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Universidad de San Carlos de Guatemala

Facultad de Ingeniería
Escuela de Ingeniería Química
Área de Química
Laboratorio de BIOQUÍMICA
Segundo Semestre de 2019

Instructor: Ing. . Erwin Manuel Ortíz Castillo. Msc.

Profesor titular Escuela de Ing. Quimica.

Ing. Erwin Manuel Ortiz Castillo. Msc.

Segundo Semestre de 2019.

Alumno:__________________________________________Carnet:___________

Este documento ha sido recopilado, adaptado y editado por Erwin Manuel Ortiz Castillo. Derechos
Reservados.
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SOBRE LA REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA

Las prácticas de laboratorio se llevarán a cabo una vez por semana en los horarios
preestablecidos de la Sección A y la Sección B los días lunes (Esto estará sujeto a cambios de
acuerdo a disponibilidad de equipos y condiciones de los mismos, debido a la cantidad de
alumnos que sobrepasa en cada grupo los 20, estos cambios serán de común acuerdo con los
señores estudiantes equipos, salvo que se indidque otra cosa). Se dispone de 11 prácticas de
las cuales se seleccionarán 6 como minimo a ser efectuadas durante el presente semestre. Los
estudiantes deberan llevar sus registros de sus laboratorios, es personal. Se trabajará en
grupos, organizados por el instructor. Para la realización adecuada de las prácticas, deberán
atenderse las siguientes indicaciones:

1. Es obligatorio presentarse puntualmente a la hora de inicio del laboratorio, ya que en

ese momento se cerrará la puerta y se procederá a realizar el examen corto.

2. Exclusiones al derecho de practica de Laboratorio son:

a) Desconocimiento de la experiencia a realizar, en particular requerimiento
cognoscitivo y metodológico del mismo.
b) No tener puesta la bata de laboratorio, lentes de protección y toalla de limpieza.
c) Falta de participación de algún miembro del grupo, se le hará un control de
conocimiento de la práctica en ejecución,
d) Que falten a las normas mínimas de seguridad en el laboratorio.

3. Cada grupo debe revisar cuidadosamente el equipo que le corresponde, ya que se le

cargará al grupo cualquier faltante o rotura. En caso de que no se reponga el material
dañado o perdido durante la realización de la práctica, el estudiante o el grupo completo
deberá ser reportado al listado de personas que deben cristalería, material o equipo
dañado. Si durante la realización de la práctica se requiere de equipo adicional, deberá
ser solicitado al instructor y se le cargará a la hoja de responsabilidad.

4. No se aceptan visitas durante la realización de la práctica, así como tampoco se permite

hablar a través de las ventanas..

5. Se prohíbe terminantemente comer, beber, fumar dentro del laboratorio.

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6. No se permitirá reponer ninguna práctica.

7. Al finalizar la práctica deberá entregarse al instructor una hoja con los datos originales,
que contiene en una forma breve y concisa todas las observaciones experimentales de
la práctica, identificándose con el nombre, carnet y firma de cada uno de los integrantes
así como el número del grupo, con letra clara y limpia. No se aceptarán hojas
arrancadas de cuaderno.

8. Para las prácticas inmediatas, ya sea en grupo o individuales, no se permitirá el

uso del instructivo de laboratorio, ni de ningún diagrama de flujo, solamente
deberá ingresar dos hojas de papel bond tamaño carta, calculadora no
programable (no HP 48 o 49 G, ni Casio Fx 880), lápiz, lapicero y una regla de ser
necesario.

DISTRIBUCIÓN DE LA NOTA . EVALUACIÓN

La nota de laboratorio de BIOQUÍMICA. Está distribuida de la siguiente manera:

Reportes 14.00 puntos
Cortos 8.00 puntos
Prereportes 3.00 puntos.

TOTAL 25.00 puntos

La nota mínima para aprobar el laboratorio es de 15.25 equivalente al 61% o lo

que se acuerde en el curso.

Existe siempre la posibilidad de realizar cambios en las prácticas por motivos de

disponibilidad de reactivos o de equipos, por lo que, se avisará con anticipación
para solventar algunos inconvenientes.
Todo que no esta contemplado en este instructivo será resuelto por el instructor.
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Las personas que estén llevando el curso de Bioquímica durante el presente

semestre y se desasigne tiene la obligación de avisar al instructor haciendo
efectivo enviándole al instructor una nota.

NORMAS GENERALES DE SEGURIDAD

PARA EL LABORATORIO DE BIOQUÍMICA.

|El riesgo de sufrir un accidente puede ser disminuido notoriamente, si todas las
instrucciones son cuidadosamente seguidas y si se hacen las cosas con cuidado razonables y
sentido común.

Casi todos los reactivos usados en el laboratorio de Bioquímica son tóxicos, inflamables
o ambos. Para dar una idea de la toxicidad de éstos, puede hacerse mención del Eter dietilico o
isopropilico, éter del petróleo éstos son inflamables por lo que es necesario utilizar estufas
eléctricas y no tener llamas presentes en el laboratorio porque existe siempre posibilidad de
incendio, debe utilizarse si es posible o como regla, guantes de hule o de cirugía ya que es una
membrana que no permite el contacto directo con la piel, lo que no permite que a través de la
piel se absorban sustancias tóxicas.. Si bien es cierto que se limitará el uso de compuestos tan
tóxicos, debe de ser tomada toda posible precaución para evitar la inhalación, ingestión o
derrame de sustancias.

Para poder desarrollar con seguridad la práctica de laboratorio, deberán tomarse en

cuenta las siguientes indicaciones (cualquier desacato de las mismas puede traer graves
consecuencias, tanto a usted como a sus compañeros de trabajo):

PROTECCION PERSONAL
1. El estudiante deberá llevar puesta en todo momento su bata de protección, la cual debe ser
de manga larga, con broches metálicos (de preferencia) hasta el cuello y cubrir por lo menos
hasta la altura de las rodillas.

2. Los ojos deben ser protegidos durante todo el período de laboratorio, parezca o no peligroso
lo que esté haciendo, por ello son necesarios los lentes de seguridad.
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IMPORTANTE: La desobediencia a las anteriores normas de protección personal

dentro del laboratorio puede ser sancionada con: no ingreso al laboratorio, un
descuento del 10% hasta un 30% del valor del reporte de dicha práctica o expulsión del
estudiante de la práctica).

NORMAS DE SEGURIDAD
1. Mantenga su mesa de trabajo limpia y ordenada. Mantenga siempre un limpiador a mano
(toalla pequeña). No ponga sobre ella libros o aparatos que no esté usando.
2. Evite los juegos y actitudes violentas en beneficio de su seguridad personal y la de sus
compañeros de trabajo. Sea cortés, acomedido, amable y respetuoso con sus compañeros.
Las buenas relaciones interpersonales son importantes para su trabajo.

3. Adquiera el hábito de trabajar de pie sin inclinarse demasiado sobre los tubos o aparatos.

4. Cuando trabaje con sustancias inflamables, asegúrese de que no haya llamas en su

proximidad.

5. Se debe evitar el contacto con las sustancias usadas y nunca saborearlas. Lávese las
manos después de efectuar transferencias de líquidos o cualquier otra manipulación de
reactivos.

6. Al determinar el olor de un compuesto, coloque el recipiente a no menos de una cuarta de la

nariz y suavemente lleve con la otra mano un poco del aire que está sobre el recipiente,
inhale lentamente. Si no detecta olor alguno, puede acercar más el recipiente pero nunca
inhale profunda ni directamente.

7. Nunca regrese el reactivo sobrante a la botella con el reactivo original. Descártelo. Nunca
introduzca varillas de agitar, pipetas, goteros, etc. en las botellas de reactivos. Transfiera un
volumen prudencial de la botella a un earlenmeyer o beaker y de allí tome lo que necesite.
Etiquete cada muestra para conocer su contenido (fórmula y concentración). Nunca
lleve los frascos de reactivos a su mesa de trabajo. Si se toma demasiado, déjese el exceso
para que sea utilizado por otros estudiantes, o bien, descarte en el lugar apropiado lo que no
use.
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8. Tape perfectamente los reactivos después de usarlos. Con ello evitará el desperdicio y la
contaminación.

9. Lea las etiquetas antes de utilizar los reactivos químicos. Se debe adquirir la seguridad de
que se tiene el reactivo químico correcto. Si algún frasco tiene la etiqueta deteriorada,
repóngala inmediatamente.
10. Caliente lentamente los tubos de ensayo y cualquier otro equipo de vidrio, antes de
calentarlos fuertemente.

11. Cuando se esté calentando un líquido en un tubo de ensayo, o bien, se esté llevando a
cabo una reacción en él, nunca dirija la boca del tubo hacia usted mismo o hacia algún
estudiante vecino.

12. Nunca vierta agua en ácido concentrado. Viértase siempre lentamente el ácido en el agua,
al mismo tiempo que se mezclan mediante un agitador, y de preferencia se realiza el
mezclado en un baño frío.
13. Si durante un experimento se desprenden vapores que sean peligrosos, hágase bajo la
campana del extractor.

14. Colóquense todos los desperdicios químicos en los recipientes indicados por el instructor.
Si no se tienen recipientes disponibles. Todos los desperdicios sólidos (excepto aquellos
que se indiquen) deberán colocarse en los cestos de desperdicios. No tire los sólidos en el
drenaje.

15. Maneje con cuidado y precaución los aparatos calientes y las sustancias corrosivas como
ácidos y bases fuertes.

16. Si se derrama cualquier reactivo químico sólido, límpiese. Si se derrama cualquier ácido o
base sobre la mesa o el piso, espolvoréese un poco de carbonato hidrogenado de sodio
sobre el producto derramado para neutralizarlo, enjuagando después.

17. Cuando se manipule vidrio para meterlo en tapones o mangueras, se debe lubricar con
glicerina, o al menos agua, y proteger las manos con una toalla. Las manos deben trabajar
muy próximas para evitar cortes en la piel (ver Figura 1).
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18. Nunca se debe trabajar sin que haya alguna otra persona en el laboratorio. Se debe
trabajar cerca de otras personas para que éstas se den cuenta rápidamente de un accidente
y puedan dar ayuda.

19. Si se siente desfallecer; siéntese, ponga la cabeza entre las piernas y avise a sus
compañeros o al instructor.

20. Si se salpican los ojos, cara o manos con cualquier ácido, lávense con abundante agua.
Téngase presente la situación de la fuente de agua más cercana, en tal forma que se pueda
ir a ella tan rápido como sea posible. Si alguien salpica con estas sustancias, notifíquese al
instructor, quien recomendará acción posterior.

21. Notifique inmediatamente al instructor cualquier lesión o accidente, por leve que sea. Él
sabrá qué hacer y cómo ayudarlo.

22. Tan pronto como se termine un experimento, desmóntese los aparatos y límpiese el equipo
utilizado. Regrese todo equipo al lugar designado.

23. Todos los experimentos de este manual tienen sus instrucciones y procedimientos, los
cuales deberá seguir fielmente para evitar en lo posible cualquier error. Nunca se deberán
realizar experimentos no autorizados.

24. En caso de duda consulte a su instructor .

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COMO REPORTAR

Uno de los objetivos de este laboratorio es que el estudiante aprenda a elaborar un

reporte técnico, por lo que se pondrá especial énfasis en los aspectos que comprende el mismo.

Un reporte debe ser breve, conciso y claro, aunque debe ser suficientemente específico
para que el lector pueda profundizar en cualquier aspecto que sea de interés. Dado que su
propósito es transmitir información a otros deberá responder a las preguntas siguientes:

¿Cuál es el propósito del reporte? ¿Qué información va a transmitir? ¿Por qué va a transmitir
esa información? ¿Quién va a leer el reporte? ¿Cuál es el nivel cultural y científico del lector?
¿Por qué lo va a leer?

Las secciones de las cuales consta un reporte de Química Orgánica, y el orden en el

cual deben aparecer, son:
A. Carátula
B. Indice
C- Resumen (al final) o 10
Introducción al inicio
C. Objetivos de la práctica 05
D. Marco teórico 05
E. Marco Metodológico. 05

F. Resultados 15
G. Pruebas de identificación
H. Interpretación de resultados 30
I. Conclusiones 15
J. Observaciones 05
K. Referencias bibliográficas 05
Apéndice:

L. Hoja de datos originales (firmada)

M.Muestra de Cálculo/prepara-
Ción de reactivos.
M. Fotografias.
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En caso de no adjuntar la hoja de datos originales tendrá cero en el reporte; ya

que para poder realizar el reporte es necesario contar con datos y observaciones
obtenidos durante la experiencia. En caso de inconcordancia entre la hoja de datos
originales y los datos u observaciones citados dentro del reporte automáticamente se
anulará dicha sección del reporte.
Si son hallados dos reportes parcial o totalmente parecidos se anularán
automáticamente dichos reportes.
Se deberán incorporar fotografías si esto fuera posible a los reportes para
ilustrarlos de una mejor manera.
La introducción se pone al inicio y si es resumen se pone al final.
Debe aplicarse el procedimiento de presentación en formato adicional que se
proporcionará sobre la presentación del reporte en cuanto al tipo de letra etc.

C. RESUMEN (se coloca al final) y si es INTRODUCCIÓN (se coloca al inicio).

Tiene por objeto que el lector pueda tener una idea completa del trabajo sin tener que
leerlo todo, por lo que debe expresar de una manera general el contenido del mismo.
Básicamente debe responder a los siguientes cuestionamientos:

 ¿Qué se hizo? Se refiere a lo que se alcanzó con el desarrollo general de la práctica

 ¿Cómo se hizo? Se refiere al procedimiento descrito resumidamente, si se utiliza un método

específico mencionarlo, indicar los reactivos utilizados.

 ¿A qué se llegó? Se refiere al resultado específico de la práctica (generalmente incluye el

rendimiento); en el caso de la síntesis de un compuesto puede mencionarse si el método
empleado produce verdaderamente el resultado esperado sobre la base de las pruebas de
identificación y a los resultados en sí.

 ¿Bajo qué condiciones se hizo? Se refiere a las condiciones de proceso y ambientales si

afectas al fenómeno.
No escriba las anteriores preguntas, recuerde que usted debe de redactar lógicamente.
D: OBJETIVOS: En esta sección es necesario colocar los objetivos de la práctica de
laboratorio, guía la práctica y la construcción de las conclusiones.
E. MARCO TEÓRICO: En esta sección se colocan los hechos, reacciones,
fundamentos relacionados con el tema en estudio.
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F. MARCO METODOLÓGICO: En esta sección se colocan los procedimientos que

se siguen en la práctica.
G. RESULTADOS

En esta sección deben incluirse todos los datos obtenidos al final de la práctica, como
masa o volumen recuperados, contenido de algún elemento en un compuesto o cualquier otro
tipo de resultado final. Además de debe incluir el porcentaje de rendimiento en el caso que
fuera posible determinarlo.
En algunas prácticas los resultados pueden ser solamente cualitativos, como por
ejemplo la determinación de elementos que compone una muestra, determinación de la
naturaleza de un compuesto. Así como los resultados de las pruebas de identificación y deben
de presentarse en una tabla preferiblemente.

H PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN

Las pruebas de identificación tienen como finalidad asegurarse de que el método

utilizado es adecuado para obtener el producto deseado, teniendo como principio la evaluación
de propiedades, tanto físicas como químicas, del compuesto en cuestión; estas pruebas se
realizan poniendo en contacto el compuesto a ser identificado con algún otro compuesto (con el
cual se espera un comportamiento conocido y observable)
La forma de presentar una prueba de identificación es la siguiente:
• Prueba No.
• Nombre de la Prueba:
• Criterio de la Prueba:
• Reacción:
• Observación:
• Conclusión:

El nombre de la prueba se refiere al reactivo con el cual se trata el compuesto

desconocido.
En el criterio de la prueba se enuncia el comportamiento de la muestra, al ser sometida
a la prueba realizada, según la bibliografía, incluyéndose además la referencia y página de
donde se sacó el criterio.
En reacción debe indicarse la que sucede cuando se lleva a cabo la prueba, debiendo
aparecer debidamente balanceada; en algunas pruebas se evalúan únicamente propiedades
físicas, por lo tanto, se debe indicar que no existe por tratarse de una propiedad física.
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La observación se refiere a lo ocurrido en el laboratorio y debe enunciarse en términos

de “producto obtenido en el laboratorio”, sin citar el nombre del compuesto que supuestamente
se preparó.
Finalmente, la conclusión se refiere a si la prueba fue positiva o negativa; es lo único
que debe referirse. Una prueba positiva implica que el compuesto sufrió un cambio químico o
físico; en caso contrario la prueba es negativa.

I. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Esta sección corresponde a una demostración, explicación y análisis de todo lo que

ocurrió y resultó de la práctica, interpretando de una manera cuantitativa y cualitativa, tanto los
resultados como los pasos seguidos para la obtención de los mismos. Aún cuando la discusión
se apoya en la bibliografía, no debe ser una transcripción de la misma, ya que el estudiante
debe explicar con sus propias palabras y criterio lo que sucede en la práctica. Cuando se haga
uso de la teoría en alguna parte de la discusión debe indicarse colocando al final del párrafo
(que debe ir entre comillas), la bibliografía de donde se obtuvo la información. La forma de
colocarlo es la siguiente: (Ref. No.1, Pág.5)
Además debe analizarse cada uno de los pasos del mecanismo de reacción del
compuesto (en caso de que se haya sintetizado), mencionando aspectos importantes como las
concentraciones de las especies involucradas, temperatura, medio de la reacción, etc.
Otro punto a discutir es el procedimiento experimental, el cual debe ser explicado
mediante la aplicación de conocimientos generales de química y fisicoquímica. Se debe
discutir el procedimiento en una forma ordenada, justificando cada uno de los pasos seguidos
para el desarrollo del experimento, tomando en cuenta las correcciones hechas al mismo. Por
ejemplo, debe explicarse el por qué de un calentamiento para aumentar la temperatura en una
reacción, la importancia de un lavado, y otros.
En cuanto a los resultados propiamente dichos, debe explicarse el por qué de los
mismos. Si el resultado está expresado como un porcentaje de rendimiento, debe explicarse
por qué éste es alto, bajo o incluso superior al 100%. Si es un resultado cualitativo debe
mencionarse los fundamentos en los cuales se basó para obtenerlo.
Por último, sobre la discusión de las pruebas de identificación, debe explicarse qué
propiedad del compuesto se evalúa, la razón por la cual el compuesto debe o no reaccionar con
el identificador, etc. Si alguna prueba resulta negativa, debe argumentarse alguna razón (de
tipo experimental), y debe evaluarse qué tanto afecta el resultado de la práctica.
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J. CONCLUSIONES
Constituyen la parte más importante del reporte. Las conclusiones son “juicios críticos
razonados” a los que ha llegado el autor, después de una cuidadosa consideración de los
resultados del estudio o experimento y que se infieren de los hechos. Deberán ser LÓGICAS,
CLARAMENTE APOYADAS Y SENCILLAMENTE ENUNCIADAS. Esta sección deberá de ser
extraída de la interpretación de resultados ya que allí han sido razonadas.

PROCEDIMIENTO (se coloca en el marco metódológico).

Es una descripción completa del procedimiento seguido en el laboratorio y debe
de incluir los cambios que hayan sido hechos durante la experiencia, debe de ser
escrito en tiempo pasado perfecto.
K. OBSERVACIONES

Las observaciones describen lo ocurrido durante la práctica en una forma empírica, es

decir, solamente se observan las propiedades o cambios visibles que sufren los compuestos sin
interpretar la naturaleza de dichos cambios.
En las observaciones se deben incluir las características de los reactivos (estado, color
o cualquier otra propiedad física); se deben describir los cambios que resultan de la mezcla de
algunos reactivos (donde no necesariamente ocurre reacción), como cambio de color, formación
de fases (describiendo su aspecto), liberación de calor, etc.; también deben mencionarse las
observaciones que se den como resultado de algún procedimiento específico, como
calentamiento, filtración, etc. Finalmente, deben colocarse las observaciones de las pruebas
de identificación, mencionando tanto las características de los reactivos utilizados como
identificadores, así como los cambios que resulten de la mezcla del identificador y el compuesto
a identificar. En esta sección podrá incluir únicamente las observaciones que se encuentren en
la hoja de datos originales, de no ser así tendrá cero en esa sección del reporte.

L REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Esta sección consta de todas aquellas referencias (libros, revistas, documentos)
utilizados como base bibliográfica en la elaboración del reporte. Deben de citarse como
mínimo 3 referencias bibliográficas (el instructivo no es una referencia bibliográfica), las
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cuales deben ir numeradas y colocadas en orden alfabético según el apellido del autor. Todas
deben estar referidas en alguna parte del reporte (discusión o pruebas de identificación), o de lo
contrario no tiene validez.
La forma de presentar las referencias bibliográficas es la siguiente:
1 Wade, L.G. Jr. “Química Orgánica”. Traducido del inglés. Segunda edición. Editorial
Prentice Hall. México, 1993. Págs.: 69, 84-87.
ES IMPORTANTE SEÑALAR QUE LA ESCRITURA DE LA BIBLIOGRAFÍA HA
VARIADO, MÁXIME CUANDO SE UTILIZAN LOS RECURSOS DEL INTERNET,
DEBE AGREGARSE ENTRE PARENTESIS LA FRASE EN LÍNEA (EN LÍNEA), E
INDICARSE EL DÍA Y LA HORA EN QUE FUE CONSULTADO EN EL INTERNET.
Puede utilizarse el manual del IICA como referencia para escribir bibliografías de todo tipo.
M Hoja de datos originales (firmada por el instructor) sin esta hoja no se calificará el reporte.

DETALLES FÍSICOS DEL REPORTE

El reporte debe presentarse en hojas de papel bond tamaño carta. Cada una de
las secciones descritas anteriormente, deben ir identificadas y en el orden establecido.
Todas las partes del reporte deben ir impresas a computadora o escritas a máquina, a
1.5 espacios entre líneas.
Se deben de numerar las páginas en la parte superior derecha.
Numerar las ecuaciones entre paréntesis con números arábigos.
También deberá numerar y titular las tablas, indicar las unidades y dimensiones
e indicar la fuente del reporte de donde proviene la información tabulada.
Para reducir el consumo de papel deberá ser impreso a doble cara.
METODOLOGÍA:
Los reportes se entregarán a los siete días calendario de la realización de la práctica, al
iniciar la práctica siguiente. Indiscutiblemente no se aceptarán reportes tarde. El
instructor tendrá una semana para entregar las notas correspondientes a cortos y
reportes, y los alumnos podrán solicitar revisión de éstos en los próximos 3 días
calendario. De no solicitar las revisiones correspondientes durante este período, el
estudiante perderá su derecho a pedir revisiones de este tipo.
Los estudiantes tendrán que desarrollar una práctica de laboratorio, que puede incluir el utilizar
un espectrofotómetro de absorción en la región visible y que será presentada entre la práctica 4
y 5. Además realizarán algunas revisiones bibliográficas para conocer algunas técnicas
instrumentales.
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AREA DE INVESTIGACIÓN.
EN EL TRANSCURSO DEL CURSO DE BIOQUÍMICA SE REALIZARÁN ALGUNAS
INVESTIGACIONES QUE SE INCORPORARÁN A LOS REPORTES RESPECTIVOS.
El trabajo de investigación deberá incluir las siguientes secciones:

• Carátula
• Introducción
• Objetivos
• Marco Teórico
• Recomendaciones
• Referencias bibliográficas

EN EL CASO QUE LOS ESTUDIANTES ESTEN INTERESADOS EN AMPLIAR SUS

CONOCIMIENTOS EN BIOQUÍMICA EN LAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO,
ESTOS PODRÁN DESARROLLAR ALGUNOS TEMAS ADICIONALES,
CONSTRUCCIÓN DE EQUIPOS O APARATOS O IMPLEMENTACIÓN DE OTRAS
TÉCNICAS DE LABORATORIO CON APLICACIÓN EN ALIMENTOS U OTRO.

LISTA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

(Debido a que hay dos secciones, A y, B. Las prácticas se programarán de acuerdo al tiempo disponible que
se tenga.). En caso de que exsista suspension de clases por cualquier motivo las practicas de laboratorio de
Bioquimica se reprogramaran oportunamente.

PRACTICA # 1 TITULACIÓN DEL ÁCIDO GLUTÁMICO

PRACTICA # 2 PROPIEDADES QUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS.
PRACTICA # 3 PROPIEDADES QUÍMICAS DE LAS PROTEÍNAS.
PRACTICA # 4 TIPOS FUNDAMENTALES DE PROTEINAS LÁCTEAS
PRACTICA # 5 EXTRACCIÓN DEL ALMIDÓN DE PAPA Y ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA DE LA AMILASA
PRACTICA # 6 DETERMINACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES.
Práctica Opcional Extracción de aceite de aguacate.

Universidad de San Carlos de Guatemala.
Facultad de Ingeniería.
Escuela de Ingeniería Química.
Área de Química. Laboratorio QUÍMICA ORGÁNICA 1
Segundo semestre 2019
CALENDARIO DE ACTIVIDADES LABORATORIO DE
QUÍMICA ORGÁNICA 1. Segundo Semestre de 2019.
Semana
Lunes 15 de Julio
Del lunes 22 de julio al 27 julio
Del lunes 29 de julio al sábado 3 de
agosto
Del lunes 5 al sábado 10 de agosto
Del lunes 12 al sábado 17 de agosto
15 de agosto Día de asueto laboral.
Del lunes 19 al sábado 24 de agosto
Del lunes 26 de agosto al sábado 31 de
agosto
Del lunes 02 al sábado 07 de
septiembre.
Del lunes 09 al sábado 14 de
septiembre.
Del lunes 16 al sábado 21 de
septiembre.
Del lunes 23 al sábado 28 de septiembre
Del lunes 30 septiembre al sábado 05 de
05 de octubre
Del lunes 07 al sábado 12 de octubre
Del lunes 14 al sábado 19 de octubre
Del lunes 21 al sábado 26 de octubre
Del lunes 28 de octubre al 02 de
noviembre.
Del lunes 04 al sábado 09 de noviembre
Se les comunicará día para hacer exámenes cortos. La programación podrá cambiar de acuerdo a las
circunstancias e intereses de los alumnos en el desarrollo de las prácticas, las cuales tendrían que ser
reprogramadas.
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Actividad
Inicio de Semestre.
Asignación virtual
Inducción de cómo reportar por sección.
Preparación de reactivos.
Práctica No. 1: Titulación ácido glutámico.
Práctica No. 2. Propiedades Químicas de
los aminoácidos. Entrega de reporte No.
1.
Revisión de reporte No. 1. Entrega de
Reporte No. 2.
Práctica No. 3. Propiedades Químicas de
las proteínas.
Revisión de Reporte No. 2. Entrega de
Reporte No. 3.
Práctica No. 4. Tipos fundamentales de
proteínas lácteas. Revisión de práctica No.
3.
Revisión de práctica 4.
SEMANA DE CONGRESOS ESTUDIANTILES.
SEMANA DE CULTURA.
Práctica No. 5. Extracción del Almidón de
la Papa y actividad enzimática de la
amilasa.
Práctica No. 6. Determinación de azucares
reductores. Entrega reporte No. 5.
Revisión de Práctica No. 5 y Entrega
Reporte No. 6.
Revisión de reporte No. 6
Entrega de calificaciones.
 16

Los reportes se entregan 1 semana después de haber realizado la práctica escrito a mano.
Cualquier reprogramación del horario se hará saber a los señores estudiantes.
El primer examen parcial y final de Bioquímica se programará durante la semana al finalizar las
primeras tres y última práctica correspondiente.

Los grupos A y B están asignados en el horario de acuerdo al horario previamente establecido.

.
Cualquier cambio en la programación se hará saber a los señores estudiantes de Bioquímica de acuerdo al
número de grupos que asistan a laboratorio.
 17

LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PRACTICA #1
TITULACION DEL ACIDO GLUTAMICO
Objetivos:
1. Que el estudiante conozca las diferentes formas en que pueden existir los aminoácidos.
2. Que el estudiante determine prácticamente el punto isoeléctrico de un aminoácido.
3. Fundamentar como se obtiene el punto isoeléctrico.
4. Construir los gráficos necesarios para determinar el punto isoeléctrico por medio de la
titulación.

Material y equipo:
2 buretas de 50 ml
2 beackers de 400 ml
1 balón aforado de 250 ml
2 pipetas volumétricas de 10 ml
2 earlenmeyers de 250 ml
1 varilla de agitación
1 vidrio de reloj
1 espátula
1 potenciómetro
1 balanza
1 juego de pinzas de bureta
1 soporte

REACTIVOS:
• Agua destilada a pH=7
• HCl 1 M
• NaOH 1 M
• Glutamato monosódico

PROCEDIMIENTO:

Primera parte:
1. Prepare 250 ml de una solución de glutamato monosódico 1 M.
Use agua destilada a pH=7, como disolvente.
2. Determinar el valor de pH de la solución preparada.
3. Tomar dos alícuotas de 10 ml cada una, de la solución del paso 1, y colóquelas en
erlenmeyers separados.
4. Al primer erlenmeyer adicione un volumen de NaOH 1 M, hasta que la solución alcance un
pH = 11. Anote el volumen agregado. Guarde este erlenmeyer previamente
identificado para la segunda parte.
5. Al segundo erlenmeyer adicione un volumen de agua destilada de pH = 7 aproximadamente
igual, al volumen de NaOH agregado en el inciso 4. Identifique el
erlenmeyer y anote el valor de pH de esta nueva solución.
6. Coloque en una bureta una solución de HCl 1 M.
7. Inicie la titulación; agregue los volúmenes de HCl según lo indique el instructor/a.
 18

SEGUNDA PARTE:

1. Tome la solución del paso 4, e inicie la titulación con HCl 1 M; agregue los volúmenes
Sugeridos por el instructor.

REPORTE:

1. Construya la gráfica de titulación del ácido glutámico con HCl con los datos obtenidos en la
primera y segunda parte de la práctica. (pH Vrs. vol. HCl agregado, pH Vrs. vol.)
2. Determine gráficamente el punto isoeléctrico ( pH Vrs. volumen de HCl agregado)
3. Ubique las regiones que se presentan en la gráfica y localice las formas ionicas del ácido
glutámico que existen durante la titulación.
4. Determine en la gráfica los valores de pK1, pK2 y pK3, con sus respectivas especies
iónicas para cada pK.
5. Escriba la reaccción de ionización del ácido glutámico.
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PRACTICA # 2
PROPIEDADES QUIMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS.
OBJETIVO:
• Familiarizar al estudiante con algunas pruebas Químicas con aminoácidos.
• Fundamentar todas las reacciones con mecanismos de reacción.
.
Pruebas con aminoácidos:
1. Prueba del Nitroprusiato Sódico
2. Prueba de Molish.
3. Prueba de azufre reducido.
4. Prueba de Elrich Diazo.
5. Prueba de Sakaguchi.
6. Prueba de ninhidrina.
7. Prueba de Hoopkins-cole.
Descripción de los procedimientos de las Pruebas con aminoácidos:
1. Prueba del Nitroprusiato Sódico
1. Se rotula los tubos con el nombre de los aminoácidos.
2. Se agrega2 mL de los respectivos aminoácidos y toma su respectiva fotografía para
comparar.
3. Se agrega 2 mL de NaOH al 10 % a los tubos del paso 2.
4. Se prepara la cámara digital para las fotografías.
5. Se agrega 1 mL de nitroprusiato sódico al 2 % a los tubos del paso 3.
6. Se anotan las observaciones.
Nota: El NaOH es irritante, usar guantes. El nitroprusiato sódico es muy tóxico y
dañino al ambiente, no descarte por el lavamanos.

2. Prueba de Molish.

1. Se coloca 2 ml de cada solución a analizar en tubos de ensayo separados.

2. Se agrega 2 gotas de 1-naftol al 5%
3. Se agrega cuidadosamente ácido sulfúrico concentrado hasta que se forme una fase
en el fondo del tubo.
4. En la interfase se observa un anillo de color púrpura que indica la presencia de un
carbohidrato.
 20

5. Se anotan sus observaciones.

3. Prueba de azufre reducido.

1. Se rotulan los tubos con el nombre de los aminoácidos.

2. Se agregan 2 mL de los respectivos aminoácidos y tomó su respectiva fotografía para
comparar.
3. Se agregan 2 mL de NaOH al 10 % a los tubos del paso 2.
4. Se agrega 0.5 mL de (CH3COO)2Pb al 10 % a los tubos del paso 3.
5. Se prepara su cámara digital para fotografíar.
6. Se sumergen los tubos por 5 minutos, en un baño de agua previamente hervido.
7. Se observa la formación de un precipitado gris obscuro.
Nota: El NaOH es irritante, usar guantes. El acetato de plomo (II) es tóxico y
dañino al ambiente, no descarte por el lavamanos.

4. Prueba de Elrich Diazo.

1. Se rotulan los tubos con el nombre de los aminoácidos.

2. Se agregan 2 mL de los respectivos aminoácidos y se toman las fotografías para
poder comparar..
3. En un tubo aparte, agregan 2 mL de ácido sulfanílico al 0.5 %, 2 mL de ácido
clorhídrico al 2 %, 2 mLde nitrito de sodio al 0.5 % y enfriar con hielo por 10 minutos.
4. prepare su cámara digital para fotografiar.
5. Se agregan a cada uno de los tubos del paso 2, 1 mL de la mezcla del tubo del paso
3.
6. Se mezclan bien y se agrega hidróxido de amonio concentrado (en la campana) con
el gotero, hasta que la solución se tornó ligeramente alcalina, verificó este cambio con
papel pH.
7. Se anotó sus observaciones.
Nota: El HCl es irritante evitar respirar vapores y tener contacto con la piel, manos
y ropa. .El hidróxido de amonio despide vapores. ESTA PRUEBA SE TRABAJA
ESTRICTAMENTE EN LA CAMPANA.
5. Prueba de Sakaguchi.
1. Se rotuló los tubos con el nombre de los aminoácidos.
2. Se agregan 5 mL de los respectivos aminoácidos y toma su respectiva fotografía para
comparar.
 21

3. Se enfria en un baño con hielo por 10 minutos los tubos del paso 2 y agregue 1 mL
de hidróxido de sodio al 40 %.
4. Se enfrian por otros 10 minutos los tubos del paso 3.
5. Se prepara su cámara digital para la fotografíar.
6. Se agregan 5 mL de 1-Naftol y 3 gotas del reactivo de sakaguchi a los tubos del paso
4.
7. Se observa el color que se forma y anotan sus observaciones.
Nota: Tener cuidado al preparar el reactivo de sakaguchi ya que el bromo es muy
tóxico y muy corrosivo.

6. Prueba de ninhidrina.
1. Se rotulan los tubos con el nombre de los aminoácidos.
2. Se agrega 1 mL de los respectivos aminoácidos y se toman su respectiva fotografía
para comparar.

3. Se agrega 1 mL del reactivo de ninhidrina a cada uno de los tubos del paso 2, y
empiece a filmar.
4. Se sumergen los tubos por 10 minutos, en un baño de agua previamente hervido.
5. Se observan los colores desarrollados y se anotan las observaciones.
Nota: El reactivo etanol-ninhidrina es inflamable, tóxico e irritante. Aleje los
mecheros, evite el contacto con ojos, piel, ropa y la inhalación de los vapores.

7. Prueba de Hoopkins-cole.

1. Se rotulan los tubos con el nombre de los aminoácidos.

2. Se agregan 2 mL de los respectivos aminoácidos y toman su respectiva fotografía para
comparar.
3. Se agregó 2 mL del reactivo de Hopkins-cole a los tubos del paso 2.
4. En la campana y con el tubo inclinado a 45 ° se deja resbalar por las paredes 1 mL
de ácido sulfúrico concentrado
6. Se observa el color que se forma y se anotan las observaciones.
Nota: El ácido sulfúrico es tóxico, corrosivo y puede causar quemaduras. El
reactivo de Hopkins es corrosivo, tóxico e higroscópico y puede causar
quemaduras. Tomar las respectivas precauciones ya que se agregará ácido a una
 22

solución acuosa. EL ÁCIDO SULFÚRICO SE AGREGA EXCLUSIVAMENTE EN LA

CAMPANA.
8. Prueba Xantoproteìca:
1. Se rotulan los tubos con el nombre de los aminoácidos.
2. Se agregan 2 mL de los respectivos aminoácidos y toman su respectiva fotografía para
comparar.
3. Se agregó 0.5 mL de àcido nítrico concentrado a los tubos del paso 2 tener cuidado
ya que es un ácido fuerte. Tomar en cuenta las precauciones para no ocasionar daños a
sus compañeros de laboratorio. Consultar al instructor.
4. Se observa el color que se forma y se anotan las observaciones.
Nota: El ácido Nítrico es tóxico, corrosivo y puede causar quemaduras. El reactivo
es corrosivo, tóxico e higroscópico y puede causar quemaduras. Tomar las
respectivas precauciones ya que se agregará ácido a una solución acuosa. EL
ÁCIDO NÌTRICO SE AGREGA EXCLUSIVAMENTE EN LA CAMPANA.
Reportar con base en el siguiente cuadro.
Pruebas efectuadas a los aminoácidos propuestos.
No. PRUEBA AMINOÀCIDO AMINOÀCIDO AMINOÁCIDO OBSERVACIONES
1 Nitroprusiato Cistina Cistina Metionina
sódico
2 Molisch Tirosina Histidina
3 Azufre Metionina Cistina Arginina
reducido
4 Elrich Diazo Fenilalanina Tirosina Histidina
5 Sakaguchi Lisina Arginina Asparagina
6 Ninhidrina Asparagina Arginina Hidroxiprolina
7 Hopkin Cole Fenilalanina Tirosina
8 Xantoproteìcae Fenilalanina Tirosina Cisteína.

Las observaciones tienen que contener el cambio que ocurre en cada uno de los
aminoácidos propuestos, por ejemplo cambios de color, formación de anillos con
coloración determinada, separación de fases, etc.
 23

PRACTICA # 3
PROPIEDADES QUIMICAS DE LAS PROTEINAS
OBJETIVO:
• Familiarizar al estudiante con algunas de las propiedades químicas más comunes de las
proteínas, especialmente aquellas que puedan ser utilizadas para distinguir entre unas y
otras.
Fundamentar las diversas pruebas con reacciones y mecanismos.
COMPOSICION ELEMENTAL DE LAS PROTEINAS
Parte 1 :
Material y Equipo:
1 tubo de ensayo
1 microespátula
pinzas parta tubo de ensayo
1 soporte de metal
1 mechero bunsen

Reactivos:
• Caseína

Procedimiento:
1. Agregue una pequeña cantidad de Caseína a un tubo de ensayo que esté completamente
seco.
2. Caliente con un mechero ( mantenga el tubo inclinado) hasta que la proteína comience a
carbonizarse. Aprecie el olor característico.
3. Anote las observaciones.

Nota: El color negro del residuo en el fondo confirma la presencia de carbono en la

proteína, y la condensación de agua en la parte superior del tubo indica la presencia de
hidrógeno.
Parte 2:
Material y Equipo:
1 tubo de ensayo
1 microespátula
pinzas parta tubo de ensayo
1 soporte de metal
1 mechero bunsen
1 mortero y pistilo
Reactivos:
• Caseína
• NaOH sólido

PROCEDIMIENTO:

1. Pulverice en un mortero una pequeña cantidad de hidróxido de sodio hasta obtener un

polvo fino. Evite el contacto con la piel.
2. Coloque una pequeña cantidad de caseína en un tubo de ensayo y agregue el hidróxido
 24

de sodio del paso 1.

3. Caliente lentamente y con precaución con ayuda del mechero.
4. Anote las observaciones.

NOTA: Puede apreciarse el olor a amoníaco lo que confirma la presencia de nitrógeno en

la proteína.
5. Determine la acidez de los vapores producidos con papel alizarina.

REACCIONES DE COLOR DE LAS PROTEINAS

Parte 3:
Material y Equipo:
2 pipetas volumétricas de 2 ml
4 tubos de ensayo

Reactivos:
• NaOH 6 M
• CuSO4 0.5%
• Caseína 2%
• Peptona 2%
• Gelatina 2%
• Glutamato monosódico 2%
• Albúmina de huevo 2%

PROCEDIMIENTO:

1. Tome 2 ml de cada una de las soluciones indicadas y colóquelas en tubos de ensayo

separados.
2. Agregue a cada tubo 2 ml de NaOH 6 M y agregue una gota de solución de sulfato de cobre
al 0.5 %. Si no se observara color azul en la solución agregue más sulfato de cobre
hasta observar un color azul o violeta según sea el caso estudiado.
3. Compare las diferencias de color entre las distintas soluciones.

Parte 4: Reacción de Elrich Diazo

Material y Equipo:
2 pipetas volumétricas de 1 ml
tubos de ensayo
1 pipeta volumétrisca de 1 ml

Reactivos:
• ácido sulfanílico 0.5%
• nitrito de sodio al 0.5%
• HCl 2%
• hidróxido de amonio concentrado

Procedimiento:
1. Coloque 2 ml de cada una de las soluciones a analizar en un tubo de ensayo.
2. En un beacker agregue 2 ml de solución de ácido sulfanílico al 0.5 %, 2 ml de HCl al 2% y
2 ml de solución de nitrito de sodio al 0.5 %.
3. Mezcle bien y después dde transcurridos 30 segundos agregue 1 ml de esta mezcla a cada
solución.
 25

4. Agite y luego agregue suficiente hidróxido de amonio concsentrado, hasta hacer que esta
mezcla se torne alcalina.
5. Anote las observaciones. La presencia de histidina produce un color rojo mientras que la
tirosina genera un color naranja.
Parte 5: Test de Azufre reducido
Material y Equipo:
2 pipetas volumétricas de 2 ml
plancha de calentamiento
5 erlenmeyers de 50 ml
1 pipeta serológica de 1 ml

Reactivos:
• NaOH 6M
• PbAc al 2%

Procedimiento :
1. Coloque 2 ml de cada solución a analizar en tubos de ensayo separados.
2. Agregue 4 ml de NaOH 6M en cada tubo.
3. Agregue 0.5 ml de PbAc al 2% a la solución anterior.
4. Caliente hasta ebullición.
5. Continúe el calentamiento por 3 ó 4 minutos más.
6. Puede ser necesario calentar la proteína por un tiempo prolongado.
7. Suspenda el calentamiento después de que se deposite un sólido negro de sulfuro de
plomo.
8. Anote sus observacciones.

Parte 6: Test de Molisch

Material y Equipo:
4 tubos de ensayo de 2 ml
5 erlenmeyers de 50 ml

Reactivos:
• alfa-naftol al 5%
• ácido sulfúrico concentrado

Procedimiento :
1. Coloque 2 ml de cada solución a analizar en tubos de ensayo separados.
2. Agregue 2 gotas de 1-naftol al 5%
3. Agregue cuidadosamente ácido sulfúrico concentrado hasta que se forme una fase en el
fondo del tubo.
4. En la interfase se observará un anillo de color púrpura que indicará la presencia de un
carbohidrato.
5. Anote sus observaciones.

Parte 7: Coagulación por calor

Material y Equipo:
2 pipetas volumétricas de 2 ml
plancha de calentamiento
5 erlenmeyers de 50 ml
1 pipeta serológica de 1 ml
 26

Reactivos:
• NaCl al 5%

Procedimiento :
1. Coloque 2 ml de cada solución a analizar en tubos de ensayo separados.
2. Agregue 1 ml de solución de NaCl al 5%.
3. Caliente hasta ebullición y obsserve la cantidad de coaglo formado.
4. Anote sus observaciones.
Parte 8: Precipitación por sales formadas por metales pesados
Material y Equipo:
4 tubos de ensayo
2 pipetas volumétricas de 5 ml

Reactivos:

• cloruro férrico al 1%
• sulfato de cobre al 2%
• PbAc al 2%
• nitrato de plata al 2%
• hidróxido de sodio 6M

Procedimiento :
1. Coloque 2 ml de cada solución a analizar en tubos de ensayo separados.
2. Agregue poco a poco un ml de una solución de cloruro férrico al 1%.
3. Repita el procedimiento agregando CuSO 4, PbAc, AgNO3.
4. En caso del CuSO4 agregue unas gotas de NaOH 6M.
5. Anote sus observaciones.

Parte 9: Precipitación por ácidos mineralees fuertes

Material y Equipo:
6 tubos de ensayo
Reactivos:

• HNO3 concentrado
• HCl concentrado

Procedimiento:
1. A 3 ml de solución de albúmina de huevo agreguee unas gotas de HNO3 concentrado.
2. Observe el precipitado que se forma al mezclar estos dos líquidos.
3. Repita el experimento con HCl concentrado.
4. Repetir pasos 1 a 3 con soluciones de peptona y gelatina.
 27

PRACTICA # 4
TIPOS FUNDAMENTALES DE PROTEINAS LACTEAS

Objetivos:
1. Conocer los constituyentes de la leche y llevar a cabo una separación adecuada de tales
constituyentes,
2. Identificar las proteínas, grasas y carbohidratos principales que se encuentran en la leche.
3. Fundamentar en este tema la composición de la leche y sus proteínas.
Material y equipo:
2 probetas de 50 ml
2 beackers de 50 ml
2 earlenmeyers de 250 ml
1 varilla de agitación
1 vidrio de reloj
1 espátula
1 potenciómetro
1 balanza
1 plancha de calentamiento
1 soporte
1 vidrio de reloj
2 embudos de separación
1 termómetro 0-150 o C

Reactivos:
• Leche
• HCl concentrado
• NaOH 6M
• MgSO4 solución saturada
• éter
• acetona

Procedimiento:
Parte 1

1. Tome una muestra de 50 ml de leche.

2. Pese la muestra y colóquela en un erlenmeyer.
3. Anote el valor de pH de la muestra.
4. Acidifique la leche con HCl concentrado gota a gota hasta alcanzar un pH de 4.6.
Observe la formación de un precipitado.
5. Separe el precipitado del filtrado usando un embudo y papel filtro.
6. Identifique el recipiente donde se recoge el suero y guárdelo par su uso posterior.
7. Transfiera el precipitado a un beacker y agregue 10 ml de éter.
8. Agite la muestra con el objeto de mezclar ambas fases.

9. Repita el procedimiento con dos alícuotas de éter de 10 ml cada una.

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10. Al sólido residual agregue 15 ml de acetona y homogenice la mezcla. Decante sobre el

papel filtro. Deseche el filtrado y repita el procedimiento con 15 ml más de acetona.
11. Transfiera el precipitado del paso 10 a un vidrio de reloj y deje secar al ambiente.
12. Pese el sólido seco.
13. Al filtrado reservado mida el pH y agregue NaOH 6M gota a gota hasta obtener un pH
de 8.
14. A la solución del paso 10 agregue unas cuantas gotas de solución saturada de sulfato
de magnesio hasta observar el precipitado coagulado.
15. Separe el precipitado y péselo cuando esté seco.

Parte 2:
1. Tome una alícuota de 50 ml de leche y colóquela en un erlenmeyer. Ebulla durante 30
minutos.
2. Acidifique con HCl hasta un valor de pH=4.6. Observe la formación de un precipitado.
3. Separe las fases por decantación y realice los pasos 7 a 12 de la parte 1 del procedimiento.
 29

PRACTICA # 5

EXTRACCION DEL ALMIDON DE PAPA Y

ACTIVIDAD ENZIMATICA DE LA AMILASA
Objetivos:
1 Fundamentar la extracción del almidón de papa.
2 Fundamentar la actividad enzimática de la amilasa con almidón de papa.

El almidón es el principal polisacárido que se encuentra en las plantas a las cuales les
sirve como reserva de alimento.
Material y Equipo
1 probeta de 25 ml
1 mechero
1 beacker de 250 ml
1 procesador sde alimentos
1 mantita
1 pipeta de 1 ml
1 varilla de agitación
1 balón de 100 ml
1 beacker de 25 ml

Reactivos
• Papa
• alcohol al 95%
• Solución de yodo en yoduro 0.001M
• Reactivo de Fehling

Procedimiento
1. Pele y pese una papa mediana.
2. Obtenga una pulpa fina con el procesador.
3. Colocar en un beacker la pulpa y el líquido que haya quedado en el procesador.
4. Agregue un volumen igual de agua y agite vigorosamente.
5. Filtre la pulpa con la mantita y recupere el filtrado en un beacker. Exprima bien la mantita.
6. Permita que el almidón se asiente y decante el líquido sobrenadante.
7. Lavar dos veces más con agua y decantar.
8. Filtrar el producto y lavarlo con alcohol.
9. Llevar a sequedad. Pesar.
Actividad enzimática de la amilasa.
1. Medir 100 ml de agua hirviendo y disolver 1 gramo de almidón.
2. Medir 25 ml de la solución anterior y colocarlo en un erlenmeyer de 125 ml.
3. Dejarlo enfriar.
4. Preparar un baño María e introducir el erlenmeyer.
5. Agregar 1 ml de saliva y agitar vigorosamente.
6. Tomar una alícuota de 1 ml, en intervalos de 1 minuto y agregar 1 ml de solución 0.001M
de yodo/yoduro.
7. A la muestra que ya no presente color practicarle Fehling.
8. Tomar una alícuota de 1 ml de la solución original de almidón y practicarle Fehling.
Reportar:
• % de almidón en la papa
• etapas de la hidrólisis del almidón
• azúcares reductores y no reductores
 30

PRACTICA # 6
DETERMINACION DE AZÚCARES REDUCTORES

OBJETIVOS

1. Realizar análisis cualitativo de los azucares reductores para lograr su reconocimiento

utilizando la prueba de Fehling; Bendict y la prueba con nitrato de plata.
2. Fundamentar todas las pruebas con reacciones globales y mecanismos de reacción.

PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN

Nombre: Prueba de Fehling.

Criterio: El poder reductor que presentan los azúcares proviene de su grupo carbonilo, que
puede ser oxidado a un grupo carboxilo con agentes oxidantes suaves. Si se encuentra el grupo
carbonilo combinado no puede tener ese poder reductor. Si la solución cambia a color rojo
ladrillo, la prueba es positiva. Si la solución continúa siendo azul oscuro, la prueba tiene un
resultado negativo.
Reacción: La reacción química es la siguiente:

CH2OH

O
OH

HO OH CH2OH
OH OH
Cu++ Cu2O
OH COOH
Rojo +
Complejo
CH2OH cupro-tartátrico HO
soluble OH
OH
OH CHO

HO OH
OH
 31

IDENTIFICACIÓN DE AZÚCARES

INTRODUCCIÓN

II. REACCIÓN DE FEHLING

Esta prueba se utiliza para el reconocimiento de azúcares reductores. El poder reductor que
pueden presentar los azúcares se debe al grupo carbonilo, que puede ser oxidado a grupo
carboxilo con agentes oxidantes suaves. Si el grupo carbonilo se encuentra combinado no
puede presentar este poder reductor.
Los azúcares reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el ión Cu2+ de color azul a
Cu+ de color rojo. Para ello el grupo carbonilo del azúcar se oxida a grupo carboxilo. En medio
fuertemente básico como en nuestro caso el NaOH el ión Cu2+ formaría Cu (OH)2 insoluble por
eso añadimos tartrato sódico potásico que actúa como estabilizador al formar un complejo con
el Cu2+.

Procedimiento:

1. Mezclar en un tubo de ensayo:

Solución de Fehling A (CuSO4) 4 ml
Solución Fehling B (Tartrato/NaOH) 4 ml
2. Agitar y calentar a ebullición (aproximadamente 10 min).
3. Añadir sacarosa, y hervir durante 15 minutos.
4. observar si precipita el Cu2O con lo cual se confirma la prueba.
.

III. REACCIÓN DE BENEDICT

Esta prueba sirve para el reconocimiento de azúcares reductores.

Se basa en la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio básico débil. Aunque es similar a la reacción
de Fehling, el medio básico débil (HNaCO3) y el estabilizante (citrato sódico) usados hacen que
este test sea más sensible y estable.

Procedimiento:

1. Preparar el reactivo de Benedict

2. Calentar a ebullición.
3. Añadir solución de azúcar o azúcar sacarosa, mezclar y calentar hasta ebullición.
Si la reacción es positiva aparece un precipitado rojizo, aunque si la cantidad de azúcar es
pequeña puede dar color anaranjado o verdoso según las condiciones.
4 Observar los cambios en color y de la forma del precipitado.

VI. PRUEBA DEL ESPEJO DE PLATA

El fundamento de la prueba sirve para el reconocimiento de monosacáridos. Los

monosacáridos son capaces de reducir, en medio amoniacal, el ión Ag+ a Ag (plata metálica),
que se deposita en las paredes del tubo.
 32

Ag (NH3)2+ + R-CHO → Ag + R-COONH4

Procedimiento:

1. Preparar el reactivo: observar el procedimiento del instructor.

2. Agregar azúcar en un tubo de ensaye; agregarle un ml de agua.
3. Luego agregar el reactivo preparado de diamin plata.
4. Calentar en baño María y al cabo de 20 minutos observar la formación por reducción del
ion plata a plata metálica que se refleja en la superficie interna del tubo al exterior del
mismo.
 33

PRACTICA # 7

EXTRACCION DEL ACEITE DE AGUACATE

ObjetivOs:
1 Fundamentar la extracción del Aceite de aguacate.
2 Fundamentar el proceso de la extracción.
3 Realizar la extracción del aceite de aguacate.

El aceite de aguacate es un aceite utilizado en la industria cosmética actualmente y por

tal razón tiene propiedades de sustancias del cuidado de la piel .
Material y Equipo
1 probeta de 25 ml
1 balanza
2 beacker de 250 ml
1 pipeta de 1 ml
1 varilla de agitación
1 cuchara o espatula
1 beacker de 25 ml

Reactivos
• Aguacate.
• Éter del petróleo
• O hexano.

Procedimiento
1. extraiga con la espátula el fruto del aguacate.
2. coloque el fruto del aguacate en un beaker de 250 ml previamente tarado..
3. Pese el fruto del aguacate.
4. Agregue un volumen de 50 ml de hexano o éter del petróleo y haga la extracción con una
varilla de agitación.
5. traslade el éter o hexano que contiene el extracto del aceite a un beaker de 250 ml.
6. coloque el nuevo beaker que contiene el extracto de aguacate y evapore el hexano en la
campana, deje que se enfrié.
7. Pese el aceite de aguacate y guárdelo.
 34

UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA
ÁREA DE QUÍMICA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
CATEDRÁTICO: Ingeniero Msc. Erwin Manuel Ortiz Castillo.
SEGUNDO SEMESTRE DE 2019.
NOMBRE DE LA PRÁCTICA:__________________No._________
CALIFICACIÓN:
Sección Ponderación nota Observación
Carátula
Índice
1 Introducción 10
2 Objetivos 05
3 Marco teórico 05
4 Marco metodológico 05
5 pruebas de identificación
6 Resultados 15
7 Interpretación de resultados 30
8 Conclusiones 15
9 Bibliografía 05
10 Apéndice:
10.1 Hoja de datos 01
originales.
10.2 Muestra de 05
cálculo/preparación de
reactivos
10.3 Fotografías. 04
NOTA TOTAL 100%
Nombre del alumno (a):________________________________________
SECCIÓN DE LABORATORIO:_________día:______ Horario:________
No. Carné: _______________No. De DPI (CUI):______________________
Fecha de la práctica:______________
Fecha de entrega de la práctica:____________
Firma del alumno (a):________________
Fecha de recibida su nota:___________: Firma:________________
Fecha de revisión:________________: Firma:________________
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