Espectrofotometría

Técnica que consiste en medir la intensidad de un haz luminoso cuando atraviesa una solución.

Aplicaciones científicas:

● Determinar la cantidad de concentración en una solución de algún compuesto

● Ayudar en la determinación de estructuras moleculares
● Identificar unidades estructurales específicas, ya que estas tienen distintos tipos de
absorbancia
● Determinar constantes de disociación de indicadores ácido-base

Espectrofotómetro

Instrumento que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución que
contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la
misma sustancia.

Transmitancia y absorbancia

La transmitancia (T) de una sustancia en solución es la relación entre la cantidad de luz

transmitida que llega al detector una vez que ha atravesado la muestra y la cantidad de luz que
incidió sobre ella.
La absorbancia (A) indica la cantidad de luz absorbida por la muestra.

Ley de Lambert-Beer

Relación entre absorbancia de luz monocromática y concentración de un cromóforo en

solución:

A = log I/Io = ε . c . L

A: Absorbancia medida

Io: Intensidad de luz incidente a una determinada longitud de onda

I: Intensidad de transmisión

L: longitud de la celda

c: Concentración de las especies absorbentes

ε: Absortividad molar o coeficiente de extinción, tiene como unidades 1/M * cm o, a menudo,

U/M * cm.

La absorbancia de una solución depende:

- De su concentración
- Distancia que recorre la luz por la solución, a igual concentración
- De ε que es especifica de cada cromóforo.