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concepto y definición
La Demanda Química de Oxigeno o DQO, es la cantidad de oxigeno que se requiere para
oxidar químicamente el material orgánico. Difiere de la DBO en que en esta última prueba
solo se detecta el material orgánico degradado biológicamente o que es biodegradable. En la
determinación de DQO todo el material orgánico biodegradable y no biodegradable es
químicamente oxidado por el dicromato de potasio en medio ácido en la presencia de un
catalizador. Para esto se emplea una mezcla de ácido sulfúrico y dicromato de potasio con
iones plata como catalizador. En estas condiciones, en un tiempo de dos horas de digestión,
a una temperatura de 150ºC, el Cromo (VI) pasa a el estado de oxidación Cromo (III)
oxidando la materia orgánica.
(CxHyOz) + Cr2O7-2 + H+ → Cr+3 + CO2 + H2O (9)
150ºC
La demanda bioquímica de oxígeno (DBO) es una prueba usada para la determinación de los
requerimientos de oxígeno para la degradación bioquímica de la materia orgánica en las
aguas municipales, industriales y en general residuales; su aplicación permite calcular los
efectos de las descargas de los efluentes domésticos e industriales sobre la calidad de las
aguas de los cuerpos receptores. Los datos de la prueba de la DBO se utilizan en ingeniería
para diseñar las plantas de tratamiento de aguas residuales.
La prueba de la DBO es un procedimiento experimental, tipo bioensayo, que mide el oxígeno
requerido por los organismos en sus procesos metabólicos al consumir la materia orgánica
presente en las aguas residuales o naturales. Las condiciones estándar del ensayo incluyen
incubación en la oscuridad a 20ºC por un tiempo determinado, generalmente cinco días. Las
condiciones naturales de temperatura, población biológica, movimiento del agua, luz solar y
la concentración de oxígeno no pueden ser reproducidas en el laboratorio. Los resultados
obtenidos deben tomar en cuenta los factores anteriores para lograr una adecuada
interpretación.
Las muestras de agua residual o una dilución conveniente de las mismas, se incuban por cinco
días a 20ºC en la oscuridad. La disminución de la concentración de oxígeno disuelto (OD),
medida por el método Winkler o una modificación del mismo, durante el periodo de
incubación, produce una medida de la DBO.
LIMITACIONES E INTERFERENCIAS
Existen numerosos factores que afectan la prueba de la DBO, entre ellos la relación de la
materia orgánica soluble a la materia orgánica suspendida, los sólidos sedimentables, los
flotables, la presencia de hierro en su forma oxidada o reducida, la presencia de compuestos
azufrados y las aguas no bien mezcladas. Al momento no existe una forma de corregir o
ajustar los efectos de estos factores.
DBO carbonácea contra nitrogenácea. La oxidación de las formas reducidas del nitrógeno
como amoniaco y nitrógeno orgánico, mediada por los microorganismos, ejercen una
demanda nitrogenácea, que ha sido considerada como una interferencia en la prueba; sin
embargo, esta puede ser eliminada con la adición de inhibidores químicos. Cuando se inhiba
la demanda nitrogenácea de oxígeno, reportar los resultados como demanda bioquímica de
oxígeno carbonácea (DBOC5); cuando no se inhiba, reportar los resultados como DBO5.
Requerimientos de dilución. Si el agua de dilución es de baja calidad, su DBO aparecerá
como DBO de la muestra, efecto que será amplificado por el factor de dilución, y el resultado
tendrá una desviación positiva. El método de análisis debe incluir agua de dilución de
verificación y agua de dilución como blanco para establecer su calidad, mediante la medición
del consumo de oxígeno con una mezcla orgánica conocida, generalmente glucosa y ácido
glutámico. La fuente del agua de dilución puede ser: destilada a partir del agua de grifo, o
agua libre de sustancias orgánicas biodegradables o bioinhibitorias tales como cloro o
metales pesados. El agua destilada puede contener amoniaco o compuestos orgánicos
volátiles; el agua desionizada también puede estar contaminada con compuestos orgánicos
solubles lixiviados del lecho de la resina; el uso de destiladores con conductos o accesorios
de cobre en las líneas de agua destilada pueden producir agua con cantidades excesivas de
cobre, que actúa como biocida.
TOMA Y PRESERVACIÓN DE MUESTRAS
Las muestras para determinación de la DBO se deben analizar con prontitud; si no es posible,
refrigerarlas a una temperatura cercana al punto de congelación, ya que se pueden degradar
durante el almacenamiento, dando como resultado valores bajos. Sin embargo, es necesario
mantenerlas el mínimo tiempo posible en almacenamiento, incluso si se llevan a bajas
temperaturas. Antes del análisis calentarlas a 20ºC.
Muestras simples. Si el análisis se emprende en el intervalo de 2 h después de la reco-lección
no es necesario refrigerarlas; de lo contrario, guardar la muestra a 4ºC o menos reportar junto
con los resultados el tiempo y la temperatura de almacenamiento. Bajo ningún concepto
iniciar el análisis después de 24 h de haber tomado la muestra; las muestras empleadas en la
evaluación de las tasas retributivas o en otros instrumentos normativos, deben ser analizadas
antes de que transcurran 6 h a partir del momento de la toma.
Muestras compuestas. Mantener las muestras a 4ºC o menos durante el proceso de
composición, que se debe limitar a 24 h. Aplicar los mismos criterios que para las muestras
sencillas, contando el tiempo transcurrido desde el final del período de composición.
Especificar el tiempo y las condiciones de almacenamiento como parte de los resultados.
APARATOS
Botellas de incubación para la DBO, de 250 a 300 mL de capacidad. Lavarlas con detergente,
enjuagarlas varias veces, y escurrirlas antes de su uso. Para evitar la entrada de aire en la
botella de dilución durante la incubación, se debe utilizar un sello de agua, que se puede
lograr satisfactoriamente invirtiendo las botellas en un baño de agua o adicionando agua en
el reborde cóncavo de la boca de las botellas especiales para la DBO. Colocar una copa de
papel o plástica o un capuchón metálico sobre la boca de la botella para reducir la evaporación
del sello de agua durante la incubación.
Incubadora de aire o baño de agua, controlada termostáticamente a 20 ± 1ºC; excluir
cualquier fuente luminosa para eliminar el proceso de producción fotosintética de OD.
REACTIVOS
Solución tampón de fosfato: Disolver 8,5 g de KH2PO4, 21,75 g de K2HPO4, 33,4 g de
Na2HPO4.7H2O, y 1,7 g de NH4Cl en aproximadamente 500 mL de agua destilada y diluir
a 1 L. El pH debe ser 7,2 sin posteriores ajustes. Si se presenta alguna señal de crecimiento
biológico, descartar este o cualquiera de los otros reactivos.
Solución de sulfato de magnesio: Disolver 22,5 g de MgSO4.7H2O en agua destilada y diluir
a 1 L.
Solución de cloruro de calcio: Disolver 27,5 g de CaCl2 en agua destilada y diluir a 1L.
Solución de cloruro férrico: Disolver 0,25g de FeCl3.6H2O en agua destilada, diluir a 1L
Soluciones ácida y alcalina, 1 N, para neutralización de muestras cáusticas o ácidas.
1) Acido. A un volumen apropiado de agua destilada agregar muy lentamente y mientras se
agita, 28 mL de ácido sulfúrico concentrado; diluir a 1 L.
2) Alcali. Disolver 40 g de hidróxido de sodio en agua destilada y diluir a 1 L.
Solución de sulfito de sodio: Disolver 1,575 g de Na2SO3 en 1000 mL de agua destilada.
Esta solución no es estable y se debe preparar diariamente.
Inhibidor de nitrificación: 2-cloro-6-(triclorometil)piridina.
Solución de glucosa-ácido glutámico: Secar a 103ºC por 1 h glucosa y ácido glutámico grado
reactivo. Disolver 150 mg de glucosa y 150 mg de ácido glutámico en agua destilada y diluir
a 1 L. Preparar inmediatamente antes de su uso.
Solución de cloruro de amonio: Disolver 1,15 g de NH4Cl en 500 mL de agua destilada,
ajustar el pH a 7,2 con solución de NaOH, y diluir a 1 L. La solución contiene 0,3 mg de
N/mL.
PROCEDIMIENTO
Preparación del agua de dilución. Colocar la cantidad de agua necesaria en una botella y
agregar por cada litro, 1 mL de cada una de las siguientes soluciones: tampón fosfato,
MgSO4, CaCl2, y FeCl3. El agua de dilución se puede inocular como se describe en 6.4;
chequear y guardar como se describe en 6.2 y 6.3, de tal manera que siempre se tenga
disponible.
Llevar el agua de dilución a una temperatura de 20ºC antes de su uso; saturarla con OD por
agitación en una botella parcialmente llena, por burbujeo de aire filtrado libre de materia
orgánica, o guardarla en botellas lo suficientemente grandes con tapón de algodón, para
permitir su saturación. Emplear material de vidrio bien limpio para proteger la calidad del
agua.
Verificación del agua de dilución. Aplicar este procedimiento como una forma de
verificación básica de la calidad del agua de dilución.
Si el agua consume más de 0,2 mg de oxígeno/L se debe mejorar su purificación o emplear
agua de otra fuente; si se usa el procedimiento de inhibición de la nitrificación, el agua de
dilución inolculada, se debe guardar en un sitio oscuro a temperatura ambiente hasta que el
consumo de oxígeno se reduzca lo suficiente para cumplir el criterio de verificación.
Confirmar la calidad del agua de dilución almacenada que está en uso, pero no agregar
semilla para mejorar su calidad. El almacenamiento no es recomendable cuando se va a
determinar la DBO sin inhibición de nitrificación, ya que los organismos nitrificantes se
pueden desarrollar en este período. Revisar el agua de dilución para determinar la
concentración de amonio, y si es suficiente después del almacenamiento; de lo contrario,
agregar solución de cloruro de amonio para asegurar un total de 0,45 mg de amonio como
nitrógeno/L. Si el agua de dilución no ha sido almacenada para mejorar su calidad, agregar
la cantidad suficiente de semilla para producir un consumo de OD de 0,05 a 0,1 mg/L en
cinco días a 20ºC. Llenar una botella de DBO con agua de dilución, determinar el OD inicial,
incubar a 20ºC por 5 días y determinar el OD final como se describe en 6.8 y 6.10. El OD
consumido en este lapso no debe ser mayor de 0,2 mg/L y preferiblemente menor de 0,1
mg/L.
CÁLCULOS
Cuando el agua de dilución no ha sido inoculada:
DBO5, mg/lt = (D1-D2) /P
Cuando el agua de dilución ha sido inoculada:
DB)5, mg/lt = {(D1-D2) -(B1-B2) *f }/P
donde:
Titulación de DQO
En el método de titulación para determinar el DQO, el excedente de dicromato reacciona con
un agente reductor, sulfato de amonio ferroso (FAS); al añadir el sulfato lentamente, el
excedente de dicromato se convierte en su forma trivalente.
Cuando todo el excedente de dicromato reacciona se alcanza un punto de equivalencia. Este
punto indica que la cantidad de sulfato de amonio ferroso que usted añadió es igual a la
cantidad del excedente de dicromato. Los indicadores de color también pueden señalar este
punto final, pero el proceso se puede automatizar con un indicador potenciómetro, como un
electrodo.
Luego, usted puede calcular cuánto dicromato se destinó para la oxidación del material
orgánico basándose en cuánto se añadió al principio y cuánto sobró.
Solución de fosfato…………………………5 ml
Solución de sulfato magnésico…………1 ml
Solución de cloruro cálcico………………1 ml
Solución de cloruro de hierro…………1 ml
Solución de cloruro amónico……………1 ml
Agua destilada hasta enrase a 1000 ml
Esta solución se mantiene a 20 °C y debe de airearse procurando evitar toda contaminación
por metales, materias orgánicas, oxidantes o reductores. Se detendrá la aireación cuando la
solución contenga 8 mg/l de oxígeno disuelto. Dejar en reposo durante 12 horas manteniendo
el recipiente destapado. Añadir 5 ml de agua residual urbana por litro de esta solución. Esta
agua de dilución, deberá utilizarse dentro de las 24 horas siguientes a su preparación.
Procedimiento
La técnica utilizada para la medición es la siguiente: Se introduce un volumen definido de la
muestra líquida en un recipiente opaco que evite que la luz pueda introducirse en su interior
(se eliminarán de esta forma las posibles reacciones fotosintéticas generadoras de gases), se
introduce un agitador magnético en su interior, y se tapa la boca de la botella con un capuchón
de goma en el que se introducen algunas lentejas de sosa. Se cierra la botella con un sensor
piezoeléctrico, y se introduce en una estufa refrigerada a 20 °C.
Las bacterias irán oxidando la materia orgánica del interior de la disolución, con el
consecuente gasto de oxígeno del interior de la botella. Estas bacterias, debido al proceso de
respiración, emitirán dióxido de carbono que será absorbido por las lentejas de sosa. Este
proceso provoca una disminución interior de la presión atmosférica, que será medida con el
sensor piezoeléctrico.
En detalle:
Introducir un volumen conocido de agua a analizar en un matraz aforado y completar con el
agua de dilución.
Verificar que el pH se encuentra entre 6-8. (En caso contrario, preparar una nueva dilución
llevando el pH a un valor próximo a 7 y después ajustar el volumen)
Llenar completamente un frasco con esta solución y taparlo sin que entren burbujas de aire.
Preparar una serie de diluciones sucesivas.
Conservar los frascos a 20 °C ± 1 °C y en la oscuridad.
Medir el oxígeno disuelto subsistente al cabo de cinco días.
Practicar un ensayo testigo determinando el oxígeno disuelto en el agua de dilución y tratar
dos matraces llenos de esta agua como se indicó anteriormente.
Determinar el oxígeno disuelto.
En el curso del ensayo testigo, el consumo de oxígeno debe situarse entre 0,5 y 1,5 g/l. En el
caso contrario, la inoculación con el agua destilada no es conveniente y se necesitará
modificar la preparación. Para la determinación de oxígeno disuelto (OD) se puede emplear
cualquiera de los dos métodos establecidos en la norma mexicana NMX-AA-012-SCFI.
Expresión de los resultados
DBO5= F (T0-T5) -(F-1) (D0-D5)
Donde:
D0 = Contenido de oxígeno (mg/l) del agua de dilución al principio del ensayo.
D5 = Contenido medio de oxígeno (mg/l) del agua de dilución al cabo de cinco días de
incubación.
T0 = Contenido de oxígeno (mg/l) de una de las diluciones de la muestra al principio del
ensayo.
T5 = Contenido de oxígeno (mg/l) de una de las diluciones de la muestra al cabo de cinco
días de incubación.
F = Factor de dilución.
Valores por encima de 30 mgO2/litro pueden ser indicativos de contaminación en aguas
continentales, aunque las aguas residuales pueden alcanzar una DBO de miles de mgO2/litro.
INTRODUCCIÓN
Programa: Biología
Asignatura: Limnologia
Nivel: VIII
Fecha: 16/10/2019