FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA - UNSLG

PRACTICA
DETECCIÓN DE GONADOTROPINA CORIÓNICA HUMANA COMO
BASE DE LA PRUEBA DE EMBARAZO
OBJETIVOS
• Analizar los fundamentos de la prueba inmunológica de embarazo.
• Interpretar la prueba inmunológica de embarazo y analizar sus
posibles fallas.
• Analizar el perfil hormonal de la mujer embarazada, premenopáusica
y menopáusica.

Revisión de conceptos
En el ciclo menstrual, el desprendimiento y la expulsión del endometrio
(menstruación) ocurren 14 días después de la ovulación como resultado de
la involución del cuerpo amarillo productor de estrógenos y progesterona.
Sin embargo, cuando el óvulo es fecundado, el blastocisto invade el
endometrio mediante la formación de células trofoblásticas sincitiales, que
secretan la hormona gonadotropina coriónica humana (GCH).
La GCH es una hormona que impide la involución del cuerpo amarillo, por lo
que éste continúa secretando estrógeno y progesterona que mantienen las
características adecuadas del endometrio para que el embarazo continúe. La
GCH es detectable desde ocho días después de la fecundación, justo cuando
ocurre la implantación en el endometrio, y duplica su concentración cada
1.3 a 2 días, de manera que cuando se advierte la falta del primer período
menstrual, su concentración es de unas 100 mUI/ml, cantidad que sigue
aumentando hasta alcanzar su valor máximo de 200 000 mUI/ml después de casi
10 a 12 semanas. Por influencia de la GCH, el cuerpo amarillo alcanza unas
dos veces su tamaño inicial en aproximadamente un mes después del inicio
del embarazo. Conforme la producción de estrógenos y progesterona por la
placenta aumenta durante el segundo trimestre, los niveles de GCH descienden
y alcanzan un valor relativamente bajo a las 16 a 20 semanas, que se
mantiene por el resto del embarazo. La aparición temprana de la GCH después
de la fecundación y sus niveles elevados al inicio de la gestación la hacen
un excelente indicador para la detección temprana del embarazo. Sin embargo,
es importante recordar que el embarazo no es la única situación en que se
presentan concentraciones elevadas de GCH; tumores como la mola
hidatidiforme y el coriocarcinoma también producen niveles de GCH
comparables a los observados en el embarazo, por lo que estas enfermedades
deben ser excluidas antes de que un resultado positivo de GCH se considere
diagnóstico de embarazo.
Desde el punto de vista químico, la GCH es una glicoproteína formada por
dos subunidades, una α y una β. La subunidad α no es específica y es igual
a la que presentan las hormonas luteinizante (LH), folículo estimulante
(FSH) y estimulante del tiroides (TSH). La subunidad β es específica de la
GCH, por lo que la detección de esta subunidad es el fundamento de la
medición de la GCH.

Realización de una prueba inmunitaria de embarazo

Las pruebas inmunitarias de embarazo se basan en la detección de la fracción

de la GCH mediante anticuerpos monoclonales contra esta subunidad, los
cuales al reaccionar con la GCH originan un precipitado que se manifiesta
de diversas formas, según el producto comercial utilizado. Con “……………..”,
que es el producto comercial que se utiliza en esta práctica, se proporciona

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una tira reactiva en un sobre

herméticamente sellado. La
tira contiene una membrana
cubierta con un anticuerpo
policlonal anti-GCH y una
almohadilla que contiene el
anticuerpo monoclonal anti-
GCH de conjugado Colorado en
la matriz de la proteína.

El material para realizar la determinación de GCH puede consistir en orina

o suero; lo más sencillo es utilizar orina. En este caso, la muestra puede
tomarse a cualquier hora del día, aunque se recomienda que sea la primera
orina de la mañana, ya que tiene mayor concentración de la hormona. La
muestra de orina se coloca en un recipiente de plástico o vidrio, limpio y
seco, sin restos de ningún conservador. Puede conservarse en refrigeración
a temperaturas entre 2 y 8°C y almacenarse hasta por 72 h antes de la
prueba. En caso de ser refrigerada, debe dejarse que alcance la temperatura
ambiente antes de practicar la prueba.
En caso de muestras de suero no se requiere ninguna preparación especial.
También puede almacenarse la muestra a temperatura entre 2 y 8°C, por no
más de 72 h, o congelarse por no más de tres meses. No se recomienda
congelar y descongelar repetidamente las muestras. En las de suero muy
hemolizadas no deberá practicarse esta prueba. Para realizar esta práctica
debe contarse con una muestra de orina de una mujer que se halle en el
primer trimestre del embarazo, además de una muestra de orina de otra
persona que se sabe no se encuentra embarazada; esto es para observar la
diferencia entre una prueba positiva y una negativa.

PROCEDIMIENTO
Realice la prueba de la siguiente manera:

1. Saque la tira reactiva de la bolsa sellada.

2. Etiquete la muestra con el No. 1 para la orina de mujer embarazada.
3. Sumerja la tira en la muestra de orina con las flechas apuntando
hacia la muestra, sin pasar de la línea que está por debajo de las
flechas.
4. Mantenga la tira sumergida por 20 segundos.
5. Retire la tira de la muestra y colóquela en una superficie limpia y
no absorbente.
6. Espere 5 minutos y lea el resultado. Si pasan más de 5 minutos la
lectura no es válida.
7. Saque otra tira reactiva de la bolsa sellada.
8. Etiquete la muestra No. 2 para orina de mujer no embarazada.
9. Realice los pasos 3 a 6.

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Según la concentración de la GCH, en sólo 40 segundos puede observarse un

resultado positivo. Sin embargo, para confirmar un resultado negativo es
necesario esperar 5 minutos. Después de 5 minutos no se deben interpretar
resultados, y para cada muestra o control deben emplearse un gotero y un
cartucho desechables diferentes.

Interpretación de los resultados

1. Líneas rosadas tanto en la zona de control como en la prueba indican

un resultado positivo.
2. Una línea rosada en la zona de control indica que la prueba es
negativa.
3. Ausencia de líneas invalida la prueba y ésta se debe repetir.

Limitaciones de la prueba

 La prueba es inespecífica para el embarazo, pues como se mencionó

antes, además del embarazo existen otras alteraciones que dan origen
a niveles elevados de GCH, como la mola hidatidiforme y el
coriocarcinoma.
 Si la muestra de orina se encuentra muy diluida, con densidad relativa
baja, es probable que no contenga niveles detectables de GCH. Si
existe sospecha de embarazo debe usarse la orina de la primera micción
del día para asegurarse que se encuentra una concentración alta de
GCH.
 Como ocurre con cualquier prueba diagnóstica, el diagnóstico clínico
definitivo no debe basarse en los resultados de una sola prueba, sino
en la evaluación global por el médico de todos los hallazgos clínicos
y de laboratorio.

INFORME DE LABORATORIO

1. Explique los resultados obtenidos en la prueba positiva y en la

negativa.

2. Explique por qué la prueba de embarazo se basa en la detección de

la fracción β de la GCH y no de la fracción α.

3. La prueba efectuada en esta práctica para la detección de GCH es

cualitativa. ¿Qué método se utilizará para hacer una determinación
cuantitativa?

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4. Describa el perfil hormonal de la mujer embarazada:

HORMONA ELEVADA DISMINUIDA

Estrógenos
Progesterona
LH
FSH
GnRH
GCH

5. Identifique el sitio donde se sintetiza la mayor cantidad de

estriol durante el embarazo y explique para qué sirve medirla.

6. Describa el perfil hormonal de la mujer premenopáusica en fase

folicular antes de la ovulación:

HORMONA ELEVADA DISMINUIDA

Estrógenos
Progesterona
LH
FSH

7. Describa el perfil hormonal de la mujer premenopáusica en el

momento de la ovulación:

HORMONA ELEVADA DISMINUIDA

Estrógenos
Progesterona
LH
FSH

8. Describa el perfil hormonal de la mujer posmenopáusica:

HORMONA ELEVADA DISMINUIDA

Estrógenos
Progesterona
LH
FSH

9. ¿Cuál es el principal estrógeno presente en la mujer premenopáusica

y dónde se sintetiza?

10. ¿Cuál es el principal estrógeno presente en la mujer posmenopáusica

y dónde se sintetiza?

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PRACTICA
DETERMINACION DE GLUCEMIA (GLUCOSA EN SANGRE)

INTRODUCCION
Luego de una comida rica en carbohidratos, la glucosa que pasa a la
sangre origina secreción rápida de insulina; esta hormona a su vez
estimula la captación inmediata de glucosa por las células para su
empleo y almacenamiento en hígado, tejido adiposo y otros tejidos.
Durante la mayor parte del día, para obtener energía el tejido
muscular depende no sólo de la glucosa, sino también de los ácidos
grasos. La principal razón de lo anterior es que las membranas
celulares del músculo en reposo son casi impermeables a la glucosa,
excepto cuando la fibra muscular es estimulada por la insulina, y
entre las comidas se secreta muy poca cantidad de esta hormona para
promover la entrada de cantidades importantes de glucosa en estas
células. Sin embargo, en dos condiciones fisiológicas los músculos
utilizan gran cantidad de glucosa para obtener energía. Una de ellas
es el ejercicio intenso; en este caso no se requiere insulina, ya
que las fibras musculares aumentan el número de transportadores en
la membrana celular, los cuales no son regulados por la insulina. La
segunda situación en que el músculo utiliza grandes cantidades de
glucosa es algunas horas después de una comida, cuando la glucemia
es alta y el páncreas secreta insulina adicional que favorece el
rápido transporte de glucosa al interior de las células musculares
por medio de un aumento de los transportadores sensibles a la
insulina. Esto hace que durante ese lapso la célula muscular utilice
carbohidratos en vez de ácidos grasos como fuente de energía, ya que
la liberación de éstos a partir del tejido adiposo es impedida de
manera significativa por la insulina, que inhibe a la lipasa sensible
a hormona en los adipocitos.
El mecanismo mediante el que la insulina aumenta la entrada de
glucosa a la célula consiste en aumento de los transportadores de
glucosa en la membrana celular. Éstos reciben el nombre de GLUT y a
la fecha se han identificado siete tipos diferentes. Los
transportadores GLUT 4 son los sensibles a la insulina y se
encuentran en tejido muscular, adiposo y otros tejidos. Los otros
transportadores no son regulados por la insulina, como el GLUT 2 que
se encuentra en las células β del páncreas y el GLUT 1 que se halla
en las neuronas. Existe además un tipo de transportadores GLUT 4 en
el músculo que no es sensible a la insulina y que interviene en el
aumento de la entrada de glucosa a la célula durante el ejercicio.
Si los músculos no se ejercitan durante el período que sigue a una
comida y no obstante se transporta glucosa en abundancia al interior
de las células musculares, gran parte de esta glucosa se almacena en

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forma de glucógeno muscular en vez de utilizarse como fuente de

energía. Este glucógeno almacenado se emplea después para
proporcionar energía al músculo. Una de las funciones más importantes
de la insulina consiste en hacer que la glucosa absorbida después de
una comida se almacene casi de inmediato en el hígado en forma de
glucógeno. Entre comidas, cuando no se dispone de insulina y la
concentración de glucosa en sangre (glucemia) comienza a disminuir,
el glucógeno hepático libera glucosa hacia la sangre periférica y
ello evita que la glucemia disminuya de modo importante.

VALOR REFERENCIAL EN ADULTO: 70 – 110 mg/dL

OBJETIVOS

 Comprender el metabolismo de la glucosa en sujetos sanos en

diferentes condiciones.
 Corroborar los cambios de glucosa e insulina durante la
ingesta de alimentos.
 Interpretar y relacionar las mismas condiciones en ayuno.

MATERIALES Y EQUIPOS

 Lancetas estériles.
 Torundas de algodón con alcohol.
 Glucómetro Accu-Check® Performa Nano
 Tiras reactivas Accu-Check® Performa Nano (CODIGO 222)

PROCEDIMIENTO

A. Se seleccionara a un alumno (a) por cada mesa de trabajo al

cual se le determinará la concentración de glucosa en sangre
total por medio de un glucómetro en los siguientes tiempos:
 0 minutos (antes de ingerir la carga de los diferentes
monosacáridos).
 30 minutos, después de ingerir alimentos.

B. Para realizar la determinación de glucosa en sangre total

seguir los siguientes pasos:

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DIABETES MELLITUS

La diabetes mellitus es la enfermedad endocrina más frecuente e

incluye un grupo de trastornos metabólicos, caracterizados por
hiperglucemia secundaria a alteraciones en la producción de
insulina, en su efecto, o en ambas. Los procesos fisiopatológicos
implicados en la diabetes mellitus van desde destrucción
autoinmunitaria de las células β del páncreas, con la consecuente
disminución en la producción de insulina, hasta anormalidades

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manifestadas por resistencia al efecto de la insulina. Por lo tanto,

las anormalidades en el metabolismo de carbohidratos, lípidos y
proteínas son resultado e secreción inadecuada de insulina, de
respuesta inadecuada a la insulina, o de ambas, en los tejidos
periféricos, en uno o varios puntos de la compleja vía metabólica en
la que la hormona ejerce su efecto. La alteración en la secreción de
insulina y el defecto en su acción periférica con frecuencia
coexisten en el mismo paciente y no está claro cuál anormalidad es
la causa primaria de la enfermedad.
La diabetes mellitus se clasifica en dos tipos:

• Diabetes mellitus tipo 1, cuya causa es la falta absoluta de

producción de insulina.

• Diabetes mellitus tipo 2, la más frecuente, y consiste en una

combinación de resistencia periférica a la acción de la insulina e
inadecuada respuesta secretoria de compensación.

DIAGNOSTICO DE DIABETES MELLITUS

La diabetes mellitus puede ser diagnosticada en cualquiera de las
siguientes tres formas:

• Síntomas de diabetes mellitus más medición casual de glucosa

plasmática ≥ 200 mg/dl (11.1 mmol/L). Se entiende por medición casual
la medición de glucosa plasmática que se realiza a cualquier hora
del día, sin tomar en cuenta el tiempo transcurrido desde la
ingestión del último alimento. Los síntomas clásicos de diabetes
mellitus incluyen polidipsia, poliuria e inexplicable pérdida de
peso.

• Glucosa plasmática en ayuno ≥ 126 mg/dl (7.0 mmol/L). Cabe la

aclaración de que se entiende por ayuno la falta de ingesta calórica
por un mínimo de ocho horas.

• Un valor en la muestra de dos horas de la curva de tolerancia a

la glucosa oral (CTG) ≥ 200 mg/dl. La CTG debe realizarse según
las indicaciones de la OMS, utilizando una carga de glucosa
equivalente a 75 g de glucosa anhidra disuelta en agua.

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INFORME PRÁCTICO

RESULTADOS:

ALUMNO BASAL 30 min. Después

INTERPRETACION DE RESULTADOS:

CUESTIONARIO:

1. ¿Qué mecanismo de transporte utiliza la glucosa para entrar en

las células?

2. Explique los efectos que produce la insulina en el hígado.

3. Los signos característicos del paciente diabético son

polidipsia, polifagia y poliuria. Explique el mecanismo que
los produce.

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