4.0 Glicólisis.

4.1 Fermentación láctica.

4.2 Fermentación
alcohólica.
 Piruvato
Glicólisis deshidrogenasa (PDH)

D-glucosa 2 Piruvato 2 Acetil CoA

Ciclo de
Krebs
2 Lactato 2 CO2 4 CO2

La glicólisis se lleva a La reacción de la PDH y

cabo ausencia o ciclo de Krebs sólo se
presencia de O2. El llevan a cabo en presecnia
lactato se produce sólo de O2.
en ausencia de O2.
 Tipos de reacciones en la glicólisis

1. Cinasas

R-OH + ATP R-O-P- O- + ADP + H+

O
 Tipos de reacciones en la glicólisis
-O
2. Mutasas
-O P O

OH O O

R- C- CH2O – P –O- R- C- CH2OH

H O- H
Tipos de reacciones en la glicólisis
3. Isomerasas

O
CH2OH
C H
C O
H – C - OH
R
R
 Tipos de reacciones en la glicólisis

4. Deshidratasas

H C– C–

H – C – OH H–C + H 2O

R H
 Tipos de reacciones en la glicólisis

R 5. Aldolasa R

C O C O H O
C
HO – C – H HO – C – H +

H – C - OH R’
H

R’
Tipos de reacciones en la glicólisis

6. Fosforilación y oxidación
 Consumo y generación de ATP en la glicólisis

Reacción ATP
1 Glucosa → Glucosa 6-fosfato -1 Irreversible

3 Fructosa 6-fosfato → Fructosa 1,6-bifosfato -1 Irreversible

7 (2)1,3-bifosfoglicerato → (2) 3-fosfoglicerato +2 Reversible

10 (2) Fosfoenolpiruvato → (2) Piruvato +2 Irreversible

Total +2
 Ejercicio 1. Atajo de la glicólisis
Suponga que descubre una levadura mutante cuya
vía glicolítica es más corta debido a la presencia de
una nueva enzima que cataliza la siguiente
reacción:

Gliceraldehído 3-P 3-fosfoglicerato

¿Sería de beneficio para la célula acortar la vía

glicolítica de esta manera? Explique.
 Respuesta
No. Debido a que no habría producción de ATP

Vía glicolítica
Gliceraldehído 3-P + NAD+ + Pi → 1,3-bifosfoglicerato + NADH
+ H+
1,3-bifosfoglicerato + ADP → 3-Fosfoglicerato + ATP

Vía glicolítica levadura mutante

Gliceraldehído 3-P + NAD+ + Pi → 3-Fosfoglicerato + NADH +
H+
Ejercicio 2. Concentración celular de
glucosa.
La concentración de glucosa en el plasma sanguíneo
humano se mantiene en alrededor de 5 mM. La
concentración de glucosa libre dentro de un miocito
es mucho menor. ¿Por qué es tan baja la
concentración en la célula? ¿Qué ocurre con la
glucosa después de la entrada en la célula?

La glucosa se administra por vía intravenosa como

fuente de alimento en algunas situaciones clínicas.
Dado que la transformación de la glucosa a glucosa
6-fosfato consume ATP. ¿Por qué no se administra
glucosa 6-fosfato por vía intravenosa en lugar de
glucosa?
 Respuesta
En el miocito la concentración de glucosa libre es
menor porque la glucosa se fosforila tan pronto entra
a las células.

El grupo fosfato en la glucosa 6-fosfato está

completamente ionizado a pH 7.0, dándole a la
molécula una carga neta negativa.
Las membranas son generalmente impermeables a
las moléculas cargadas eléctricamente, la glucosa
6-fosfato no puede pasar del torrente sanguíneo al
interior de las células y, por lo tanto, no puede
entrar en la vía glicolítica y generar ATP.
(Por esta razón una vez fosforilada la glucosa no
puede salir de la célula)
 Isoenzimas de hexocinasa

-Las isoenzima son enzimas que catalizan

la misma reacción pero son codificadas
por genes diferentes.
-Son proteínas diferentes que catalizan la misma
Reacción.

La hexocinasa está presente en cuatro isoformas

(I, II, III y IV).
-La isoforma predominate en músculo es la II
aunque también está presente la I.
-La isoforma predominate en hígado es la
hexocinasa IV o glucocinasa.
La hexocinasa es una enzima regulatoria.
La glucosa 6 fosfato, producto de la
reacción, inhibe alostéricamente a
las isoformas I y II.
Diferencias entre las hexocinasas I-III y la IV

1.  La Km de la hexocinasa IV es 10 mM, la cual es

mayor que la concentración de glucosa en sangre.

2. La hexocinasa IV se inhibe por la unión

reversible de una proteína regulatoria específica del
hígado. Dicha unión aumenta por la presencia
del regulador alostérico fructosa 6 fosfato.

3. La hexocinasa IV no es inhibida por glucosa 6

fosfato.
Curvas de saturación de sustrato

1.0
Hexocinasa
Relative enzyme activity

Km= 0.1 mM

Glucocinasa (Hexocinasa D o IV)

Km= 10 mM

(mM)
 + Fructosa 6 fosfato

Enzima desfosforilada

Bajos niveles Fructosa 2,6

Fructosa 6 fosfato de glucosa en
sangre
+ bifosfato

Enzima fosforilada

- Fructosa 6 fosfato
Fosfofructocinasa 2/Fructosa 2,6 bifosfatasa
(Fructosa bifosfatasa 2)
 Baja [glucosa] en sangre
⇓
Aumento en la secreción de
glucagon
⇓
Aumento en la [AMPc]
⇓
Aumento en la fosforilación de Aumento en la
enzimas fosforilación de la
⇓ piruvato cinasa
Activación de FBPasa-2 e
inactivación de PFK-2
⇓ Menos activa
Disminución en la [Fructosa 2,6 BP]
⇓
Inhibición de la PFK-1
⇓
Disminución en la glicólisis
HÍGADO

MÚSCULO
Alanina aminotransferasa (ALT)
Piruvato + Glutamato à Alanina + Alfa-cetoglutarato
Destino del piruvato en condiciones
anaerobias: Fermentación

4.1 Fermentación láctica

4.2 Fermentación alcohólica

 CO2
Piruvato
Ácido pirúvico descarboxilasa
Lactato
deshidrogenasa
NADH + H+
Acetaldehído
NAD+ NADH + H+
Alcohol
NAD+ deshidrogenasa
OH

Ácido láctico Etanol

Fermentación láctica Fermentación alcohólica
Fermentación láctica
Ejercicio 3. Papel de lactato deshidrogenasa

La demanda de ATP en el tejido muscular aumenta

durante la actividad extenuante. En el músculo el
ATP se produce casi exclusivamente por la
fermentación láctica.
El ATP se forma en la fase de pago de la glicólisis
por medio de dos reacciones, promovidas por
fosfoglicerato cinasa y piruvato cinasa. Suponga
que el músculo esquelético se encuentra
desprovisto de lactato deshidrogenasa. ¿Se podría
generar ATP a un ritmo elevado por la glicólisis?
Explique.
 Respuesta
No. La lactato deshidrogenasa se requiere para
reciclar NAD+ del NADH formado durante la
oxidación del gilceraldehído 3-fosfato.

Piruvato + 2NADH + H+ Lactato + 2NAD +

Lactato deshidrogenasa
Fermentación alcohólica
q  Ecuación balanceada para la conversión de glucosa a piruvato
(Glicólisis)

Glucosa +2 NAD+ + 2 ADP + 2 Pi → 2 Piruvato + 2 NADH + 2 H+ + 2 ATP + 2 H2O

q  Ecuación balanceada para la conversión de glucosa a lactato

(Fermentación láctica)
Glucosa + 2 ADP + 2 Pi → 2 Lactato + 2 ATP + 2 H2O

q  Ecuación balanceada para la conversión de glucosa a etanol

(Fermentación alcohólica)
Glucosa + 2 ADP + 2 Pi → 2 Etanol + 2 CO2 + 2 ATP + 2 H2O
 GLUCÓGENO

Glucogénolisis Glucogénesis

GLUCOSA

Glucólisis Gluconeogénesis

LACTATO
Ejercicio 4. Envenenamiento por
arseniato
El arseniato, muy tóxico para algunos organismos, es
estructural y químicamente similar al fosfato inorgánico
(Pi), y muchas enzimas que requieren fosfato también
usan arseniato. Los compuestos orgánicos del
arseniato son menos estables que los compuestos de
fosfato análogos. Por ejemplo, acil arseniato se
descompone rápidamente por hidrólisis.
Ejercicio 4. Envenenamiento por
arsenato
Por otro lado, los acil fosfato, tales como 1,3-
bifosfoglicerato, son más estables y son sometidos
a transformaciones en la célula catalizadas por
enzimas.
a) Prediga el efecto de la reacción neta catalizada
por la gliceraldehído 3-fosfato deshidrogenasa si el
fosfato se remplazara por arseniato.

b) ¿Cuál sería la consecuencia en el organismo si

el arseniato fuese sustituido por fosfato?
 Respuesta
a)  El producto sería 3-fosfoglicerato
Gliceraldehído 3-P + NAD+ + Pi → 1,3-bifosfoglicerato + NADH + H+

Reemplazando el Pi por arseniato

Gliceraldehído 3-P + NAD+ + arseniato → 3-fosfoglicerato + NADH + H+

b) En presencia de arseniato no hay síntesis neta de ATP bajo

condiciones anaerobias.

Gliceraldehído 3-P + NAD+ + Pi → 1,3-bifosfoglicerato + NADH + H+

1,3-bifosfoglicerato + ADP → 3-Fosfoglicerato + ATP

 Ejercicio 5. Requisitos de fosfato en la
fermentación de etanol
En 1906, Harden y Young en una serie de estudios clásicos
sobre la fermentación de glucosa a etanol y CO2 por
extractos de levadura de cerveza, hicieron las siguientes
observaciones:
(1) El fosfato inorgánico es esencial para la fermentación,
cuando la fuente de fosfato se agotó, la fermentación cesó
antes de que se utilizara la glucosa.
(2) Durante la fermentación bajo estas condiciones se acumulan
etanol, CO2 y una hexosa bifosforilada.
(3) Cuando se sustituye fosfato por arseniato, no se acumula la
hexosa bifosforilada, pero la fermentación procede hasta que
toda la glucosa se convierte en etanol y CO2.
Ejercicio 5. Requisitos para el fosfato en
la fermentación del etanol

a) ¿Por qué cesa la fermentación cuando el abasto de

fosfato se agota?

La fermentación alcohólica requiere 2 mol de Pi

por mol de glucosa.

La enzima gliceraldehído 3-fosfato

deshidrogenasa (GA3PDH) es la que requiere el
Pi.
 Ejercicio 5. Requisitos para el fosfato en
la fermentación del etanol
b) ¿Por qué se acumula etanol y CO2?
¿La conversión de piruvato a etanol y CO2 es esencial?
¿Por qué?
Identifica la hexosa bifosforilada que se acumula ¿Por qué
se acumula?
El etanol es el producto reducido formado durante la
reoxidación de NADH a NAD+ y CO2, es el biproducto de la
conversión de piruvato a etanol.
Si, el piruvato debe convertirse a etanol, para producir
continuamente NAD+ para la oxidación de gliceraldehído 3-
fosfato (GA3P).
La hexosa que se acumula es fructosa 1,6-bifosfato. Es el
precursor de GA3PDH.
Ejercicio 5. Requisitos para el fosfato
en la fermentación del etanol
c) ¿Por qué la sustitución de arseniato por fosfato
previno la acumulación de hexosa bifosfato y
permitió la fermentación de etanol a CO2
completarse?
El arseniato remplaza al Pi en la reacción de la
gliceraldehído 3-fostafo deshidrogenasa para formar acil
arseniato, el cual se hidroliza espontáneamente. Esto
previene la formación de ATP, pero el 3-fosfoglicerato
continua por la vía.
 Ejercicio 6. Regulación de la PFK-1
A una concentración dada de fructosa 6-
fosfato, la actividad de la PFK-1
incrementa al aumentar la
concentración de ATP, pero se alcanza
un punto en el cual el aumento de la
concentración de ATP inhibe la enzima.

a)  Explique cómo el ATP puede ser

tanto un sustrato y un inhibidor de la
PFK-1. ¿Cómo se regula la enzima
por ATP?
b)  ¿De qué manera se regula la
glicólisis por los niveles de ATP?
c)  La inhibición de la PFK-1 por el ATP
disminuye cuando la concentración
de ADP es alta, como se presenta
en la figura. ¿Cómo se explica esta
observación?
 Respuesta
a)  La enzima tiene 2 sitios de unión para el ATP: el
catalítico y el regulatorio. La unión del ATP al
sitio regulatorio inhibe la PFK-1 mediante la
reducción de Vmax o aumentando Km para el ATP
en el sitio catalítico.
b)  El flujo de la vía glicolítica se reduce cuando la
[ATP] es alta.
c)  La figura hace evidente que el incremento de la
[ADP] suprime la inhibición por ATP. Porque el
suministro del nucleótido de adenina es
constante, el consumo de ATP conduce al
incremento de la [ADP]. Los datos indican que la
actividad de la PFK-1 podría estar regulada por
la relación [ATP]/[ADP].