Practica N° 4

Pruebas cualitativas para carbohidratos

Integrantes:
Payares García Camilo Andrés
Doria Pedroza Camilo Andrés
Correa Londoño Omar
Santos Paternina Rafael
Iván parra
Andrés Felipe manchego

Docente: Pardo Plaza Yury Janio

30-09-2019

Universidad de Córdoba

Montería-Córdoba
 OBJETIVOS

 Reconocer la presencia de carbohidratos en una muestra problema mediante

la prueba e molish
 Diferenciar carbohidratos reductores de no reductores por su
comportamiento frente al reactivo de Benedict.
 Realizar ensayos cualitativos para el reconocimiento de carbohidratos
específicos
.
 INTRODUCCION
Los carbohidratos son compuestos orgánicos, formados primordialmente por
carbono, hidrógeno y oxígeno. Se encuentran en muchos productos naturales y son
una de las fuentes principales de energía para los organismos quimio tróficos. La
unidad fundamental de los carbohidratos son los monosacáridos, estos son
polihidroxialdehídos o polihidroxicetonas. Los monosacáridos se combinan, con la
pérdida de moléculas de agua uniéndose mediante enlaces glicosídicos,
formándose oligosacáridos y polisacáridos. En presencia de ácidos no oxidantes,
los carbohidratos se deshidratan y forman furfural si el monosacárido es una
pentosa o hidróximetilfurfural, si el monosacárido es una hexosa. Cuando la
reacción de deshidratación se efectúa con la ayuda del ácido sulfúrico concentrado
y el color se desarrolla con alfa naftol, la prueba se denomina reacción de Molisch.
Otra prueba basada en la formación de furfural es la prueba de Seliwanoff. Esta
prueba consiste en la reacción del resorcinol (1,3 dihidróxibenceno) con las cetosas
deshidratadas por el HCI concentrado. Se observa la formación de un complejo rojo.
La prueba de Bial se utiliza para identificar pentosas y consiste en calentar la
pentosa con HCI. se forma furfural que se condensa con orcinol en presencia de
iones férricos para dar un color verde azuloso. Para la Prueba para azúcares
reductores las propiedades reductoras de los azúcares dependen de la presencia
de grupos aldehídos o cetonas, reales o potenciales. Al calentar ciertas soluciones
de azúcares, en presencia de determinados iones metálicos, el grupo carbonilo se
oxida y el ion metálico se reduce. Algunas de estas pruebas son: La de Benedict,
que identifica carbohidratos en general y es positiva cuando se observa la aparición
de un precipitado amarillo, anaranjado o rojo ladrillo; y la prueba de Barfoed, que es
similar a la de Benedict, excepto que el reactivo es ligeramente ácido o sirve para
detectar la presencia de monosacáridos. Los polisacáridos son cadenas muy largas
o polímeros de monosacáridos, lineales o ramificados. Se dividen en
heteropolisacáridos y homopolisacáridos dependiendo si la forman distintos o
iguales unidades simples. Algunos polisacáridos de reserva importante lo son el
almidón formado por dos constituyentes: amilosa y amilopectina; y el glucógeno
llamado “almidón animal”, se encuentra en el hígado y músculos. En la siguiente
practica reconoceremos la presencia de carbohidratos en una muestra problema
mediante la prueba de Molish, diferenciaremos carbohidratos de no reductores por
su comportamiento frente al reactivo de Benedict. y Realizaremos ensayos
cualitativos para el reconocimiento de carbohidratos específicos.
MATERIALES Y REACTIVOS
 Estufa o calentador
 Pipetas de 5 y de 10ml
 Beakers de 100 y 400ml
 10 tubos de ensayo
 Pinza para tubos de ensayo
 Gradilla
 Gotero
 Papel tornasol
 Soluciones de: glucosa, galactosa, ribosa, arabinosa, sacarosa, lactosa,
fructosa, almidón, leche (traer de la casa)
 Solución de yodo.
 Reactivo de Molish
 Ácido sulfúrico concentrado
 Reactivo de Benedict
 Reactivo de Barfoed
 Reactivo de Bial
 Reactivo de Selliwanoff
 Alcohol Amilico
 Ácido clorhídrico concentrado
 Hidróxido de sodio 1M
 PROCEDIMIENTO
1.Prueba de Molish
Se tomó un tubo de ensayo y se le agregó un ml de leche y se le agregó 5 gotas de
reactivo de Molish y de inmediato se desnaturalizo la leche al mezclar, después se
le agregó 1 ml de ácido sulfúrico por las paredes del tubo y se formó un anillo de
color morado en la parte inferior del tubo de ensayo, lo que indica que hay presencia
de azúcar.

2.prueba de Benedict
se tomaron tres tubos de ensayo y al tubo N° 1 se le agregó 0,5 ml de solución de
lactosa, al tubo N° 2 se le agregó 0,5 ml de solución de glucosa y al tubo N° 3 se le
agregó 0,5 de sacarosa y se procedió a agregarle 0,5 ml de solución de reactivo de
benedict y se apreció un cambio de color azul en cada tubo, luego se procedió a
calentar en baño de maría por 3 min y se observó una precipitación y cambio de
color rojo ladrillo en el tubo N° 1 y 2, indicando presencia de un azúcar reductor, en
el tubo N° 3 no presento cambios.
3.prueba de Barfoed
Se tomaron 3 tubos de ensayo y al tubo n° 1 se le agregó 0,5 ml de solución de
galactosa, al tubo n°2 se le agregó 0,5 ml de solución de ribosa y al tubo N°3 se le
agregó 0,5 de solución de almidón y a cada tubo se le adiciono 1 ml de reactivo de
Barfoed y para alcalizar se le agregó una gota de hidróxido de sodio y se procedió
a calentamiento por 2 min luego se dejó reposar y se observó en el tubo N° 1 y 2
hubo precipitación y se tornó de un color rojo ladrillo lo que indica presencia de
azúcar reductor y el tubo N°3 no hubo cambios.
4. prueba de Bial
En este punto se tomaron 3 tubos de ensayo y al tubo N° se le agregó 0,5 ml de
solución de fructosa al tubo N°2 se agregó 0,5 ml de solución de arabinosa y al tubo
N°3 se le agregó 0,5 ml de solución de glucosa y a cada tubo se le agregó 0,5 ml
de reactivo de Bial y se procedió a calentamiento hasta hervir cada sustancia, dando
lugar a un enfriamiento para así agregar ácido sulfúrico, el cual reemplazo el alcohol
aluminico para así observar la presencia de pentosa en las sustancias, donde se
evidencia un anillo que identifica la presencia de pentosa en gran proporción en la
arabinosa, medianamente en fructosa y muy leve en la glucosa, caracterizando así
los buenos procesos bioquímicos.

5. prueba de salliwanoff
se tomaron 3 tubos de ensayo y el tubo N°1 se le agregó 0,5 de solución de fructosa
al N°2 se le agregó 0,5 de solución de arabinosa y el tubo N°3 se le agregó 0,5 de
solución de glucosa, a cada tubo se le agregó 10 gotas de reactivo de salliwanoff, y
luego se procedió a calentar las muestras por un minuto y se observó que en la
glucosa se formó un precipitado y una coloración rojo ladrillo y la fructosa con la
arabinosa se tornaron de una coloración rosado esto indica la presencia de cetosas.
6. prueba para sacarosa
Se agregó en un tubo de ensayo 2 ml de sacarosa a este se le agregaron 3 gotas
de ácido clorhídrico, luego se calentó por 5 min y se dejó reposar, luego se le agregó
un ml de hidróxido de sodio y se procedió a dividir en dos tubos de ensayo, a uno
se le agrego tres gotas de benedict y al otro tubo se le agrego tres gotas de
salliwanoff luego se sometió a calentamiento y hubo un cambio de color el tubo con
la solución de benedict, se tornó de un rojo ladrillo y el de salliwanoff también tuvo
una coloración roja con esto podemos decir que ambas pruebas fueron positivas.
7.prueba para polisacáridos
Se añadió 1 mL de solución de almidón en un tubo de ensayo, luego añadimos 1
gota de solución de yodo y se observó un cambio de coloración azul, luego lo
sometimos a calentamiento y observamos una precipitación de color azul, luego
dejamos enfriar el tubo y observamos que se tornó completamente una solución de
color azul.
 CONCLUSIÓN
Los carbohidratos al poseer en su estructura aldehídos o cetonas, presentan un
comportamiento químico ligado a los grupos funcionales de estos, como por
ejemplo la capacidad de oxidarse con agentes oxidantes suaves como el reactivo
de Fehling o de Tollens o la capacidad de formar osazonas, además esta clase de
reacciones permiten diferenciar monosacáridos de disacáridos como la sacarosa.
Los monosacáridos se diferencian de los disacáridos (sacarosa) por su poder
reductor, poder que es otorgado por el carbono libre que posee, los monosacáridos
a su vez se subdividen en aldosas y cetosas, y en pentosas o hexosas, estos fueron
identificados y diferenciados mediante la prueba deTollens, de Seliwanoff y de Bial,
en las que se evidencio la velocidad de deshidratación de las aldosas y cetosas, y
la formación de furfural ohidroximetil furfural, según provenga una pentosa o
hexosa. La sacarosa al hidrolizarse libera a sus monosacáridos constituyentes: la
glucosa y la fructosa, debido a esto la sacarosa presento resultados positivos en la
prueba para disacáridos y en la prueba de Seliwanoff.
 PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
2. Explique los resultados de cada una de las pruebas realizadas?
R//: La respuesta está en el procedimiento
3. Explique estructuralmente, porque la maltosa es un azúcar reductor y
porque el almidón no lo sus observaciones
R//: La maltosa es un azúcar reductor ya que posee un grupo carbonilo intacto, y
que a través del mismo pueden reaccionar con otras especies.
El almidón es un polisacárido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y
la amilopectina. Y los polisacáridos no son reductores
4. Consulte las enfermedades producidas por el mal metabolismo de los
carbohidratos
R//:
Diabetes: Tema de salud de MedlinePlus
Enfermedad de almacenamiento de glucógeno tipo 5
Enfermedad de Von Gierke
Enfermedad del almacenamiento de glucógeno tipo V
Galactosemia
Intolerancia hereditaria a la fructosa
Mucolipidosis
Mucopolisacáridos
Mucopolisacáridos tipo I
Mucopolisacáridos tipo II
Mucopolisacáridos tipo III
Mucopolisacáridos tipo IV
Síndrome de Hunter

5. Porque la celulosa a pesar de estar formada por moléculas de glucosa es

insoluble en agua
R//: Estructura de la celulosa; a la izquierda, β-glucosa; a la derecha, varias β-
glucosa unidas. La celulosa tiene una estructura lineal o fibrosa, en la que se
establecen múltiples puentes de hidrógeno entre los grupos hidroxilo de distintas
cadenas yuxtapuestas de glucosa, haciéndolas impenetrables al agua, lo que hace
que sea insoluble en agua, y originando fibras compactas que constituyen la pared
celular de las células vegetales.

6. ¿Porque la sacarosa es un azúcar no reductor? Consulte las posibles

estructuras de las muestras problemas
R//: No contiene ningún átomo de carbono anomérico libre, puesto que los carbonos
anoméricos de sus dos unidades monosacáridos constituyentes se hallan unidos
entre sí, covalentemente mediante un enlace O-glucosídico. Por esta razón, la
sacarosa no es un azúcar reductor y tampoco posee un extremo reductor.

7. Consulte el fundamento de otras técnicas usadas para la determinación de

la glucosa en el laboratorio
R//:
a) Métodos basados en el poder reductor de los hidratos de carbono (reacción de
Benedict t, método de la o-toluidina)
b) Métodos enzimáticos: son los más utilizados, utilizan enzimas como reactivos (ej.
glucosa oxidasa, hexoquinasa) a fin de aumentar
la especificidad. Los dos métodos que vamos a citar se pueden utilizar para
determinar la glucosa en muestras de suero, orina y líquido cefalorraquídeo
b.1.) Método de la hexoquinasa: Es el método de referencia y consiste en dos
reacciones acopladas.
b.2.) Método de la glucosa oxidasa: Al igual que el anterior consiste en dos
reacciones acopladas