UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE INGENIERÍA

LABORATORIO DE ORGANIZACIÓN Y FUNCIÓN CELULAR Escuela de Ingeniería de Materiales

PRACTICA N° 03
RECONOCIMIENTOS DE CÉLULAS SILLARES EN MUESTRAS BIOLÓGICAS
Y RECONOCIMIENTO DE MONOSACÁRIDOS:

I.- OBJETIVO:

1.1 Diferenciar los diferentes aminoácidos.

1.3 Manejar los diferentes reactivos presentes en la práctica..

II.- FUNDAMENTO TEÓRICO:

2.1 Aminoácido

Un aminoácido es una molécula orgánica con un grupo amino (-NH2) y un grupo

carboxilo (-COOH). Los aminoácidos más frecuentes y de mayor interés son aquellos
que forman parte de las proteínas. Dos aminoácidos se combinan en una reacción de
condensación entre el grupo amino de uno y el carboxilo del otro, liberándose una
molécula de agua y formando un enlace amida que se denomina enlace peptídico;
estos dos "residuos" de aminoácido forman un dipéptido. Si se une un tercer
aminoácido se forma un tripéptido y así, sucesivamente, hasta formar un poli péptido.
Esta reacción tiene lugar de manera natural dentro de las células, en los ribosomas.

Todos los aminoácidos componentes de las proteínas son L-alfa-aminoácidos. Esto

significa que el grupo amino está unido al carbono contiguo al grupo carboxilo
(carbono alfa) o, dicho de otro modo, que tanto el carboxilo como el amino están
unidos al mismo carbono; además, a este carbono alfa se unen un hidrógeno y una
cadena (habitualmente denominada cadena lateral o radical R) de estructura variable,
que determina la identidad y las propiedades de cada uno de los diferentes
aminoácidos. Existen cientos de radicales por lo que se conocen cientos de
aminoácidos diferentes, pero sólo 22 (los dos últimos fueron descubiertos en los años
1986 -selenocisteína- y 2002 -pirrolisina-)2 forman parte de las proteínas y tienen
codones específicos en el código genético.

La unión de varios aminoácidos da lugar a cadenas llamadas péptidos o polipéptidos,

que se denominan proteínas cuando la cadena polipeptídica supera una cierta longitud
(entre 50 y 100 residuos aminoácidos, dependiendo de los autores) o la masa

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molecular total supera las 5000 uma y, especialmente, cuando tienen una estructura
tridimensional estable definida.

2.2.2 HISTORIA

El primer aminoácido fue descubierto a principios del siglo XIX. En 1806, los
químicos franceses Louis-Nicolas Vauquelin y Pierre Jean Robiquet aislaron un
compuesto de un espárrago (asparagus en inglés), que en consecuencia fue nombrado
asparagina y se trata del primer aminoácido descubierto. La cistina se descubrió en
1810, aunque su monómero, cisteína, permaneció desconocido hasta 1884. La glicina
y leucina se descubrieron en 1820. El último de los 20 aminoácidos comunes que se
descubrió fue la treonina en 1935 por William Cumming Rose, quien también
determinó los aminoácidos esenciales y estableció los mínimos requerimientos
diarios de todos los aminoácidos para su crecimiento óptimo.

Se usa el término amino acid en la lengua inglesa desde 1898. Se supo que las
proteínas dan aminoácidos después de la disgestión enzimática o de la hidrólisis
ácida. En 1902, Emil Fischer y Franz Hofmeister propusieron que las proteínas son
el resultado de la formación de enlaces entre el grupo amino de un aminoácido y el
grupo carboxilo de otro, en una estructura linear que Fischer denominó "péptido".

2.2.3 ESTRUCTURA GENERAL DE UN AMINOÁCIDO

La estructura general de un alfa-aminoácido se establece por la presencia de un

carbono central (alfa) unido a un grupo carboxilo (rojo en la figura), un grupo amino
(verde), un hidrógeno (en negro) y la cadena lateral (azul):

FIG. N°1: GENERAL STRUCTURE OF AMINOACIDS - AA-STRUCTURE-

ES.PNG

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"R" representa la cadena lateral', específica para cada aminoácido. Tanto el

carboxilo como el amino son grupos funcionales susceptibles de ionización
dependiendo de los cambios de pH, por eso ningún aminoácido en disolución
se encuentra realmente en la forma representada en la figura, sino que se
encuentra ionizado.

FIG. N°2: Zwitterion

A pH bajo (ácido), los aminoácidos se encuentran mayoritariamente en su

forma catiónica (con carga positiva), mientras que a pH alto (básico) se
encuentran en su forma aniónica (con carga negativa). Para valores de pH
intermedios, como los propios de los medios biológicos, los aminoácidos se
encuentran habitualmente en una forma de ion dipolar o zwitterión (con un
grupo catiónico y otro aniónico).

2.2.4 CLASIFICACIÓN

Existen muchas formas de clasificar los aminoácidos; las tres que se presentan a
continuación son las más comunes.

SEGÚN LAS PROPIEDADES DE SU CADENA

FIG. N°3: Otra forma de clasificar los aminoácidos de acuerdo a su cadena lateral.
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Los aminoácidos se clasifican habitualmente según las propiedades de su cadena

lateral:

 Neutros polares, polares o hidrófilos: serina (Ser, S), treonina (Thr, T), glutamina
(Gln, Q), asparagina (Asn, N), tirosina (Tyr, Y).
 Neutros no polares, apolares o hidrófobos: alanina (Ala, A), cisteína (Cys, C),
valina (Val, V), leucina (Leu, L), isoleucina (Ile, I), metionina (Met, M), prolina
(Pro, P), fenilalanina (Phe, F), triptófano (Trp, W) y glicina (Gly, G).
 Con carga negativa o ácidos: ácido aspártico (Asp, D) y ácido glutámico (Glu,
E).
 Con carga positiva o básicos: lisina (Lys, K), arginina (Arg, R) e histidina (His,
H).
 Aromáticos: fenilalanina (Phe, F), tirosina (Tyr, Y), triptófano (Trp, W) y prolina
(Pro, P) (ya incluidos en los grupos neutros polares y neutros no polares).
SEGÚN SU OBTENCIÓN

A los aminoácidos que deben ser captados como parte de los alimentos se los llama
esenciales; la carencia de estos aminoácidos en la dieta limita el desarrollo del
organismo, ya que no es posible reponer las células de los tejidos que mueren o crear
tejidos nuevos, en el caso del crecimiento. Para el ser humano, los aminoácidos
esenciales son:

 Valina (Val, V)
 Leucina (Leu, L)
 Treonina (Thr, T)
 Lisina (Lys, K)
 Triptófano (Trp, W)
 Histidina (His, H) *
 Fenilalanina (Phe, F)
 Isoleucina (Ile, I)
 Arginina (Arg, R) *
 Metionina (Met, M)

A los aminoácidos que pueden sintetizarse en el propio organismo se los conoce

como no esenciales y son:

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 Alanina (Ala, A)
 Prolina (Pro, P)
 Glicina (Gly, G)
 Serina (Ser, S)
 Cisteína (Cys, C)
 Asparagina (Asn, N)
 Glutamina (Gln, Q)
 Tirosina (Tyr, Y)
 Ácido aspártico (Asp, D)
 Ácido glutámico (Glu, E)

Estas clasificaciones varían según la especie e incluso, para algunos aminoácidos,

según los autores. Se han aislado cepas de bacterias con requerimientos diferentes de
cada tipo de aminoácido

SEGÚN LA UBICACIÓN DEL GRUPO AMINO

 Alfa-aminoácidos: El grupo amino está ubicado en el carbono n.º 2 de la cadena,
es decir el primer carbono a continuación del grupo carboxilo (históricamente
este carbono se denomina carbono alfa). La mayoría de las proteínas están
compuestas por residuos de alfa-aminoácidos enlazados mediante enlaces amida
(enlaces peptídicos).
 Beta-aminoácidos: El grupo amino está ubicado en el carbono n.º 3 de la cadena,
es decir en el segundo carbono a continuación del grupo carboxilo.
 Gamma-aminoácidos: El grupo amino está ubicado en el carbono n.º 4 de la
cadena, es decir en el tercer carbono a continuación del grupo carboxilo

2.3 GLUCOSA

La glucosa es un monosacárido con fórmula molecular C6H12O6. Es una hexosa, es

decir, contiene 6 átomos de carbono, y es una aldosa, esto es, el grupo carbonilo está
en el extremo de la molécula (es un grupo aldehído). Es una forma de azúcar que se
encuentra libre en las frutas y en la miel. Su rendimiento energético es de 3,75
kilocalorías por cada gramo en condiciones estándar. Es un isómero de la fructosa,
con diferente posición relativa de los grupos -OH y =O.

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La aldohexosa glucosa posee dos enantiómeros, si bien la D-glucosa es predominante

en la naturaleza. En terminología de la industria alimentaria suele denominarse
dextrosa (término procedente de «glucosa dextrorrotatoria»)3 a este compuesto.

2.3.2 CARACTERÍSTICAS

La glucosa, libre o combinada, es el compuesto orgánico más abundante de la

naturaleza. Es la fuente primaria de síntesis de energía de las células, mediante
suoxidación catabólica, y es el componente principal de polímeros de importancia
estructural como la celulosa y de polímeros de almacenamiento energético como
elalmidón y el glucógeno.

A partir de su estructura lineal, la D-glucosa sufre una ciclación hacia su

formahemiacetálica para dar sus formas furano y pirano (D-glucofuranosa y F-
glucopiranosa) que a su vez presentan anómeros alfa y beta. Estos anómeros no
presentan diferencias de composición estructural, pero si diferentes características
físicas y químicas.

La glucosa es uno de los tres monosacáridos dietéticos, junto

con fructosa y galactosa, que se absorben directamente al torrente sanguíneo durante
la digestión. Las células lo utilizan como fuente primaria de energía y es un
intermediario metabólico. La glucosa es uno de los principales productos de
la fotosíntesis y combustible para la respiración celular.

Todas las frutas naturales tienen cierta cantidad de glucosa (a menudo con fructosa),
que puede extraerse y concentrarse para preparar un azúcar alternativo. Sin embargo,
a escala industrial tanto el jarabe de glucosa (disolución de glucosa) como la dextrosa
(glucosa en polvo) se obtienen a partir de
la hidrólisis enzimática de almidón de cereales(generalmente trigo o maíz).

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III.- EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS.

3.1.- Materiales

 Tubos de ensayos.
 Pipeta graduada.
 Vaso de precipitado.
 gradilla
 Agua destilada
 Ovoalbúmina

3.2.- Reactivos

 Acetato de plomo.
 Hidróxido de sodio al 30%
 Ácido nítrico
 Glucosa al 1%
 Benedict

IV.- PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

 PRUEBA DE LA CISTINA

- En un tubo de ensayo se agrega Ovoalbúmina con la ayuda de la pipeta

graduada.
- Después se agrega 1 ml de acetato de plomo, al tubo de ensayo, se puede
apreciar un precipitado.
- Luego se agrega 1 ml de Hidróxido de sodio al 30% al tubo de ensayo y se
puede apreciar que el precipitado se disolvió, también cambio de color
Marrón o champan.

 PRUEBA XANTOPROTEICA
- En un tubo de ensayo se agrega Ovoalbúmina con la ayuda de la pipeta
graduada.
- Después de agrega unos 20 gotitas de ácido nítrico al tubo de ensayo, se
puede apreciar un color amarillento y se procede a calentar el tubo

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- También se agrega el Hidróxido de Sodio al 30% y se puede apreciar un color

amarillo o anaranjado en las paredes del tubo de ensayo.
- En esta prueba se obtuvo los aminoácidos aromáticos.

 PRUEBA DE BENEDICT
- En un tubo de ensayo se agrega 6 ml de Benendict con la ayuda de la pipeta
graduada.
- Después lo colocamos al fuego para observar si cambia de color para tener
la certeza que este bien preparado.
- Se agrega 2 o 3 gotitas de glucosa al 1% y se puede apreciar el cambio de
color verde oscuro , luego cambio a color plomo.

V.- RESULTADOS

A. RESULTADOS DEL TUBO N°1

FIG. N°4: PRUEBA DE CISTINA

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B. RESULTADOS DEL TUBO N°2

FIG. N°5: PRUEBA XANTOPROTEICA

C. RESULTADOS DEL TUBO N°3

FIG. N°6: PRUEBA DEL BENEDICT

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VI.- CONCLUSIONES
6.1 Se pudo identificar los aminoácidos aromáticos.

6.2 Se identificó la Glucosa.

VII.- BIBLIOGRAFÍA
[1] Aminoácido. Fecha y hora de búsqueda: (30/04/16) 02:14 p.m.

Disponible en:

https://es.wikipedia.org/wiki/Amino%C3%A1cido

[2] Glucosa. Fecha y hora de búsqueda: (30/04/16) 02:14 p.m.

Disponible en:

https://es.wikipedia.org/wiki/Glucosa

VIII.- ANEXOS

FIG. N° 7: HIDRÓXIDO DE SODIO AL 30%

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FIG. N° 8: BENEDICT

FIG. N° 9: GLUCOSA AL 1%

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FIG. N° 10: RESULTADOS FINALES

FIG. N° 11: REACTIVOS

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