Sumário da 5ª aula 


Nutrição Bacteriana

• Necessidades em nutrientes, satisfação das necessidades em

Carbono, Oxigénio e Hidrogénio
• Categorias nutricionais.
• Necessidades em azoto, fósforo e enxofre,
• Factores de crescimento
• Processos de aquisição de nutrientes
• Meios de cultura

Recomenda-se a leitura do capítulo 5 do livro - PRESCOTT, HARLEY & KLEIN. Microbiology.

Sixth edition, Wm. C. Brown-McGraw-Hill Publishers, 2005
JMP FFUL
Composição aproximada de
uma célula
Elementos % do peso seco da
célula
Carbono 50

Oxigénio 20
Azoto 14

Hidrogénio 8
Fósforo 3

Enxofre 1
Potássio 1

Sódio 1
Cálcio 0.5

Mg2+ 0.5
Cloro 0.5

Ferro 0.2
Manganês, Zinco, ~0,3
Molibdénio, Cobre,
Cobalto
 As bactérias utilizam uma grande diversidade de fontes de
carbono

• Actinomicetes são capazes de degradar o

álcool amilico, parafina, e mesmo a
borracha
• Burkholderia cepacia pode utilizar mais de
100 compostos carbonados diferentes
• As bactérias metilotróficas utilizam o
metano, metanol, ácido fórmico etc.
 

Classificação dos organismos
Fontes de Carbono, Energia e Hidrogénio/
electrões
Fontes de Carbono
Autotróficos C02
Heterotróficos Compostos orgânicos préformados
Fontes de energia
Fototróficos luz
Quimiotróficos Oxidação de compostos orgânicos
Fontes de electrões
Litotróficos Molécula inorgânica reduzida
Organotróficos Molécula orgânica reduzida
 Categorias nutricionais
Tipos Nutricionais Fontes: - Microrganismos representativos
Energia - e - C

Fotolitoautotróficos Luz - C. inorgânicos - CO2 Cianobactérias, algas

Fotoorganoheterotróficos Luz - compostos orgânicos Bactérias fotossintética Arqueas halófitas

Energia química - C. Inorgânicos -

Quimiolitoautotróficos Bactérias ox do S Bactérias nitrificantes
CO2

Quimioorganoheterotróficos Energia química - C. orgânicos Protozoários, Fungos, Bactérias patogénicas,

• Necessidades em azoto, fósforo e enxofre.
Estes elementos para serem assimilados têm que estar na forma reduzida.
Podem ser obtidos de compostos orgânicos azotados, fosfatados ou sulfurados

Redução assimilatória dos Nitratos

Nitratos > Nitritos > > NH3
Nitrato Reductase Nitrito reductase

JMP FFUL
Redução assimilatória dos Sulfatos

Sulfato > > Sulfito > Sulfureto > compostos orgânicos sulfurados

O P pode ser obtido dos Fosfatos ou dos esteres orgânicos de P

(fosfolipidos)

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 Factores de crescimento

• Aminoácidos
• Purinas e pirimidinas
• Vitaminas
O Entrococcus faecalis necessita de 8 vitaminas diferentes

A Escherichia coli é uma bactéria prototrófica - Cresce num meio simples

tendo como única fonte de carbono a glucose. Não necessita de factores de
crescimento.
As bactérias auxotróficas necessitam de factores de crescimento não
conseguem crescer num meio só com glucose como fonte de carbono
8
O Staphylococcus aureus fornece NAD ao haemophilus influenzae
© Gloria J. Delisle and Lewis Tomalty, Queens University, Kingston, Ontario,
Canada. Licensed for use by ASM Microbe Library http:// 9
www.microbelibrary.org
 Aquisição de nutrientes

Mecanismos de transporte de nutrientes

• Difusão
• Transporte activo :
– Sistema ABC de transporte
– Transporte utilizando gradientes de electroquímicos
– Translocação de grupo
 Difusão
•Difusão passiva - O2, H2O, CO2

•Difusão facilitada – Glicerol (Enterobactérias)

Velocidade do transporte

Permease
Proteína de
transporte

Concentração do soluto
Esquema da difusão facilitada
Transporte activo
Sistema ABC de transporte
ATP-binding cassette

Proteína de ligação do
soluto
periplasma
transportador

Membrana
citoplasmática

citoplasma

Domínios de ligação
ao ATP

E. coli - glícidos : maltose, arabinose, galactose

Aminoácidos :glutamato, histidina, leucina
Estes sistemas podem bombear antibióticos para o exterior
 Transporte utilizando gradientes electroquímicos

Espaço
citoplasma
periplasmático

Proteína transportadora
Fixadora do Na+

Mudança de conformação

E. Coli : Simporte : Lactose, amino

ácidos e ácidos orgânicos – malato,
succinato
Antiporte : melibiose, glutamato

http://course1.winona.edu/sberg/ANIMTNS/symprtan.gif
 Translocação de Grupo :
Sistema PTS (phosphotransferase system)

manitol

glucose

Matriz citoplasmática periplasma

PEP: fosfoenolpiruvato
EI : enzima I
HPr : proteína termoresistente de PM. Baixo
E. Coli utiliza este sistema no transporte de: glucose, manitol,
sacarose, fructose, N-acetilglucosamina, etc
EII : Complexo enzimático II
Resumo dos processos de transporte de solutos

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Transporte do Ferro

Sideróforos :
Hidroxamatos: fungos
Fenolatos-catecolatos: bactérias
Esterase

Enterochelin
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 Classificação dos meios de cultura
• Composição
– Meios Sintéticos - Meios quimicamente definidos
– Meios complexos - (peptonas, extractos de carne; extractos de levedura)
– Meios enriquecidos (sangue de coelho ou cavalo)
• Estado
– Líquidos
– Sólidos - agar (10-15g/L)
– Semi-sólidos - agar (7g/L)
• Função
– M. selectivos : contêm inibidores, crital violeta, fucsina básica sais biliares
– M. de diagnóstico ou diferenciais
 Meio de cultura sintético
Ingrediente Função Quantidade
Glucose Fonte de C e energia 1 gr

NH4PO4 Fonte de N, tampão 5 gr

K2HPO4 Fonte de fósforo, 1 gr

tampão
NaCL Sal inorgânico, 5 gr

MgSO4.7H2O Fonte Mg e S 0,2 gr

H2O destilada Solvente 1000 ml

 Meio complexo de uso geral

Caldo nutritivo
Ingrediente Função Quantidade

Extracto de carne Proteínas, ácidos 3 gr

aminados, glícidos,
vitaminas
Peptona Péptidos, ácidos 5 gr
aminados

Nacl Iões- equilíbrio 5 gr

osmótico

H2O Solvente 1000 ml

 Meio selectivo e diferencial

MacConkey agar

Ingrediente Função Quantidade

Digesto pancreático de Peptidos, aminoácidos 17 gr
gelatina
Digesto pancreático de Peptidos, aminoácidos 1,5 gr
caseína
Digesto de carne animal Peptidos glícidos, vitaminas, 1,5 gr
nucleotideos
Lactose Indicador diferencial 10 gr

Sais biliares Inibidor 1,5 gr

NaCl Equilíbrio osmótico 5 gr

Vermelho neutro Indicador de pH 0,03 gr

Cristal violeta Inibidor 0,001 gr

Agar Agente solidificante 14 gr

H2O destilada Solvente 1000 ml

MacConkey agar

Lactose + Lactose -
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Meios de diagnóstico

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26