FINALIDAD PRECAUCIÓN

Evaluar la morfología en muestra seminal tiene relevancia pues varios estudios han demostrado que el El laboratorio debe adoptar protocolos de seguridad para evitar riesgos asociados al manejo muestras
análisis de la morfología espermática puede resultar útil para predecir la tasa de fertilización en programas biológicas ya que estas pueden contener virus patógenos, como VIH; virus de la hepatitis, herpes,
de fertilización in vitro (FIV), ya que el porcentaje de formas normales está altamente relacionado con la manejarlos con precaución y desecharlos en recipientes exclusivos para materiales biológicos.
capacidad fecundante in vivo (Marnet et al., 2000) y con la capacidad de desarrollo de los embriones. De
hecho, Ron-El et al. (1991) y Parinaudet al. (1993) han demostrado que un porcentaje elevado de formas EXTENSIÓN DE MUESTRA
espermáticas anormales, conocido como teratozoospermia, se asocia con fallos en la fertilización. 1. Realizar por muestra mínimo dos extensiones, colocar 5-10 μL de muestra, utilice la técnica
similar a un frotis sanguíneo cuidando que no queden muy gruesas para una mejor visualización
FUNDAMENTO al microscopio.
El método empleado para estudiar la morfología de los espermatozoides consiste en fijar la muestra de 2. Dejar secar la muestra completamente antes de teñir.
semen en un portaobjeto, se realiza una tinción biológica y se evalúa al microscopio con aumento de 100 x, 3. Fijar los frotis durante 1 minuto con la solución fijadora incluida.
la tinción de las distintas estructuras permite una mejor observación al microscopio al incrementar la
definición de las membranas. Los espermatozoides constan morfológicamente de tres partes claramente PROCEDIMIENTO
diferenciadas la cabeza, la pieza intermedia o cuello y la cola. 1. Coloque las extensiones en la solución fijadora durante un minuto, dejar escurrir.
2. Teñir con el colorante I, sumerja el extendido en el frasco, realice 10 inmersiones de un segundo cada
PRESENTACIONES una en la solución, ó introduzca la extensión en el frasco durante 30 – 60 segundos.
3. Absorba el excedente de colorante.
4. En el colorante II realice 10 inmersiones del extendido ó introduzca 30 – 60 segundos en el colorante.
Componentes Catálogo Presentación
5. Enjuague con agua destilada, no permita que el chorro de agua caiga con presión sobre la muestra,
Fijador 6554 inicie el enjuague de la parte superior del portaobjeto y deje que el agua se deslice por toda la pared
Colorante I 6452 100 mL del extendido, (como precaución de no barrer la muestra si esta no quedó bien fijada).
6. dejar secar. Observe al microscopio con objetivo de 100 X.
Colorante II 6453 7. Contar 200 espermatozoides consecutivos. Calcular el porcentaje de morfología normal.

Debe haber una región acrosomal definida que ocupa del 40-70 % del área total de la cabeza, la pieza media
MATERIALES REQUERIDOS NO INCLUIDOS debe ser delgada con un ancho menor a 1 μm, unida a la cabeza de forma axial, las gotas citoplasmáticas
1. Portaobjetos Cat. 75511 deben ser menores de la mitad de una cabeza normal, la cola debe ser derecha y uniforme, debe estar
2. Aceite de inmersión Cat. 64287 desenrollada y medir aproximadamente 45-50 μm de largo1
3. Pipetas pasteur delgadas Considere las siguientes categorías anormales, debe reportar como observación los defectos más frecuentes.
4. Microscopio óptico

ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO
1. Las soluciones están listas para usarse.
2. Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad impresa en la etiqueta a temperatura de 15-30 ºC,
en el frasco original, cerrado y protegido de la luz.
3. No usar los reactivos si existe deterioro ó contaminación.

MANEJO DE LA MUESTRA
 Se recomiendan muestras entre dos y siete días de abstinencia sexual, debe obtenerse por
masturbaci6n y eyacularse dentro de un recipiente de vidrio o plástico de boca ancha estéril
 Evaluar antes de transcurrida una hora desde la recolección, porque la motilidad disminuye a medida
que transcurre el tiempo, proteger la muestra de las temperaturas extremas no menos de 20 ºC ni más
de 40 ºC durante el traslado al laboratorio.
 No se aceptan muestras por coito interruptus porque se pierde la primera porci6n del eyaculado que
suele contener la mayor concentraci6n de espermatozoides, puede contaminarse la muestra y el pH
del liquido vaginal puede afectar la movilidad. sólo bajo circunstancias que impiden muestras por
masturbación usar condones especiales que no contienen espermaticidas.

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VALORES DE REFERENCIA

Limites de referencia inferiores (LIR)

para morfología normal 4%
OMS-2010 5ª Edición

BIBLIOGRAFIA

 OMS Manual para el semen humano y de la interacción entre el semen y el moco cervical. 4ª
Edición. Editorial Panamericana.
 WHO Laboratory manual for the examination y proccessing of human semen, Fifth Edition
2010
 M. José López García, Aurora Urbano Felices. Martha Cardenas Povedano. Manual de
Laboratorio para Análisis de semen, Omnia Science

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