Universidad Autónoma del

Estado de Hidalgo
ICBI

Lic. Química en Alimentos

Biomoléculas y su Metabolismo
4to Semestre – Grupo 1

Reporte de práctica #3
“Obtención de extracto crudo de hígado vacuno y
determinación en el mismo de la concentración
de proteínas por el método de Lowry”.

Integrantes:
-Gallegos Hernández Anahí Yajaira (318733)
-Galván Mendoza Ruth (390876)
-Granillo Guerrero María Denise (315777)
-Leonel Enríquez Jorge Eduardo (392980)
-Peña Vázquez Yair Ulises (363071)

29 de agosto del 2019.

Resumen:

Las proteínas son moléculas formadas por aminoácidos que están unidos por un tipo de
enlaces conocidos como enlaces peptídicos. Estas pueden cuantificarse por medio de
métodos tradicionales o métodos alternativos. Se estudio uno de los métodos alternativos
como lo es el método de Lowry que igual es conocido como método colorimétrico. El
objetivo de esta práctica es analizar la cuantificación de proteínas en un material biológico
como lo es el hígado y de esta manera se obtendrán lo resultados correspondientes para
cada una de las cuantificaciones así mismo se obtuvo una grafica donde se observa la
concentración de la proteínas en la cuantificación.

Introducción.

La cuantificación exacta de proteínas es esencial para todos los experimentos

relacionados con proteínas en una multitud de temas de investigación. Se han
desarrollado diferentes métodos para cuantificar proteínas totales, o alguna en
particular. Los métodos de cuantificación de proteínas totales incluyen métodos
tradicionales tales como la medición de la absorbancia a 280 nm, los ensayos de
Bradford y el ácido bicinconínico, así como métodos alternativos como el de Lowry
o novedosos ensayos desarrollados por los proveedores comerciales. (Johnson,
2012)

El método de Lowry (1951) es un método colorimétrico de valoración cuantitativa de

las proteínas. A la muestra se añade un reactivo que forma un complejo coloreado
con las proteínas, siendo la intensidad de color proporcional a la concentración de
proteínas.

Todas las proteínas poseen una misma estructura química central, que consiste en
una cadena lineal de aminoácidos. Lo que hace distinta a una proteína de otra es la
secuencia de aminoácidos de que está hecha, a tal secuencia se conoce como
estructura primaria de la proteína. La estructura primaria de una proteína es
determinante en la función que cumplirá después, así las proteínas estructurales
(como aquellas que forman los tendones y cartílagos) poseen mayor cantidad de
aminoácidos rígidos y que establezcan enlaces químicos fuertes unos con otros
para dar dureza a la estructura que forman. (Guillén, 2015)

Las proteínas determinan la forma y la estructura de las células y dirigen casi todos
los procesos vitales. Las funciones de las proteínas son específicas de cada una de
ellas y permiten a las células mantener su integridad, defenderse de agentes
externos, reparar daños, controlar y regular funciones, entre otras. Todas las
proteínas realizan su función de la misma manera: por unión selectiva a moléculas.

Las proteínas estructurales se agregan a otras moléculas de la misma proteína para

originar una estructura mayor. Sin embargo, otras proteínas se unen a moléculas
distintas: los anticuerpos a los antígenos específicos, la hemoglobina al oxígeno, las
enzimas a sus sustratos, los reguladores de la expresión génica al ADN, las
hormonas a sus receptores específicos.
Objetivo General:

Analizar las biomoléculas; en particular las proteínas con el fin de observar y

conocer la cuantificación de ellas en un material biológico con ayuda del equipo
correspondiente.

Objetivos específicos:

1. Aplicar un procedimiento para extraer de la muestra las biomoléculas que se

analizarán, en este caso las proteínas.
2. Construir una curva patrón para determinar el contenido de proteína en las
muestras a analizar.
3. Aplicar el método de Lowry para cuantificar la concentración de proteínas en una
muestra de origen animal.

Resultados:
Discusión:

Con los resultados obtenidos en el espectrofotómetro se observó la variación de

absorbancia en las diferentes muestras (P1 y P2) sabiendo con anterioridad y
preparándose con concentración conocida de la solución homogenizada de hígado,
se analizó las proteínas contenidas en este calibrando nuestra curva con estándares
de seroalbúmina bovina, esto es importante ya que es la representación gráfica de
una señal que se mide en función de la concentración de un analito, en este caso el
de nuestro interés las proteínas contenidas en el hígado examinado.

Gracias a esto a la calibración que incluye la selección de un modelo para estimar

los parámetros que permitan determinar la linealidad de esa curva. “y”, en
consecuencia, la capacidad de un método analítico para obtener resultados que
sean directamente proporcionales a la concentración de un compuesto en una
muestra, dentro de un determinado intervalo de trabajo (María Antonia Dosal, 2008),
con lo anterior efectuado supimos conocer la concentración de nuestras muestras
problemas con los resultados experimentales.

Conclusión:

Fue muy importante haber usado el método de Lowry ya que es un método que nos
permitió hacer la valoración cuantitativa de las proteínas contenidas en nuestra
muestra de hígado. La curva que se realizó nos permitió tener un patrón en cual
podíamos comparar y verificar la concentración de proteína contenida.
Se logró homogenizar totalmente el hígado con el agua y esto se llevó a cabo para
lograr una ruptura celular y a partir de ahí tomamos nuestra alícuota. Pudimos
observar en nuestro tubo de ensayo la detección de gran cantidad de proteínas que
como ya sabemos están formadas por aminoácidos y estos desempeñan variedad
de funcionamientos dentro de nuestro organismo, aunque es un alimento que no es
tan comúnmente consumible es rico en proteínas y beneficioso para quien lo
consume.

Bibliografía
Guillén, V. L. (5 de abril de 2015). Universidad de Valencia. Recuperado el 28 de
agosto de 2019, de Universidad de Valencia :
https://www.uv.es/tunon/pdf_doc/proteinas_09.pdf
Johnson, M. (28 de febrero de 2012). Labome. Recuperado el 28 de agosto de 2019,
de Labome: http://www.labome.es/method/Protein-Quantitation.html
María Antonia Dosal, M. V. (21 de junio de 2008). UNAM. Recuperado el 28 de
agosto de 2019, de UNAM:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/CURVASDECALIBRACION_23498.pdf