Universidad ICESI 2019-2

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Síntesis de Fluoresceína a partir de Resorcinol y Anhídrido ftálico y su

comportamiento según los cambios de pH, evaluados por medio del método
de espectrofotometría UV.
Arboleda Isabella A, Muñoz Ángela B, Velásquez Manuela c
Laboratorio Química Orgánica II, Química Farmacéutica, Departamento de Química, Universidad ICESI, Colombia.

Información del Resumen

artículo
Síntesis de la Fluoresceína a partir de Resorcinol y Anhídrido ftálico, se analizan los diferentes espectros
de absorción de este compuesto en pH ácido, neutro y básico. Los espectros que se obtienen en el
Historia del artículo:
Entregado 9 septiembre
espectrómetro UV-Vis muestra la absorbancia de la molécula para diferente valor de longitudes de onda
2019 y por el contrario el color que se observa es la radiación emitida. También se tratará la espectrometría de
Revisado masa, IR, RMN H, RMN C.
Aceptado © 2019 Universidad ICESI

Keywords:
Fluoresceína
Resorcinol
Anhídrido ftálico
Espectroscopía
pH

1. Resultados.
Los resultados obtenidos para el compuesto Fluoresceína al ser
observado en el espectro UV-Vis tuvieron diferentes longitudes de
onda de absorción para cada pH al que fue sometido; en este caso se
trató en medio ácido, neutro y básico.
En la Figura 1. Fluoresceína en medio ácido, se le añadió ácido
clorhídrico (HCl). Como se observa en la imagen hubo un pico más
notable que los otros, que indica una absorbancia de aproximadamente
350 nm. También hubo otros tres picos de menor pronunciación, los
cuales se encontraban entre 250nm, 310nm y el último de una longitud
de 430nm. Para este pH ácido se observaba que emitía un color menos
fluorescente.

Ilustración 1. Fluoresceína en medio ácido.

Ilustración 2. Fluoresceína en medio neutro.

En la ilustración anterior, se observa la absorbancia de la fluoresceína en

A
Corresponding author.
E-mail addres: isabela.arboleda00@gmail.com (I-Arboleda)
B angelita22lm@hotmail.com (A-Muñoz)
C manusofi2000@gmail.com (M-Velásquez)
un medio neutro que en este caso fue el agua. Se observan 3 picos, 2 de estos
con una altitud similar, el primero en 250nm, el siguiente en 290nm
aproximadamente y el último de estos en 480, un poco similar a la absorbancia
con el ácido clorhídrico al igual que el color observado. Tanto para esta
absorbancia y la otra el rango en el espectro fue de 250nm a 600nm.

Ilustración 3. Fluoresceína en medio básico.
La longitud de onda absorbida correspondiente para este espectro
es de la Fluoresceína con Hidróxido de sodio (NaOH). A diferencia de
las dos ilustraciones mostradas anteriormente esta tuvo un único pico,
que se hallaba aproximadamente entre los 500nm de absorción, por otro
lado, el rango del espectro fue de 400nm a 800nm.
Ilustración 4. Espectro 1H-RMN de la fluoresceína
Después de obtener el rendimiento experimental se trabajó con
los diferentes espectros de la molécula, en este caso, el espectro de la
Ilustración 4. Espectro 1H-RMN; se puede observar muestra las
diferentes señales de distintos hidrógenos que posee la molécula de
fluoresceína, donde se obtuvieron 7 tipos de hidrógenos. Siendo el
más desplazado (hacia la izquierda), aquel hidrógeno proveniente
del OH.

Reacción 1. Sintesis de Fluoresceína a partir del resorcinol y anhídrido Ilustración 5.Espectro RMN 13C para la fluoresceína
ftálico
En este espectro de Carbono 19, se identifica los diferentes
1. Resorcinol tipos de carbono dentro de la molécula, indica que hay 7 carbonos
2. Anhídrido ftálico idénticos entre sí y 13 que no son similares, causantes de estas
señales. Los más desplazados es debido a la electronegatividad de
Tabla 1. Rendimiento de la Fluoresceína su átomo vecino.

Resorcinol Anhídrido Ácido Ácido

Ftálico Sulfúrico Clorhídrico
Peso (g) 0.550 0.375 N.A N.A
Volumen(mL) N.A N.A 0.13 0.25
Rendimiento 98.8%
Peso Fluoresceína 0.8175
obtenida

Cálculos del rendimiento

C8H4O3 →Anhídrido ftálico

C6H6O2→Resorcinol Ilustración 6. Espectro de masas para la fluoresceína

C20H12O5→Fluoresceína El espectro de masas arrojó el peso molecular de este compuesto,
que fue de 332g/mol, que es el último pico que se observa, en los
0.550g C6H6O2 1 𝑚𝑜𝑙 C20H12O5
siguientes picos más altos dieron el peso molecular de los cationes
110.1𝑔 𝑥 = 2.49𝑥10−3 𝑚𝑜𝑙 C20H12O5 → formados cuando se parte la molécula, teniendo valores de 287, 288 y 272
2 𝑚𝑜𝑙 C6H6O2
𝑚𝑜𝑙
𝑅𝑒𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑜 𝐿í𝑚𝑖𝑡𝑒 g/mol.

0.375𝑔 C8H4O3 1 𝑚𝑜𝑙 C20H12O5

148.1𝑔 𝑥 = 1.53𝑥10−3 𝑚𝑜𝑙 C20H12O5
C8H4O3
𝑚𝑜𝑙

332.31 𝑔 𝐶20𝐻12𝑂5
2.49𝑥10−3 𝑚𝑜𝑙 C20H12O5 × = 0.8274g C20H12O5
1 𝑚𝑜𝑙 𝐶20𝐻12𝑂5

0.8175𝑔
% 𝑅𝑒𝑛𝑑. = 𝑥100
0.8274𝑔
= 98.8%

Ilustración 7. Espectro IR de la fluoresceína.
Finalmente, para el espectro infrarrojo (Ilustración 7) se pueden
identificar diferentes bandas vibracionales o longitudes de onda
como el enlace C=O, C=C también C=C del anillo, O-H, C-O, p
diferentes valores para los enlaces C-H. Donde arrojaba valores para
los alquenos y aromáticos entre 2400 y 2600 cm-1. Para el doble enlace
de alquenos valores aproximados entre 1400 y 1600 cm-1. y de 1000 a
1350cm-1 anillos aromáticos, por último, entre 2800 y 3000cm-1
2. Experimental
2.1 General
La síntesis de fluoresceína se llevó a cabo bajo condiciones
ambientales de Cali. Se utilizaron ciertos reactivos para esta
reacción como: resocinol con una pureza ≥ 99%, anhidro
ftálico 99,5% y,para evaluar el comportamiento de la
fluoresceína en diferente medios se utilizaron hidróxido de
sodio con pureza >98%, Acido Clorhidrico al 36% y agua
destilada con 99,5%, reactivos distribuidos por la empresa
Sigma-Aldrich. Se registraron RMN-1H en un
espectrofotómetro Shimadzu UV-1800 usando CDCl3 como
disolvente, estos espectros se informaron según la
absorbancia en (Abs) y longitud de onda en (nm), además de
esto se evaluaron los tres medios en una lámpara ultravioleta
(ICESI, 2019).
2.2 procedimiento típico para la síntesis de la fluoreceina.
Se pesó resocinol (Benzene-1,3-diol) 0,55g (0,0049M) y anhidro
ftálico (2-benzofuran-1,3-dione) 0,375g (0,0025M) se los macero en el
balón y se procedió a agregarle H2SO4 concentrado (0,13 ml), se
ensambló un refrigerante para el flujo y se inició agitación con
calentamiento constante a temperatura de 200°C, por un tiempo
aproximadamente de 30 minutos o hasta la formación de una masa
café. Después de esto se agregó HCl (0,25ml en 5ml agua) por el
refrigerante, posteriormente se calentó a temperatura de 200°C por
20 minutos, hasta que la fluoresceína se adhiera a las paredes del
balón, finalmente se filtra en una bomba al vacío con agua helada y
se pesa el producto de color anaranjado oscuro y el residuo de agua
que este pudo a ver absorbido se evaporo en el horno por unos
minutos.
Para observar en la lámpara ultravioleta se prepararon dos
muestras, primero se agregó NaOH (1M, 5ml) mas fluoreceina, y
otra muestra con soló 3ml de filtrado, después se observó la luz
reflejada con la luz UV con una longitud de onda de 370nm.
Para observar en el espectofotometro se realizaron 3 muestra en
diferentes medios, el primero en un medio básico con 0,25 de
fluoreceina en 10 ml de NaOH, en medio acido con 0,25 de
fluoreceina en 10 ml de HCl y finalmente en un medio neutro con
10ml de agua y 0,25 de fluoreceina
2.2.1 Benceno-1,3-diol(1)
Solido blanco; pf:110°C; pe:277°C; el espectro de RMN-1H presenta 4
señales: 9,15 ppm (2H) para OH, 6,929 ppm (1H) para el H más alejado
de los OH,6,22 ppm (1H) para el H en medio de los dos OH y 6,21 ppm
(2H) para los H adyacentes a los OH. Para el espectro RMN-13C presenta
4 señales: 157,73 ppm de los dos carbonos con el OH, 103,55 ppm del
carbono en medio de los dos OH, 108.52 ppm de los carbonos adyacentes
al OH y 131,65 ppm del carbono más alejado de los OH , para el espectro
IR presenta una señal entre 3000-4000 cm-1 que pertenece a los OH y el
espectro de masa presenta en su última señal el mismo peso de este
compuestos siendo este 110g/mol.
2.2.2 2-benzofuran-1,3-dione(2)
Solido blanco; pf:131°C; pe:295°C; el espectro de RMN-1H presenta 2
señales: 8,04 del benceno (2H, doblete), 7,93 del benceno (2H,triplete), .
Para el espectro RMN-13C presenta 8 señales: 125,6-131,1 ppm de los
carbonos del benceno, 162,2 ppm de los carbonos del ciclo pentano, para
el espectro IR presenta una señal entre 2400-2600 cm-1 que pertenece al
benceno y en 1720 cm-1 para la cetona y el espectro de masa presenta en
su última señal el mismo peso de este compuesto siendo este 148 g/mol
y formando tres carbocationes con masas de: 104 y 76 g/Mol
2.2.1 3',6'-dihidroxiespiro[2-benzofuran-3,9'-xanten]-1-ona(3)
Solido rojo; pf:315°C; el espectro de RMN-1H presenta 12
señales:6,56 ppm (doblete), 6,56 ppm (singulete), 6,58 ppm (doblete),
6,72 ppm (triplete), 7.28 ppm (triplete), 7,30 ppm (singulete)
perteneciente al OH, 7,70 ppm (doblete), 7,72 (doblete), 7,74
(doblete), 7,78 (doblete), 7,80 (doblete), 7,82 (doblete) los últimos seis
dobletes pertenecen a los hidrógenos de los bencenos. Para el
espectro RMN-13C presenta 14 señales: las principales son 156,9
ppm para el enlace C=C del etileno, 115.1, 158.4, 108.4 ppm para el
enlace O-C=C del benceno, 185,7 ppm para el carbonil, 128,5, 134,3
ppm para 1-etileno, 139,8, 129,0 ppm benceno, 167,6 ppm del
carboxi. Para el espectro de masas: la última señal represento la masa
molecular de este siendo 332g y la masa de los carbocationes
formados fueron tres : 287,288,272 g/mol y para el espectro infrarojo
de 2400-2600 son alquenos y aromáticos y en 3000 cm-1 aparecen OH
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