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Profe autor:
Dentro del ojo hay una gran cantidad de fotoreceptores, receptores sensoriales que
transforman los estímulos luminosos en impulsos nerviosos. El globo ocular está formado
por tres capas: la túnica fibrosa por fuera, la túnica vascular en el medio, y la túnica
nerviosa en el interior.
Inclusión Para poder obtener cortes delgados que puedan ser observados al microscopio
óptico, los tejido deben ser incluidos en una sustancia de consistencia firme, la cual puede
ser hidrófila o hidrófoba. Un medio hidrófobo que se puede utilizar es la parafina o el
paraplast. Este último es una parafina altamente purificada a la cual se le han agregado
cantidades variables de polímeros especiales, lo cual le dará distinta dureza y plasticidad al
taco de inclusión.
Luego del corte con el micrótomo la muestra debe pasar el baño de flotación el cual debe
estar a una temperatura de 45°grados. De ser mayor a esto el tejido se daña y se deshace y
de ser menor la temperatura el tejido se arruga y se producen pliegues del tejido por ende
debe ser rápido y a temperaturas adecuadas y retirar con una lámina porta objeto y llevar a
la estufa por 30min a una temperatura de 80° a 100° grados.
Tinción Primero la parafina debe ser eliminada sumergiendo los portaobjetos con los cortes
en un solvente orgánico que puede ser xilol (para desparafinar). Luego los cortes deben ser
hidratados pasando por una serie de graduaciones decreciente de alcohol etílico( 100%,
90%, 80%), luego pasa por agua para desalcoholizar (10dips). Luego se colorea por 5min
con hematoxilina. Luego se diferencia en agua corriente para retirar el exceso de colorante.
Y se sumergen en eosina con 3dips.
Luego de teñir el tejido este debe ser deshidratado nuevamente, para esto hay que pasarlo
por una serie de alcoholes en grado creciente (80%, 90%, 100%). Posteriormente hay que
pasar el tejido por 2xilol, para hacerlo miscible con el medio de montaje.
Finalmente se le agrega el medio de montaje y se le coloca el cubreobjetos, teniendo
cuidado en no dejar burbujas sobre el tejido para una optima observación.
Retina.