dado una pauta para el

reconocimiento de cada uno de los microorganismos presentes en la

naturaleza. (Morales, Chávez, Herrera, Zambrano y Murillo 2010)

La nutrición es el proceso por el cual los seres vivos toman, del medio donde

habitan, los nutrientes que necesitan para crecer. Dichos nutrientes se

requieren para dos fines: energéticos (reacciones de mantenimiento y

biosinteticos (reacciones plásticas o anabolismo). Los requerimientos

nutricionales de un microorganismo están determinados por la composición

química de la célula, por su constitución genética y por factores del medio

ambiente. Cualquier sustrato puede constituir una fuente de nutrientes para

ciertos microorganismos, sin embargo, cada grupo de organismos varía

ampliamente en sus características genéticas y por consiguiente en su

capacidad para utilizar y transformar los diferentes compuestos químicos.

(Olivas, Alarcón 2004). Esto es debido a que en el mundo encontramos una

gran variedad de especies microbianas y por lo tanto diversos tipos de

nutrición es que se las ha clasificado en los distintos grupos que veremos a lo

largo de esta práctica, en el cual se concentrara también en las características

metabólicas ya que de hecho, de las mismas dependerá la variedad de las

condiciones nutricionales ideales para el óptimo desarrollo microbiano. El

cual es de gran importancia que tiene el conocimiento de los diferentes medios

en el cual se desarrollan los diferentes microorganismos. (Morales, Chávez,

Herrera, Zambrano y Murillo 2010) Con la intención de entender los

requerimientos nutricionales de los diferentes microorganismos y como varía

según el tipo de microorganismo que sea, en la presente práctica se puso a

prueba el crecimiento de una bacteria (​Staphylococcus aureus.​) y un hongo

(​Penicillium s.p​) en diferentes medios con sustratos distintos siendo: sacarosa,

glucosa y mezcla 1 en el caso de la bacteria y extracto de levadura y mezcla 2

en el caso del hongo.

METODOLOGÍA
Para la bacteria:
Para el hongo:

RESULTADOS

- ESTADO INICIAL
Microorganismos madre ​Penicillium s.p y Staphylococcus aureus

Fig. 2 viales con sacarosa Fig. 4 viales con Extracto de levadura

Fig. 3 viales con glucosa Fig. 5 viales con Mezcla 2

Fig. 3 viales con Mezcla 1

-PARTE 1.

Tabla 1. Resultados obtenidos en vial para ​Staphylococcus aureus.

Sustratos Viales con las concentraciones inicialmente Resultado.

 Sacarosa

se observó turbidez en los viales c

concentraciones de 0.1% y 1% de sacaro

Glucosa

Se observó turbidez en los viales c

concentración de glucosa de 0.1%, 2.0%
5.0%.

Mezcla 1
(glucosa+sacarosa)

Se observó turbidez en los viales c

concentración de 0.1%, 2.0% y 5.0%.

Tabla 2. Resultados obtenidos en vial para ​Penicillium s.p

Sustratos Viales con las concentraciones Resultado

Extracto de
levadura

Mezcla 2
(glucosa +
extracto de
levadura)

Mezcla 2. Penicillium s.p

Extracto de levadura. ​Penicillium s.p
 -PARTE 2.
Tabla 3. Resultados obtenidos en agar para ​Staphylococcus aureus.

Agar nutritivo
(Bacterias)

Sustrato % Crecimiento Imagen

Abundante
crecimiento,
colonias color
crema. Unas
líneas gruesas
0,1% y otras
dispersas por
el medio.

Crecimiento
abundante,
Sacarosa
colonias color
crema. Unas
agrupadas en
1% líneas gruesas
y otras
agrupadas en
unidades.

Poco
crecimiento,
colonias
2%
agrupadas
planas, color
 crema pegadas
a la pared.

Poco
crecimiento,
colonias
pegadas a la
5% pared, forma
ovalada planas
color crema

Abundante
crecimiento ,
0,1% colonias color
crema unas
agrupadas y
otras dispersas.

Una colonia
1% plana color
crema.

Poco
Glucosa
crecimiento de
colonias en
2%
agrupaciones
color crema
planas

Crecimiento de
20 colonias
5%
planas de color
crema .
 Poco
crecimiento en
0,1% agrupaciones,
colonias color
crema planas.

Crecimiento de
colonias planas
1%
agrupadas y
unas dispersas

Mezcla 1 Poco
crecimiento,
2% colonias ovalas
agripadas color
crema.

Abundante
crecimiento,
colonias
5%
agrupadas unas
planas y otras
redondas.

Tabla 4. Resultados obtenidos en agar para ​Penicillium

Agar PDA
(Hongos)

Sustrato % Crecimiento Imagen

 Observamos la cuatro
estrías de siembra
perfectamente formadas
por el crecimiento de
0,1%
penicillum

Observamos las cuatro

estrías de siembra
perfectamente formadas
1% por el crecimiento de
penicillum

Observamos las cuatro

estrías de siembra
perfectamente formadas
Extracto de por el crecimiento de
levadura 2% penicillum

Observamos solo dos

estrías de siembra Características morfológicas:
vemos como pierde la Color: verde-gris
propiedades optimas
Forma: circular
5% de crecimiento
Elevación: convexa
Borde: entero
 Observamos las cuatro
estrías de crecimiento
perfectamente formadas
con presencia de una
colonia en una de sus
0,1%
estrías de color verde y
crema

Observamos muy
poco crecimiento en las
cuatro estrías de
1% crecimiento

Observamos las cuatro

estrías de crecimiento
perfectamente formadas
con la presencia de una
2% colonia de color verde
Mezcla 2 en una de sus estrías

Observamos dos estrías Características morfológicas

de crecimiento con dos
Color: blanco con colonias verdes, crema, gris
5% colonias de color verde
y gris en sus estrías Forma: filamentosa
Elevación: pulvinante
Borde: filamentoso
 DISCUCIONES
BACTERIA
1. Rutas metabólicas:

- ​Staphylococcus aureus:

El ​Staphylococcus aureus​ tiene un metabolismo de tipo fermentativo y anaerobio

facultativo, catalasa positiva y oxidasa negativa. Son capaces de fermentar la glucosa

sin producción de gases y producen acetil metil carbinol. Fermentan también el manitol

con formación de ácidos y puede hacerlo en anaerobiosis. No hidrolizan el almidón y

son capaces de crecer en presencia de un 40% de bilis. Su temperatura óptima de

crecimiento va de 35 a 40 °C y el pH óptimo oscila entre 7,0 y 7,5 aunque soportan pH

mucho más extremos. Soportan tasas elevadas de cloruro sódico, hasta un 15%. Poseen

una enzima, la coagulasa, que la diferencia del resto de las especies del género; ésta

tiene la facultad de reaccionar con el fibrinógeno dando lugar a un coágulo de fibrina.

Figura 13. Fermentación acética.

 Figura 14. Embden- Meyerhof en bacterias.

Caracteristicas microscopicas y macroscopicas:

Morfología microscópica (​S. aureus​)

Se trata de cocos Gram positivos que poseen tendencia a agruparse en racimos. Tienen

una forma esférica y un diámetro de alrededor de una micra.

Fig. 16 ​S. aureus​ con tinción de gram.

Morfología macroscópica (​S. aureus​)

Para apreciarla debemos contar con un aislamiento de la cepa a estudiar en una placa de

Petri. El aislamiento nos permitirá observar las características de las colonias. En

medios no selectivos, S. aureus presenta colonias de 1 a 3 mm de diámetro, lisas,

levemente elevadas, de bordes enteros, levemente convexas y generalmente

pigmentadas con un color que puede ir desde la crema al amarillo. La producción de

pigmento se ve favorecida si se incuban los cultivos por 24 a 48 horas adicionales a

temperatura ambiente. Cuando crecen en agar sangre ovina se puede observar una zona

de β-hemólisis alrededor de las colonias.

-Penicillium chrysogenum

Ruta metabólica: ​Al existir diferentes especies del genero penicillium nos hemos

enfocado en la ruta metabólica de penicillium chrysogenum ya que es un

microorganismo de interés industrial por ser es un hongo filamentoso ampliamente

utilizado para la producción comercial de penicilinas y cefalosporinas a nivel industrial.

La elaboración microbiana de penicilinas y cefalosporinas se lleva a cabo por una serie

de reacciones que incluyen dos pasos comunes, primero la formación de tripeptido

Ú-(L-Ó aminoadipil)-L-cisteinil-D-valina (ACV) por medio de la enzima ACV sintetasa

y segundo, la enzima isopenicilina N sintetasa o ciclasa lleva a cabo la conversión del

tripeptido a ACV a isopenicilina N. en la biosíntesis de la penicilina, la isopenicilina N

es convertida a penicilina G por medio de la enzima penicilina aciltransferasa.

En la vía biosintetica de la cefalosporina, la isopenicilina N es convertida a penicilina N

isomerasa. Posteriormente la penicilina N es convertida a desacetoxicefalosporina C

(DAOC) por acción de la enzima desacetoxicefalosporina C sintetasa también llamada

expandasa. La siguiente reacción es la hidroxidacion de DAOC con la enzima

desacetoxicefalosporina C hidrolasa para formar la desacetoxicefalosporina C (DAC) la

reacción final es la acetilación de DAC por medio de la enzima acetiltransferasa para

formar la cefalosporina C.

Caracteristicas microscopicas y macroscopicas:

Morfología microscópica

Hongo filamentoso que presenta conidióforos tabicados de pared lisa (200-300 µm),

ramificado al final, con métulas (de 8-12 µm) y fiálides en forma de botella (de 7-12
µm), donde nacen conidios lisos, elipsoidales (de 2,5-4 µm) azules o verde-azulados en

cadenas, sin ramificar, con un penacho o pincel característico.

Morfología macroscópica

Colonias de crecimiento rápido, vellosas, aterciopeladas, verdosas con una corona radial

ancha y blanca, a 25 °C (no crecen o crecen pobremente a 37 °C) . Puede haber gotas de

exudado sobre la superficie de la colonia. Reverso habitualmente amarillento o

cremoso. Esporulación abundante. Olor aromático, especiado o afrutado (a manzana o a

piña).

AGARES

2. AGAR PDA: (POTATO DEXTROSE AGAR) AGAR PAPA DEXTROSA

Fórmula / Litro (COMPOSICION)

Infusión de Papa (Potato Infusion) a partir de 200 g...............4 g*

Dextrosa (Dextrose)................................................................ 20 g

Agar........................................................................................ 15 g

*4,0 g de extracto de papa es equivalente a 200 g de infusión de papas.

pH Final: 5,6 ± 0,2 a 25°C

(La fórmula puede ser ajustada y/o suplementada de acuerdo a los requerimientos para

cumplir con las especificaciones de rendimiento o desempeño).

IMPORTANCIA: ​El Agar Papa Dextrosa está compuesto por Infusión de Papa

deshidratada y Dextrosa que fomentan el crecimiento exuberante de los hongos. El agar

es adicionado como agente solidificante. Muchos procedimientos estándares usan una

cantidad específica de ácido tartárico estéril (10%) para reducir el pH de este medio a

3,5 ​± 0.1, y así inhibir el crecimiento bacteriano. No recalentar el medio acidificado, el

calentamiento en estado ácido hidrolizará el agar.

3. AGAR SABORAUD: No contiene inhibidores del desarrollo bacteriano. La

pluripeptona es la fuente de carbono y nitrógeno para el desarrollo bacteriano. El

agregado de cloruro de sodio permite el enriquecimiento con sangre de carnero u

otras sustancias para facilitar el cultivo de microorganismos exigentes.

IMPORTANCIA​: Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el

aislamiento de microorganismos poco exigentes en lo que se refiere a requerimientos

nutritivos.
Su uso está descripto en muchos procedimientos para el análisis de alimentos, aguas y

otros materiales de importancia sanitaria.

Por las características de sus componentes es un medio usado para el cultivo de

microorganismos poco exigentes en sus requerimientos nutricionales.

SUSTRATOS

Glucosa y sacarosa: ​en el caso de Staphylococcus aureus, fermenta glucosa.

Extracto de levadura: ​El Extracto de Levadura es un extracto soluble en agua de un

autolisado de células de levaduras seleccionadas. Este producto es rico en vitaminas

especialmente del complejo B, aminoácidos y otros factores de crecimiento. Es utilizado

en una amplia variedad de medios de cultivo como una excelente fuente de nutrientes.

La levadura se hace crecer de manera específica para este propósito y el extracto no es

un producto secundario de otras levaduras.

El extracto producido por este método tiene un elevado contenido de proteínas y

aminoácidos libremente disponibles. Además, de una fuente rica de las importantes

vitaminas del complejo B.

​ taphylococcus aureus
Importancia industrial de​ S
Es una de las principales causas de infecciones bacterianas tanto en el hospital como en

la comunidad. Origina un amplio rango de enfermedades que van desde una infección

menor de piel hasta una fatal neumonía necrotizante. Desde la introducción de la

penicilina para su tratamiento y el desarrollo de la resistencia a los ​β​-lactámicos, fue

necesaria la creación de un nuevo antibiótico: la meticilina como tratamiento de las

infecciones para esta bacteria; sin embargo, a los pocos meses de su introducción se

reportaron las primeras cepas de ​S. aureus resistentes a meticilina (MRSA), las cuales

se deben a la introducción de un elemento genético móvil denominado cassette

cromosómico estafilocócico mec (SCCmec).

​Staphylococcus aureus ​es una bacteria muy resistente en el medio ambiente y

ampliamente distribuida en la naturaleza que puede encontrarse en el aire, agua,

residuos, maquinaria y superficies de la industria alimentaria, pero su principal

reservorio son los animales y humanos, encontrándose en la piel, cabello, fosas nasales

y garganta. En consecuencia, pueden transmitirse a una amplia gama de alimentos,

principalmente alimentos derivados de animales (leche, carne y huevos y los productos

derivados) y alimentos consumidos en crudo (frutas, verduras, etc).

Es una de las bacterias patógenas humanas formadoras de toxinas son altamente

estables, y resistentes al calor, congelación e irradiación, por lo que una vez formadas

en el alimento, es extremadamente difícil eliminarlas.

Importancia industrial de ​Penicillium chrysogenum

Es el hongo productor de penicilina más conocido y también puede producir

algunos ​alcaloides​ como la ​roquefortina C​, ​meleagrina​ y ​chrisogina​. Por otra parte, otras

especies de Penicillium son beneficiosas para los seres humanos. Los quesos tales como
el ​roquefort​, ​brie​, ​camembert​, ​stilton​, etc. se crean a partir de su interacción con algunos

Penicillium y son absolutamente seguros de comer. La ​penicilina​ es producida por el

hongo ​Penicillium chrysogenum​, un moho ambiental.

El crecimiento microbiano se da gracias a un conjunto de reacciones químicas para las

cuales es indispensable la utilización de una serie de elementos o nutrientes, los cuales

deben estar disponibles en el medio que los rodea.

Los microorganismos para crecer y desarrollar sus actividades, deben disponer en el

ambiente de los nutrientes que le provean energía y materiales para la biosíntesis. Los

microorganismos presentan una gran diversidad fisiológica específica y por lo tanto

requerimientos nutricionales específicos.

Los requerimientos nutricionales están determinados por el tipo de metabolismo celular,

ya sea autotrófico, que corresponde a los microorganismos que obtienen el carbono del

CO2 como las algas y algunas bacterias, y los heterotróficos que necesitan compuestos

orgánicos como fuente de carbono como en el caso de​ Penicillium.​

En la práctica se confirmó el hecho de que el crecimiento microbiano depende del

sustrato que esté disponible en el medio que rodea al microorganismo, teniendo que ser

el adecuado y en concentraciones necesarias para cada uno. Así como el

microorganismo puede inhibir su crecimiento por la falta de nutrientes también puede

pasar por el exceso del mismo, puede llegar a estresarlo.

BIBLIOGRAFIA

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nutricionales: factores intrínsecos y extrínsecos que afectan al crecimiento microbiano.

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CINCLUSIONES