DESVIACIONES DE LA LEY DE BEER

LIMITACIONES DE LA LEY DE BEER

Se han encontrado pocas excepciones a la generalizaci�n de que la absorbancia est�
relacionada linealmente con el camino �ptico. Por otra parte, con frecuencia se han
encontrado desviaciones de la proporcionalidad entre la medida de la absorbancia y
la concentraci�n cuando b (ancho de celda) es constante. En algunas ocasiones
estas desviaciones est�n relacionadas con el fundamente de la ley y representan
limitaciones propias de la misma. Otras veces surgen como consecuencia de la forma
en que se realizan las medidas. Otras veces surgen como consecuencia de la forma en
que se realizan las medidas de absorbancia o como resultado de cambios qu�micos
asociados con cambios de concentraci�n, las dos �ltimas son conocidas a veces como
Desviaciones instrumentales y desviaciones qu�micas, respectivamente.
DESVIACIONES REALES
La ley de Beer describe de forma correcta el comportamiento de absorci�n de un
medio que contiene concentraciones de analito relativamente bajas; en este sentido,
es una ley l�mite. A concentraciones altas (generalmente > 0,01 M), la distancia
media entre las mol�culas responsables de la absorci�n disminuye hasta el punto en
que cada mol�cula altera la distribuci�n de carga de las mol�culas vecinas. Esta
interacci�n a su vez, puede alterar la capacidad de las mol�culas para absorber la
radiaci�n de una determinada longitud de onda. Como la magnitud de la interacci�n
depende de la concentraci�n, la aparici�n de este fen�meno da lugar a desviaciones
de la linealidad entre absorbancia y la concentraci�n.
Un efecto similar se encuentra, a veces, en medios que contienen concentraciones
altas de otras especies, especialmente electrolitos. La estrecha proximidad de los
iones al absorbente altera la absortividad molar de �ste por interacciones
electrost�ticas; el efecto se reduce mediante diluci�n.
Aunque, normalmente, el efecto de las interacciones moleculares no es significativo
para concentraciones inferiores a 0,01 M, entre ciertos iones o mol�culas org�nicas
grandes aparecen algunas excepciones. Por ejemplo, se ha comprobado que la
absortividad molar del cati�n del azul de metileno en disoluciones acuosas a 436nm
aumenta un 88 por 100 cuando la concentraci�n del colorante de 10-5 a 10-2; incluso
por debajo de 10-6 M no se observa un cumplimiento estricto de la ley de Beer.
Tambi�n surgen desviaciones de la ley de Beer como consecuencia de la dependencia
de ? con el �ndice de refracci�n del medio. Por ello, si los cambios de la
concentraci�n causan alteraciones significativas en el �ndice de refracci�n ? de
una disoluci�n, se observan desviaciones de la ley de Beer. Para este efecto puede
hacerse una correcci�n mediante la sustituci�n de ? por la cantidad:
??(? ?)/((?^2+2)�)
Por tanto se tiene:
A= (?* ?)/((?^2+2)�)*b*C
D�nde:
A: Absorbancia ( )
?: Absortividad molar (M-1 cm-1)
b: ancho de celda (cm)
C: concentraci�n molar de la muestra (M)
?: �ndice de refracci�n ( )
En general, esta correcci�n nunca es muy grande y rara vez es significativa para
concentraciones menores de 0,01 M.
DESVIACIONES INSTRUMENTALES
La inestabilidad de algunas fuentes de radiaci�n o la respuesta no lineal del
detector pueden originar el funcionamiento incorrecto de un determinado aparato.
Pueden considerarse los siguientes factores de tipo instrumental como causas de
desviaciones de la ley de Beer:
Uso de radiaci�n no monocrom�tica. La deducci�n de la ley de Beer se hizo
sobre la base de utilizar radiaci�n monocrom�tica, lo cual, en sentido estricto,
nunca se cumple, pues en la pr�ctica, todos los dispositivos seleccionan una banda
m�s o menos ancha en torno a una determinada longitud de onda. La influencia de la
radiaci�n policrom�tica sobre la ley de Beer puede mostrarse del siguiente modo:
Sup�ngase un haz formado por las longitudes de onda ?1 y ?2, banda M en la figura
a.

Aplicando la ley de Beer a cada una de ellas, se tiene:

A_1=log P_01/P_1 =E_1 bC ; P_1=P_01 ?10?^(E_1 bC)
A_2=log P_02/P_2 =E_2 bC ; P_2=P_02 ?10?^(E_2 bC)
Cuando este haz constituido por las dos radiaciones atraviesa una disoluci�n
conteniendo especies absorbentes, la potencia del haz emergente es P_1 ?+P?_2,
mientras que la del haz incidente sobre la muestra es? P?_01+P_02. Seg�n esto, la
absorbancia medida ser�:
A_M=log((P_01+P_02)/(P_1 ?+P?_2 ))=log((P_01+P_02)/(P_01 10^(-E_1 bC)+P_02 10^(-E_2
bC) ))

A_M=log(P_01+P_02 )-log(P_01 10^(-E_1 bC)+P_02 10^(-E_2 bC) )

En el caso particular de que e1 = e2 la ecuaci�n anterior se simplifica,

reduci�ndose a:
A_M=E_1 bC
que es la ley de Beer. Sin embargo, cuando e1 es distinto de e2, la relaci�n entre
AM y la concentraci�n deja de ser lineal. Evidentemente, cuanto mayor sea la
diferencia entre e1 y e2, mayores ser�n las desviaciones de la linealidad. Por eso
mismo, aun cuando la anchura de banda sea relativamente grande, si las diferencias
en los valores de la absortividad son peque�os, la utilizaci�n de un haz
policrom�tico no implica diferencias significativas respecto a uno monocrom�tico,
banda N Figura a.
Presencia de radiaci�n par�sita. El haz de radiaci�n que sale de un
monocromador suele estar contaminado con peque�as cantidades de radiaci�n par�sita
o dispersada originada por reflexi�n de los distintos componentes �pticos,
dispersi�n por part�culas de polvo atmosf�rico, etc. Por otra parte, la propia
muestra puede originar dispersiones. Con frecuencia, la radiaci�n dispersada tiene
una longitud de onda diferente respecto a la radiaci�n principal, pudiendo adem�s,
en ocasiones, llegar al detector sin haber atravesado la muestra. Por todo ello, la
absorbancia medida en presencia de radiaci�n par�sita es:
A_M=log((P_0+P_s)/(P?+P?_s ))
Donde P_s es la potencia del haz dispersado. Al aumentar la concentraci�n de
sustancias absorbentes, disminuye P, con lo que este t�rmino puede ser lo
suficientemente peque�o respecto a P_s como para que la expresi�n anterior se
transforme en:
A_M=log((P_0+P_s)/(P?+P?_s ))-log((P_0+P_s)/P_s )
lo cual indica la presencia de desviaciones negativas en la ley de Beer debido a
este factor.
Errores de lectura. Los errores indeterminados en la lectura de la
transmitancia o absorbancia son errores que potencialmente siempre est�n presentes
y es necesario tenerlos en cuenta. En ocasiones, peque�os errores en la lectura de
la transmitancia o de la absorbancia pueden ocasionar errores grandes en la
concentraci�n cuando se opera en los extremos de la escala. Esto se ilustra en la
figura siguiente:

En 1, el error absoluto cometido en la determinaci�n de la concentraci�n, para un

cierto error de lectura de transmitancia, es peque�o, pero al ser peque�a la
concentraci�n, el error relativo puede ser grande. En 3, la incertidumbre en la
determinaci�n de la concentraci�n es alta, y en 2, hacia la mitad de la escala,
parece que se trata de la situaci�n m�s favorable. Puede demostrarse, como se
indica a continuaci�n, que el m�nimo error relativo se obtiene para una absorbancia
de 0.434. La primera derivada de la ley de Beer es:
A= EbC=-logT ; EbdC= -loge dT/T
donde dT representa el error indeterminado en la lectura de la escala de
transmitancia y dC indica la incertidumbre en la concentraci�n. Como log e = 0.434
y e b = � log T/C, se obtiene:
dC/C=(0.434)/(T(logT)) dT
Derivando esta ecuaci�n de nuevo e igualando a cero, se obtiene que la
transmitancia �ptima corresponde a 36.8 %, que equivale a una absorbancia de 0.434.
DESVIACIONES QU�MICAS
Como factor de orden qu�mico se puede citar la variaci�n de algunas estructuras en
funci�n de la concentraci�n; como por ejemplo al diluir una soluci�n de dicromato
se verifica el siguiente equilibrio:

Los iones dicromato presentan absorci�n m�xima a 450 nm, en tanto que los iones
cromato lo hacen a 375 nm, por lo que al efectuar las diluciones de soluciones de
dicromato se debe mantener el nivel de acidez a fin de no variar la estructura
qu�mica.

Desviaci�n negativa de la Ley de Lambert-Beer

An�logamente cuando la especie que absorbe radiaciones es un complejo se debe
mantener una concentraci�n grande de ligante (por ejemplo unas 100 veces mayor).

Se incluyen en este apartado toda una serie de desviaciones aparentes de la ley de

Beer producidas como consecuencia de procesos qu�micos en los que participan las
especies absorbentes.
a) Influencia del equilibrio. Cuando la sustancia problema interviene o forma parte
de un sistema en equilibrio con otras especies, el desplazamiento del equilibrio
implica una modificaci�n en la concentraci�n, y, en consecuencia, en la
absorbancia.
Algunas situaciones que pueden producirse son las siguientes:
Dimerizaciones. Cuando una disoluci�n de dicromato pot�sico no tamponada se diluye,
ocurre una transformaci�n parcial en cromato, como consecuencia del equilibrio
d�mero-mon�mero:
Cr2O72� + H2O <��> 2 CrO42� + 2 H+
(?max = 350, 450 nm) (?max = 372 nm)
Es evidente que cuando las especies absorbentes est�n implicadas en un equilibrio
�cido-base, la ley de Beer no se cumple, al menos que el pH o la fuerza i�nica sean
constantes, o se opere a la longitud de onda del punto isob�stico, esto es, la
longitud de onda a la cual las dos especies absorbentes en equilibrio presenten la
misma absortividad. En este sentido hay que mencionar que los puntos isosb�sticos
se toman frecuentemente como criterio para la existencia de dos especies
absorbentes interconvertibles de un compuesto determinado.
Complejos. Cuando se mide la absorbancia de un complejo, por ejemplo Fe(SCN) 6-3,
para que se cumpla la ley de Beer hay que mantener constante la concentraci�n de
ligando libre, lo cual se consigue frecuentemente operando en gran exceso de
ligando respecto al metal.
b) Influencia del disolvente. Como consecuencia de las interacciones
soluto�disolvente se originan con frecuencia desplazamientos espectrales,
ensanchamientos de bandas y otros fen�menos que pueden provocar desviaciones en la
ley de Beer. En este sentido, no es posible hacer predicciones de forma general.
�nicamente mencionar algunos t�rminos relacionados con los desplazamientos
espectrales:
Desplazamiento batocr�mico o desplazamiento hacia el rojo, consiste en un
desplazamiento del m�ximo de absorci�n hacia longitudes de onda mayores (este
efecto suele producirse en disolventes de alta constante diel�ctrica).
 Desplazamiento hipsocr�mico o desplazamiento hacia el azul, es el desplazamiento
hacia longitudes de onda m�s cortas.
c) Influencia de la temperatura. La temperatura puede influir modificando el
equilibrio qu�mico de algunos sistemas, as� como, en ocasiones, dar lugar a
desplazamientos batocr�micos. De todas formas, la temperatura no suele ser un
factor a considerar en la mayor parte de los sistemas absorbentes sencillos.
d) Presencia de impurezas en los reactivos. Muchos m�todos espectrofotom�tricos son
lo suficientemente sensibles como para detectar cantidades a nivel de trazas, por
lo que la presencia de impurezas absorbentes en los mismos reactivos pueden
originar errores considerables. Debido a ello, en la pr�ctica anal�tica ordinaria,
las medidas espectrofotom�tricas se llevan a cabo frente a un blanco constituido
por la propia c�lula, el disolvente y los reactivos. En este sentido interesa que
la absorbancia del blanco sea peque�a, pues si es grande, un peque�o error en su
medida puede implicar un gran error relativo en el resultado final.
e) Interacciones entre especies absorbentes. Cuando en una disoluci�n existen
varias especies absorbentes, la ley de Beer se cumple para cada una de ellas, si
todas act�an independientemente. Sin embargo, la interacci�n entre ellas puede
producir alteraciones en la distribuci�n de cargas, como consecuencia de lo cual
puede modificarse la energ�a requerida para la absorci�n y, en consecuencia,
variaciones en la posici�n, forma y altura de las bandas de absorci�n. Por otra
parte, estas alteraciones en la distribuci�n de cargas tambi�n pueden ser
originadas por la presencia de sales inertes, con el consiguiente aumento de la
fuerza i�nica de la disoluci�n.
f) Interacciones soluto�radiaci�n electromagn�tica. Aunque en sentido estricto no
son factores de tipo qu�mico, tambi�n deben considerarse otros tipos de interacci�n
entre la radiaci�n y la materia, distintos de los que intervienen en el proceso de
absorci�n. As�, la posible emisi�n de resonancia y la presencia de fen�menos
fluorescentes y fosforescentes pueden originar desviaciones aparentes en la ley de
Beer.

COMPONENTES B�SICOS DE UN ESPECTROFOTOMETRO

INSTRUMENTACI�N PARA ESPECTROSCOPIA
Los instrumentos utilizados para el estudio de la absorci�n o emisi�n de la
radiaci�n electromagn�tica como funci�n de la longitud de onda, son llamados
Espectr�metros o m�s frecuentemente Espectrofot�metros. Los principios �pticos y
electr�nicos empleados en los instrumentos son los mismos para espectroscop�a UV,
Visible o IR, sin embargo hay ligeras diferencias en componentes espec�ficos del
instrumento para cada regi�n del espectro electromagn�tico.
Los componentes esenciales de un espectrofot�metro son:
Una fuente estable de energ�a radiante
Un sistema de lentes, espejos y aberturas (Slits), que definan, colimen
(hagan paralelo) y enfoquen el haz de radiaci�n y un monocromador que separe la
radiaci�n de bandas estrechas de longitud de onda.

Un componente transparente a la radiaci�n que contenga la muestra

Un detector de radiaci�n o transductor que recibe la se�al de radiaci�n
electromagn�tica y la convierte en una se�al el�ctrica de magnitud proporcional a
la intensidad de la radiaci�n recibida.

Un sistema amplificador que produzca o genere una se�al el�ctrica mucho mayor
a la se�al recibida
Un sistema de lectura tal como: Una escala de aguja, un registrador, un
sistema de d�gitos o una computadora, que transforme la se�al el�ctrica en una
se�al que el operador pueda interpretar.
El diagrama de estos componentes es el siguiente:
Figura 1: Diagrama de bloques para los componentes de un espectrofot�metro
FUENTES DE RADIACI�N
Estas consisten de materiales que son excitados a niveles de mayor energ�a, por
medio de descargas el�ctricas de alto voltaje o por calentamiento. Cuando los
electrones del material regresan del estado excitado al estado basal, emiten
energ�as caracter�sticas correspondientes a DE, la diferencia en energ�a entre el
estado basal y el estado excitado.
Una fuente de radiaci�n ideal, ser�a aquella que emitiese un espectro de igual
intensidad sobre la regi�n de inter�s, sin embargo la intensidad de �sta var�a con
la longitud de onda.
S� el voltaje que suministra energ�a el�ctrica a la fuente var�a, la intensidad en
la relaci�n emitida por �sta fuente tambi�n se altera, y esto afecta las lecturas
las cuales son efectuadas a intervalos.
En instrumentos de doble haz la radiaci�n que emerge de la fuente es dividida en
dos:
El haz de referencia y el haz de muestra. El transductor, el cual recibe las dos
se�ales compensa por los efectos de variaci�n de voltaje o de intensidad en la
fuente misma cancelando de �sta manera los efectos inherentes a la misma.
Las fuentes de radiaci�n utilizadas en espectroscop�a son continuas o de l�neas.
Las primeras tienen amplio campo de aplicaci�n en m�todos espectrosc�picos basados
en absorci�n molecular. Las fuentes de l�nea son empleadas en espectroscopia de
absorci�n at�mica.
FUENTES DE RADIACI�N ULTRAVIOLETA: Las l�mparas de hidr�geno y deuterio son las
fuentes m�s comunes de radiaci�n UV. Estas consisten de un par de electrodos en un
tubo de vidrio con ventanas de cuarzo, y que adem�s contiene hidr�geno o deuterio
gaseoso. Cuando se aplica un alto voltaje a los electrodos, ocurre una descarga de
electrones, lo cual excita las mol�culas de gas y �stas pasan a niveles energ�ticos
superiores. Cuando los electrones de los �tomos del gas regresan a su estado basal
emiten radiaci�n, la cual es continua en el rango de 180 a 350 nm.
Para UV es posible tambi�n utilizar la l�mpara de xen�n, la cual emite una
radiaci�n m�s intensa, sin embargo �sta no es tan estable como la l�mpara de
hidr�geno y de deuterio, adem�s de que emite radiaci�n visible lo cual interfiere
en las aplicaciones en espectroscopia UV.
FUENTES DE RADIACI�N VISIBLE: La l�mpara de tungsteno es la fuente m�s barata y m�s
satisfactoria en espectroscopia visible e infrarroja. El filamento de tungsteno es
calentado por medio de una fuente de corriente directa o por una bateria. Los
filamentos de tungsteno, los cuales alcanzan una temperatura de aproximadamente
2900�C, emiten radiaci�n continua de 350 a 2500 nm. El arco de grafito emite una
radiaci�n m�s intensa, sin embargo es muy raro que �sta fuente sea utilizada en
�ste tipo de espectroscop�a.
FUENTES DE RADIACI�N INFRARROJA: El Globar y la l�mpara de Nernst son las fuentes
primarias de radiaci�n infrarroja. El Globar es una barra de carburo de silicio que
se calienta aproximandamente a 1200�C. Este emite radiaci�n en el rango de 1 a 40
mm y es muy estable. La l�mpara de Nernst es una barra hueca de �xidos de itrio y
de zirconio calentados aproximadamente a 1500�C. Esta l�mpara emite radiaci�n
continua entre 0 y 20 mm y no es tan estable como el Globar, pero �ste �ltimo
requiere de enfriamiento con agua.
MONOCROMADORES
Como se indic� anteriormente, las fuentes de radiaci�n emiten en forma continua
sobre un determinado rango de longitudes de onda. El uso de bandas angostas de
longitudes de onda de radiaci�n tienen las siguientes ventajas:
 La radiaci�n en bandas angostas permite la resoluci�n de bandas de absorci�n
que son muy cercanas entre s�.
Con bandas angostas un pico puede ser medido a su m�ximo de absorci�n
incrementando as� la sensibilidad.
Las bandas angostas de absorci�n tienden a seguir en mayor aproximaci�n la
Ley de Beer.
Con la finalidad de resolver el haz policrom�tico en bandas angostas de longitudes
de onda se emplean filtros y monocromadores.
FILTROS.- Los filtros y monocromadores son utilizados para obtener radiaci�n de un
rango angosto de longitudes de onda (radiaci�n casi monocrom�tica).
Los filtros son materiales de un vidrio especial, el cual contiene sustancias que
le dan color al vidrio y que absorben una parte de la radiaci�n y transmiten otra.
Estos filtros transmiten radiaci�n en anchos de bandas de 20 a 50 nm
aproximadamente.
MONOCROMADORES.- Los monocromadores tienen capacidad de resoluci�n de ancho de
banda 35 a 0.1 nm. Los componentes de un monocromador son:
Una abertura que permita el paso de la radiaci�n policrom�tica de la fuente.
Un colimador que puede ser una lente o un espejo.
Un medio de dispersi�n que puede ser un prisma o una rejilla.
Lentes de enfoque o espejos.
Una abertura de salida.
Todos los moncromadores tienen: una abertura de entrada; unos lentes colimadores o
un juego de espejos para producir un haz paralelo de radiaci�n; un prisma o rejilla
como elemento de dispersi�n y un elemento de enfoque, el cual proyecta una serie de
im�genes sobre una superficie plana (el plano focal). Adicionalmente, la mayor�a de
los moncromadores tienen ventanas en las aberturas de entrada y salida para
proteger los componentes del moncromador del polvo y los humos corrosivos que
puedan existir en el ambiente.
En la Figura 2 se muestra el dise�o �ptico de dos monocromadores t�picos, uno
empleado como medio de dispersi�n de la radiaci�n de un prisma y el otro una
rejilla de dispersi�n.
Con prop�sitos de ilustraci�n se muestra una fuente de radiaci�n que solo emite dos
o tres longitudes de onda l1> l2>l3. La radiaci�n llega al monocromador a atrav�s
de una abertura rectangular (slit de entrada), es colimada y posteriormente incide
con un cierto �ngulo sobre la superficie del elemento dispersor (prisma o rejilla).
En el prisma la refracci�n en las dos caras de �ste, genera la dispersi�n angular
de la radiaci�n. En la rejilla la dispersi�n ocurre como consecuencia del fen�meno
de difracci�n.
En ambos casos, la radiaci�n ya dispersada se enfoca sobre el slit de salida, pero
�nicamente sale del monocromador radiaci�n de longitud de onda l1. De �sta manera,
de la radiaci�n policrom�tica generada por la fuente, solamente una porci�n de �sta
incidir� sobre la muestra.
Ser�a deseable tener un ancho de banda sumamente peque�o (y un monocromador puede
hacerlo), sin embargo, mientras menor sea el ancho de banda menor ser� la cantidad
de fotones que lleguen al detector y consecuentemente la sensibilidad del
instrumento se ve disminuida. El ancho de banda se puede seleccionar con la
abertura (slit width) y esto generalmente se hace en forma emp�rica.

Figura 2: Dos tipos de monocromadores. (a) Monocromador de prisma tipo Bunsen. (b)
Monocromador de rejilla tipo Czerney-Turner. l1>l2

CUBETAS
Una cubeta es un peque�o tubo de secci�n circular o cuadrada, sellado en un
extremo, fabricado en pl�stico, vidrio o cuarzo (transparente a la luz
ultravioleta) y dise�ado para mantener las muestras durante los experimentos de
espectroscopia. Las cubetas deben ser tan claras o transparentes como sea posible,
sin impurezas que puedan afectar a una lectura espectrosc�pica. Al igual que un
tubo de ensayo, una cubeta puede estar abierta a la atm�sfera por la parte superior
o tener una tapa para sellarla. Tambi�n se puede utilizar Para film para sellarla.
Caracter�sticas
Las cubetas de bajo costo son redondas y tienen un aspecto similar a los tubos de
ensayo. Las cubetas desechables de pl�stico se utilizan a menudo para an�lisis
espectrosc�picos r�pidos, donde la velocidad es m�s importante que una exactitud
elevada.
Algunas cubetas s�lo son transparentes en dos caras opuestas, de manera que s�lo
pueda pasar el rayo de luz a trav�s de ese par de caras. En ese caso, las otras dos
caras opacas poseen cierta rugosidad para permitir un f�cil manejo. Las cubetas
utilizadas en espectroscopia de fluorescencia deben ser transparentes en sus cuatro
caras pues la fluorescencia se mide en �ngulo recto con respecto a la trayectoria
del haz para limitar las contribuciones del propio haz incidente. Algunas cubetas,
conocidas como cubetas t�ndem, tienen una barrera de cristal que se extiende hasta
2/3 de su altura interior, por lo que las medidas se pueden tomar, en primer lugar,
con las dos disoluciones separadas, y posteriormente cuando se mezclan.
Normalmente, las cubetas miden 1 cm (0,39 pulgadas) de ancho, para permitir
c�lculos f�ciles de los coeficientes de absorci�n. Tambi�n existen cubetas cuyo
camino �ptico es menor (de 5 mm o de 1 mm) o mayor (2 cm) que las de longitud
est�ndar. Otras cubetas est�n preparadas para permitir el flujo de reactivos a su
trav�s para medidas r�pidas, e incluso existen cubetas termostatizadas
Las cubetas utilizadas en experimentos de dicro�smo circular no deben someterse a
tensi�n mec�nica, pues ello produce birrefringencia en el cuarzo, afectando a las
mediciones efectuadas.
Tipos de cubeta

El rango de transmisi�n es la zona del espectro en la que el material tiene una

transmitancia superior al 80%.

DETECTOR
Los detectores modernos general una se�al como resultado de los fotones que llegan
y chocan con �l. Esta se�al activa una aguja, env�a una se�al digital a un
microprocesador y/o activa un graficado.
El ruido, como ya se ha mencionado anteriormente, se refiere a una se�al de fondo
generada por la vecindad del instrumento con otros aparatos y/o por cambios mismos
en el sistema electr�nico en el detector.
Un buen instrumento debe reunir los siguientes requerimientos:
El ruido debe ser m�nimo para que no interfiera con la se�al recibida.
El tiempo de respuesta debe ser corto.
Debe ser estable durante un largo per�odo de tiempo.
La se�al percibida debe ser f�cilmente amplificada.

DETECTORES PARA UV Y VISIBLE. - Los fotones con radiaci�n de longitud de onda en

visible y UV, poseen suficiente energ�a para causar la foto eyecci�n de electrones
cuando chocan en superficies que han sido tratadas con compuestos espec�ficos.
La absorci�n de estos fotones tambi�n puede causar que los electrones que se
encuentran en la banda no conductora pasen a la banda de conducci�n, si el material
sobre el que inciden los fotones es un semiconductor. Ambos procesos generales una
corriente el�ctrica que es directamente proporcional al poder radiante de los
fotones absorbidos. Los detectores que utilizan este sistema se denominan
detectores fotoel�ctricos y son clasificados como fototubos y celdas fotovoltaicas.
FOTOTUBOS. - Un fototubo consiste de:
un cilindro al alto vac�o (con una ventana de cuarzo para UV),
un c�todo semicil�ndrico, el cual tiene en su superficie un compuesto, con
propiedades tales que el electr�n de �sa substancia se pueden desprender con
relativa facilidad. Este compuesto generalmente es un �xido de un metal alcalino
(litio, sodio, potasio, etc.) o alcalinot�rreos (calcio, bario, estroncio, etc.)
un �nodo que es un alambre met�lico. A este sistema se le aplica una
diferencia de potencial de aproximadamente 90 volts
La radiaci�n que atraviesa la celda de muestra o de referencia pasa a trav�s de una
ventana de vidrio pyrex o cuarzo del cilindro, y choca con la superficie
fotoemisiba del c�todo. Los fotones son absorbidos y transfieren su energ�a a los
electrones d�bilmente ligados a la superficie del material. Estos electrones son
desprendidos del c�todo y son colectados por el �nodo, gener�ndose un flujo de
corriente en el circuito y la corriente generada es directamente proporcional al
poder radiante de la radiaci�n incidente.
REGISTRADOR
Es un sistema de lectura tal como: Una escala de aguja, un registrador, un sistema
de d�gitos o una computadora, que transforme la se�al el�ctrica en una se�al que el
operador pueda interpretar.
Convierte el fen�meno f�sico en n�meros proporcionales al analito en cuesti�n.
CLASES DE REGISTRADOR

FUENTES DE RADIACI�N
Estas consisten de materiales que son excitados a niveles de mayor energ�a, por
medio de descargas el�ctricas de alto voltaje o por calentamiento. Cuando los
electrones del material regresan del estado excitado al estado basal, emiten
energ�as caracter�sticas correspondientes a ?E, la diferencia en energ�a entre el
estado basal y el estado excitado.
Las l�mparas de hidr�geno y deuterio son las fuentes m�s comunes de radiaci�n UV.
Estas consisten de un par de electrodos en un tubo de vidrio con ventanas de
cuarzo, y que adem�s contiene hidr�geno o deuterio gaseoso. Cuando se aplica un
alto voltaje a los electrodos, ocurre una descarga de electrones, lo cual excita
las mol�culas de gas y �stas pasan a niveles energ�ticos superiores. Cuando los
electrones de los �tomos del gas regresan a su estado basal emiten radiaci�n, la
cual es continua en el rango de 180 a 350 nm. Para UV es posible tambi�n utilizar
la l�mpara de xen�n, la cual emite una radiaci�n m�s intensa, sin embargo, �sta no
es tan estable como la l�mpara de hidr�geno y de deuterio
TIPOS DE MONOCROMADORES
Con la finalidad de resolver el haz policrom�tico en bandas angostas de longitudes
de onda se emplean filtros y monocromadores.
Filtros. - Los filtros y monocromadores son utilizados para obtener radiaci�n de un
rango angosto de longitudes de onda (radiaci�n casi monocrom�tica). Los filtros son
materiales de un vidrio especial, el cual contiene sustancias que le dan color al
vidrio y que absorben una parte de la radiaci�n y transmiten otra. Estos filtros
transmiten radiaci�n en anchos de bandas de 20 a 50 nm aproximadamente.
Prismas. - El prisma, tal y como se ha mencionado con anterioridad separa la
radiaci�n policrom�tica en bandas angostas y a diferentes �ngulos. Para dirigir la
radiaci�n de longitud de onda seleccionada a la abertura de salida (slit) se hace
girar el prisma por medio de un mecanismo acoplado para este fin.
Materiales del prisma. - El material del que est� hecho el prisma debe ser
trasparente a la radiaci�n utilizada y un excelente medio dispersor. Para el UV
pueden ser utilizados prismas de s�lice o de cuarzo. Para el Visible e Infrarrojo
cercano, el vidrio ordinario con plomo muestra buenas cualidades. Para el
Infrarrojo se utilizan s�lidos i�nicos cristalinos, siendo uno de los m�s
utilizados el Cloruro de Sodio.
Rejillas. - Las rejillas como medio de dispersi�n de la luz son muy superiores a
los prismas. Hasta hace poco a�o una de las desventajas de este tipo de dispersor
era su costo. Actualmente se ha desarrollado la tecnolog�a para la elaboraci�n de
rejillas de difracci�n en grandes cantidades y con aceptable calidad, lo cual ha
tra�do como consecuencia un menor precio y un desplazamiento casi total a la
utilizaci�n de rejillas de difracci�n como elementos de resoluci�n de haces
policrom�ticos.
Lentes y espejos. - La radiaci�n es colimada y enfocada por lentes y espejos. El
material de los lentes debe ser por supuesto trasparente a la radiaci�n utilizada.
En el Infrarrojo se utilizan espejos, ya que la mayor�a de los materiales no son
suficientemente trasparentes a la radiaci�n Infrarroja y causan significantes
p�rdidas de energ�a. Tambi�n en espectroscop�a Visible y UV se emplean con
frecuencia los espejos como elementos o partes del monocromador.
DETECTORES
Los detectores modernos general una se�al como resultado de los fotones que llegan
y chocan con �l. Esta se�al activa una aguja, env�a una se�al digital a un
microprocesador y/o activa un graficado. El ruido, como ya se ha mencionado
anteriormente, se refiere a una se�al de fondo generada por la vecindad del
instrumento con otros aparatos y/o por cambios mismos en el sistema electr�nico en
el detector.
Fototubos. - Un fototubo consiste de:
a) un cilindro al alto vac�o (con una ventana de cuarzo para UV),
b) un c�todo semicil�ndrico, el cual tiene en su superficie un compuesto, con
propiedades tales que el electr�n de �sa substancia se pueden desprender con
relativa facilidad. Este compuesto generalmente es un �xido de un metal alcalino
(litio, sodio, potasio, etc.) o alcalinot�rreos (calcio, bario, estroncio, etc.) y
c) un �nodo que es un alambre met�lico. A este sistema se le aplica una diferencia
de potencial de aproximadamente 90 volts.
La radiaci�n que atraviesa la celda de muestra o de referencia pasa a trav�s de una
ventana de vidrio pyrex o cuarzo del cilindro, y choca con la superficie
fotoemisiba del c�todo. Los fotones son absorbidos y transfieren su energ�a a los
electrones d�bilmente ligados a la superficie de la materia
Tubo fotomultiplicador. - Cuando incide radiaci�n sobre una superficie fotoemisiba
se genera un desprendimiento de electrones de dicha superficie. Si estos electrones
desprendidos se aceleran por medio de un campo el�ctrico y chocan con otra
superficie fotoemisiba, se desprenden m�s electrones que el primer caso. Si este
proceso se repite una y otra vez, se tendr� un efecto multiplicador de los fotones.
Este es el principio de un tubo fotomultiplicador
Fotoceldas. - Las celdas fotovoltaicas son utilizadas para detectar y medir la
radiaci�n en la regi�n visible y su rango de detecci�n es aproximadamente el del
ojo humano. Estas consisten de una hoja de cobre o hierro, la cual sirve como
electrodo, sobre la cual est� depositada una capa de un material semiconductor tal
como �xido de cobre (I) o selenio (Figura 6). La superficie exterior del
semiconductor es cubierta por una capa trasparente de oro, plata o plomo, el cual
sirve como segundo electrodo o electrodo colector. El sistema est� protegido por
una cubierta trasparente
REGISTRADORES
Una vez que la se�al de energ�a radiante ha sido trasformada en una se�al el�ctrica
y amplificada posteriormente, dicha se�al pasa a un sistema de lectura. En
instrumentos m�s modernos, la escala de absorbancia o de transmitancia se presenta
en n�meros digitales. Tambi�n es posible a trav�s de algunas funciones que el
procesador contiene, obtener la lectura directamente en concentraci�n.
RUIDO El factor limitante final en la precisi�n y sensibilidad de cualquier m�todo
anal�tico instrumental, es la presencia de extra�a se�ales no deseadas que se
sobreponen a la se�al generada por la substancia determinada anal�ticamente estas
extra�as se�ales son llamadas RUIDO, siendo derivada la terminolog�a de la
radioingenier�a, donde la presencia de dichas se�ales es reconocible en forma
audible (est�tica).
Fuentes de ruido. - El ruido est� asociado con cada componente de un instrumento,
esto es: la fuente, el transductor, el procesador de se�al, y el sistema de
lectura. Adicionalmente el ruido generado por cada uno de estos componentes puede
ser de diferentes tipos y generado de diferentes formas. Por lo tanto, el ruido
observable es una mezcla compleja de se�ales indeseables, el cual no puede ser
totalmente caracterizado.
Instrumento de haz sencillo. - En este tipo de instrumentos se requiere de calibrar
el aparato a cero de absorbancia (o 100% de transmitancia) con el blanco. Una vez
ajustado se retira la celda con el blanco y se colocan las muestras y est�ndares
que s� contienen la especie absorbente y se efect�a la lectura correspondiente.
Instrumentos de doble haz. - En estos aparatos el haz es dividido, e incide tanto
en la celda que contiene el blanco como en la celda que contiene la muestra. El
detector compara estas dos se�ales continuamente o muchas veces en un segundo y
efect�a la lectura relacionando la lectura de la muestra con la lectura del blanco.
De esta manera se compensan las fluctuaciones que pudiesen existir por: ruido,
variaci�n de voltaje, variaci�n en la intensidad de la fuente luminosa, etc.
Obviamente estos instrumentos son m�s complicados y costosos.
APLICACIONES
Aplicaciones cualitativas
Las aplicaciones de la espectrofotometr�a ultravioleta y visible en el an�lisis
cualitativo son limitadas ya que el n�mero m�ximo y m�nimo de absorci�n corresponde
a una mol�cula relativamente peque�o
Por tanto, una identificaci�n inequ�voca es a menudo posible. En espectroscopia
molecular existe diferentes tipos de registros espectrales lo m�s habitual es
representar en ordenadas el porcentaje de trasmitancia la absorbancia el logaritmo
de la absorbancia o la absortividad molar
En abscisas es habitual representar la longitud de onda o el n�mero de onda, aunque
en algunas ocasiones se emplea la frecuencia.

Aplicaciones cuantitativas
Gran aplicaci�n para sistemas org�nicos como inorg�nicos
Sensibilidades caracter�sticas de 10-4 a 10-5 M
Este intervalo puede ampliarse de 10-6 a 10-7 M (con ciertas modificaciones)
Selectividad moderada. buena presi�n adquisici�n de datos f�cil y r�pida
La espectrometr�a UV/Vis se utiliza habitualmente en la determinaci�n cuantitativa
de soluciones de iones met�licos de transici�n y compuestos org�nicos muy
conjugados
Soluciones de iones met�licos de transici�n Las soluciones de iones met�licos de
transici�n pueden ser coloreadas (es decir, absorben la luz visible) debido a que
los electrones en los �tomos de metal se pueden excitar desde un estado electr�nico
a otro. El color de las soluciones de iones met�licos se ve muy afectado por la
presencia de otras especies, como algunos aniones o ligando. Por ejemplo, el color
de una soluci�n diluida de sulfato de cobre es muy azul; agregando amon�aco se
intensifica el color y cambia la longitud de onda de absorci�n m�xima.

Compuestos org�nicos Los compuestos org�nicos, especialmente aquellos con un alto

grado de conjugaci�n, tambi�n absorben luz en las regiones del espectro
electromagn�tico visible o ultravioleta. Los disolventes para estas determinaciones
son a menudo el agua para los compuestos solubles en agua, o el etanol para
compuestos org�nicos solubles. Los disolventes org�nicos pueden tener una
significativa absorci�n de UV, por lo que no todos los disolventes son adecuados
para su uso en espectrometr�a UV. El etanol absorbe muy d�bilmente en la mayor�a de
longitudes de onda. La polaridad y el pH del disolvente pueden afectar la absorci�n
del espectro de un compuesto org�nico. La tirosina, por ejemplo, aumenta su m�ximo
de absorci�n y su coeficiente de extinci�n molar cuando aumenta el pH de 6 a 13, o
cuando disminuye la polaridad de los disolventes.
Aunque los complejos de transferencia de carga tambi�n dan lugar a colores, �stos
son a menudo demasiado intensos para ser usados en mediciones cuantitativas.
BIBLIOGRAF�A
- Principios de An�lisis Instrumental -Skoog, Holler, Nieman
http://ocw.usal.es/ciencias-experimentales/analisis-aplicado-a-la-ingenieria-
quimica/contenidos/course_files/Tema_3.pdf
http://virtual.ffyb.uba.ar/mod/book/view.php?id=88081&chapterid=1892.