ESTERILIZACION DE MATERIALES DE VIDRIO

INTRODUCCION
La esterilización de materiales de vidrio consiste en la destrucción de toda
forma de vida microbiana, incluidas las esporas (las esporas son los
microorganismos más resistentes al calor así como a los agentes químicos y
radiaciones). El estado estéril de un material no puede ser demostrado de
forma eficaz, bien porque los medios que disponemos no son suficientes para
demostrar la presencia de organismos vivos en un objeto, encontrándonos con
falsos negativos, o bien el mismo proceso de verificación produciría una
contaminación involuntaria, en donde el material parece no estéril cuando en
realidad lo está, encontrándonos con un falso positivo.
La esterilidad de un objeto hace referencia a la probabilidad de que un objeto
no este contaminado.
OBJETIVO GENERAL
 Esterilizar todo el material de laboratorio (Frascos y Tubos de ensayo)
para ser utilizados en prácticas futuras.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Aprender el procedimiento de esterilización para materiales de vidrio.

 Conocer y aplicar el procedimiento de esterilización por calor seco y

húmedo en los materiales de vidrio.

MARCO TEORICO
La esterilización es la muerte y/o eliminación de todo microorganismo. No
existen grados de esterilidad, un objeto es estéril o no lo es. La dinámica de la
esterilización dice que la proporción de microorganismos muertos en iguales
periodos de tiempo es constante.
A mayor temperatura, mayor acción y menos tiempo necesario para esterilizar
esto es válido para cualquier procedimiento químico o físico excepto filtración.
Los métodos de esterilización se clasifican en:
Esterilización por calor húmedo: La desnaturalización y coagulación se facilita en
presencia de agua pues se rompen los puentes de hidrógeno entre los grupos
que constituye la estructura secundaria y se agrega (también mediante puente
de hidrógeno) una molécula de agua a cada extremo de esas uniones rotas. Las
proteínas en soluciones más diluidas coagulan a menor temperatura que las
concentradas. Esterilizar exclusivamente en calor húmedo: medios de cultivos,
recipientes contaminados, material de goma, y todo elemento que no resista
las altas temperaturas del calor seco. El autoclave utiliza vapor a presión
superior a la normal. Así, la temperatura del vapor de agua asciende a 121ºC.
El vapor saturado penetra en los recipientes tomando contacto con los
microorganismos a destruir, allí se condensa liberando calor. El calentamiento
es rápido por la gran cantidad de calor latente del vapor de agua, que libera al
condensarse sobre la superficie del objeto.
Esterilización por calor seco: Deshidrata las bacterias, virus, etc. y facilita la
coagulación o desnaturalización de las proteínas. Se requieren mayores
temperaturas para producir daño irreversible (muerte). Se acepta que el calor
seco actúe oxidando los constituyentes intracelulares. En el proceso de
esterilización son prioritarios los procesos oxidativos y de fusión de membranas
por sobre la desnaturalización. Resulta lento por la menor eficacia del calor seco
y por la lentitud del transporte del calor (convección y radiación).
No existe un procedimiento de esterilización y desinfección aplicable a todos
los casos. El método de esterilización será seleccionado para cada caso
teniendo en cuenta la naturaleza física del objeto y la naturaleza biológica del
contaminante. Como rara vez se conoce la población de microorganismos sobre
un objeto que debe ser tratado, debemos presuponer que se encuentran
presentes las formas microbianas más resistentes: las endosporas. El método
de esterilización a emplearse debe ser previamente valorado.
Actualmente existen valores tabulados de tiempo de exposición, temperatura
y concentración de principios activos para los métodos de esterilización más
usados que nos permiten elegir el más adecuado para cada caso. En la elección
debe tenerse en cuenta también el uso posterior que le será dado (o no) al
objeto a esterilizar. Para asegurar el éxito de un proceso esterilizante es
necesario considerar las siguientes pautas:
1. Esterilización previa: Será necesaria cuando el material y/ o equipos hayan
sido utilizados con material infeccioso o presunto infeccioso, por ejemplo
placas de Petri inoculadas, tubos conteniendo cultivos de microorganismos,
frascos empleados en el cepario, etc. Serán esterilizados en autoclave a 1 atm.
De presión durante 15 – 30 minutos.
Para las pipetas, micro pipetas y tubos de hemólisis puede emplearse este
método o sumergirlas inmediatamente después de ser utilizadas en solución
desinfectante de formol al 10 % durante una hora.
2. Limpieza previa: Se realizará para eliminar las partes gruesas de suciedad o
residuos no infecciosos (gratitud, resto de pegamento, cinta adhesiva, carbono,
tinta de rotulado, etc.). Se empleará el raspado con espátulas, cepillo, esponjas
metálicas, paños, etc.
Se enjuagará repetidas veces bajo el chorro de agua corriente a presión
(conectando a la canilla un tapón perforado o tapando parcialmente con un
dedo). Se aconseja un último enjuague con agua destilada. Se dejará secar en
canasto o rejilla de alambre boca abajo a temperatura ambiente o estufa a 60
– 80 °C. El material de vidrio que luego de este tratamiento aún quedase
manchado será sumergido en una solución sulfocrómica durante 24 hs (Este
procedimiento lo realiza personal especializado del Droguero).
3. Preparación del material de vidrio: este acondicionamiento debe realizarse de
manera tal de asegurar la perfecta esterilización del mismo en todos sus puntos
y evitar la posterior contaminación.
a. Placas de Petri: se envuelven en papel madera según la técnica indicada por
el instructor (se esterilizan en estufa a 160- 180ºC durante dos o una hora
respectivamente).
b. Tubos de ensayos, tubos de hemólisis y tubos de Khan: se confecciona en
tapón de algodón y se cubre con un capuchón de papel aluminio. (Se esterilizan
en estufa).
c. Pipetas: se obtura el extremo superior con un filtro de algodón y luego se
envuelven con tiras de 4 a 5 cm. de ancho de papel madera comenzando por la
punta de la misma. Debe rotularse cada una con la capacidad y graduación
correspondiente (se esterilizan en estufa).
La radiación, o emisión y propagación de la energía a través de un medio, puede
ser utilizada como agente para la eliminación de microorganismos. Así tenemos
que las radiaciones ionizantes se pueden utilizar para la esterilización de
materiales termolábiles, como por ejemplo materiales plásticos, y las
radiaciones no ionizantes, como la luz ultravioleta, puede ser empleada en el
control de áreas cerradas.
Agentes mecánicos
La filtración permite la remoción de todos los microorganismos presentes en
un líquido o un gas reteniéndolos sobre la superficie de un material.
Agentes químicos
Algunas sustancias químicas pueden ser usadas como agentes esterilizantes
porque tienen la capacidad de promover una o más reacciones químicas
capaces de dañar los componentes celulares de los microorganismos
(proteínas, membranas, etc.)
ALMACENAMIENTO DEL MATERIAL ESTÉRIL.
Una vez que un material está estéril puede mantener esta condición si está
protegido en la forma apropiada. Es decir, la duración de la esterilidad de un
material no está relacionada directamente con el tiempo, sino con factores que
comprometen su exposición al medio ambiente. Los materiales estériles
pierden su esterilidad cuando:
 Se produce cualquier ruptura, accidental o no, del material que lo
recubre durante su transporte o almacenamiento.
 Se humedece el material de empaque, es importante no manipular los
materiales estériles con las manos húmedas, ni colocarlos sobre
superficies mojadas.
Al almacenar los materiales estériles se deben tomar una serie de precauciones,
tales como:
  Controlar el acceso a las áreas de almacenamiento de materiales
estériles.
 Mantener el área de almacenamiento limpia, libre de polvo, sucio e
insectos.
 Controlar la temperatura y la humedad de las áreas de almacenamiento.
La temperatura ideal debe estar por debajo de los 26ºC y la humedad relativa
entre 30 y 60%.

MARCO PRÁCTICO
Antes de entrar al laboratorio es necesario ponerse la bata, el barbijo y guantes
de látex.
Una vez de realizar esto se procede a la esterilización de los materiales de vidrio
para ello pusimos todos los materiales dentro de la olla a presión, estos ya
estaban empaquetados con papel estañado y ligas.
Se los debe calentar dentro de la olla a 121 ° durante 15 minutos.
Una vez pasado los 15 minutos destapamos la olla y esperamos a que se enfríen
luego los sacamos al mesón y con mucho cuidado los destapamos y echamos
todo lo que esto contenga hasta que no quede ningún residuo.
En un bañador con detergente colocamos todos los materiales y los lavamos
con sumo cuidado con la ayuda de una esponja, no debe quedar ningún residuo
ni por fuera ni por dentro.
Una vez lavados todos los materiales los enjuagamos dos veces en agua, para
estar seguros del correcto lavado los pasamos por agua destilada.
Finalmente, los ponemos a esterilizar en el horno a 105° durante dos horas.

EQUIPOS Y MATERIALES
 Olla a presión.
 Detergente.
 Esponja.
  Agua destilada.
 Bañadores.
 Horno para la esterilización.

CONCLUSIONES
Logramos aprender cómo deben ser esterilizados los materiales de vidrio para
poder ser usados antes de cultivos de microorganismos ya que de lo contrario
podrían crecer otros organismos que no son requeridos.
Por último, se aprendió a lavar correctamente el material y el tiempo que es
necesario para que se logre la esterilización.
RECOMENDACIONES
 Manipular con mucho cuidado todos los materiales, ya que estos son de
vidrio y pueden quebrarse fácilmente.

 No dejar ningún residuo al momento del lavado.

 Tener cuidado al momento de utilizar la olla a presión ya que se pueden

producir quemaduras.

CUESTIONARIO
1. ¿Qué tipo de esterilización es más recomendable y por qué?
La esterilización más recomendable es por calor húmedo porque hay rápido
calentamiento y penetración, destruye las bacterias y esporas en poco tiempo,
no deja residuos tóxicos, es económico y hay un bajo deterioro del material.
2. ¿Por qué antes de una esterilización es necesario lavar y desinfectar el
material?
Es necesario lavar y desinfectar los materiales para destruir y eliminar carga
microbiana o gérmenes que puedan estar presentes en los materiales a
esterilizar. Tiene por objeto la destrucción de microorganismos mediante
agentes de naturaleza química (desinfectantes), con el fin de disminuir el
número de formas vegetativas a niveles mínimos.
3. ¿Cuál material se puede esterilizar por calor seco y cual no? ¿Por qué?
Deben ser materiales básicamente resistentes al calor, para el calor seco la
temperatura es mayor hasta 180 grados y el tiempo puede ser mayor una o dos
horas dependiendo del material. Estos materiales pueden ser pipetas, cajas de
Petri, tubos de ensayo, Erlenmeyer, entre otros; los cuales son de vidrio
refractario.
4. ¿A que condiciones de temperatura y presión se destruyen las esporas?
 La condición para matar o destruir una espora es la temperatura de 121·C
durante 15 minutos y la otra condición es a una presión de 15 libras.

5. ¿Cuánto tiempo deben permanecer los frascos dentro del horno de

esterilización?
 Los frascos deben permanecer dentro durante 2 horas
aproximadamente.

BIBLIOGRAFIA
http://www.codeinep.org/preparaciondematerialesenvoltoriosymetodos1.htm

https://esterilizacionmf.wikispaces.com/Métodos+de+Esterilización
https://instrumentacionupc.wordpress.com/2011/10/22/metodos-de-esterilizacion/
www.pisa.com.mx/publicidad/portal/enfermeria/manual/4_6_5.htm
https://microcosmorflores.wikispaces.com/file/.../Metodos-de-esterilizacion.-Lab2.pdf

www.academia.edu/.../Informe-4-esterilizacion-y-empaquetaduria-de-materiales
www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp3.pdf