Actividad antimicrobiana y espectro de Cefovecina, una cefalosporina de Nuevo Espectro

Extendido, contra patógenos recogidos de Perros y gatos en Europa y América del Norte

Las infecciones de la piel y el tejido blando y las infecciones urinarias en perros y gatos están entre
las infecciones más comunes que presentan en las prácticas veterinarias. La infección de la piel en
los perros está representada principalmente por pioderma, una infección bacteriana piogénica.
Pioderma en los perros se manifiesta en una gran diversidad de síndromes clínicos que van desde la
leve enfermedad de la piel (p. ej., pioderma superficial, involucrando sólo la epidermis) a
condiciones de vida-amenazantes (p.ej., piodermia profunda, una condición grave que involucra la
dermis y la subcutis). La especie coagulasa-positiva Staphylococcus intermedius se considera la
causa principal de infecciones piodermas superficiales (8, 12), con Escherichia coli, Proteus spp. , y
Pseudomonas spp. Siendo invasores secundarios, principalmente en pioderma profunda.
Estreptococos beta-hemolíticos se han descrito como patógenos implicados en la piel y infecciones
del tracto urinario en perros y gatos. más comunes de la piel son el resultado de las heridas de
mordida y participan Pasteurella multocida y anaerobes como Porphyromonas spp. , Fusobacterium
spp. , Bacteroides spp. , Peptostreptococcus spp. y Clostridium spp. (5). Las infecciones urinarias en
perros y gatos se asocian frecuentemente con Escherichia coli, Proteus spp. , Klebsiella spp. ,
Staphylococcus spp. , Streptococcus spp. , Enterococcus spp. y (solo en gatos) Pasteurella multocida
(16). Prevotella spp. y Porphyromonas spp. han sido identificados como patógenos clave
involucrados en la enfermedad periodontal canina. Los antimicrobianos desempeñan un papel
predominante en el control de las infecciones bacterianas de la piel y las vías urinarias. La cefovecina
es un antimicrobiano de reciente desarrollo perteneciente a la familia de la cefalosporina.
Cefovecina está formulado para la administración subcutánea; su eliminación intrínseca larga
media-vida (perros, 5.5 días; gatos, 6.9 días) permitirá 14-días intervalos de dosificación (18). Dentro
del programa preclínico y de desarrollo clínico para la cefovecina, se determinaron los CIM de 2,641
patógenos bacterianos recolectados en varios países europeos y en los Estados Unidos. La actividad
in vitro de la cefovecina se comparó con el de otros antimicrobianos utilizados comúnmente, como
cefalexina, amoxicilina con ácido clavulánico y cefadroxil.

LOS MATERIALES Y LOS MÉTODOS

Actividad in vitro de la cefovecina. Las cepas bacteriológicas de los casos clínicos se recogieron en
dos fases: durante una encuesta epidemiológica (recogida de patógenos específicamente para esta
encuesta en las prácticas veterinarias y los patógenos almacenados en laboratorios de diagnóstico)
y en los estudios de registro de la cefovecina para uso veterinario. patógenos de diferentes
complejos de enfermedades caninas y felinas (predominantemente piel y tejidos blandos e
infecciones urinarias) se recogieron entre 1999 y 2000 en cinco países europeos (Dinamarca,
Francia, Alemania, Italia y Reino Unido) y en tres zonas geográficas de los Estados Unidos ( noreste
de los Estados Unidos, el Noroeste y el Medio Oeste). Muestras (muestras bacteriológicas y de orina,
n 373 de la Unión Europea y n 285 de los Estados Unidos) se obtuvieron de perros y gatos
presentados en prácticas veterinarias con signos clínicos indicativos de infecciones bacterianas (p.
ej., piel, herida, absceso, tracto urinario, cavidad oral, oído u ojo). Además, se obtuvieron 73
patógenos bacterianos de laboratorios comerciales de diagnóstico en Francia, Alemania y el Reino
Unido. En el campo de los estudios de seguridad y eficacia, se obtuvieron patógenos bacterianos
caninos y felinos entre 2001 y 2003 en Europa (Francia, Alemania, España y el Reino Unido; n 845)
y en los Estados Unidos (n 1,065) de animales con infecciones de piel y tejidos blandos e infecciones
urinarias. Los animales de los que se recogieron las cepas no habían recibido ningún tratamiento
antimicrobiano en los últimos 30 días antes del muestreo. La distribución de patógenos caninos y
felinos se muestra en el cuadro 1. Todas las muestras se enviaron a diversos laboratorios de
diagnóstico (en el nivel en la Unión Europea o a nivel regional en los Estados Unidos) para
purificación e identificación de patógenos. Prueba de susceptibilidad (MIC) para todos los patógenos
bacterianos se llevó a cabo en un laboratorio europeo y uno de los EE.UU.

CUADRO 1. Fuentes de patógenos caninos y felinos utilizados para la determinación in vitro de la

susceptibilidad de la cefovecina Origen Colección Años de recogida No. de muestras de: Perros
Unión Europea Encuesta epidemiológica 1999–2000 229 217 Estudios epidemiológicos 2001–2003
497 348 Estados Unidos Encuesta epidemiológica 1999–2000 169 116 Estudios de seguridad y
eficacia 2001–2003 765 300 Total 1,660 981 a Todas las muestras se enviaron a diversos laboratorios
de diagnóstico (a nivel nacional en la Unión Europea o a nivel regional en los Estados Unidos) para
su purificación e identificación de patógenos. Las pruebas de susceptibilidad (MIC) para todos los
patógenos bacterianos se llevaron a cabo en un laboratorio europeo y uno de los EE.UU..

Determinación del MIC. Las determinaciones del COI contra la cefovecina y otros antimicrobianos
de referencia se realizaron mediante métodos de microdilución del caldo recomendados por el
Instituto de Normas Clínicas y de Laboratorio (CLSI, anteriormente NCCLS) (9, 11). La susceptibilidad
de cada cepa se determinó utilizando placas de microdilución Sensititre personalizadas (Trek
Diagnostic Systems Ltd., East Grinstead, Reino Unido). Los rangos de concentración analizados
fueron los siguientes: para la cefovecina (Pfizer Animal Health, Kalamazoo, Michigan), de 0,06 a 32
g/ml; para cefalexina (GlaxoSmithKline, Reino Unido), de 0,5 a 64 g/ml; para Cefadroxil (Sigma-
Aldrich, Reino Unido), 0.25 a 32 g/ml; y para el ácido amoxicilinlavulanico
(Melfords/GlaxoSmithKline, Reino Unido), 0.5/0.25 a 64/32 g/ml. Se prepararon aislamientos
aeróbicos para inoculación con catión-ajustados Caldo de Mueller-Hinton, al que se añadió un 3%
de sangre de caballo lisiada para Streptococcus spp. Se prepararon aislamientos anaeróbicos para
inoculación con Wilkins-Chalgren caldo anaerobe. Los pozos de microdilución se inocularon con
aproximadamente 5 105 CFU/ml para aeróbicos y aproximadamente 1 106 CFU/ml para anaerobes.
se incubaron durante al menos 16 h a aproximadamente 37°C para aeróbicos y al menos durante
46 a 48 h aproximadamente a 37°C en una atmósfera anaeróbica para los anaerobes. Las series de
MIC individuales se validaron mediante pruebas simultáneas de la Se han determinado los rangos
de control de calidad de la cefovecina. Antes de la prueba de los patógenos de campo en un
multilateral independiente estudio; los resultados de ese estudio aún no se han publicado y se
presentarán el Subcomité de Pruebas de Susceptibilidad Antimicrobiana Veterinaria. El rango de
concentración elegido para la cefovecina acomodó todas las gamas de control de calidad para
cefovecina; debido a la limitación de espacio, esto no era posible para todos los antimicrobianos
probados.

Actividad bactericida de la cefovecina. Un total de 100 aislamientos bacterianos clínicos se probaron

los estudios de seguridad y eficacia recogidos en el marco europeo. Se probaron los siguientes
patógenos: E. coli (n 25), P. multocida (n 15), Proteus mirabilis (n 10), S. intermedius (n 30),
Streptococcus spp. (n 10), Fusobacterium spp. (n 6) y Bacteroides spp. (n 4). Para garantizar la
calidad se incluyeron cepas de control de calidad que representaban cinco géneros. Los PRM y las
concentraciones mínimas de bactericidas (MBC) fueron determinado para cefovecina, cefhalexina y
Ceftiofur mediante microdilución de caldo métodos recomendados por las directrices CLSI M11,
M26 y M31 (9–11). Los PRM fueron leídos visualmente; todos los pozos fueron chapados a medios
de crecimiento adecuados y incubado. El MBC se definió como una reducción de 99.9% en CFU
desde el principio inóculo después del intervalo de incubación adecuado. La primera concentración
antimicrobiana del pozo de microdilución que contenía menos colonias que el blanco el punto de
rotura bactericida ( 99.9%) se definió como el MBC. las gamas de cefovecina y cefalexina eran
idénticas a las empleadas para Prueba MIC (véase más arriba); Ceftiofur (Pfizer Animal Health,
Kalamazoo, Michigan) se probó dentro de un rango de 0.002 a 128 g/ml.

RESULTADOS Y DEBATE DE LOS Las susceptibilidades antimicrobianas de una amplia gama de

patógenos bacterianos (1,660 caninos y 981 felinos) fueron probado contra cefovecina, cefhalexina,
Cefadroxil y ácido amoxicilina-clavulánico. aún no se han presentado a la CLSI; nunca se han
establecido puntos de interrupción clínicos específicos veterinarios para la cefalexina y el cefadroxil,
y el documento CLSI M31 recomienda el uso de la cefalofina Puntos de interrupción MIC
establecidos para la medicina humana en su lugar (11). Por lo tanto, las tasas de resistencia no se
reportan aquí. resultados (modo, MIC50, MIC90, y rango) para los patógenos bacterianos más
frecuentemente recogidos contra cefovecina, cefhalexina, ácido amoxicilina-clavulánico, y
Cefadroxil se enumeran en Cuadro 2 para aislamientos europeos y de EE.UU.

Un total de 501 S. aislados intermedios fueron investigados para susceptibilidad vitro. Cefovecina
exhibió buena actividad in vitro contra europeos y EE.UU. aislados; el valor MIC90 de 0.25 g/ml para
aislados de EE.UU. fue idéntico al Pan-European valor. susceptibilidades de S. intermedius a la
cefovecina se compararon por país (cuadro 3). los aislamientos contra las tres cefalosporinas y el
ácido amoxicilina-clavulánico fueron bajos, una observación consistente con anteriores
publicaciones (14, 15, 17). Cinco aislamientos (cuatro fueron recogidos en la Unión Europea) tenía
un elevado MIC cefovecina ( 8 g/ml) y se consideraron resistentes a la cefovecina. estos aislamientos
eran cruz-resistentes (tenían un elevado MIC de 32 g/ml) a cefalexina y Cefadroxil, mientras que un
MIC de ácido amoxicilina-clavulánico de 8/4 g/ml. La observación hecha para el ácido amoxicilina-
clavulánico es consistente con los hallazgos de Ganiere et al, que no observaron resistencia para
esta combinación al investigar 50 aislamientos recogidos en Francia. Ganiere et al Reportaron el
más alto cephalexin MIC en una colección de aislados franceses con historia de tratamiento
desconocida a ser 2 g/ml; en nuestro estudio, aunque animales no fueron tratados con
antimicrobianos en un plazo de 30 días antes de la recogida de muestras, 13 de las 270 cepas
intermedias de S. presentadas MICs superiores a 2 g/ml. La mayoría (33 de 36) de los aislamientos
de Staphylococcus aureus se inhibieron a concentraciones de cefovecina de 2.0 g/ml; no S. aureus
fue aislado de gatos y perros en los Estados Unidos durante estos estudios. Tres de los 36
aislamientos de S. aureus fueron inhibido en su crecimiento a concentraciones de cefovecina de 8
g/ml, y estas cepas exhibieron MICs de 32 g/ml contra Cefadroxil y cefalexina. Curiosamente, los
tres aislamientos fueron recogidas durante la encuesta epidemiológica de 1999; aislamientos con
CIM elevada de cefovecina no se recogieron durante el estudios de eficacia sobre el terreno
realizados entre 2001 y 2003. La susceptibilidad a la meticilina no se llevó a cabo.

Cefovecina demostró buena actividad contra estafilococos coagulasenegativos (n 110). variedad de

patógenos (p. ej., Staphylococcus schleiferi, Staphylococcus xylosus, y Staphylococcus Felis), la gama
MIC consecuentemente era bastante amplia. Valores MIC90 para Europa y Estreptococos
hemolíticos norteamericanos contra la cefovecina - fueron 0.12 g/ml y 0.06 g/ml, respectivamente.
Los estreptococos Biberstein y los compañeros de trabajo, -hemolíticos de origen canino tienen un
80% de probabilidad de pertenecer a Lancefield Grupo G (Streptococcus canis), y por lo tanto
aislados europeos se identificaron a nivel de especie. Los aislados europeos de S. canis demostraron
ser altamente susceptibles a la cefovecina. Del mismo modo con las otras cefalosporinas probadas
aquí (cefhalexina y Cefadroxil), la cefovecina no era sensiblemente activa contra Enterococcus spp.
El ácido amxicilina-clavulánico, sin embargo, mostró una buena actividad in vitro contra los
aislamientos de Enterococcus spp. (MIC90 de 1/0.5 g/ml).

Cefovecina exhibió una amplia actividad contra una gama de patógenos Gramnegativos, incluyendo
P. multocida, E. coli, Proteus spp. (incluyendo P. mirabilis), Klebsiella spp. (incluyendo Klebsiella
neumonía), y Enterobacter spp. Al igual que otras cefalosporinas extendidas del espectro (e.g.,
cefotaxime, Ceftiofur, y ceftriaxone), la cefovecina no estaba activa in vitro contra Pseudomonas
aeruginosa. Todos P. multocida, Proteus spp. y Klebsiella spp. aislados exhibieron MICs de 2 g/ml
(sólo un Proteus sp. aislado exhibido un MIC de 8 g/ml). spp. 76.9% de todos los aislamientos de la
Unión Europea probados (n 39) fueron susceptibles a concentraciones de 2 g/ml; sin embargo, el
alto MIC90 observado (32 g/ml) indica una subpoblación resistente. Los EE.UU. aislados (n 20), sin
embargo, mostró un MIC90 de 2 g/ml, con una sola cepa que exhibe cefovecina de 2 g/ml. La
actividad in vitro de la cefovecina contra P. multocida fue excelente, con un valor MIC90 de 0.12
g/ml para los aislados de la Unión Europea y 0.06 g/ml para los aislados de EE.UU., en comparación
con Cefadroxil (MIC90 de 4 g/ml) y cefalexina (MIC90 de 2 g/ml). Se investigaron casi 500 cepas de
E. coli en todo el estudio. Se observó un valor MIC90 idéntico (1.0 g/ml) para la Unión Europea y
EE.UU. aislados. idéntica en toda Europa, con sólo aislados de Francia exhibiendo un valor MIC90
que era un paso de dilución más alto. El el crecimiento de nueve aislamientos se inhibió a
concentraciones superiores a 8 g/ml (o no en absoluto); estos aislamientos eran todos cross-
resistant contra cefalexina, Cefadroxil y ácido amoxicilina-clavulánico. Aplicación de los puntos de
interrupción clínicos publicados, las tasas de resistencia para amoxicilina-ácido clavulánico,
cefalexina, y Cefadroxil fueron 3.7%, 5.0%, y 5.6%, respectivamente. para amoxicilina-ácido
clavulánico y cefalexina son considerablemente inferior a las notificadas anteriormente . Sin
embargo, ha sido demostrado que los PRM de patógenos sometidos a diagnóstico los centros
tienden a ser más altos que los PRM de patógenos recogidos de casos no remitidos, que muy a
menudo no se presentan para pruebas de susceptibilidad antimicrobiana. Un total de 286 patógenos
anaeróbicos-crecientes (Prevotella spp., Porphyromonas spp. , Peptostreptococcus spp. ,
Fusobacterium spp. Bacteroides spp. , Clostridium spp. y Corynebacterium spp. ) fueron aislados y
probados en este estudio. cefovecina en general exhibió buena actividad in vitro contra patógenos
anaeróbicos. Sólo ocho aislamientos (2.8%) fueron inhibidos en su crecimiento en concentraciones
superiores a 4 g/ml. La combinación de amoxicilina y el ácido clavulánico exhibieron los MIC más
bajos contra patógenos anaeróbicos sin aislamientos resistentes, teniendo en cuenta el punto de
rotura CLSIapproved de R de 32/16 g/ml. Resumen de los datos MIC (MIC50, MIC90, y rango) para
cefovecina contra los tres patógenos más frecuentemente aislados (i.e., S. intermedius, E. coli, y P.
multocida) se presenta, por país de origen, en el cuadro 3.Los valores MIC90 para los y patógenos
de EE.UU. eran idénticos para los tres patógenos. Dentro de la colección europea, el MIC90 valora
entre los países eran casi idénticos para los tres patógenos. un paso de dilución más alto para E. coli
y S. intermedius que el Valores MIC90 de estas cepas recogidos de otros países.

Actividad bactericida. Cefovecina exhibió actividad bactericida contra la mayoría de los probados
gram-positivos y gram-negativos patógenos típicos de la clase -lactam (cefalosporina). La mayoría
de los aislamientos mostraron una relación MBC:MIC de 2 para cefovecina y cefalexina (cuadro 4).
4 para P. multocida y P. mirabilis en 26% (n 4) y 80 de los casos investigados, respectivamente.

Sin embargo, el Ceftiofur Los PRM de estos cuatro aislamientos de P. multocida eran
extremadamente bajos (0.002 g/ml) con los correspondientes MBC a 0.016 g/ml o 0.031 g/ml, lo
que hace irrelevantes las proporciones MIC:MBC. Las proporciones de patógenos anaeróbicos-
crecientes tendieron a ser más altas para los tres antimicrobianos que para los patógenos aeróbicos.
En conclusión, la cefovecina exhibió una excelente actividad in vitro a través de un amplio espectro
de bacterias, abarcando todos los patógenos principales con relevancia clínica para la piel común,
vías urinarias e infecciones periodontales en perros y gatos. Debido al perfil farmacocinético
distintivo de la cefovecina, una sola inyección proporciona un curso completo de 14-días de la
terapia. La molécula tiene el potencial de ser una adición única a la clase bien-establecida y segura
de cefalosporina.