DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

LICENCIATURA EN BIOLOGÍA

BIOFÍSICA. GPO 01.

PROFESOR: M. en C. Bricia Rivera Villanueva
PRÁCTICA #2.
PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA

ANDREA LARISSA FRANCO CERVANTES

Matrícula: 19030386

Guasave, Sin. 28 de Octubre del 2019

 INTRODUCCIÓN

La membrana citoplasmática regula la entrada y salida de materiales,

permitiendo la entrada de unos y restringiendo el paso de otros. Esta propiedad se
llama permeabilidad selectiva. La permeabilidad de la membrana depende de varios
factores relacionados con las propiedades físico-químicas de la sustancia:

 Solubilidad en los lípidos: Las sustancias que se disuelven en los lípidos

(moléculas hidrófobas, no polares) penetran con facilidad en la membrana
dado que esta está compuesta en la mayor parte por fosfolípidos.

 Tamaño: La mayor parte de las moléculas de gran tamaño no pasan a través

de la membrana. Solo un pequeño número de moléculas no polares de
tamaño pequeño pueden atravesar la capa de fosfolípidos.

 Carga: Las moléculas cargadas y los iones no pueden pasar, en condiciones

normales, a través de la membrana. Sin embargo, algunas sustancias
cargadas pueden pasar por los canales proteicos o con la ayuda de una
proteína transportadora.

Gracias a esta selección es posible mantener dentro de la célula moléculas de alto

peso molecular como proteínas y ácidos nucleicos, y de bajo peso molecular como
gases, sales y algunos iones.

GENERALIDADES
El transporte de materia puede realizarse gracias a la presencia de ciertas
sustancias que conforman a las membranas: unas se encargan de formar una
compleja estructura, otras de facilitar el paso de sustancias de una manera selectiva
y controlada, y algunas más tienen como función relacionar a la célula con el medio
circundante.
Entre los compuestos básicos que conforman a las membranas podemos
reconocer los lípidos, las proteínas y los carbohidratos. Los lípidos conforman la
estructura o matriz de la membrana y están representados básicamente por los
fosfolípidos, es decir, compuestos que presentan una “cabeza” hidrofílica
constituida por grupos fosfato, y una “cola” hidrofóbica formada por cadenas de
carbonos de naturaleza lipídica. Tanto la cabeza como la cola pueden tener
diferente composición y complejidad, de acuerdo con el tipo de membrana de que
se trate.
Por la presencia de dos zonas (una hidrofílica y otra hidrofóbica) los
fosfolípidos en presencia de agua forman una bicapa. El movimiento continuo que
presentan las colas de las moléculas da una enorme flexibilidad a esta zona, por lo
que se considera que en la membrana hay un flujo bidimensional continuo, ya que
las moléculas tienen gran movimiento lateral a lo largo y ancho de cada monocapa.
Por el contrario, el movimiento de moléculas entre dos monocapas opuestas es
extremadamente lento.
Que una membrana permita o no el paso de una sustancia a través de ella
depende del tamaño y la carga de la sustancia y de la composición de la membrana.
Se dice que la membrana es permeable a una sustancia dada si permite que esta
la cruce, e impermeable en caso contrario. Una membrana con una permeabilidad
selectiva permite el paso solo de algunas sustancias. En general, las membranas
biológicas son más permeables a las moléculas pequeñas y a sustancias
liposolubles capaces de cruzar el interior hidrófobo de la bicapa (Ver Fig. 1).

Fig. 1 Estructura de la membrana plasmática

Aunque son polares (no liposolubles), las moléculas de agua pueden cruzar
con rapidez las bicapas lipídicas fluidas que constituyen las membranas porque son
lo suficientemente pequeñas para pasar por los huecos que se crean cuando una
cadena de ácido graso se desplaza en forma momentánea. También pueden
atravesar con libertad algunos gases como el oxígeno, dióxido de carbono y
nitrógeno; moléculas polares pequeñas como el glicerol, y sustancias no polares de
mayor tamaño (hidrófobas), entre éstas los hidrocarburos. Algunas moléculas
polares un poco más grandes, como la glucosa, así como los iones con carga de
cualquier tamaño, cruzan con mayor lentitud la bicapa.
Si bien la bicapa es relativamente impermeable a los iones, las células
necesitan desplazar iones y moléculas polares grandes y pequeñas, como
aminoácidos y azucares, a través de las membranas. La permeabilidad de estas
últimas a sustancias de esos tipos se debe sobre todo a actividades de proteínas
de membrana especializadas. Las membranas biológicas que rodean a células,
núcleos, vacuolas, mitocondrias, cloroplastos y otros organelos subcelulares son
semipermeables a diferentes tipos de moléculas.
 En respuesta a las condiciones ambientales o a las necesidades celulares
cambiantes, una membrana plasmática puede constituirse en barrera para una
sustancia dada en un momento y promover de modo activo su paso en otro instante.
Al regular el tránsito químico de esta manera, la célula ejerce algún control sobre su
propia composición iónica y molecular interna, que puede ser diferente de la que
corresponde al medio extracelular.

OBJETIVO
Comprobar la selectividad de la membrana celular por medio de reacciones
químicas en un modelo artificial.

MATERIAL
- Mechero
- Probeta
- Vaso de precipitado de 500ml
- Embudo
- Película de gel

REACTIVOS
- Lugol.
- Reactivo de Benedict
- Solución de albúmina.
- Ácido nítrico concentrado.
- Agua destilada.
- Hidróxido de amonio concentrado.
- Reactivo de Biuret y de Fehling.
- Solución de almidón al 1%.
- Solución de glucosa al 30%.
- Solución de nitrato de plata al 1%.
- Solución de cloruro de sodio al 5%.
 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. Preparar la película de gel utilizando gelatina libre de azúcares,
bacteriológica bioxon (grenetina) 2g en 50ml de agua destilada. Colocarla en
un molde circular para obtener la forma de éste, procurando que la capa sea
delgada (máx. 5 mm) puede ser una tapa, cristalizador o caja Petri colocando
entre este y el gel un pedazo de bolsa de plástico para que no pegue el gel
en el recipiente.

2. Una vez que se tenga la película de gel, colocarla en el embudo y agregarle

5 ml de las soluciones de almidón, glucosa, NaCl y albúmina.

3. Colocar el embudo con la película de gel en un vaso con agua destilada hasta
tener contacto con la película, al agua se le habrán practicado previamente
las pruebas para almidón, glucosa, proteínas y cloruros, para asegurarse que
el agua no contenga ninguna de estas sustancias.

4. Se deja reposar el embudo con el vaso, en posición vertical durante 24 hrs.

5. Los procedimientos para realizar las pruebas de identificación de almidón,

glucosa y proteínas se describe a continuación:

PRUEBA DEL LUGOL PARA IDENTIFICAR ALMIDÓN:

a) Colocar una pequeña cantidad de la muestra en un tubo de ensayo.
b) Agregar 2 a 3 gotas de lugol.
c) Observar la reacción. Si la muestra contiene almidón con lugol adquirirá
una coloración azul oscuro (reacción positiva).

PRUEBA DE FEHLING PARA IDENTIFICACIÓN DE AZÚCARES

REDUCTORES:
a) Colocar una pequeña cantidad de la muestra en un tubo de ensayo.
b) Agregar 0.5 ml de solución de Fehling A y 0.5 ml de solución Fehling B.
c) Calentar a ebullición por 2 minutos (en baño maría). Observar la reacción.
d) Si en la reacción existen azúcares reductores con el reactivo de Fehling
se formará un precipitado café-rojizo (reacción positiva) o por lo menos la
solución debe tomar esta coloración.

PRUEBA DE BIURET PARA IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS:

Es una prueba general para proteínas y polipéptidos de cadena no menor de
tres unidades de aminoácidos.
a) Colocar una pequeña porción de la muestra en un tubo de ensayo y
agregar 3 a 5 gotas de reactivo de Biuret.
 b) Observar la reacción. Si en la muestra existen proteínas se observará que
el reactivo agregado adquirirá una coloración violeta (reacción positiva).

REACCIÓN XANTOPROTÉICA:
Esta reacción es positiva tanto en proteínas en solución como en estado
sólido y es mucho más sensible cuando se encuentran perfectamente secas.
a) A una pequeña porción de muestra agregar 1 ml de ácido nítrico
concentrado.
b) Calentar y enfriar.
c) Dejar resbalar por las paredes del tubo 1 ml de hidróxido de amonio
concentrado sin agitar.
d) La formación de un anillo color naranja en la superficie indica la presencia
de proteínas en la muestra (reacción positiva).

PRUEBA PARA IDENTIFICAR CLORUROS:

a) Colocar 1 ml de muestra en un tubo de ensayo.
b) Agregar 5 gotas de solución de nitrato de plata.
c) Agitar y observar.
d) La presencia de un precipitado blanco indica la presencia de cloruros.

NOTA: Si el resultado de las pruebas anteriores es positivo indica que la

sustancia se encuentra en la muestra que se está analizando, o de que no
hay si es negativo. En el cuadro de reacciones de identificación se indican
las características de los resultados de las pruebas para cuando son positivas
y/o negativas.

6. Tomar cuatro muestras del agua destilada donde estuvo sumergida la

película de gel en tubos de ensayo numerados y efectuar las reacciones para
las sustancias de la mezcla, anotando en cada caso, si la reacción fue
positiva y/o negativa de acuerdo con la información del cuadro que se
presenta a continuación:
 REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN
REACCIONES REACCIONES
SUSTANCIA REACTIVOS
POSITIVAS NEGATIVAS
Coloración o
Solución del color del
Glucosa Fehling precipitado café-
reactivo.
rojizo
Solución color azul Solución del color del
Almidón Lugol
oscuro reactivo.
Precipitado amarillo Solución del color de
Albúmina Xantoprotéica
huevo la albúmina
Solución del color del
Albúmina Biuret Solución violácea
reactivo.
Cloruro de Solución transparente
Nitrato de plata Precipitado blanco
sodio incolora.

RESULTADOS

ANTES (POSITIVA Y/O DESPUÉS (POSITIVA

PRUEBA
NEGATIVA) Y/O NEGATIVA)
Fehling Negativa Positiva
Lugol Negativa Positiva
Biuret Negativa Negativa
Nitrato de plata Negativa Positiva
Xantorpotéica Negativa Negativa

Antes Lugol Biuret Xanto AgNo3 Fehling

Fig. 1. Resultados de las pruebas

 PREGUNTAS PARA DISCUTIR RESULTADOS
1) De las sustancias utilizadas incluyendo el agua, decir cuáles son de alto
peso molecular y de bajo peso molecular.

Alto peso molecular Albúmina

Bajo peso molecular Glucosa, NaCl, H2O, Almidón

2) Indicar qué sustancias se encontraban en ambos lados de la membrana de

gel en el siguiente esquema:

Interior Exterior
Glucosa, Almidón, H2O, NaCl H2O, Albúmina

3) ¿Qué sustancias atravesaron la membrana de gel de afuera hacia

adentro, así como de dentro hacia fuera? La glucosa, el almidón, el agua y
el cloruro de sodio atravesaron la membrana de afuera hacia adentro.

4) ¿Por qué dichas sustancias atravesaron la membrana? Porque eran

sustancias de bajo peso molecular que no requieren gasto de energía para
atravesar la membrana.

5) ¿Qué tipo de transporte se efectuó a través de la membrana durante el

experimento? Transporte pasivo.

CUESTIONARIO

1. ¿Por qué se dice que la membrana tiene permeabilidad selectiva? Porque

sólo permite el paso de ciertas sustancias, dando el paso a moléculas que
necesita y evitando sustancias que pueden perjudicar a la célula.

2. ¿Por qué se dice que la bicapa de la membrana constituye una barrera

natural? Porque está compuesta por biomoléculas que protegen a la célula.

3. ¿Cuáles con los factores que afectan la velocidad de difusión a través de la

membrana celular? El gradiente de concentración y el tamaño, carga e
hidrofobicidad de las moléculas.

4. ¿Cómo está constituida la membrana celular de tal manera que permite la

permeabilidad? Está constituida de fosfolípidos, glucolípidos y proteínas,
que regulan y seleccionas qué otras moléculas pueden atravesar o no la
membrana.
 DISCUSIÓN

La práctica se ejecutó en el laboratorio y se trabajó en equipos de 6. Los

alumnos siguieron las instrucciones guiados por la profesora y se realizó una
película de grenetina que en este caso cumplía la función de simular la membrana
de una célula. El proceso fue sencillo y no hubo problemas al ejecutarlo, sin
embargo, por motivos fuera del alcance, no fue posible revisar la solución al tiempo
correcto, por lo que la profesora proporcionó una solución ya preparada y entonces
se pudo terminar la práctica con las pruebas de identificación de solutos. Se tomaron
notas y se compararon resultados para resolver las preguntas que surgieron.

CONCLUSIÓN
Se puede decir que la membrana plasmática tiene permeabilidad selectiva
porque sólo deja pasar a las sustancias que necesita, y descarta a los desechos
celulares. En esta práctica se observó que el cloruro de sodio y el agua atravesaron
la membrana mediante diálisis, ya que por medio de la presión hidrostática se
concentraron de una zona de mayor concentración a otra de menor (o en este caso
nula) de concentración. Al momento de hacer las pruebas de Fehling y Lugol se
presenció que la glucosa y el almidón también atravesaron la membrana usando el
transporte facilitado por ser moléculas polares.

Se utilizó el reactivo de Biuret y la reacción Xantoprotéica para comprobar si

la proteína (albumina) había logrado atravesar la membrana, los cuales dieron como
resultados negativos; esto se podría deber a que la albumina, siendo una proteína
con alto peso molecular, resulta una molécula muy grande a la hora de pasar la
membrana celular. Curiosamente, la albumina está compuesta por aminoácidos que
si tienen la capacidad de pasar por medio de la difusión facilitada, pero
probablemente las condiciones no fueron las adecuadas.

BIBLIOGRAFÍA:
 Johnson, G. 2006. “Biología Celular”. México D.F. Segunda edición.
Editorial Panamericana. Págs. 73-77
 Nason, A. 1990. El mundo biológico. México D.F. Primera edición. Editorial
Limusa. Págs. 53-55
 Villee, C. 2003. Biología. México D.F. Octava edición. Editorial Mc Graw
Hill. Págs. 37-39
 Young, A. 2001. Biología II. México D.F. Primera edición. Editorial Nueva
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 Khan, Salman. 2019. Estructura de la Membrana Plasmática. Cambridge,
Massachusetts. Khan Academy. Recuperado de http://khanacademy.org