COLEGIO HISPANOAMERICANO

CAMPUS PREPARATORIA

BIOQUIMICA

PRÁCTICA DE LABORATORIO No 2

“CUANTIFICACIÓN DE VITAMINA C”

6TO SEMESTRE “A”

QFB. JOSCELYN MACÍAS REYES

Céd. Prof. 9021001

2016

RESUMEN

La vitamina C es una vitamina hidrosoluble sensible al calor. Químicamente hablando, se trata de ácido L-
ascorbico y sus sales, los ascorbatos (los más comunes, que son ascorbatos de sodio y de calcio).

Acción

La vitamina C es un cofactor enzimático implicado en diversas reacciones fisiológicas (hidroxilación). Es

necesaria para la síntesis del colágeno y de los glóbulos rojos, y contribuye al buen funcionamiento del
sistema inmunitario.

También juega un papel en el metabolismo del hierro, en la transformación de dopamina en noradrenalina

y en la biosíntesis de carnitina. Bajo su forma oxidada, atraviesa la barrera hemato-encefálica para acceder
al cerebro y a varios órganos. Muy frágil en solución, se destruye al contacto con el aire, por la luz o el
calor. Se trata de un antioxidante, molécula capaz de contrarrestar la acción nociva de oxidantes como los
radicales libres. Con este fin, también se emplea la forma R- del ácido ascórbico, la cual, al contrario que
la forma L-, no presenta actividad vitamínica.

La vitamina C es un compuesto inestable, debido a la facilidad con la que se oxida e hidrata. Se destruyen
con facilidad en el procesamiento y conservación de los alimentos, por lo que es utilizada como indicador
de la pérdida vitamínica de un alimento durante su procesamiento y almacenamiento. Por otra parte, el
calor y los cationes metálicos (cuidado al cocinar en recipientes de cobre) destruyen la vitamina C.
Alimentos como los cítricos, kiwi, fresones, brócoli, lechuga, entre otros, son fuente natural de vitamina
C, y su contenido depende de la especie, área geográfica en las que son cultivados, las condiciones de
almacenamiento una vez recogidos y del estado de maduración (generalmente aumenta con la
maduración).

La vitamina C se puede reconocer mediante azul de metileno. Este colorante cuando está oxidado es de
color azul y se reduce fácilmente formando un compuesto incoloro. Por otra parte, la cromatografía y la
titulación volumétrica de óxido-reducción son métodos utilizados para cuantificar el contenido de
vitamina C de un alimento. La cromatografía líquida de alta presión (HPLC) es el método más utilizado por
ofrecer una gran precisión de los resultados. Sin embargo la técnica de HPLC resulta cara, por ello en esta
práctica determinaremos el contenido de vitamina C presente en la fruta, en bebidas preparadas o en
complejos vitamínicos mediante una titulación volumétrica de óxido reducción.

Palabras claves: Vitamina C, cítricos, ingesta diaria recomendada, titulación, volumetrías REDOX, Almidón,
Azul de Metileno.

Objetivo: Que el alumno pueda identificar y cuantificar Vitamina C a través de una titulación volumétrica
de óxido-reducción.

MATERIALES Y REACTIVOS

MATERIAL
- Bureta de 50 ml
- Erlenmeyer de 250 ml
- Embudo
- Probeta de 50 ml
- Baño María
- Perilla (lo venden en farmacias, para bebés)
- 1 botellita de agua, 500 mL c/ integrante
- Papel de Cocina (el necesario para limpieza de bureta)
REACTIVOS
1. Disolución de yodo 24,1 mM
2. Disolución de almidón 1% (w/v) (recién preparada) de papa
Disolver 1 g de almidón soluble en 100 ml de agua hirviendo. Homogeneizar la suspensión. Una vez fría,
filtrarla utilizando algodón.
3. HCl 15%
4. Naranja o limón y zumos comerciales
5. Preparado de vitamina C (comprimidos o sobres de vitamina C; 500mg/L agua destilada)
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Preparación del zumo de fruta

- Exprimir una naranja o limón.

- Filtrarlo a través de una gasa.
- Puede utilizarse también zumos de fruta de venta en establecimientos comerciales.
- Para determinar el ácido ascórbico de los comprimidos de vitamina C, disolver una tableta que
contenga 500 mg de ácido ascórbico en un litro de agua destilada.

2.1 Titulación del ácido ascórbico

 Si se hace con zumos naturales

- Poner en un Erlenmeyer de 100 ml:

 10 ml de zumo
 15 ml de agua destilada
 0,25 ml de HCl (15% v/v)
 0,25 ml de almidón (1% w/v) que actúa como indicador.
- Llenar la bureta con 15 ml de la disolución de yodo.
- Titular lentamente y agitando la disolución de zumo contenida en el Erlenmeyer, hasta que vire
al azul.

 Para titular el ácido ascórbico de los zumos comerciales y en preparados de vitamina C

- Poner en un Erlenmeyer de 100 ml:

 25 ml de la disolución de ácido ascórbico o de zumo
 0,25 ml de HCl (15% v/v)
 0,25 ml de almidón (1% w/v) que actúa como indicador
Proceder de la misma manera que se hizo con el zumo natural.

Limpieza de la bureta

Una vez terminada la parte experimental:

- Recuperar la disolución de yodo sobrante.

- Pasar agua a través de la bureta hasta que desaparezcan todos los restos de yodo.
- Desmontar la llave de la bureta y limpiarla con papel.
 - Poner de nuevo la llave envuelta en papel.

TRATAMIENTO Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Calcular la cantidad de vitamina C en la muestra (zumo por ejemplo) en g/L utilizando la siguiente fórmula:

g Volumen yodo consumido

= 0,424 ×
L volumen de la muestra

Donde:

El volumen de yodo consumido es es el volumen añadido al erlenmeyer desde la bureta al titular

el preparado de vitamina C.

El volumen de la muestra es el volumen de zumo que hemos puesto en el erlenmeyer con una
concentración de vitamina C desconocida.

BIBLIOGRAFÍA

Ciancaglini P et al. Using a classical method of vitamin C quantification as a tool for discussion of its role
in the body. Biochem. Mol. Biol. Edu. 29: 110-114, 2001.

Harris DC. Análisis químico cuantitativo. Editorial Reverté, 2001.