I.

-INTRODUCCION

Los mohos son un tipo de hongos de la clase eucariotas, que básicamente son
organismos que poseen un núcleo celular y organelas que se encuentran
rodeadas por una membrana.
Son microorganismos que tienen una acción deteriorante que pudre y malogra
materias primas, y son utilizados como elementos biológicos en la manufactura de
algunos alimentos: quesos, cerveza, pan, etc.
Ciertos mohos pueden producir al desarrollarse en animales y en el hombre,
sustancias que genéricamente reciben el nombre de micotoxinas.
Los mohos se encuentran distribuidos ampliamente en la naturaleza, como en la
tierra y en el polvo, las levaduras se desarrollan con facilidad en los utensilios que
no han sido perfectamente lavados, utilizados en las industrias de carbohidratos.
El objetivo principal de investigación en el laboratorio es descubrir las fuentes de
contaminación y la defectuosa conservación de algunos alimentos. Por ello la
técnica se ha diseñado para estimar su abundancia y no sólo su presencia.
La prueba no se aplica a cualquier tipo de alimento, sino sólo aquellos en los que
de acuerdo con la experiencia, permite correlacionar su hallazgo, por encima de
ciertos límites, con prácticas sanitarias defectuosas en la producción y
almacenamiento del alimento.
 I. OBJETIVOS

 Observar colonias de diferentes especies de mohos y levaduras

 Identificar los diferentes mohos y levaduras presentes en el ají amarillo.

 Contabilizar el número de colonias con el uso del contador de colonias y

analizar si excede o no los límites máximos permisibles.

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 II. MARCO TEÓRICO

a) OBSERVACIÓN DE LOS HONGOS

Frecuentemente pueden observarse crecimiento de hongos sobre los alimentos y
otros materiales. Se examinan estos sustratos con un lente simple pueden
distinguirse el cuerpo vegetativo formado por una masa de filamentos ramificados
e entrelazados denominada Micelio. Cada filamento de micelio constituye una Hifa.

En algunos hongos, el protoplasma recorre las hifas en forma interrumpida,

constituyendo hifas Aceptadas o Cenocíticas. Las hifas de otros hongos tienen
paredes transversales llamadas septos con uno o varios poros que permiten el
paso del protoplasma. A este tipo de hifas se les denomina Septadas. Los hongos
se reproducen asexualmente a través de esporas asexuales desarrolladas dentro
de un esporangio, se denominan Esporangiosporas. Si las esporas se reproducen
libremente en el extremo o allado de las hifas, se denominan Conidiosporas.
Existen hongos unicelulares que no forman estructuras filamentosas, estos reciben
el nombre de levaduras y pueden distinguirse de las bacterias por su mayor
tamaño y por la presencia de un núcleo simple. Ocasionalmente puede observarse
el desarrollo de estructuras conspicuas denominadas Cuerpos Fructíferos los
cuales portan las esporas sexuales de reproducción. Estas estructuras se utilizan
como base de la clasificación natural de los hongos. De esta manera se definen
tres divisiones:
Zygomicota, Ascomicota y Basidiomycota.

El micelio de los Zygomycota es aceptado excepto en las estructuras de

reproducción. Los miembros de esta división forman esporas asexuales de tipo
esporangiosporas. Las esporas sexuales son la denominadas Zigosporas

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Que desarrollan en ausencia de un cuerpo fructífera. Los hongos al igual que la
mayoría de las bacterias son heterótrofos, ningún hongo es capaz de crecer bien
en ausencia de sustancias alimenticias orgánicas. Ningún hongo posee pigmentos
fotosintetizantes y ninguno es capaz de utilizar el dióxido de carbono. Sin embargo,
en presencia de un suministro exterior de azucares de otro alimento orgánico,
muchos hongos exhiben una sorprendente capacidad de síntesis y produce una
gran variedad de sustancias orgánicas complejas. La mayor parte de hongos son
filamentosos. Los filamentos conocidos por hilos están ordinariamente muy
ramificados y forman colectivamente el talo vegetativo o Micelo. En los hongos
superiores las hifas pueden agregar separa formar estructuras sólidas complejas
que en algunas especies pueden alcanzar un tamaño muy considerado. Los
Ascomycotas tienen micelio septado. La reproducción asexual es muy variada
involucrando procesos de fisión, gemación, fragmentación, formación de
Clamidiosporas o formación de conidias, dependiendo de las especies y delas
condiciones ambientales. La fisión y la gemación son comunes en levaduras
mientras que la mayoría de ascomicetos forman uno o varios grupos de esporas
terminales llamadas Conidia que desarrollan a partir de hifas ramificadas llamadas
Conidioforos y Esterigmas. Las esporas sexuales son llamadas Ascosporas
desarrolladas dentro de sacos y protegidas en cuerpos fructíferos denominados
Ascoscarpos.

b) HABITAT:
Los hongos ocupan una amplia variedad de ambientes. La mayoría ocupa los
lugares húmedos de la tierra, aunque algunos en particular las especies de
Aspergillus, Penicillum pueden resistir unas condiciones de mayor sequedad.
Muchos hongos son parientes activos de plantas, incluso de las más importantes
plantas cultivadas y algunas especies causan enfermedades en el hombre y en los
animales domésticos.

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C) REPRODUCCIÓN:
La reproducción en los hongos se realiza habitualmente por esporas. Los más
frecuentes son unas células aisladas incoloras, pero pueden poseer gruesas
membranas esculpidas pueden llamar apéndices o pueden estar rodeadas de una
cubierta gelatinosa. La mayor parte de los hongos producen más de una especie
de esporas, cuando las condiciones son favorables al crecimiento de estas. La
mayoría de los hongos son muy variables, tanto en condiciones naturales como en
el cultivo de laboratorio. Algunas veces la variación esta inducida por cambios en
las condiciones ambientales y el hongo regresa a la forma manual cuando
revierten los cambios ambientales.

I. CONCLUSIONES

 Aprendimos la importancia de un medio de cultivo y los tipos que existen de

ellos.
 Con la finalidad de que se desarrollen un tipo de bacterias, conocimos sus
nutrientes y el medio que estos requieren.

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MORFOLOGÍA DE LAS COLONIAS

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III. MATERIALES Y MEDIOS DE CULTIVO

solución salina Agar Sabouraud

Placas Petri Contador de colonias

Balanza Mechero

Desinfectantes Probeta

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 Fiola Pipeta

IV. PARTE EXPERIMENTAL

o Colocamos el Agar Sabouraud Glucosado en un vaso de precipitado

con agua de 250ml y lo sometemos a calor hasta fundirlo (temperatura
de 50° C A 65°C). Observamos que torno su coloración de mostaza a
amarillo pálido.

o Luego preparamos la solución salina 8g/L. Se necesitarán 8g de sal

en 1 L de agua destilada. Para ello dispondremos de una fiola de 1L.
Se agita la mezcla y tendremos finalmente nuestra solución salina.

o Pesamos 10gr de muestra problema (Ají amarillo molido), esto de

acuerdo a la norma.

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o Realizamos la primera dilución (10-1), que consiste en agregar en un
vaso de precipitado los 10 g pesados de ají amarillo en 90 ml de
solución salina, agitamos enérgicamente con ayuda de la bagueta.

o De manera seguida, realizamos la segunda dilución (10-2), pipeteamos

1ml de la mezcla preparada en el paso anterior, y lo vertemos a un
tubo de ensayo que contiene 9 ml de la solución salina, agitamos. Lo
repetimos 2 veces más.

o Realizamos en inóculo en la placa Petri agregamos 1 ml de la dilución

(10-4) realizada en el tubo de ensayo, de manera que esté esparcida
por toda la placa, y enseguida añadimos 20 ml del medio de cultivo.
Se homogeniza y se deja enfriar.

o Colocamos a la incubadora a 37o C por un tiempo de 3 días.

o Después sacamos nuestra muestra de la incubadora y contamos

colonias.

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 V. CALCULOS Y RESULTADOS

𝑼𝑭𝑪 𝑵° 𝒅𝒆 𝒄𝒐𝒍𝒐𝒏𝒊𝒂𝒔 𝒑𝒐𝒓 𝒑𝒍𝒂𝒄𝒂

=
𝒎𝒍 𝒗𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆𝒏 𝒅𝒆 𝒔𝒆𝒎𝒃𝒓𝒂𝒅𝒐𝒙𝒅𝒊𝒍𝒖𝒄𝒊𝒐𝒏

Para los Mohos:

N° de colonias: 11

𝑼𝑭𝑪 𝟏𝟏
=
𝒎𝒍 𝟏𝒎𝒍𝒙𝟏𝟎−𝟐

𝑼𝑭𝑪
= 𝟏𝟏𝒙𝟏𝟎𝟐
𝒎𝒍

Para las Levaduras:

N° de colonias: 2040

𝑼𝑭𝑪 𝟐𝟎𝟒𝟎
=
𝒎𝒍 𝟏𝒎𝒍𝒙𝟏𝟎−𝟐

𝑼𝑭𝑪
= 𝟐𝟎𝟒𝟎𝒙𝟏𝟎𝟐
𝒎𝒍

En ambos casos se hizo una dilución de 10^ (-2)

RESULTADOS

RESULTADOS LMP MORJOLOGIA OBSERVACION

MICROORGANISMOS
(UFC/ml)
102 esféricas apto
MOHOS 11x10^ 2

102 esféricas No apto

LEVADURAS 2040x10^ 2

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 VI. CONCLUSIONES
NTS N° 071 MINSA/DIGESA.V01. NORMA SANITARIA QUE ESTABLECE LOS
CRITERIOS MICROBIOLOGICOS DE CALIDAD SANITARIA E INOCUIDAD
PARA LOS ALIMENTOS Y BEBIDAS DE CONSUMO HUMANO.

Salsas(de tomate, picantes, de tamarindo, de mostaza) y aderezos

industrializados
Agente Categoría Clase n c Limite por mL
microbiano m M
2
mohos 2 3 5 2 10 103
levaduras 2 3 5 2 102 103

La muestra de aji amarillo que se evaluó tenía presencia de mohos y levaduras,

11x10^ 2 mohos y 2040x10^ 2 levaduras, según lo establecido por NTS N° 071
MINSA/DIGESA.V01. NORMA SANITARIA QUE ESTABLECE LOS CRITERIOS
MICROBIOLOGICOS DE CALIDAD SANITARIA E INOCUIDAD PARA LOS
ALIMENTOS Y BEBIDAS DE CONSUMO HUMANO podemos concluir que los
mohos se encuentran dentro del limite permisible y es apto para en consumo,
mientras que las levaduras superan el limite, por lo tanto NO es apto para el
consumo.

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VII. RECOMENDACIONES
Trabajar siempre considerando las medidas de higiene y seguridad en el
laboratorio

No dejar que se enfríe el agar, ya que se pondrá sólido y de nuevo se

requerirá calentar para ponerlo líquido.

Homogenizar la placa para tener una buena observación de las colonias

durante la lectura.

Tener el peso exacto de la muestra así se evitaría excedentes de

microorganismos para contar y obtener buenos resultados

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 VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

 Cerra, H. et al (2013). Manual de Microbiología Aplicada a las Industrias

Farmacéutica, Cosmética y de Productos Médicos. Buenos Aires. Argentina.

 Morales, M. et al (2012). Manual de Microbiología. Departamento de ciencias

básicas academicas de Biología

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