PROTEINOGRAMAS - IF

Interpretación de resultados
y
Estrategia de análisis
 Proteinograma

• Separación de las proteínas séricas en 5 ó 6

fracciones

• Estado general paciente (reuma,

enfermedades crónicas...)

• Despistaje bandas monoclonales

 Proteinograma

Alb.
Alfa 1
Alfa 2
Beta
Gamma
 Proteinograma
5 fracciones 6 fracciones
 Proteinograma

• Muestra normal:
 Proteinograma
Cambios en albúmina

• Bisalbuminemia, hereditaria o adquirida:

 Proteinograma
Cambios en albúmina

• Analbuminemia congénita:
 Proteinograma
Cambios en ? 1

• Fracción alfa-1 doble (heterozigoto AAT):

 Proteinograma
Cambios en ? 1

• Síndrome inflamatorio agudo (asociado con

aumento en ? 2):
 Proteinograma
Cambios en ? 2

• Muestra hemolizada; ? 2 doble:

 Proteinograma
Cambios en ? 2

• Síndrome nefrótico (pérdida albúmina en

orina; proteínas urinarias > 3 g/L)
 Proteinograma
Cambios en ?

• Hipertransferrinemia en anemia:
 Proteinograma
Cambios en ?

• Bloque ? -? en cirrosis alcohólica:

 Proteinograma
Cambios en ?

• Presencia IgA monoclonal:

 Proteinograma
Cambios en ?

• Enfermedad de cadenas ligeras libres:

 Proteinograma
Cambios en ?

• Hipogammaglobulinemia:

– Fisiológica en el recién nacido

– Inmunodeficiencia aislada o total, en niños y
adultos
– Secundaria, debida a tratamiento
inmunosupresor
– Mieloma de cadenas ligeras (BJ en orina)
 Proteinograma
Cambios en ?

• Hipogammaglobulinemia:
 Proteinograma
Cambios en ?

• Hipergammaglobulinemia policlonal (infecciones

hepáticas, SIDA o enfermedades autoinmumes):
 Proteinograma
Cambios en ?

• Hipergammaglobulinemia monoclonal con:

– Gammapatía maligna (mieloma, Waldenstöm)
– Gammapatía asociada (leucemia linfática crónica, linfoma)
– Gammapatía benigna (pacientes ancianos) *

*
 Proteinograma
Cambios en ?
• Hipergammaglobulinemia oligoclonal (perfil
oligoclonal):

– Por respuesta autoinmune

– Por respuesta anti-proteínas virales
– Por tratamiento inmunosupresor tras transplante
– Por respuesta inmune en individuos normales (1-5 %)
 Proteinograma
Cambios en ?

• Perfil oligoclonal:
 Proteinograma
Cambios que simulan CM

• Zona ? 2:
– Síndrome inflamatorio que da lugar a gran elevación
Haptoglobina, aunque también se da hiper ? 1 globulinemia.

– Síndrome nefrótico con elevada concentración ? 2-

macroglobulina, aunque está asociado a hipoproteinemia
aguda (Alb muy baja).
 Proteinograma
Cambios que simulan CM

• Zona ? :
– Suero muy hemolisado: la Hb libre migra en ? aumenta su
proporción, mientras que el complejo Hb-Haptoglobina
genera banda extra en ? 2 (aunque la hemólisis es visible
en el tubo).

– Hiper ? globulinemia no monoclonal: el aumento de la

TRF (anemia), de C3 aislado (colestasis) o de ? -
lipoproteína (apoB elevada) aumenta la zona ? . En este
caso hay que tener en cuenta la edad del paciente y la
información clínica.
 Proteinograma
Cambios que simulan CM

• Zona ?:
– La presencia de fibrinógeno, debido a coagulación
retrasada en sueros recogidos en tubos de plástico o a
tratamiento con anticoagulante tipo heparina.
– Hay que tratar el suero con trombina y repetir el análisis
usando el sobrenadante.
– Si se hace IF, la banda anormal de fibrinógeno sólo es
visible en el carril ELP.
 Proteinograma
Cambios que simulan CM

• Zona ?:
Suero con Suero tratado con
fibrinógeno trombina
 Inmunofijación

• Tipado de componentes monoclonales

• Tipado de crioglobulinas
 Inmunofijación

• Ig´s séricas:
 Inmunofijación
• Isotipos Ig´s y función:
 Inmunofijación

• Estructura general Ig´s:

 Inmunofijación

• Estructura general Ig´s:

Inmunofijación
Inmunofijación
 Inmunofijación
Ejemplos de aplicación

• Gammapatías monoclonales:
 Inmunofijación
Ejemplos de aplicación

• Gammapatía biclonal:
 Inmunofijación
Ejemplos de aplicación

• Gammapatía monoclonal en ? 2:
Inmunofijación
Interpretación

IgG ? catódica
Inmunofijación
Interpretación

IgG ?
Inmunofijación
Interpretación

IgG ? anódica
Inmunofijación
Interpretación

IgA ? en zona ? 2
 Inmunofijación
Interpretación

IgD ? asociada
a ? libre
 Inmunofijación
Interpretación

IgE ?
 Inmunofijación
Interpretación

Gammapatía biclonal: IgG ? asociada a IgA ?

 Inmunofijación
Interpretación

Gammapatía triclonal: 3 IgG ?

Realizar tratamiento con agente reductor (BME):

-queda 1 banda: IgG ? con estructuras monoméricas y poliméricas (muy raro)
-quedan 3 bandas: gammapatía triclonal que incluye diferentes subclases de IgG (más frecuente)
 Inmunofijación
Interpretación

3 bandas de IgA ?

Realizar tratamiento con BME:

-queda una banda: presencia de una sola IgA ? con formas monoméricas y poliméricas
-quedan 2 ó 3 bandas: presencia de gammapatía biclonal o triclonal que incluye diferentes
subclases de IgA
 Inmunofijación
Interpretación

Gammapatía biclonal: IgM ? + IgM ?

 Inmunofijación
Interpretación

IF BJ

Gammapatía monoclonal asociada a un exceso de cadenas ligeras libres

(confirmación con gel BJ): IgA ? + ? libre
 Inmunofijación
Interpretación

Gammapatía monoclonal asociada a un exceso de cadenas ligeras libres

En la IF se detectaron 2 cadenas ligeras ? y se confirmaron con:

-una con el anti ? libre
-Otra con anti IgD
 Inmunofijación
Interpretación

Gammapatía monoclonal asociada a un exceso de cadenas ligeras libres

Presencia de 2 bandas monoclonales ? confirmadas:
-una con anti-IgM
-La otra, más anódica, con anti cadenas ligeras libres lambda
Inmunofijación
Interpretación

Gammapatía triclonal:
IgG ? , IgM ? e IgM ?
 Inmunofijación
Interpretación

Mieloma de cadenas ligeras ? , con hipogammaglobulinemia

(ante resultado negativo para BJ, debería analizarse con anti IgD y anti IgE)
 Inmunofijación
Interpretación

Mieloma de cadenas ligeras ?

Se trata la muestra por doble banda sin correspondencia cadenas pesadas.
Inmunofijación
Interpretación

IgM ?
Inmunofijación
Interpretación

IgM ?
Inmunofijación
Interpretación

IgM ?
Inmunofijación
Interpretación

IgM ?
 Inmunofijación
Interpretación

IgM ? polimerizada sin tratar con BME

 Inmunofijación
Interpretación

Enfermedad de cadenas pesadas ?:

confirmar con INMUNOSELECCIÓN
 Inmunofijación
Interpretación

Perfil oligoclonal IgG (? + ? )

 Inmunofijación
Interpretación

Hipergammaglobulinemia con débil perfil oligoclonal IgG (? + ? )

 Inmunofijación
Interpretación

Perfil oligoclonal con IgG e IgM (? + ? )

El perfil no se modifica tras tratar con BME
 Inmunofijación
Interpretación

Perfil oligoclonal IgG en paciente transplantado

Inmunofijación
Interpretación

Perfil oligoclonal en paciente transplantado

IgG e IgM (? + ? )

IgG, IgA, IgM (? + ? )

 Inmunofijación
Interpretación

Hipergammaglobulinemia con perfil oligoclonal IgG (? + ? )

Paciente con VIH
Inmunofijación
Interpretación
Inmunofijación
Interpretación
Inmunofijación
Plasma

IF plasma normal
Inmunofijación
Orina
 Inmunofijación
Crioglobulinas

Piroproteínas: sus propiedades se modifican a temperaturas elevadas

-Piroglobulinas o pirogelglobulinas: precipitan o gelifican a 56 º C (irreversible)
-Proteínas de BJ: precipitación entre 40 y 60 º C (reversible)

Termoproteínas

Crioproteínas: sus propiedades se modifican por debajo de 37 º C

-Crioglobulinas
-Criofibrinógeno Precipitación, gelificación o aglutinación reversible de 4 a 37 º C
-Aglutininas frías
Inmunofijación
Crioglobulinas
 Inmunofijación
Crioglobulinas
• Clasificación:
1- En función de su aspecto a 4 º C

-Precipitado crioglobulina
-Gel criogelglobulina
-Cristales criocristalglobulinas
2- En función del tipado inmunoquímico
(según Brouet y col., 1974)

-Tipo I Ig monoclonal aislada

-Tipo II Ig monoclonal + Ig policlonal(es)
-Tipo III Ig policlonal(es)
Crioglobulinas
 Crioglobulinas

Tubo 1: suero normal, negativo para CG

Tubo 2: crioprecipitado con CG tipo II mixta (IgM ? monoclonal + IgG policlonal)
Tubo 3: criogel con CG tipo I (IgM ? monoclonal) con geificación completa del suero
 Crioglobulinas

• IF de CG tipo I (monoclonal):

IgG ? IgM ?
 Crioglobulinas

• IF de CG tipo IIa (mono + policlonal):

IgG ? prevalente + IgG policlonal IgM ? + IgG policlonal con banda de

a baja concentración ? -lipoproteínas en carril ELP
(apoB presente en cada caso de CG
asociada a VHC)
 Crioglobulinas
• IF de CG tipo IIb (mono + oligoclonal y
policlonal):

IgG ?, IgA ? e IgG IgG e IgM oligoclonales

e IgM policlonales + Igs policlonales
Presencia banda ? -lipo (VHC)
 Crioglobulinas

• IF de CG tipo III (policlonal):

IgG e IgM policlonales

 Crioglobulinas
• IF de criofibrinógeno:
– La muestra se recoge como para CG pero se estudia PLASMA.
– La sangre debe recogerse en tubo con anticoagulante (citrato) y no en tubo
seco.
– Al mismo tiempo, debe realizarse test presencia CG con suero en tubo
seco:
– Ambos resultados positivos: CG
– Sólo positivo el test en tubo con anticoagulante: CRIOFIBRINÓGENO
 Crioglobulinas
Propuesta para nueva clasificación inmunoquímica

Tipo de CG Características de la Ig Clases de la IG

Tipo I Una Ig monoclonal -Ig monoclonal (la mayoría)

Monoclonal -IgA monoclonal
-Cadenas ligeras libres (muy raro)
Tipo Iia Una Ig monoclonal + una ó más clases -IgM monoclonal + IgG policlonal
Mixta monoclonal y de Ig policlonal -IgG monoclonal + IgG policlonal
policlonal -IgA monoclonal + IgG policlonal
-IgM monoclonal + IgA policlonal
Tipo Iib Una o más clases de Ig oligoclonal + - IgG y/o IgM oligoclonal + IgG y/o
Mixta oligoclonal y una o más clases de Ig policlonal IgM policlonal
policlonal
Tipo III Una o más clases de Igs policlonales -IgM o IgG o IgA policlonal
Mixta policlonal -IgG + IgM policlonal
-IgG + IgA policlonal
-IgG + IgM + IgA policlonal
 Clasificación de componentes
monoclonales (CM)
• Según criterios inmunoquímicos:
1.Hiperproducción selectiva de Igs monoclonales completas:
- IgG, IgA, IgM y menos frecuentemente en IgD e IgE
- Relacionada con CM maligno o benigno
- Se visualiza en la electroforesis de forma clara

2.Hiperproducción de cadenas ligeras libres monoclonales (5 %):

- Síntesis excesiva de cadenas ligeras libres ? ó ?
- Se encuentra casi exclusivamente en mieloma de cadenas ligeras maligno constante
- Banda monoclonal en suero ausente o discreta excepto en presencia polímeros de cadenas ligeras
libres (demasiado grandes para ser filtrados por glomérulo)
-Hipogammaglobulinemia asociada.

3.Hiperproducción de cadenas pesadas libres monoclonales

estructuralmente anómalas (muy poco frecuente).
-Implica a cadenas pesadas ? , ?, ? : enfermedad de cadenas pesadas.
-Asociada a veces a procesos malignos.
 Clasificación de componentes
monoclonales (CM)
• Según criterios clínicos:
1.Componentes monoclonales malignos:
- Mieloma: IgG, IgA, cadenas ligeras y raramente de IgD o IgE.
- Enfermedad de Waldenström (IgM)
- Enfermedad de cadenas pesadas (? , ?, ? )
La Ig monoclonal constituye un marcador para el diagnóstico y el seguimiento de un tumor

2.MGUS:
- IgG, IgM y a veces IgA.
- Hay 2 tipos de MGUS, ya que la Ig monoclonal detectada no es un marcador de tumor
a) CM asociados a patologías benignas o malignas
b) CM idiopáticos, a menudo de naturaleza asintomática en pacientes ancianos.
 Estrategia de análisis para
detección Ig monoclonales

• 1. Análisis del suero:

– PT + electroforesis: detección CM.

– Cuantificación Ig sérica

– IF para determinar isotipo CM.

 Estrategia de análisis para
detección Ig monoclonales

• 2. Análisis de la orina:

– IF ó IEP (determina isotipo).

– PT orina + electroforesis: detecta posible BJ

 Estrategia de análisis para
detección Ig monoclonales

• 3. Tests complementarios:

– IEP ó IF (determina isotipo BJ e Ig monoclonal

si está presente en la orina)
– Investigación de posible crioglobulina
– Cuantificación ? 2 microglobulina
– Cuantificación PCR.
 Papel del laboratorio

• Diagnóstico y seguimiento de CM malignos.

• Seguimiento de estado general y evolución

MGUS.
(la detección de un CM, en ausencia de otros indicadores clínicos
o biológicos, debería confirmarse al cabo de 3 meses y requiere un
seguimiento semestral o anual)
Estrategia análisis suero
Estrategia análisis orina
PROTEINOGRAMAS - IF