Revista de Ciências

Farmacêuticas Estabilidade físico-química de fitocosméticos

Básica e Aplicada Rev. Ciênc. Farm. Básica Apl., v. 29, n.1, p. 81-96, 2008
Journal of Basic and Applied Pharmaceutical Sciences ISSN 1808-4532

Protocolo para ensaios físico-químicos de

estabilidade de fitocosméticos
Isaac, V.L.B.1*; Cefali L.C.1; Chiari, B.G.1; Oliveira, C.C.L.G.2; Salgado H.R.N.2; Corrêa, M.A.1
1Laboratório de Cosmetologia, LaCos, Departamento de Fármacos e Medicamentos, Faculdade de Ciências Farmacêuticas,
Universidade Estadual Paulista, UNESP, Araraquara, SP, Brasil.
2Laboratório de Controle Biológico de Qualidade, Departamento de Fármacos e Medicamentos,
Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade Estadual Paulista, UNESP, Araraquara, SP, Brasil.

Recebido 12/05/2008 - Aceito 24/07/2008

RESUMO seja um extrato, óleo ou óleo essencial, cuja ação define a

A crescente demanda por produtos cosméticos estáveis,
seguros e eficazes tem exigido da comunidade científica
estudos cada vez mais complexos e utilização de técnicas
mais eficientes para determinação da estabilidade dos
produtos. O uso de ativos da biodiversidade brasileira
levou ao desenvolvimento de inúmeros produtos, nas mais
diferentes formas cosméticas, o que dificulta, ainda mais,
a padronização de protocolos experimentais para atestar
a estabilidade das preparações cosméticas. Embora não
exista no Brasil um protocolo que padronize os ensaios
a serem realizados para se determinar a estabilidade
dos produtos, vários estudos foram realizados nos
meios acadêmicos para determinação da estabilidade
de matérias-primas específicas. As características
reológicas são propriedades importantes a serem
consideradas na fabricação, estocagem e aplicação de
produtos de uso tópico. Além de ensaios comumente
empregados, a determinação do comportamento
reológico da formulação auxilia na avaliação da
natureza físico-química do veículo, de tal forma que
torna possível detectar sinais precoces de instabilidade
física, possibilitando o controle de qualidade dos
constituintes, das formulações teste e dos produtos
finais. A análise térmica também é usada para auxiliar
o estudo da estabilidade de produtos cosméticos e, de
modo geral, a calorimetria exploratória diferencial para
orientar o desenvolvimento de novos produtos. Outras
ferramentas, como a fluorimetria e a granulometria a
laser podem auxiliar o estudo e o desenvolvimento de
sistemas, emulsionados ou não. O objetivo deste estudo
é o desenvolvimento de protocolo para o estudo da
estabilidade físico-química de fitocosméticos - sistemas
contendo ativos da biodiversidade brasileira.
Palavras-chave: biodiversidade brasileira; estabilidade
físico-química; fitocosméticos.
INTRODUÇÃO
Fitocosmético pode ser definido como o
cosmético que contém ativo natural, de origem vegetal,
atividade do produto.
Um fitocosmético deve passar por todas as
etapas de pesquisa: proposição, criação e desenvolvimento,
incluindo os testes de estabilidade, para assegurar a
atividade durante toda sua vida útil.
A estabilidade é um parâmetro de validação muito
pouco descrita em normas de validação de metodologia
analítica (Vilegas & Cardoso, 2007), mas necessária para
assegurar a qualidade do fitocosmético, desde a fabricação
até a expiração do prazo de validade.
Variáveis relacionadas à formulação, ao
processo de fabricação, ao material de acondicionamento
e às condições ambientais e de transporte, assim como
cada componente da formulação seja ativo ou não, podem
influenciar na estabilidade do produto.
As alterações podem ser extrínsecas, ou seja,
relacionadas a fatores externos aos quais o produto está
exposto (tempo, temperatura, luz e oxigênio, umidade,
material de acondicionamento, microrganismos e vibração)
e intrínsecas, relacionadas à natureza das formulações e,
sobretudo, à interação de seus ingredientes entre si e ou com
o material de acondicionamento: incompatibilidade física e
incompatibilidade química, como, por exemplo, pH, reações
de óxido-redução, reações de hidrólise, interação entre
ingredientes da formulação e interação entre ingredientes
da formulação e o material de acondicionamento.
Técnicas de análise térmica diferencial,
calorimetria exploratória diferencial e termogravimetria
podem ser usadas na compreensão de mecanismos físico-
químicos relativos a processos de decomposição térmica e
no desenvolvimento de compostos.
A espectrometria de fluorescência ou também
chamada espectrofluorimetria é o método espectroscópico
óptico mais extensivamente usado em meios analíticos e
em investigações científicas, devido ao elevado nível de
sensibilidade e ao amplo intervalo dinâmico que pode ser
aplicado. Além disso, o instrumento para a maioria dos
propósitos pode ser adquirido por um custo não muito
elevado (Silberman, 2006).
A granulometria a laser permite determinar o
tamanho da partícula por difração de laser e pode ser usada

*Autor correspondente: Vera Lucia Borges Isaac - Departamento de

Fármacos e Medicamentos - Faculdade de Ciências Farmacêuticas -
Universidade Estadual Paulista, UNESP - Rodovia Araraquara-Jaú, km 1 -
CEP: 14801-902 - Araraquara – SP, Brasil. - Telefone: (16) 3301-6979
e-mail: isaacvlb@fcfar.unesp.br 81
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos
para análises que não destroem a amostra, seja ela seca ou
úmida, com partículas de 0,02 a 2.000 micra (Kippax, 2007).
A reologia, na última década, adquiriu posição
permanente nos testes de estabilidade, uma vez que as
características reológicas são propriedades importantes a
serem consideradas na fabricação, estocagem e aplicação
de produtos de uso tópico, interferindo na forma de
utilização do produto, na adesão ao tratamento e, também,
na aceitação do produto pelo consumidor.
A caracterização reológica completa de um sistema
pode, então, ser útil desde o desenvolvimento do produto
cosmético até a determinação do prazo de validade,
incluindo influência em testes sensoriais, que auxiliam
verificar a aceitação do consumidor.
Os extratos vegetais podem ser incorporados em
diferentes preparações cosméticas e, dependendo da
classe química de seus ativos, podem ser responsáveis
pela atividade do produto. Podem ou não alterar a forma
cosmética e o comportamento reológico da preparação
conforme estudos realizados por Archondo (2003).
Xampus manipulados com extrato de pitanga
tiverem suas viscosidades alteradas, dependendo do veículo
extrator, mas não da quantidade de extrato adicionado, como
atestam resultados preliminares em estudos realizados pelo
nosso grupo de pesquisa.
Extratos são preparações concentradas, de
consistência líquida, sólida ou intermediária, obtidos a partir
de material vegetal ou animal, (Farmacopéia Brasileira,
2001), usando como solvente etanol, água ou mistura entre
eles ou, ainda, outro líquido extrator que seja apropriado ao
uso (Schulz et al., 2002). Após a extração, o solvente pode
ser evaporado em evaporador rotativo e o resíduo liofilizado.
Para obtenção do extrato glicólico, o mais usualmente
empregado em preparações cosméticas, o material deve ser
suspenso em propilenoglicol, veículo que apresenta grande
compatibilidade com as formulações farmacêuticas usadas
como veículos e excipientes cosméticos.
Padronizar um extrato significa estabelecer a
relação ideal entre droga vegetal x extrato e a relação
extrato x marcador. Muitos extratos são comercializados
com o objetivo de preparar fitocosméticos sem ao menos
apresentar a concentração dos princípios ativos. A utilização
de extratos padronizados pode assegurar a eficácia de um
fitocosmético, garantindo segurança e qualidade.
Maceração é o processo no qual o material a ser
extraído é reduzido em partículas de tamanho adequado e
mantido em contacto com o líquido extrator por tempo a
ser determinado experimentalmente, para que a extração
seja completada. Esse contacto é realizado em recipiente
fechado e, ao final do processo, o extrato é separado do
resíduo, o qual deve ser prensado e o líquido juntado ao
extrato (Farmacopéia Brasileira, 2001).
Percolação é o processo no qual o material a ser
extraído é reduzido em partículas de tamanho adequado e
mantido em contato com o líquido extrator por tempo não
inferior a uma hora. Em percolador, o material deve ser
coberto com o líquido extrator e após o tempo necessário à
82
maceração, deverá ser percolado lentamente, tendo cuidado
para que sempre permaneça coberto pelo solvente. A
velocidade, o tempo e a temperatura de percolação deverão
ser determinados experimentalmente, para que a extração
seja completada (Farmacopéia Brasileira, 2001).
Turboextração é um processo não farmacopêico
que consiste em dois processos simultâneos: rasura e
esgotamento do material. Isto ocorre, pois o material,
ainda na sua forma íntegra, é colocado em um recipiente
que possui três facas em seu fundo, que realizam um
movimento rotacional, semelhante a um liquidificador, o
que leva à rasura do material e permite o contato com o
líquido extrator de forma cinética.
A liofilização consiste em retirar o solvente do
material a ser estudado, o qual é seco por sublimação de
água à pressão inferior à do ponto triplo, em misturas
solidificadas ou congeladas, sem sofrer desnaturação. As
características essenciais da amostra são mantidas e, a
simples adição de água, é suficiente para sua reconstituição
(Pombeiro, 1980).
O estudo da estabilidade fornece indicações sobre
o comportamento do produto, em determinado intervalo
de tempo, frente a condições ambientais a que possa ser
submetido, desde a fabricação até o término da validade
(Brasil, 2004).
Para os testes de estabilidade, as condições de
armazenagem mais comuns são: temperatura (elevada, do
ambiente e baixa), exposição à luz e ciclos de congelamento
e de descongelamento. A temperatura ambiente deverá
ser monitorada, sendo aceita variação de até ± 2 ºC e as
temperaturas elevadas devem obedecer aos limites mais
freqüentemente praticados, em estufas a 37, 40, 45 e 50
ºC, sendo aceita variação de até ± 2 ºC. Os limites de
temperaturas baixas mais utilizados são em geladeira a 5
ºC e em freezer de –5 a –10 ºC.
Segundo o Guideline on Stability Testing: Stability
Testing of New Drug Substances And Products (2008),
preconizado pela European Medicines Agency, os ensaios
avaliam as amostras submetidas a diferentes temperaturas
(25 ºC ou 30 ºC, 40 ºC, 5 ºC e –20 ºC) em um determinado
período de tempo. Para temperaturas de 25 ou 30 ºC,
durante o teste em longo prazo, as amostras devem ser
estocadas a uma temperatura de 25 ºC ± 2 ºC a 60% de
umidade relativa ± 5% ou a 30 ºC ± 2ºC a 65% de umidade
relativa ± 5% durante 12 meses. Já no teste acelerado, as
amostras deverão ser armazenadas à temperatura de 40 ºC
± 2 ºC a 75% de umidade relativa ± 5% durante seis meses.
Durante o teste em longo prazo no refrigerador, as amostras
devem ser submetidas à temperatura de 5 ºC ± 3 ºC durante
12 meses, e no teste acelerado, submetidas à temperatura
de 25 ºC ± 2 ºC a 60% de umidade relativa ± 5% durante
seis meses. As amostras também devem ser estocadas no
freezer a uma temperatura de –20 ºC ± 5 ºC, durante 12
meses, para avaliar sua estabilidade.
A exposição do produto à radiação luminosa pode
alterar a cor, levando à degradação de ingredientes da
formulação. Por isso, os estudos de avaliação da estabilidade
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos
frente à exposição luminosa, devem ocorrer frente à luz
solar, captada através de vitrines especiais ou em ambientes
cujas lâmpadas apresentem espectro de emissão semelhante
ao do sol, como as lâmpadas de xenônio.
Os ciclos de congelamento e descongelamento
alternam 24 horas em temperaturas elevadas e 24 horas
em temperaturas baixas, sendo recomendados os seguintes
conjuntos: ambiente e –5 ± 2 ºC; 40 ± 2 ºC e 4 ± 2 ºC; 45 ±
2 ºC e –5 ± 2 ºC; 50 ± 2 ºC; –5 ± 2 ºC (Brasil, 2004).
Os parâmetros a serem avaliados são definidos pelo
pesquisador e dependerão não só das características do
produto, como também dos componentes da formulação e,
principalmente, da forma cosmética. Podem ser classificados
em organolépticos, físico-químicos e microbiológicos. Um
cuidado a ser tomado é que os ensaios realizados devem,
de fato, representar o conjunto de parâmetros que avaliem
a estabilidade do produto.
A força da gravidade atua sobre os produtos
fazendo com que as partículas se movam no seu
interior. A centrifugação promove estresse na amostra,
simulando aumento na força da gravidade, aumentando a
mobilidade das partículas e antecipando possíveis sinais
de instabilidade, como precipitação, separação de fases,
formação de sedimento compacto e coalescência (Brasil,
2007). A ANVISA recomenda que, antes do início dos testes
de estabilidade, o produto seja submetido à centrifugação,
durante 30 minutos, a uma velocidade de 3.000 rpm com
três leituras para cada amostra. A ocorrência de instabilidade
é indicativa da necessidade de reformulação. As amostras
consideradas, por este ensaio, inicialmente estáveis, podem
ser submetidas ao Teste de Estabilidade Preliminar.
O objetivo desta pesquisa foi estabelecer protocolo
para o estudo da estabilidade físico-química de formas
cosméticas contendo ativos da biodiversidade brasileira
para uso cosmético, os fitocosméticos.
MATERIAL E MÉTODOS
Os ensaios de estabilidade propostos estão descritos
de maneira geral e devem ser empregados adequadamente
ao estudo da estabilidade de cada forma cosmética. Muitos
foram realizados em nosso laboratório e outros foram
retirados da literatura, na tentativa de mostrar sua importância
na avaliação da estabilidade de fitocosméticos.
O material empregado em ensaios de estabilidade
foi produzido e/ou manipulado em um único lote, usando
as mesmas matérias-primas, para não haver possibilidade
de interferência na estabilidade do sistema se as matérias-
primas forem de diversos fornecedores e apresentarem
prazos de validade diferentes. Sendo assim, para os ensaios
serem realizados em triplicata, foram preparados em três
lotes. Em estudos de estabilidade deve ser assegurada a
quantidade de material necessária para produzir amostra
suficiente para a realização de todos os ensaios.
Os fitocosméticos estudados foram identificados
quantitativamente para verificação da concentração de
ativo na forma cosmética, utilizando espectrofotômetro
UV/VIS, com leitura em comprimento de onda de máxima
absorção ou em cromatógrafo líquido de alta eficiência. As
amostras foram dissolvidas em sistema solvente adequado
e submetidas à leitura para determinação da massa inicial
do ativo. A comparação da concentração inicial com a
concentração residual, determinada nas leituras durante todo
o experimento, possibilitam a verificação da estabilidade
do ativo. As formas cosméticas foram acondicionadas
nas embalagens adequadas para realização do estudo da
estabilidade.
Metodologia
Estabilidade Preliminar
O teste de estabilidade preliminar consiste em
submeter a amostra a condições extremas de temperatura
e realizar os ensaios em relação aos vários parâmetros de
acordo com a forma cosmética estudada.
O teste de estabilidade preliminar tem a duração
de 15 dias, sendo a primeira avaliação realizada no tempo
um (t1), que corresponde a 24 após a manipulação e/ou
produção, para que o produto possa adquirir viscosidade e
consistência final, após sua maturação. As outras avaliações
devem ser realizadas diariamente, durante toda a duração
do teste. Alguns dos parâmetros a serem analisados para
cada amostra, são: aspecto, cor, odor, pH, viscosidade,
densidade, condutividade elétrica e devem ser apresentados
como a média aritmética dos valores obtidos dos testes
realizados em triplicata.
Estabilidade Acelerada
Este teste tem como objetivo fornecer dados
para prever a estabilidade do produto, tempo de vida
útil e compatibilidade da formulação com o material de
acondicionamento (Brasil, 2004). Emprega condições
não extremas e serve como auxiliar na determinação da
estabilidade da formulação. É um estudo preditivo e pode
ser usado para estimar o prazo de validade mas pode ser
empregado, ainda, quando houver mudanças na composição
ou no processo de fabricação, na embalagem primária ou
para validar equipamentos e, também, no caso de fabricação
terceirizada As amostras devem ser acondicionadas
em frascos de vidro neutro ou na embalagem a serem
acondicionadas como produto final, o que pode antecipar
a avaliação da compatibilidade entre a formulação e a
embalagem. É importante que a quantidade de produto seja
suficiente para as avaliações necessárias e que o volume
total da embalagem não seja completado, sendo respeitado
um terço da capacidade da embalagem para possíveis trocas
gasosas (Brasil, 2004).
O teste de estabilidade acelerada tem duração
de 90 dias, embora possa ser estendido para seis meses
ou um ano, em função das características do produto a
ser analisado (Brasil, 2004). As amostras devem ser
83
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos
submetidas a aquecimento em estufas, resfriamento
em refrigeradores, exposição à radiação luminosa e ao
ambiente, com controle da temperatura e analisadas em
relação aos vários parâmetros de acordo com a forma
cosmética estudada.
Teste de Prateleira
A amostra, acondicionada em embalagem apropriada
e mantida à temperatura ambiente deve ser analisada
periodicamente, até o término do prazo de validade, em
relação aos vários parâmetros de acordo com a forma
cosmética estudada.
Centrifugação
Em tubo de ensaio para centrífuga, cônico, graduado,
de 10 g de capacidade, devem ser pesados, em balança
semi-analítica, cerca de 5 g da amostra a ser analisada,
os quais devem ser submetidos a rotações crescentes
de 980, 1800 e 3000 rpm, em centrífuga, durante quinze
minutos em cada rotação, à temperatura ambiente (Idson,
1988; 1993a; 1993b; Rieger, 1996). A não ocorrência de
separação de fases não assegura sua estabilidade, somente
indica que o produto pode ser submetido, sem necessidade
de reformulação, aos testes de estabilidade.
Estresse Térmico
Em embalagem adequada, semelhante àquela a ser
usada para a comercialização do produto cosmético, 10 g
da amostra devem ser submetidos a condições extremas de
temperatura, como 5 ºC e 45 ºC, para detecção de sinais de
instabilidade a mudanças de temperaturas e sob manutenção
de temperaturas baixas e elevadas por um determinado
intervalo de tempo. A não ocorrência de separação de fases
deve ser indicativa de estabilidade do produto ensaiado.
Ciclos de Congelamento e Descongelamento
Em embalagem adequada, semelhante àquela a ser
usada para a comercialização do produto cosmético, cerca de
10g da amostra devem ser submetidos a condições extremas
de temperaturas, nos chamados ciclos, sendo considerados
para efeito de estudo de estabilidade preliminar, a realização
de pelo menos seis ciclos.
Os ciclos de congelamento e descongelamento
alternam 24 horas em temperaturas elevadas e 24 horas
em temperaturas baixas, sendo recomendados os seguintes
conjuntos: ambiente e –5 ± 2 ºC; 40 ± 2 ºC e 4 ± 2 ºC; 45 ±
2 ºC e –5 ± 2 ºC e 50 ± 2 ºC; –5 ± 2 ºC.
Exposição à Radiação Luminosa
Em embalagem adequada, semelhante àquela a ser
usada para a comercialização do produto cosmético, cerca
de 10 g da amostra devem ser submetidos a condições
84
extremas de incidência luminosa direta, para detecção de
sinais de instabilidade à exposição à luz (Brasil, 2004). A
não ocorrência de separação de fases e a não alteração da
coloração devem ser indicativas de estabilidade do produto
ensaiado.
Aspecto
A amostra deve ser analisada, em relação ao padrão,
a fim de avaliar as características macroscópicas para
verificação de sinais de instabilidade. A não ocorrência de
separação de fases, de precipitação, de turvação, deve ser
indicativa de estabilidade da amostra ensaiada.
O aspecto pode ser descrito como granulado, pó
seco, pó úmido, cristalino, pasta, gel, fluido, viscoso,
volátil, homogêneo, heterogêneo, transparente, opaco e
leitoso. A amostra pode ser descrita como normal, sem
alteração; levemente separada, precipitada, turva; separada,
precipitada, turva.
Cor
A colorimetria deve ser realizada pela comparação
visual, sob condições de luz branca e espectrofotométrica,
pela análise na região espectral do visível, da cor da amostra
com a cor do padrão, armazenado nas mesmas condições e
embalagem que a amostra.
A comparação visual da cor da amostra ensaiada
com a cor do padrão deve ser realizada em cerca de 5 g da
amostra acondicionados em frascos iguais. A fonte de luz
empregada deve ser a luz branca, natural.
Cerca de 1,5 g da amostra ensaiada diluídos em
água destilada, na proporção de 1:1 (p/p) devem ser
submetidos à colorimetria espectrofotométrica pela análise
da varredura, na região do visível, e comparação com a
varredura do padrão. Efeitos hipercrômico e hipocrômico,
referentes à intensidade da banda e efeitos batocrômico ou
hipsocrômico, referentes à variação no comprimento de onda
relativo à máxima absorção, são indicativos de alteração na
intensidade da cor ou mesmo modificação da coloração e,
portanto, podem ser indicativos de instabilidade.
A amostra pode ser classificada, em relação à cor em:
normal, sem alteração; levemente modificada; modificada;
intensamente modificada.
Odor
O odor da amostra ensaiada deve ser comparado ao
odor do padrão, diretamente através do olfato. A amostra
pode ser classificada, em relação ao odor em: normal, sem
alteração; levemente modificado; modificado; intensamente
modificado.
pH
A determinação do pH deve ser realizada em
uma dispersão aquosa a 10% (p/p) da amostra ensaiada
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos
em água recém destilada, usando peagômetro digital,
avaliando a diferença de potencial entre dois eletrodos
imersos na amostra em estudo (Brasil, 2004). O eletrodo
deve ser inserido diretamente na dispersão aquosa (Davis
& Burbage, 1997; Isaac, 1998a; Farmacopéia Brasileira,
2001) e valores mantidos entre 5,5 e 6,5, compatíveis
com o pH cutâneo, devem ser usados como critério de
estabilidade.
Densidade
A densidade relativa é a relação entre a densidade
absoluta da amostra e a densidade absoluta de uma
substância usada como padrão. Quando a água é utilizada
como substância padrão, a densidade determinada é a
densidade específica (Brasil, 2007).
A determinação da densidade específica deve ser
realizada em picnômetro, acoplado com termômetro,
previamente pesado vazio, para determinação da mPv. A
amostra deve ser inserida no picnômetro e a temperatura
deve ser ajustada para 20 ºC, quando, então, o picnômetro
deve ser pesado, para determinação da mPa. A diferença
entre a massa do picnômetro com a amostra e do
picnômetro vazio é a massa da amostra. A relação entre
a massa da amostra e a massa da água, ambas a 20 ºC,
representa a densidade específica da amostra ensaiada
(Farmacopéia Brasileira, 2001).
Viscosidade
A viscosidade depende das características físico-
químicas e das condições de temperatura do material
(Brasil, 2007). Pode ser determinada em viscosímetro
rotativo coaxial, acoplado a banho termostatizado e
a computador para uso de software específico para o
equipamento, que tem como princípio a velocidade de
rotação de eixos metálicos imersos no material ensaiado,
e consiste na medição do torque requerido para rodar o
sensor imerso na amostra.
O controle da temperatura e a escolha do sensor
são fundamentais para a adequação da leitura. O sensor
deve ser mergulhado diagonalmente na amostra, para
evitar formação de bolhas. Cerca de 8 a 15g de amostra
devem ser analisados no dispositivo de amostras e o
sensor imerso possibilita, sob velocidades crescentes,
a leitura das viscosidades. Podem ser traçadas curvas
ascendente e descendente, correspondentes a velocidades
crescentes e decrescentes, a fim de serem classificados
os sistemas em Newtonianos ou não-Newtonianos, isto
é, que apresentam e não viscosidades constantes sob
qualquer condição.
Espalhabilidade
A determinação da espalhabilidade da amostra
deve ser realizada a partir da leitura dos diâmetros
abrangidos pela amostra em um sistema formado por uma
placa molde circular de vidro com orifício central, sobre
uma placa suporte de vidro posicionada sobre uma escala
milimetrada (Isaac, 1998a; Knorst & Borghetti, 2006).
A determinação da consistência por extensibilidade
pode ser realizada como proposto por Isaac, (1998a),
adaptado de Bueno et al. (1984), e oferece subsídios para
discussão de espalhabilidade relacionada à caracterização
reológica da amostra.
A amostra, cerca de 0,3g de produto deve ser
colocada entre duas placas de vidro, com 10 X 18cm e
0,5cm de espessura, sendo uma delas disposta sobre um
papel milimetrado, colado em uma placa de madeira. A
adição de pesos de 250, 500, 750 e 1000g, a cada três
minutos, na placa superior, promove o espalhamento do
produto, que pode ser medido como extensibilidade, em
centímetros.
A espalhabilidade pode ser determinada, ainda,
quando cerca de 4mg de cada amostra de fotoprotetores,
por exemplo, forem aplicados, no lado interno do
antebraço e espalhados por um período de 10 minutos
sobre a pele. Devem ser mantidas condições ambientais
propícias, tais como temperatura de 23 ºC e umidade
relativa do ar de 60%. Os resultados, expressos em
centímetros de extensão da região aplicada, devem ser
analisados estatisticamente, para obtenção do perfil de
espalhabilidade dos emolientes presentes na formulação
e/ou da própria formulação. Este ensaio pode ser
executado com 15 voluntários, sendo efetuadas quatro
medições por pessoa (Isaac, 1998a; Francisco et al.,
2001; Pereira et al., 2001).
Análise Térmica
A análise térmica deve ser realizada submetendo
a amostra à análise por Calorimetria Exploratória
Diferencial (DSC) e Termogravimetria (TG/DTG). A
massa da amostra deve ser colocada em cadinho de platina
para as análises de TG e DTG, e cadinho de alumínio
com tampa perfurada para a análise de DSC. A razão de
aquecimento deve ser determinada experimentalmente,
em atmosfera de N2, utilizando uma ampla faixa de
temperatura.
Espectrofluorimetria
A espectrofluorescência pode ser empregada para
detectar a presença de peróxido por meio de uma sonda
que se torna fluorescente na presença de peróxidos, após
incubação em meio tamponado (Pytel et al., 2005).
Granulometria a Laser
No equipamento de granulometria por difração a
laser, a distribuição de tamanho da partícula é calculada
comparando o ensaio de uma amostra com um modelo
ótico apropriado.
85
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos
Estudo do Comportamento Reológico
A determinação do comportamento reológico
é realizada em reômetro acoplado em banho
termostatizado, por meio de ensaios rotativos e
oscilatórios, para caracterização reológica dos produtos
estudados. Os ensaios rotativos permitem análise do
fluxo da amostra, da tixotropia, da área de histerese e
determinação do limite de escoamento, utilizando uma
tensão de cisalhamento por um determinado período de
tempo para a curva ascendente e mesmo tempo para a
curva descendente, obtendo dados relativos a um ponto
por segundo, sob temperatura controlada.
Os ensaios oscilatórios permitem analisar
a deformação e a recuperação da amostra, a
susceptibilidade mecânica, depois de aplicadas tensões
de cisalhamento por um determinado período de tempo,
em temperatura controlada, com o sensor adequado à
consistência de cada produto analisado. A amostra
deve ser exposta à força oscilatória, isto é, deve ser
submetida a uma tensão de cisalhamento utilizando
freqüências variáveis, sendo possível analisar a
viscosidade dinâmica (η), os módulos de estocagem ou
armazenamento (G’) e de perda ou deformação (G’’)
os quais possibilitam inferir sobre a deformação e a
recuperação de amostras após o cisalhamento, avaliando
a viscoelasticidade da amostra.
Em reômetro de oscilação, deve ser utilizado o
sensor adequado à amostra (placa-placa, cone-placa ou
copos com cilindros coaxiais) e tensão de cisalhamento
de 0,01-0,5 Pa, por 180 segundos, sendo obtidos dados
a cada dois segundos, a 25 ºC. A deformação deve ser
avaliada com duração de 300 segundos e tensão de 0
a 0,5 Pa e a recuperação também com 300 segundos,
voltando à tensão de 0 Pa, em temperatura de 25 ºC.
RESULTADOS
Estudos realizados em nosso laboratório, por
integrantes cadastrados em nosso grupo de pesquisa,
possibilitaram a obtenção de muitos dos resultados, em
vários ensaios realizados, mostrados neste estudo.
Centrifugação
Dois sistemas emulsionados, um água em óleo
(A/O) e outro óleo em água (O/A), contendo novas
matérias-primas para sistemas A/O, propostos para
realização de avaliação sensorial, usando nitreto de
boro como modificador sensorial, por retirar a sensação
graxa residual das emulsões água em óleo, foram
submetidos ao ensaio preliminar de centrifugação,
usando três diferentes rotações (980, 1800 e 3000 rpm),
durante 15 minutos em cada rotação. Os dois sistemas
permaneceram estáveis.
86
Estresse Térmico
Um sistema emulsionado água em óleo (A/O)
contendo Polyglyceryl-2 e Dipolyhydroxystearate como
agente emulsificante, elevadas concentrações de emolientes
e de espessante hidrofílico, apresentou estabilidade no
ensaio inicial de centrifugação. Ao ser submetido a estresse
térmico em condição extrema de temperatura em freezer, a
– 5 ºC, apresentou separação de fases e teve sua formulação
modificada para ser submetido aos ensaios de estabilidade
subsequëntes para o desenvolvimento do trabalho.
Ciclos de Congelamento e Descongelamento
Um sistema emulsionado contendo álcool
cetoestearílico etoxilado com 20 moles de óxido de etileno,
como agente emulsificante, foi submetido a oito ciclos de
congelamento e descongelamento, durante 16 dias, nas
temperaturas – 5 °C ± 2 °C e 45 °C ± 2 °C, mantendo-se
estável em todo o ensaio.
Exposição à Radiação Luminosa
Um xampu manipulado com extrato de polpa se
Acrocomia aculeata (lacq) Lood. ex Mart, quando submetido
à radiação luminosa, por exposição à luz natural, apresentou
mudança de coloração, caracterizada por escurecimento.
Aspecto
Uma pasta dentifrícia manipulada com espessante
hidrofílico, elevada concentração do agente abrasivo
carbonato de cálcio e óleo essencial de folhas frescas de
fruto cítrico, apresentou modificação de aspecto após ser
submetida à temperatura de 45 ºC; entretanto, a concentração
do ativo, determinada em espectrofotometria na região
ultravioleta, não foi alterada após o estresse térmico.
Cor
Uma solução hidroalcoólica contendo polpa de
Acrocomia aculeata (lacq) Lood. ex Mart apresentou
alteração de cor, caracterizada pelo escurecimento, quando
mantida na bancada do laboratório, protegida da luz em
frasco de vidro âmbar e envolto em papel alumínio. A
adição de conservante antioxidante promoveu manutenção
da coloração.
Odor
Amostras de fitocosméticos para maquiagem (loção
tônica hidratante e base de maquiagem) que são usados
pelos estudantes em testes para verificação e escolha das
cores dos produtos a serem por eles preparados em aula
prática, apresentaram modificação do odor, entretanto,
nenhuma alteração visual foi notada nos produtos.
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos

pH

Os valores de pH obtidos por potenciometria

direta em dispersão aquosa das amostras estudadas, estão
apresentados na Figura 1.

Figura 3. Valores da densidade das amostras (1-6) mantidas

a 45 ºC durante 15 dias.

Figura 1. Valores de pH das amostras (1-6) armazenadas

em temperatura de 28 ± 2 °C, durante 14 dias.

Amostra 1 – creme padrão sem conservante

Amostra 2 – creme padrão com conservante
Amostra 3 – creme sem conservante + Staphylococcus aureus
Amostra 4 – creme com conservante + Staphylococcus aureus
Amostra 5 – creme sem conservante + Pseudomonas aeruginosa
Amostra 6 – creme com conservante + Pseudomonas aeruginosa

Densidade

A densidade de sistemas emulsionados estudados,

em duas condições de armazenamento, podem ser avaliadas
nas Figuras 2 e 3.

Figura 4. Reograma do gel de CMC 3% para Rampa de

Tensão com limite de escoamento.

Figura 2. Valores da densidade das amostras (1-6) mantidas

a -5 ºC durante 15 dias.

Viscosidade

A variação da viscosidade de diferentes xampus

espessados com diferentes concentrações de cloreto de
sódio pode ser visualizada na Tabela 1.

Figura 5. Reograma do gel de CMC 3% para Deformação

e Recuperação.

87
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos

Tabela 1 - Avaliação da viscosidade (em mPa.s), de xampus contendo diferentes concentrações de

tensoativo e espessados com cloreto de sódio em dois valores diferentes de pH

Xampu A Xampu B Xampu C

Concentração % do tensoativo detergente 15 25 30

Concentração % do espessante cloreto de sódio 2,8 4,0 3,2
Viscosidade, em mPa.s, em pH = 6 901,18 5047,79 11968,17
Viscosidade, em mPa.s, em pH = 7 954,42 5116,01 12512,18

Tabela 2 - Perfil de espalhabilidade em média das medidas, em cm, da região do antebraço espalhada
com creme fotoprotetor com diferentes emolientes.
emoliência do fotoprotetor média das medidas, em cm

óleo mineral 2,0133

lactato de miristila 1,6933
miristato de isopropila 1,6533
óleo de amêndoas 1,6267
manteiga de karité 1,4933
dimeticone 200 1,4333
isononanoato de cetila 1,4133

Tabela 3 - Temperatura de estabilidade e temperatura final da decomposição obtida das curvas TG/
DTG dos óleos vegetais em atmosfera de nitrogênio (Faria et al., 2002)

óleo temperatura de estabilidade ºC temperatura final de decomposição ºC

araticum 320 478

babaçu 180 440
buriti 321 483
guariroba 283 433
murici 271 477

Tabela 4 - Características do tamanho das partículas observadas nas emulsões após diluição com água
destilada e com solução de dodecilsulfato de sódio.

emulsão D50 (hm) %D < 200 hm %D < 1 mm

H2O DSS H2O DSS H2O DSS

sem a - tocoferol 255 ± 1 249 ± 1 27 26 100 100
com a - tocoferol 416 ± 14 391 ± 3 13 14 71 78

Determinação da Espalhabilidade Análise Térmica

O perfil de espalhabilidade dos emolientes presentes A análise térmica de óleos e gorduras vegetais,
em sete diferentes formulações de creme fotoprotetor está determinada por Faria et al. (2002), avaliou a temperatura
apresentado na Tabela 2. de estabilidade e a temperatura final de decomposição,
apresentadas na Tabela 3.

88
 Tabela 5 - Ensaios físico-químicos a serem realizados e periodicidade de realização nos testes de estabilidade preliminar, acelerada e de longa duração.
Estabilidade físico-química de fitocosméticos

89
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos
Espectrofluorimetria
A pele irradiada e tratada com creme contendo o
complexo antioxidante testado apresentou concentração
116% menor de peróxidos cutâneos, enquanto a pele
tratada com creme sem o complexo antioxidante apresentou
concentração 49% menor (Pytel et al., 2005).
Granulometria a Laser
A média do tamanho das partículas e as
porcentagens de partículas com tamanhos menores que 200
ηm e menores que 1 µm estão apresentadas na Tabela 4.
D50 é a média dos diâmetros médios
%D < 200 ηm é a porcentagem de partículas com diâmetros
menores que 200 ηm
%D < 1 µm é a porcentagem de partículas com diâmetros
menores que 1 µm
Estudo do Comportamento Reológico
Os reogramas dos ensaios rotativo e oscilatório
com gel de sodium carboxymethyl cellulose estão mostrados
nas Figuras 4 e 5.
A Tabela 5 mostra o protocolo proposto para
avaliar a estabilidade físico-química de fitocosméticos,
com base no conjunto de ensaios utilizados.
DISCUSSÃO
O uso de ingredientes de origem natural em
cosméticos ganhou popularidade e, entre eles, podem ser
citados os extratos vegetais, óleos vegetais, óleos essenciais
e seus derivados que, incorporados nas formulações,
agregam bioatividade, funcionalidade e apelo de marketing
(Priest, 2006).
Nas últimas duas décadas, a indústria cosmética
tem lançado produtos contendo ingredientes naturais,
mas as definições, ainda, são ambíguas ou incertas. Uma
corrente define natural como a substância que vem de uma
fonte vegetal renovável e que não seja derivado nem de
outra forma quimicamente modificada ou alterada. Outra
definição, mais ampla, considera natural a substância ou
seus derivados sintéticos de origem natural, o que poderia
englobar todas as matérias-primas, uma vez que podem ser
reduzidas a uma origem ou outra, entre os reinos animal,
mineral ou vegetal (Oliveira & Bloise, 1995).
A partir do lançamento de uma linha muito variada
de produtos cosméticos por uma grande empresa brasileira
do setor, que usou ativos da Biodiversidade Brasileira, a
Amazônia passou a ser o centro das atenções das empresas
fornecedoras de matérias-primas para a produção de
cosméticos, no Brasil e no mundo. O manejo sustentável
tem sido explorado pelas empresas fornecedoras de
matérias-primas, mas o caboclo é um suporte indispensável
90
nessa cadeia, pois além de se beneficiar com a exploração,
ajuda a manter a floresta em pé, uma vez que se preocupa
com a derrubada das árvores, pois, do contrário, na
próxima colheita não teria as sementes desejadas pelos
fornecedores.
Silva (2002) apresentou estudos de bioengenharia
cutânea comprovando a eficácia de bioativos tropicais e,
assim como esse autor, vários pesquisadores têm estudado
ativos brasileiros aplicados em cosméticos. Sua conclusão
mostra a importância da associação da tecnologia com
a cultura popular, para estudo e conseqüente uso de
ingredientes naturais em cosméticos. Isso tem aumentado
a pesquisa referente ao isolamento, à identificação e à
quantificação de compostos ativos das plantas e suas
atividades biológicas (Teodor et al., 1998; Galhardo et al.,
2007a).
No Brasil, estão localizadas cerca de 20 por cento
das duzentas e cinqüenta espécies medicinais catalogadas
pela UNESCO, facilitando o aproveitamento do potencial
curativo dos vegetais para o tratamento de doenças
(Drumond et al., 2004; Galhardo et al., 2007b).
Óleos e extratos de plantas há muito tempo têm
servido de base para diversas aplicações na medicina
popular, entre elas, a produção de anti-sépticos. Tal
realidade serviu para muitas investigações científicas, com
vistas na confirmação da atividade antimicrobiana dos
óleos essenciais (Nascimento et al., 2007).
Pesquisas demonstraram que o óleo essencial
(constituído por um conjunto de componentes) apresenta uma
melhor atividade terapêutica do que as substâncias isoladas
que representam sua composição principal, por exemplo: o
óleo essencial de Eucaliptus globulus tem atividade anti-
séptica maior do que o seu principal constituinte ativo
isolado, o cineol ou eucaliptol (representando 80% da
composição). Um óleo essencial possui uma composição
complexa sendo, algumas vezes, de centenas de diferentes
compostos químicos, os quais apresentam ação sinérgica ou
complementar entre si, aumentando sua atividade (Simões
et al., 2000).
Estudos laboratoriais preliminares (Galhardo et al.,
2007a, Galhardo et al., 2007b), demonstraram atividade
inibidora de crescimento bacteriano frente a diferentes
substâncias químicas, de óleo essencial de pitanga coletado
em diferentes épocas.
A tendência mundial é a padronização de
extratos através de técnicas rápidas e eficientes, sejam
elas espectrofotométricas e cromatográficas, como
cromatografia em camada delgada comparativa (CCDC)
e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), com a
finalidade de se determinar as substâncias normalmente
presentes, responsáveis pela atividade cosmética, mesmo
que em pequenas concentrações (Jácome et al., 1999).
Dois fatores básicos determinam a composição de
um extrato: a qualidade do material vegetal e o processo de
produção (Schulz et al., 2002). A padronização de extratos
vegetais deverá ser realizada a fim de ser conhecido o teor
de um ou mais constituintes (Farmacopéia Brasileira, 2001).
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos
A padronização pode ocorrer pela diluição com o solvente
usado na extração ou com extratos menos concentrados,
obtidos nas mesmas condições ou, ainda, pela adição
de materiais inertes ou concentração por processo sob
pressão reduzida, em temperatura onde a degradação dos
constituintes do extrato não seja significativa.
Alguns estudos já foram realizados por integrantes
do nosso grupo de pesquisa, utilizando extratos vegetais
para o desenvolvimento de fitocosméticos e suas técnicas
de controle de qualidade (Silva et al., 2004, Salvagnini et
al., 2006, Baby et al., 2007, Iha et al., 2008).
Um dos processos mais usados para obtenção
de extratos é a turboextração, no qual muitas estruturas
celulares são rompidas, permitindo contato direto do líquido
com os metabólitos secundários, entre outras substâncias,
possibilitando esgotamento mais rápido, necessitando
apenas de 15 minutos. Um inconveniente deste processo é
o calor devido ao movimento de rotação das facas, podendo
levar à degradação de substâncias de interesse.
Franco & Bueno (1999), compararam os processo
de turboextração (15 minutos) e maceração (42 dias) na
extração de própolis, e concluíram que, para as finalidades
propostas, o primeiro foi mais eficiente, além de ser um
processo mais ágil que os demais.
Segundo monografia da International Federation of
Societies of Cosmetic Chemists, o teste de estabilidade é
considerado um procedimento preditivo, baseado em dados
obtidos de produtos armazenados em condições que visam
acelerar alterações passíveis de ocorrer nas condições de
mercado. A estabilidade é relativa, pois varia com o tempo
e em função de fatores que aceleram ou retardam alterações
nos parâmetros do produto.
O estudo da estabilidade contribui para orientar
o desenvolvimento da formulação e do material de
acondicionamento; fornecer subsídios para aperfeiçoamento
das formulações; estimar o prazo de validade e
fornecer informações para sua confirmação; auxiliar no
monitoramento da estabilidade organoléptica, físico-
química e microbiológica, produzindo informações sobre a
confiabilidade e segurança dos produtos.
O teste de estabilidade preliminar, realizado em um
curto intervalo de tempo, pode ser considerado um teste
orientativo no desenvolvimento de produtos. Consiste em
submeter a amostra a condições extremas de temperatura,
objetivando acelerar processos de instabilidade, para
auxiliar na triagem de formulações e não ser estimativo de
vida útil do produto.
A centrifugação, o estresse térmico e os ciclos de
congelamento e descongelamento são ensaios realizados em
condições extremas de armazenamento que podem fornecer
indicações de instabilidade da formulação, mostrando a
necessidade de alteração na sua composição.
Provavelmente, o escurecimento de xampus
manipulados com extrato de polpa se Acrocomia aculeata (lacq)
Lood. ex Mart, submetido à radiação luminosa, por exposição à
luz natural, apresentou mudança de coloração devido à oxidação
de seus componentes, uma vez que a adição de conservante
antioxidante impediu a alteração da coloração.
O aspecto de um fitocosmético, em relação à
homogeneidade e coloração do produto, é importante do
ponto de vista comercial, uma vez que pode influenciar a
compra, por parte do consumidor, que não se sente atraído
pela aparência do produto.
A modificação do odor pode ter ocorrido,
provavelmente, por contaminação microbiana, devido ao
uso inadequado do produto, como aplicação com a ponta
dos dedos, ao invés do uso de espátula; entretanto, nenhuma
alteração visual foi notada nos produtos.
O valor de pH dos produtos que foram usados para
os ensaios que estão sendo apresentados neste trabalho,
está apresentado na Figura 1. Como pode ser verificado,
os valores não sofreram alteração maior que 10%, o
que representa a manutenção de valores entre 5,5 e 6,5,
compatíveis com o pH cutâneo. Valores baixos de pH podem
estar relacionados ao aparecimento de irritação dérmica
cumulativa (Leonardi, 2002), e ser devido à degradação de
qualquer componente do fitocosmético.
A densidade de sistemas emulsionados e não
emulsionados não têm apresentado variação significativa.
Os valores medidos durante os ensaios de estabilidade
diferem entre si, nos produtos dos projetos realizados e
em execução no nosso laboratório, em valores inferiores
a 10%, razão pela qual está sendo adotado que variação de
valores maior que 20% pode significar instabilidade.
Foi possível observar, a partir das Figuras 2 e 3,
que a inoculação de microrganismos (amostras 4 a 6, como
descrito na Figura 1) pouco alterou a densidade dos cremes.
Da mesma forma, durante os 15 dias em que se realizou o
teste de estabilidade, a variação entre os valores de densidade
entre os cremes e entre as condições a que estavam expostos
foi pequena. Foi possível observar na Figura 3 um ligeiro
aumento do valor da densidade em relação à outra condição
de estresse, isso se deve, provavelmente, a uma maior
perda de água, fazendo com que a densidade aumentasse;
entretanto, a alteração de densidade das amostras não foi
suficiente para determinar se esta propriedade promoveu
instabilidade nas preparações ensaiadas.
A variação da viscosidade influenciada por dois
diferentes valores de pH (6 e 7), em xampus espessados com
diferentes concentrações (entre 2,80 e 3,20%) de cloreto de
sódio foi avaliada por Speroto et al. (2007). A viscosidade
foi determinada em viscosímetro coaxial, utilizando xampus
manipulados com três diferentes concentrações de tensoativo
detergente: 15, 25 e 30%. Os resultados mostrados na Tabela
1 indicaram que o pH foi determinante para aumento da
viscosidade de xampus; entretanto, a concentração de
tensoativos e do agente espessante cloreto de sódio, também
influenciaram no valor da viscosidade de xampus (Corrêa et
al., 1997; Isaac et al., 1998b; Speroto et al., 2007)
O ensaio para a determinação da espalhabilidade
foi executado com 15 voluntários, sendo efetuadas quatro
medições por pessoa, quando foram aplicados, no lado
interno do antebraço, 4mg de cada amostra de creme
fotoprotetor manipulado com diferentes emolientes,
espalhados por um período de 10 minutos sobre a pele.
91
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos
Foram observadas condições ambientais propícias, tais
como temperatura de 23 ºC e umidade relativa do ar
de 60%. Os resultados possibilitaram obter o perfil de
espalhabilidade dos emolientes presentes na formulação.
Foram realizados testes com sete diferentes emolientes e
as medidas das regiões, onde os produtos foram aplicados
para a avaliação da espalhabilidade, estão apresentadas na
Tabela 2.
As características de espalhamento sobre a pele
de uma emulsão fotoprotetora são importantes, tanto do
ponto de vista sensorial como de eficácia. Uma emulsão
fotoprotetora deve propiciar a sensação correta e esperada
pelo consumidor, além de ter espalhamento adequado para
garantir o Fator de Proteção Solar (FPS) nominal (Francisco
et al., 2001). Usando o conceito de “cascata de emolientes”,
é possível a obtenção de emulsões com características
sensoriais otimizadas, em relação à espalhabilidade (Pereira
et al., 2001, Silva et al., 2004; Isaac et al., 2005).
Nos últimos anos, a inovação tecnológica tem
possibilitado o desenvolvimento de novos métodos de
análise, com destaque para os métodos calorimétricos, de
elevada sensibilidade, capazes de fornecer informações
a cerca da energia envolvida em muitos processos, aos
quais está associada a liberação e/ou absorção de energia
calorífica.
Os métodos calorimétricos juntamente com técnicas
analíticas que permitem medir alterações das propriedades
químicas e/ou físicas de uma amostra, em função da
temperatura, constituem o que se denomina Análise
Térmica.
A análise térmica possibilita uma ampla faixa de
aplicação para medidas de propriedades físicas, estudos
de reações químicas, avaliação da estabilidade térmica,
determinação da composição de materiais e desenvolvimento
de metodologia analítica.
Faria et al. (2002) estudaram a estabilidade térmica
de óleos e gorduras vegetais por três técnicas analíticas:
termogravimétrica, termogravimétrica derivada e análise
térmica diferencial, concluindo que as técnicas foram
adequadas a esse fim. Os autores usaram um módulo
simultâneo DSC-TGA da TA-Instruments, modelo SDT
2960, numa faixa de temperatura de 30 a 650 ºC, com razão
de aquecimento de 10 ºC min-1 e atmosfera dinâmica de
nitrogênio com vazão de 100ml. min-1 e cadinho de alumina
com massa de 10 a 20mg. Foi observado um patamar de
estabilidade térmica dos óleos entre 180 e 321 ºC e o
processo de decomposição térmica ocorreu em uma única
etapa, sendo finalizado entre 433 e 478 ºC. A estabilidade
térmica dos óleos foi determinada através da faixa de
temperatura na qual a massa permaneceu inalterada.
ATabela 6 mostra a temperatura referente à estabilidade
e a temperatura final de decomposição dos produtos. Os
autores afirmaram que os óleos analisados apresentaram a
seguinte ordem crescente de estabilidade: babaçu, murici,
guariroba, araticum e buriti, fator determinante no controle
de qualidade de óleos e gorduras durante o processamento,
estocagem e utilização industrial (Faria et al., 2002)
92
Solis-Fuentes & Duran-De-Bazua (2003)
caracterizaram misturas eutéticas de diferentes composições
de óleos e gorduras vegetais por análise térmica (DSC) e
concluíram que as gorduras podem suportar misturas com
diferentes composições equivalentes à manteiga de cacau e
serem aplicadas em produtos cosméticos, entre outros.
Guillen et al. (2006) avaliaram a contribuição
da análise térmica na avaliação do DMAE e seus sais
correspondentes e do ácido ascórbico e derivados. Os
autores encontraram resultados que não conferem com
a especificação do laudo, salientando a importância do
método no controle de qualidade de substâncias.
A espectrometria de fluorescência é um método
confiável, rápido, preciso, de baixo custo, que permite a
determinação de princípios ativos, tornando-se um método
bastante atrativo em ensaios de controle de qualidade e
de estudos de estabilidade.A metodologia de análise pelo
espectrofluorímetro é bastante simples, na qual se aplica
uma certa energia em uma faixa de comprimento de onda
e, por meio de filtros de emissão, pode ser observado um
determinado valor de concentração. Em função da curva
analítica é possível determinar a concentração da amostra e
avaliar a estabilidade da preparação segundo a concentração
do ativo
A fluorescência é causada pela absorção de energia
radiante e reemissão de parte dela, sob a forma de luz;
ou seja, radiação visível. A luz emitida tem, sempre,
comprimento de onda maior do que o da absorvida (Bassett
et al., 1981). Na prática, isso ocorre quando uma solução é
iluminada por um feixe luminoso, de comprimento de onda
específico, absorvendo luz e emitindo em um comprimento
de onda diferente.
Pytel et al. (2005), estudaram a atividade anti-
radicalar, em três áreas da pele de antebraço de voluntárias:
uma após incidência de radiação ultravioleta A e B, outra
da pele irradiada e tratada com creme contendo complexo
antioxidante e a outra região da pele não irradiada e
não tratada, através da quantificação de peróxidos, pela
aplicação de sonda fluorescente em adesivo específico, que
retirou uma amostra do estrato córneo das áreas estudadas.
As unidades fluorimétricas obtidas foram usadas para
calcular a proteção anti-radicalar.
Os resultados obtidos por Pytel et al. (2005)
mostraram que a pele irradiada e tratada com creme
contendo o complexo antioxidante testado apresentou
concentração 116% menor de peróxidos cutâneos, enquanto
a pele tratada com creme sem o complexo antioxidante
apresentou concentração 49% menor, o que não foi
considerado estatisticamente significativo em comparação
à área irradiada.
No ensaio de granulometria por difração a laser,
a distribuição de tamanho da partícula é calculada
comparando o ensaio de uma amostra com um modelo ótico
apropriado. Relkin et al. (2008) estudaram a estabilidade
de nanoemulsões óleo em água usando diferentes técnicas
e, entre elas, a granulometria, para avaliar a influência da
presença de α - tocoferol, como constituinte da fase oleosa,
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos
na distribuição do tamanho das partículas da emulsão. Os
autores usaram o equipamento Malvern Mastersizer 2000
Instruments para avaliar a distribuição do tamanho das
partículas, após diluição da nanoemulsão em água destilada
(H2O) ou em solução de dodecilsulfato de sódio (DSS) e
agitados lentamente por 30 minutos e verificaram, com os
resultados, uma proteção ao α-tocoferol.
Para a adequação da medida na elaboração das
curvas de distribuição granulométrica de uma amostra,
podem ser usados dois princípios de medida: Fraunhofer
e Mie. A aproximação de Fraunhofer tem sido usada
em instrumentos mais antigos de difração. Supõe que as
partículas que estão sendo medidas são opacas e espalham
luz em ângulos estreitos. Em conseqüência, é somente
aplicável às partículas grandes e dará uma avaliação
incorreta da fração da partícula fina.
A teoria de Mie é mais rigorosa para o cálculo
de distribuições de tamanho da partícula dos dados de
espalhamento de luz. As intensidades de espalhamento
podem ser aplicadas a todas as partículas, pequenas ou
grandes, transparentes ou opacas. A teoria de Mie permite
um espalhamento preliminar da superfície da partícula, com
a intensidade calculada pela diferença de índice de refração
entre a partícula e o meio de dispersão. É possível, também,
determinar o espalhamento secundário, causado pela refração
dentro da partícula - esta é especialmente importante para
partículas abaixo de 50 micra de diâmetro, como indicado
no padrão internacional para medidas de difração a laser pela
ISO13320-1, em 1999 (Kippax, 2007).
Os sistemas se apresentam mais estáveis quando a
amostra dispersa em água com agente surfactante, apresentar
distribuição homogênea de tamanho de partícula. Tamanhos
característicos relativos às proporções em que 10, 50 e
90% do material devem ser determinados. Enquanto o d50
representa o tamanho mediano do material, a razão d90/d10
oferece uma indicação da homogeneidade granulométrica
do material.
Reologia representa o estudo das propriedades
de escoamento e deformação da matéria sob a ação de
forças, com o objetivo de descrever as relações entre as
tensões e deformações, através das leis constitutivas ou do
comportamento de fluxo. A determinação do comportamento
reológico da formulação auxilia na avaliação da natureza
físico-química do veículo ou excipiente, de tal forma que
torna possível detectar sinais precoces de instabilidade
física, possibilitando o controle de qualidade dos
constituintes, das formulações teste e dos produtos finais
(Barry, 1993). Diferentes processos físicos como cremeação
ou sedimentação, floculação e coalescência podem ocorrer
em sistemas emulsionados e serem investigados usando
diferentes técnicas reológicas.
Características sensoriais e desempenho do produto
são freqüentemente relacionados às suas propriedades
reológicas, principalmente às propriedades de fluxo,
que determinam a consistência, além de avaliar a fácil
espalhabilidade sem escoamento excessivo do produto
(Masson, 2005).
Dessa maneira, a caracterização reológica
completa, seja pelos ensaios rotacionais, complementados
pelos ensaios oscilatórios, possibilita determinar a
estabilidade do material ou produto, auxiliando na
determinação do prazo de validade.
Ensaios com géis hidrofílicos permitiram determinar
o melhor excipiente para veicular pigmento inorgânico
para uso como máscara para os cílios. Foram realizados
ensaios rotativos e oscilatórios que determinaram o
limite de escoamento, a deformação e a recuperação do
material, o que representa informações importantes para
o desenvolvimento de produtos, uma vez que possibilita
inferir que, ao ser aplicada, a máscara não vai apresentar
dificuldade para ser retirada da embalagem, vai fluir com
facilidade, mas não vai escoar, uma vez que sua recuperação
é rápida, após o espalhamento (Gregolin et al., 2008).
Neste teste foi utilizada uma faixa de tensão de
cisalhamento de 0,01 a 0,5 Pa, por 180 segundos, para
avaliar em que tensão de cisalhamento os géis sofreriam
deformação. Essa faixa contém valores bastante baixos de
tensão, pois é esperado que um gel flua facilmente, sem
haver necessidade de uma força elevada. Pela análise do
gráfico, foi possível notar que o gel se deformou dentro
dessa faixa, necessitando realmente de uma tensão
pequena para isso. Não apresentou picos antes de fluir
completamente (Figura 5), demonstrando baixa resistência
à deformação e apresentando linearidade entre 0,1 e 1
Pa, ou seja, proporcionalidade entre a tensão aplicada e a
resposta obtida (Ribeiro et al., 2004).
No ensaio de fluência e relaxação, foi possível
observar que o gel apresentou boa recuperação da parte
elástica (Figura 6). A sua característica viscoelástica permite
sua utilização como base cosmética para os diferentes tipos
de produtos (Gregolin et al., 2008).
Os dados do presente estudo permitem concluir que
os ensaios propostos garantem a estabilidade físico-química
e a qualidade de fitocosméticos. Assim, o conjunto de
ensaios aqui mostrados constitui um protocolo para avaliar
a estabilidade físico-química de fitocosméticos, como
proposto na Tabela 5 e os ensaios preparados conforme
descrito em Material e Métodos.
Agradecimentos
Os autores agradecem pelos financiamentos
recebidos do CNPq (Brasília), FINEP (Brasília),
FUNDUNESP (São Paulo), FAPESP (São Paulo) e PADC-
FCF (Araraquara), pelo apoio aos projetos desenvolvidos
nos Laboratórios de Cosmetologia e de Controle Biológico
de Qualidade da Faculdade de Ciências Farmacêuticas da
UNESP.
93
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos
ABSTRACT:
Guide to physical and chemical stability of phytocosmetics
The growing demand for stable, safe and effective
cosmetics has required increasingly complex studies by
the scientific community and the use of more efficient
techniques to determine the stability of these products.
The use of active principles from the Brazilian flora
has led to the development of numerous products, in
the most varied pharmaceutical forms, making it, even
more difficult to standardize experimental protocols
to certify the stability of cosmetic preparations. While
in Brazil there is no one protocol that standardizes
the tests that should be carried out to determine
product stability, several studies have been conducted
in academic laboratories to determine the stability
of specific raw materials. The rheological properties
of topical use products have to be taken into account
in their manufacture, storage and application.
The determination of the rheological behavior of a
formulation helps in evaluating the physicochemical
nature of the vehicle, allowing early signs of physical
instability to be detected and thus enabling quality
control of the constituents, test formulations and final
products. Thermal analysis has also been used to assist in
the study of cosmetic stability and differential scanning
calorimetry to guide the development of new products.
Other tools, such as fluorimetry and laser granulometry
can be used to help the study and development of
both emulsified and non-emulsified systems. The aim
of the present study is to develop a protocol for the
investigation of the physical and chemical stability of
phytocosmetics - systems containing active compounds
extracted from the Brazilian biodiversity.
Keywords: Brazilian biodiversity; physical and chemical
stability; phytocosmetic.
REFERÊNCIAS
Archondo AEDL. Sistematização do desenvolvimento de
produtos dermatológicos contendo extrato de Centella
asiática L. (Urban). [Tese] São Paulo: Faculdade de
Ciências Farmacêuticas, USP; 2003.
Baby AR, Migliato KF, Maciel COM, Zague V, Pinto
CASO, Salgado HRN, Kaneko TM, Velasco MVR.
Accelerated chemical stability data of O/W fluid emulsions
containing the extract of Trichilia catigua Adr. Juss (and)
Ptychopetalum olacoides Bentham. Braz J Pharm Sci 2007;
43(3):405-12.
Barry BW. Dermatological formulations. New York:
Marcel Dekker, 1993.
94
Bassett J, Denney RC, Jeffery GH, Mendham JV. Análise
inorgânica quantitativa. 4. ed. Rio de Janeiro: Guanabara
Koogan, 1981. p.576-84.
Brasil. Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA).
Gerência Geral de cosméticos. Guia de estabilidade de
produtos cosméticos. Brasília, 2004.
Brasil. Agência Nacional de Vigilância Sanitária
(ANVISA). Gerência Geral de cosméticos. Guia de controle
de qualidade de produtos cosméticos. Brasília, 2007.
Bueno JHF, Toni LC, Oliveira AG, Evangelista RC, Jorge
Neto J, Mancini B, Lourenço VA. Óleo das sementes de
tangerina ponkan – Citrus reticulata Blanco. Possibilidades
do emprego na estruturação de cremes A/O (cold cream).
Rev Ciênc Farm 1984; 6:29-37.
Corrêa MA, Bim AVK, Silva BNP, Mazzer DF. Influência
do pH sobre a viscosidade de shampoos formulados com a
presença ou não de detergentes anfóteros. In: 44ª Jornada
Farmacêutica da Unesp, 1997, p.34.
Davis SS, Burbage AS. Electron micrography of water-
in-oil-in-water emulsions, J Colloid Interface Sci 1997;
62:361-3.
Drumond MRS, Castro RD,Almeida RVD, Pereira MSV, Padilha
WWN. Estudo comparativo in vitro da atividade antibacteriana
de produtos fitoterápicos sobre bactérias cariogênicas. Pesq
Bras Odontoped Clin Integr 2004; 4(1):33-8.
Faria EA, Lei MIG, Ionashiro M, Zuf TO, Antoniosi Filho
NR. Estudos da estabilidade térmica de óleo e gorduras
vegetais por TG/DTG e DTA. Eclet Quim 2002; 27:1-9.
Farmacopéia Brasileira. 4.ed. São Paulo: Atheneu; 2001.
pt.2. p.146.
Francisco C, Pereira CSC, Marona HRN, Isaac VLB, Bolini
HMA. Análise sensorial de uma preparação cosmética
emulsionada com filtro solar e vitamina E. In: Anais do
15º Congresso Brasileiro de Cosmetologia; 2001 jul.
24-6; São Paulo, SP. São Paulo Associação Brasileira de
Cosmetologia; 2001. p.525-36.
Franco SL, Bueno JHF. Otimização de processo extrativo
de propólis. Infarma 1999; 11:48-51.
Galhardo NCW, Isaac VLB, Moreira RRD, Pizzolitto AC.
Avaliação da atividade antibacteriana do óleo essencial de
Eugenia uniflora L., 1º Simpósio Paulista de Farmacognosia,
Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Araraquara, 2007a
jun 4-6; Araraquara, SP. Araraquara. 2007a.
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos
Galhardo NCW, Isaac VLB, Pizzolitto AC, Moreira RRD,
Corrêa MA. Óleo de pitanga na higiene oral. Cosmet Toilet
2007b; 19(5):64-5.
Gregolin MT, Chiari BG, Ribeiro HM, Isaac VLB.
Caracterização reológica de géis hidrofílicos. In: 25º
Congresso Brasileiro de Cosmetologia; 2008 mai 27-9; São
Paulo, Br. São Paulo: 2008. CD-Rom.
Guillen JSQ, Batista IASA, Matos JR. Contribuição
da análise térmica na avaliação do DMAE e seus sais
correspondentes e do ácido ascórbico e derivados. 5º
Congresso Brasileiro de Análise Térmica e Calorimetria;
2006 abr 2-5; Poços de Caldas, MG. Poços de Caldas;
2006. Disponível em URL:http://abratec.com.br/cbratec5/
trabalhos/399G.pdf . [10 abr 2008].
Guideline on Stability Testing: Stability Testing of New Drug
Substances And Productos, Disponível em URL : http://
www.emea.europa.eu/htms/human/humanguidelines/
quality.htm. [20 jul 2008].
Idson B. Stability testing of emulsions. Drug Cosmet Ind
1988; 103(12):35-8.
Idson B. Stability testing of emulsions. I. Drug Cosmet Ind
1993a; 142(1):27-8.
Idson B. Stability testing of emulsions. II. Drug Cosmet Ind
1993b; 142(2):38-43.
Iha SM, Migliato KF, Rebuglio JC, Pietro RCL, Isaac
VLB. Brunetti IL, Correa MA, Salgado HRN. Estudo
fitoquímico de fruto com potencial antioxidante: goiaba
(Psidium guajava L.) para desenvolvimento de formulação
fitocosmética. Rev Bras Farmacogn 2008 18 (3):21-5.
Isaac VLB. Desenvolvimento, estabilidade e liberação
in vitro de preparações lipolíticas. [Tese] São Paulo;
Faculdade de Ciências Farmacêuticas, USP; 1998a.
Isaac VLB, Uchiyama CL Influência da combinação de
tensoativos associada a agentes espessantes na viscosidade
de xampus. In: 45ª Jornada Farmacêutica da UNESP; 1998
ago 9-14; Araraquara, SP. Araraquara; 1998b. p.11.
Isaac VLB, Silva TMA, MigliatoKF, Salgado HRN.
Qualidade de creme fotoprotetor A/O. Cosmet Toiet. 2005;
18(5):58-70.
Jácome RLR, Oliveira ABO, Raslan DS, Muller A, Wagner,
H. Análise de naftoquinonas em extratos brutos de raízes de
Zeyheria montana M. (Bolsa-de-pastor). Quím Nova 1999;
22:175-7.
Kippax P. Measuring particle size using modern laser
diffraction techniques. Disponível em URL: http://www.
chemie.de/articles/e/61205/. [20 out 2007].
Knorst MT, Borghetti GS. Desenvolvimento e avaliação da
estabilidade física de loções O/A contendo filtro solares.
Rev Bras Ciênc Farm 2006; 42(4):531-7.
Leonardi, G. Estudo da variação do pH da pele humana
exposta à formulação cosmética acrescida ou não das
vitaminas A, E ou de ceramida, por metodologia não
invasiva. An. Bras. Dermatol [periódico on line] 2002;
77 (5). Disponível em URL: http://www.scielo.br/scielo.
php?script=sci_arttext&pid=s0365-05962002000500006&
lng=en&nrm=iso&tlng=pt. [2008 jul 13].
Masson DS. Desenvolvimento e avaliação da estabilidade
físico-química de emulsões O/A quanto à variação
de umectantes e à adição de ativos despigmentantes.
[Dissertação] Ribeirão Preto: Faculdade de Ciências
Farmacêuticas de Ribeirão Preto, USP; 2005.
Nascimento PFC, Nascimento AC, Rodrigues CS, Antoniolli
AR, Santos PO, Júnior AMB, Trindade RC. Atividade
antimicrobiana dos óleos essenciais: uma abordagem
multifatorial dos métodos. Rev Bras Farmacogn 2007;
17(1):108-13.
Oliveira LC, Bloise MI. Extratos e óleos naturais vegetais
funcionais. Cosmet Toilet 1995; 7(2):30-7.
Pereira CSC, Francisco C, Marona HRN, Isaac VLB, Bolini
HMA. Análise sensorial de creme para rejuvenescimento
facial contendo AHA/BHA e filtros solares. Anais 15º
Congresso Brasileiro de Cosmetologia; 2001 jul 24-6, São
Paulo, SP: São Paulo, 2001. p.429-45.
Pombeiro AJL. Técnicas e operações unitárias em química
laboratorial. Lisboa; Fundação Calouste Gulbenkian,
1980, p.345.
Priest D. Novo ingrediente ativo para a pele. Cosmet Toilet
2006; 18(1):62-5.
Pytel RF, Silva LVN, Nunes AS, Gesztesi JL, Costa A.
Estudo in vivo de atividade anti-radicalar por quantificação de
peróxidos cutâneos. An Bras Dermatol 2005; 80(3):323-28.
Relkin P, Yung JM, Kalnin D, Ollivon M. Structural
behaviour of lipid droples in protein-stabilized nano-
emulsions and stability of α-tocopherol. Food Biophys
2008; (3):163-8.
95
 Estabilidade físico-química de fitocosméticos
Ribeiro HM, Morais JA, Eccleston GM. Strucuture and
rheology of semisolid o/w creams containing cetyl alcohol/
non-ionic surfactant mixed emulsifier and different
polymers. Intern J Cosmet Sci 2004; 26(2):47-59.
Rieger MM. Teste de estabilidade para macroemulsões.
Cosm Toilet 1996; 8(5):47-53.
Salvagnini LE, Migliato KF, Isaac VLB, Correa MA,
Salgado HRN, Pietro RCLR. Efficacy evaluation of
preservatives associated to Achillea millefolium extract
against B. subtilis. Braz J Microbiol 2006; 37:75-7.
Schulz V, Hänsel R, Tyler V. Fitoterapia racional: Um guia
para as ciências da saúde. Barueri: Manole, 2002. 386 p.
Silberman RPS. Espectrofluorimetria. 2006. Disponível em
URL: http://pt7mdv.ceingebi.unam.mx/computo/pdfs/met/
espectrofluorimetria.pdf. [20 out 2007].
Silva CR. Bioativos tropicais com eficácia comprovada.
Cosmet Toilet 2002; 14(1):42-6.
Silva TMA, Migliato KF, Salgado HRN, Isaac VLB. Quality
comparison of W/O photo-protection creams. Cosmet Toilet
2004; 119(7):41-6.
96
Simões CMO, Schenkel EP, Gosmann.G, Mello JCP,
Mentz LAA, Petrovick PR. Farmacognosia: da planta ao
medicamento. 5.ed. Florianópolis: UFSC, 2000.
Solis-Fuentes JA, Duran-De-Bazua C. Characterization of
eutetic mixtures in different natural fat blends by thermal
analysis. Eur J Lip Sci Tech 2003; 105(12):742-8.
Speroto JS, Heguedusch DF, Branco V, Isaac VLB, Corrêa
MA Avaliação da viscosidade de xampus espessados com
eletrólitos em diferentes pHs. In: 54ª Jornada Farmacêutica
da UNESP; 2007 ago 18-24; Araraquara. p.11.
Teodor AH, Culea MB, Cimpoiu CA, Cot AC. Separation,
identification and quantitative determination of free amino
acids from plants extracts. J Pharm Biomed Anal 1998;
18(1):319-23.
Vilegas W, Cardoso CAL. Controle químico de qualidade de
fitoterápicos e plantas medicinais. In: Yunes RA, Cechinel
Filho V. Química de produtos naturais, novos fármacos e a
moderna farmacognosia. Itajaí: Univali; 2007. p.157-82.