BACTERIOLOGÍA II William Calero Cáceres, PhD

4.1. INTRODUCCIÓN A LA BIOLOGÍA MOLECULAR

 INTRODUCCIÓN (EXPRESS)
A LA BIOLOGÍA MOLECULAR
CONCEPTOS
A pesar de su importancia, tan sólo se han cultivado,
identificado y estudiado menos del 1% del total de
especies de microorganismos.

¿Por qué?

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COMUNIDADES MICROBIANAS
En ecología microbiana, los microorganismos no son considerados como entidades
aisladas.

107 taxones
Microorganismos existen en comunidades. diferentes

1010 – 1017
individuos

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EXAMEN DE LAS POBLACIONES BACTERIANAS
Aislamiento selectivo

Muestra desconocida Coliformes

(Chromocult ®)

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DILUCIONES PARA RECUENTO EN PLACA

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NÚMERO MÁS PROBABLE
Basado en un análisis estadístico, de
la probabilidad de encontrar un
microorganismo en una determinada
dilución de acuerdo a resultados de
presencia/ausencia.

Se expresa en nº microorganismos/ml

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 EXAMEN DE LAS POBLACIONES BACTERIANAS
Microorganismos no cultivables (VBNC)

No es posible su enriquecimiento o aislamiento

VBNC si muestra signos de vida

(movimiento o células en división)

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 EXAMEN DE LAS POBLACIONES BACTERIANAS
Microorganismos cultivables y no cultivables
Kits basados en biología molecular PCR

VBNC si muestra signos de vida

(movimiento o células en división)

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BIOLOGÍA MOLECULAR
Tiene como objetivo el estudio de los procesos que se desarrollan en los seres vivos
desde un punto de vista molecular.
Pretende explicar los fenómenos de la vida a partir de sus propiedades
macromoleculares.

Ácidos nucleicos
• DNA
• RNA

Proteínas

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NATURALEZA DEL GEN Y DEL GENOMA
Son factores retenidos a través de la vida de un organismo.
Pasan a su progenie.
Los factores hereditarios residen en el cromosoma y esta
formados por el DNA (acido desoxiribonucleico).

Genoma: cuerpo colectivo de información genética presente en

una especie. Contiene todos los genes necesarios para construir
un organismo específico.

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 FLUJO DE LA INFORMACIÓN GENÉTICA
TRANSCRIPCIÓN DEL DNA

rRNA

Mensajero
DNA Transporte Ribosomal

Herencia del DNA

en las células hijas

REPLICACIÓN DE DNA WILLIAM CALERO CÁCERES ©

FLUJO DE LA INFORMACIÓN GENÉTICA
TRADUCCIÓN DEL mRNA

RIBOSOMA
(rRNA + proteína)

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DNA A PROTEÍNA

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 COMPOSICIÓN DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
Bases púrinicas y Azúcar
pirimidínicas (Ribosa o deoxiribosa)

Nucleósido o desoxinucleósido Ácido fosfórico

Nucleótido o desoxinucleótido

Ácido nucleico (RNA, DNA)

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 BASES Y AZÚCARES

DESOXIRIBOSA
PURINAS

(DNA)
Adenina (A) Guanina (G)
PIRIMIDINAS

RIBOSA
(RNA)
O
Citosina (C) Timina (T) Uracilo (U)
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 UNIÓN AZÚCAR-BASE

5’
Ribosa + Adenina

ADENOSINA

4’ 1’

2’

3’ WILLIAM CALERO CÁCERES ©

NUCLEÓTIDOS
BASE NITROGENADA
Adenina

FOSFATO

AZÚCAR
Desoxiribosa
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POLIMERIZACIÓN

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ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (DNA)
El azúcar y el fosfato hacen el
“esqueleto” de la doble hélice
de DNA, unidas por enlaces
químicos.

Las bases nitrogenadas que

están en el medio se unen por
medio de puentes de
hidrógeno
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ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (DNA)

A-T
C-G
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ÁCIDO RIBONUCLEICO (RNA)

El azúcar y el fosfato hacen el

“esqueleto”.

Dirección 5’ 3’

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COMPARATIVA DNA-RNA

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APLICACIÓN DE LA BIOLOGÍA MOLECULAR AL
DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
DNA Y RNA
Moléculas que almacenan la información
que determina las características de las
células y organismos.

La información está codificada en un

código químico determinado por el
orden en el que se encuentran las bases
nitrogenadas dentro del DNA.

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TAMAÑO DE LOS GENOMAS
Los genomas bacterianos tienen un
tamaño de pb entre 105 y 107.

Escherichia coli (1997)

4.6 millones de pb
4000-5500 genes

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EVOLUCIÓN PROCARIÓTICA
Procariotas tienen una elevada variación
genética.

Tres factores contribuyen a esta diversidad:

1. Rápida reproducción
2. Mutación
3. Recombinación genética (intercambio
genético)

Battistuzzi, F. U., Feijao, A., & Hedges, S. B. (2004). A genomic timescale of

prokaryote evolution: insights into the origin of methanogenesis, phototrophy, and
the colonization of land. BMC evolutionary biology, 4(1), 44.

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E. coli O157:H7 Shigella flexneri

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DETECCIÓN DE GENES FUNCIONALES
Regiones altamente conservadas.
1. Identificación
2. Tipificación

Genes de interés
1. Mecanismos de virulencia
2. Genes de resistencia a antibióticos
3. Genes de resistencia a metales pesados
4. Mecanismos de supervivencia
5. Genes implicados en anabolismo y catabolismo

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CONTINUARÁ !!!!