GUÍA PRACTICA DE QUÍMICA DEPARTAMENTO DE CIENCIAS

ORGÁNICA UPN - LIMA ESTE

PRÁCTICA N° 04

CROMATOGRAFIA DE PAPEL

I. OBJETIVO:

 Medir la distancia recorrida por el absorbente en el papel.

 Calcular los Rf para cada una de las sustancias separadas.
 Separar los componentes de una mezcla.

II. INTRODUCCIÓN

La cromatografía es una técnica indispensable en los laboratorios de química

Orgánica tanto en su vertiente analítica como en su potencial para la separación de
mezclas.

Esta técnica depende del principio de adsorción selectiva (no confundir con absorción).
La cromatografía fue descubierta por el botánico ruso, de origen italiano, Mijaíl Tswett
en 1906, pero su uso no se generalizó hasta la década de 1930. Tswett separó los
pigmentos de las plantas (clorofila) vertiendo extracto de hojas verdes en éter de
petróleo sobre una columna de carbonato de calcio en polvo en el interior de una
probeta.

A medida que la disolución va filtrándose por la columna, cada componente de la mezcla

precipita a diferente velocidad, quedando la columna marcada por bandas horizontales
de colores, denominadas cromatogramas. Cada banda corresponde a un pigmento
diferente.

Fases:
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Tipos de cromatografía:

1. La cromatografía en columna utiliza un amplio espectro de adsorbentes sólidos,

incluidas la sílice, la alúmina y la sílice gelatinosa. También los líquidos pueden ser
adsorbidos en estos sólidos y a su vez sirven como adsorbentes (un proceso denominado
cromatografía de reparto) permitiendo al químico elaborar columnas de diferentes
propiedades para diversas aplicaciones.
En la cromatografía con líquidos de alto rendimiento, una variante de esta técnica de uso
frecuente hoy en día, se utilizan líquidos adsorbidos en partículas muy pequeñas y
uniformes, lo cual proporciona una sensibilidad bastante alta.
Para llevar la mezcla a través de la columna se precisa una bomba. La cromatografía de
capas finas es otra forma de cromatografía en columna en la cual el material adsorbente
reposa en un cristal o en una película de plástico.

2. En la cromatografía en papel, una muestra líquida fluye por una tira vertical de
papel adsorbente, sobre la cual se van depositando los componentes en lugares
específicos.

3. Cromatografía gas-líquido permite la separación de mezclas de compuestos

gaseosos o de sustancias susceptibles de vaporizarse por calor. La mezcla vaporizada es
conducida mediante un gas inerte a través de un estrecho tubo en espiral que contiene
una sustancia, por la que los componentes fluyen en diferentes proporciones, siendo
detectados al final del tubo.

El uso de la cromatografía está ampliamente extendido en el análisis de alimentos,

medicinas, sangre, productos petrolíferos y de fisión radiactiva.
4. Determinación del Rf
La retención se puede explicar en base a la competencia que se establece entre el soluto
a separar y la fase móvil por adsorberse a los centros activos polares de la fase
estacionaria. Así, las moléculas de soluto se encuentran adsorbidas en la fase estacionaria
y a medida que se produce la elución van siendo desplazadas por la fase móvil. La
retención y la selectividad en la separación dependen de los valores respectivos de las
constantes de los diferentes equilibrios químicos que tienen lugar, que están en función
de: la polaridad del compuesto, determinada por el número y naturaleza de los grupos
funcionales presentes. Los solutos más polares quedarán más retenidos puesto que se
adsorben más firmemente a los centros activos de la fase estacionaria, mientras que los
no polares se eluirán con mayor facilidad. ‐ naturaleza del disolvente. Así, para un
mismo compuesto, un aumento en la polaridad del disolvente facilita su
desplazamiento en la placa.
La relación entre las distancias recorridas por el soluto y por el eluyente desde el origen de la
placa se conoce como Rf, y tiene un valor constante para cada compuesto en unas condiciones
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cromatográficas determinadas (adsorbente, disolvente, tamaño de la cubeta, temperatura,

etc.). Debido a que es prácticamente imposible reproducir exactamente las condiciones
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experimentales, la comparación de una muestra con otra debe realizarse eluyendo ambas en la
misma placa. Para calcular el Rf se aplica la siguiente expresión: Rf = distancia recorrida por el
compuesto (X) / distancia recorrida por el eluyente (Y)

III. MATERIALES Y

REACTIVOS MATERIALES

 Papel filtro
 Bagueta
 3 Beaker de 50 mL
 Piseta
 tijeras
 plumones
 soporte universal
 placa Petri
 pinza

REACTIVOS

 Alcohol etílico

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

I. PARTE

1. Recortar una tira de papel filtro (6 cm x 12 cm) y trazar con lápiz una línea a
un centímetro de distancia de uno de los bordes.
2. Dibujar uno o más puntos con tinta de plumón.
3. Introducir el papel verticalmente y con el/los puntos dibujados hacia debajo de la
placa petri y en la que previamente hemos vertido alcohol (menos de un
centímetro de altura del disolvente).
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4. Dejar que el disolvente suba a través del papel cromatográfico por capilaridad,
arrastrando parte de la tinta según avanza.
5. Una vez que se haya completado la subida del alcohol se habrá obtenido una
separación de los diferentes colorantes que forman parte de la tinta del plumón.
6. Interpretar los resultados: normalmente para conseguir un determinado color
es preciso recurrir a mezclas de colorantes.

Anotar sus observaciones:

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II. PARTE

1. En cada vaso de precipitado agregar una tira de papel coloreado (3 cm x 3 cm)

y extraer su colorante con 10 ml de alcohol etílico.
2. Mezclar en una placa Petri aproximadamente 5 ml de cada solución coloreada.
3. Preparar una tira de papel filtro (3 cm x 12 cm).
4. Introducir la tira verticalmente al vaso de precipitado.
5. Dejar que el disolvente suba a través del papel cromatográfico por capilaridad,
arrastrando parte de la tinta según avanza.
6. Una vez que se haya completado la subida del alcohol se habrá obtenido una
separación de los diferentes colorantes que inicialmente se tenían.
7. Calcular la Rf.
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Calcular el RF

Anotar sus observaciones:

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V. VI. CUESTIONARIO

1. ¿Qué significa Capilaridad?

2. Mencione los tipos de cromatografía
3. ¿Cuál es la diferencia entre absorción y adsorción?
4. ¿Cuáles son las bases del funcionamiento de una columna
cromatográfica?
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