Comunicación

Una nota sobre el teñido de Productos de lana uso de

tintes naturales Extraídas de madera putrefacta que
habitan Hongos
Vicente A. Hernández 1, *, A. Felipe Galleguillos 1, Nicole Sagredo 1 y Angela Machuca 2
1 Centro de Biotecnología, Universidad de Concepción, Concepción 4030000,
Chile; felipe.fel1ga21@gmail.com (FAG); nsagredonh@gmail.com (NS)
2 Escuela de Ciencia y Tecnología, Universidad de Concepción, Campus Los ngeles A,
de Los Á ngeles 4440000, Chile; angmachu@udec.cl
* Correspondencia: vhernandezc@udec.cl ; Tel .: + 56-41-2661449

Recibido el 14 de diciembre de 2017 Aceptado: 14 Febrero de 2018; Publicado: 19 Febrero 2018

Resumen: Fungal aislamientos obtenidos a partir de muestras de madera podridos fueron identificados
y seleccionados por su capacidad para producir colorantes de hongos en medios líquidos. Aislados
fúngicos produjo tintes naturales extracelulares con colores que van del rojo al naranja, amarillo y
morado. Colorantes de dos de estos hongos, Talaromyces australis (rojo) y Penicillium murcianum
(amarillo), se extrajeron y se utilizaron para teñir muestras de lana en una máquina de Data Color
Ahiba IR Pro-Comercio (modelo Top Speed II). La naturaleza de proteína de lana interactuaba bien con
los colorantes de hongos que producen colores adecuados para aplicaciones textiles cuando se usa a
una concentración de 0,1 g L-1. Los resultados sobre la solidez del color al lavarse confirmaron la
afinidad de los colorantes con la lana que las muestras teñidas mantienen su color en intervalos
aceptables después del lavado, sin la aplicación de tratamientos previos mordentado o el uso de agentes
de fijación.

palabras clave: colorantes hongos; Talaromyces; Penicillium; Trichoderma; Fusarium; lana; rapidez
del color

1. Introducción

La demanda mundial de pigmentos y tintes naturales han aumentado en los últimos años,
impulsado por una mayor concienciación de clientes con respecto al efecto nocivo de varios
colorantes sintéticos en la salud humana y el medio ambiente [14]. Se espera que la demanda de
pigmentos y tintes naturales para llegar a 10 millones de toneladas en 2017 [5]. pigmentos y tintes
naturales se han aislado desde la antigüedad de diferentes fuentes, tales como plantas, bacterias y
hongos [6-10]. Hoy en día pigmentos y tintes naturales pueden ser una alternativa real a sus
homólogos artificiales en una amplia gama de aplicaciones en las industrias alimentarias,
cosméticas, farmacéuticas y textiles [5,11].
En el teñido de productos textiles, se ha informado de una serie de problemas ambientales
asociados con la descarga de colorantes artificiales para el medio ambiente. Muchos de estos
compuestos son conocidos por sus efectos mutágenos, cancerígenos, alérgicas y citotóxicos [12]. En
tal sentido, el uso de colorantes naturales se presenta como una alternativa para reducir el impacto
ambiental de esta industria. Algunos estudios muestran avances significativos en el uso de
pigmentos y tintes naturales a partir de hongos para colorear tejidos [2,13-15]. Por ejemplo, los
pigmentos de hongos de Chlorociboria aeruginosa (Oeder) Seaver y cuboideum Scytalidium (Sacc.
Y Ellis) Sigler y Kang y Scytalidium ganodermophthorum Kang, Sigler, Lee y Yun han sido
utilizados para la tinción de poliéster, poliamida, algodón y lana [15 ]. Similar, solidez del color de
los tejidos naturales y sintéticos se estudió recientemente con pigmentos verdes de C. aeruginosa,
pigmentos rojos de S. cuboideum y pigmentos amarillos de S. ganodermophthorum [16].
Preocupaciones relacionadas con la presencia de metabolitos tóxicos en pigmentos y colorantes
producidas por hongos son criados comúnmente en la evaluación de su uso para los productos
fabricados. En este sentido, la adecuada identificación de cepas de hongos y la ejecución de las
pruebas de toxicidad es clave para garantizar un ambiente seguro para los trabajadores y los
productos inocuos para los usuarios finales.

revestimientos 2018, 8, 77; doi: 10.3390 / coatings8020077

www.mdpi.com/journal/coatings
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En esta nota, el potencial de los hongos filamentosos aislado de madera podrida para producir
colorantes naturales se estudió utilizable para el teñido de tela de lana. Se aislaron hongos,
identificados y evaluados en su capacidad para producir colorantes extracelulares, es decir,
compuestos solubles en agua con afinidad por un soporte textil, en medios líquidos. A partir de
entonces, se utilizaron colorantes (rojo y amarillo) obtenidos a partir de dos hongos seleccionados
para teñir tejidos de lana en una máquina de Data Color Ahiba IR Pro-Comercio (modelo Top
Speed II). Solidez del color cuando se evaluó el lavado de las muestras teñidas.

2. Materiales y métodos

2.1. Aislamiento e identificación de hongos

Hongos, recogidos de descomposición Nothofagus spp. registros que se encuentran en el sur

central y de Chile (Lircay, región de Maule, 35.6097 ° S, 70.9663 ° W; Nonguén, región de Bio-Bio,
36.8980 ° S, 72.9815 ° W; Oncol, región de Los Ríos, 39.7001 ° S, 73.3261 ° W; y Chiloé, región de Los
Lagos, 42.6459 ° S, 73.9354 ° W), se aislaron en placas de Petri con medio sólido (20 g L-1 extracto de
malta-agar, 200 mg de estreptomicina). Los aislados fueron identificados por técnicas moleculares
de acuerdo con el método descrito por Doyle y Doyle [17]. En breve, la extracción de ADN a partir
de micelios de hongos se realizó mediante el uso de fenol-cloroformo y precipitación con
isopropanol. La amplificación de correspondiente espaciador interno transcrito (ITS) incluyó el uso
de cebadores universales ITS1F y ITS4 [18] y los siguientes ciclos de temperatura: 94 ° C durante 4
min, 30 ciclos de 94 ° C 40 s, 60 ° C 40 s, 72 ° C durante 1 min, y una etapa de elongación final de 72 °
C durante 10 min. Los productos resultantes de PCR fueron secuenciados en instalaciones Macrogen
en Seúl, Corea. La identidad y la cobertura de las secuencias se evaluó en la base de datos GenBank
utilizando el algoritmo BLAST disponible en el sitio web, https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi
[19].

2.2. colorantes Producción

Los aislados fúngicos se cultivaron en medios líquidos que contienen 20 g L -1 extracto de malta, 200
mg L-1estreptomicina y agua destilada, pH 5,6. Un conjunto de 15 frascos de vidrio (1 l) que contiene 500
ml de medio líquido se trataron en autoclave a 121 ° C durante 21 min y después se inocularon
individualmente con cinco tapones de agar (5
mm) de cada hongo (n = 3). Los matraces se incubaron a continuación a 130 rpm a 30 ° C, durante
12 días. Después, se recogieron los medios líquidos de cada matraz y se filtraron usando papel
Whatman N ° 4 (Whatman plc, Maidstone, Inglaterra) y se almacenan a 4 ° C. medios líquidos
coloreado obtenido después del cultivo se extrajeron con acetato de etilo 1: 3 en un embudo de
separación de 2 l. Después de la extracción la fase orgánica se concentró en un rotevaporator a 50 °
C; 120 rpm, hasta el secado. La producción de cada colorante se cuantificó mediante diferencias de
peso.

2.3. teñido tela

colorantes secos (amarillo y rojo) obtenidos a partir de dos hongos seleccionados se utilizaron para
teñir muestras de lana. Lana fue seleccionado debido a su afinidad con colorantes aniónicos [20], tales
como las aisladas de otros productores de colorantes hongos [21]. Crossville Tela Chile SA (Tomé, Chile),
una empresa textil interés en la incorporación de colorantes naturales en la fabricación de sus productos
textiles, donó 100 muestras% de lana (5 × 10 cm2; 5 g) con una estructura de tela cruzada, 275 g / m2, que
se tiñe en un color Ahiba datos IR Pro-Comercio (modelo Top Speed II, Datacolor, NJ, EE.UU.) de la
máquina. Los dos extractos de hongos secos se volvieron a solubilizar en agua destilada a 0,1 g / L y se
colocaron en recipientes separados en la máquina de teñido con sus respectivas muestras de lana (n = 3).
La tintura se lleva a cabo a 98 ° C durante 30 min sin la incorporación de un tratamiento previo de
mordentado. Después se secaron tintura muestras de lana a temperatura ambiente durante la noche y su
color se midió en un espectrofotómetro CM-5, Konica Minolta, Tokio, Japón. lecturas de color se
expresaron en el CIE Lab * coordenadas. A partir de entonces, muestras se sometieron a mojar de lavado
de acuerdo con el protocolo establecido por el departamento de control de calidad de Crossville Tela
Chile SA El protocolo, inspirado en el estándar AATCC 61/2013 [22] se utiliza por la empresa como una
prueba rápida en muestras teñidas, y consiste en un ciclo de inmersión y agitación (60 rpm) durante 15
min, 60 ° C, en agua destilada con el detergente aniónico Verolan NBO (1 g L-1). Las muestras se secaron
a continuación a temperatura ambiente durante la noche. Color de las muestras lavadas se determinó de
nuevo con el Japón. lecturas de color se expresaron en el CIE Lab * coordenadas. A partir de entonces, las
muestras se sometieron a mojar lavado de acuerdo con el protocolo establecido por el departamento de
control de calidad de Crossville Tela Chile SA El protocolo, inspirado en el estándar AATCC 61/2013 [22]
se utiliza por la empresa como una prueba rápida en muestras teñidas, y consiste en un ciclo de
inmersión y agitación (60 rpm) durante 15 min, 60 ° C, en agua destilada con el detergente aniónico
Verolan NBO (1 g L-1). Las muestras se secaron a continuación a temperatura ambiente durante la noche.
Color de las muestras lavadas se determinó de nuevo con el Japón. lecturas de color se expresaron en el
CIE Lab * coordenadas. A partir de entonces, las muestras se sometieron a mojar lavado de acuerdo con
el protocolo establecido por el departamento de control de calidad de Crossville Tela Chile SA El
protocolo, inspirado en el estándar AATCC 61/2013 [22] se utiliza por la empresa como una prueba
rápida en muestras teñidas, y consiste en un ciclo de inmersión y agitación (60 rpm) durante 15 min, 60 °
C, en agua destilada con el detergente aniónico Verolan NBO (1 g L-1). Las muestras se secaron a
continuación a temperatura ambiente durante la noche. Color de las muestras lavadas se determinó de
nuevo con el inspirado en la norma AATCC 61/2013 [22] se utiliza por la empresa como una prueba
rápida en muestras teñidas, y consiste en un ciclo de inmersión y agitación (60 rpm) durante 15 min, 60 °
C, en agua destilada con el aniónico detergente Verolan NBO (1 g L-1). Las muestras se secaron a
continuación a temperatura ambiente durante la noche. Color de las muestras lavadas se determinó de
nuevo con el inspirado en la norma AATCC 61/2013 [22] se utiliza por la empresa como una prueba
rápida en muestras teñidas, y consiste en un ciclo de inmersión y agitación (60 rpm) durante 15 min, 60 °
C, en agua destilada con el aniónico detergente Verolan NBO (1 g L-1). Las muestras se secaron a
continuación a temperatura ambiente durante la noche. Color de las muestras lavadas se determinó de
nuevo con el
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espectrofotómetro y se utiliza para calcular la diferencia de color después de lavar (? E). E se

reportó como la solidez del color al lavarse.

3. resultados

3.1. Aislamiento e identificación de hongos

Se aislaron cinco hongos ascomicetos capaces de producir colorantes y se identifican mediante

técnicas moleculares. Hongos, incluidas las especies de Penicillium, Trichoderma, Talaromyces y
Fusarium. La identidad en todos los casos fue del 99% o superior. Los resultados se muestran en la
Tabla 1.

Tabla 1. Identificación de hongos aislados de muestras de madera podridos.

Identidad% Número de Tamaño de secuencia

Aislar Nombre GenBank (explosión) acceso (pb)
1 murcianum Penicillium 100 NR138358 575
2 Talaromyces australis 99 NR147431 509
3 Spirale Trichoderma 99 KP009301 549
4 Talaromyces sp. 100 LT558966 522
5 Fusarium oxysporum 100 KR997535 479

3.2. La producción de hongos Colorantes

Los tintes naturales producidos por los cinco hongos identificado aísla en medios líquidos se
representan en la Tabla 2. Rendimiento de colorantes varió desde 0,1 hasta 0,28 g L-1, y el color
obtenido eran de color rojo (T. australis), amarillo (P. murcianum y T. spirale), naranja (Talaromyces
sp.) y púrpura (F. oxysporum). Debido a su color y rendimiento de colorantes, T. australis y P.
murcianum fueron seleccionados para la prueba adicional en el teñido de tela de lana. Además, la
literatura indica que los colorantes rojos de T. australis son Monascus metabolitos tipo, es decir,
principalmente una mezcla de rubropunctamine y monascorubramine [21,23]. metabolitos mismo
modo, reportados para P. murcianum son griseofulvina y ácido penicillic [24]. El uso de estos
compuestos en productos alimenticios y farmacéuticos insinúa en la naturaleza no tóxica probable
de los colorantes obtenidos de estos hongos.
Tabla 2. Rendimiento y el color de colorantes producidos en medios líquidos por hongos aislados de muestras de
madera podridos.

Colorantes
hongos Rendimiento (g L-1) Color
Talaromyces australis 0.22 Rojo *
murcianum Penicillium 0.28 Amarillo *
Talaromyces sp. 0.10 naranja
Spirale Trichoderma 0.24 Amarillo
Fusarium oxysporum 0.25 Púrpura
* Seleccionado para tejidos de lana teñido.

3.3. Tinte de muestras de lana

colorantes naturales extraídos de T. australis y medios líquidos P. murcianum fueron re-solubilizan

en agua y se utilizan para teñir muestras de lana. El color obtenido a 0,1 g L-1 de la concentración con
ambos colorantes apareció adecuada para aplicaciones textiles. La diferencia de color después del lavado
indican una buena interacción de lana con los colorantes de hongos. Las mediciones de color y las
diferencias de color después del lavado en húmedo se muestran en la Tabla 3. Apariencia de control,
teñidas y se lavaron las muestras se muestra en la Figura 1.
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Tabla 3. lecturas de color y la diferencia de color de las muestras teñidas antes y después del lavado en húmedo.
CIE L * a * b * Color
Tela de lana AE
antes de lavar Después del lavado
L* = 52 (0.2), a * = 24,5 (1,6), L* = 52,5 (0,7), a * = 23,1 (0,3),
rojo 2,1 (0,9)
segundo* = 17 (0,5) segundo* = 6,2 (0,1)
L* = 54,4 (1,0), a * = 6,3 (0), L* = 54,4 (0,7), a * = 6,4 (0,2),
Amarillo 2,9 (0,5)
segundo* = 28,5 (0,2) segundo* = 25,6 (0,7)

Figura 1. muestras de lana teñidas con colorantes de P. murcianum y T. australis, antes y después del
lavado. (A) control, (B) de la muestra teñida con colorantes P. murcianum, (C) de la muestra teñida con
colorantes P. murcianum Después del lavado, (D) de la muestra teñida con colorantes T. australis, (E) de la
muestra teñida con T. australis colorantes después del lavado.

4. Discusión

Cinco aislados fúngicos se obtuvieron de muestras de madera podrida y después del cultivo en
medios líquidos producen diferentes tintes naturales. Los aislados correspondían a filamentosos
australis Talaromyces hongos, murcianum Penicillium, Talaromyces sp., Trichoderma spirale y
Fusarium oxysporum. Se encontró que todos estos hongos promover la coloración de fibras de
madera en las muestras de madera podrida bajo la corteza de los registros de la muestra. La gama
de colorantes obtenida varió de amarillo, de rojo, naranja y púrpura. Los colores específicos están
relacionados con la presencia de diferentes metabolitos secretados por los hongos, que puede tener
un papel protector contra otros microorganismos o a factores ambientales [25,26]. Todos los
metabolitos fúngicos se mostró a ser soluble en agua, que difiere de otros metabolitos de color
fúngicas utilizadas experimentalmente para teñir tejidos. Por ejemplo, las producidas por C.
aeruginosa, S. cuboideum y S. ganodermophthorum, que no son muy solubles en agua [27]. La
solubilidad en agua aumenta las posibilidades de incorporar metabolitos fúngicos directamente en
procesos de teñido industriales, como agua productos de teñido solubles ya están en uso a nivel
industrial.
T. australisy P. murcianum colorantes se seleccionaron para llevar a cabo una prueba
exploratoria en tejido de lana. La naturaleza de proteína de lana interactuaba bien con los
colorantes fúngicas productoras de colores adecuados para la producción de tejidos de decoración y
prendas de vestir, cuando se aplica a una concentración de 0,1 g L-1. Los resultados sobre la solidez
del color al lavarse confirmaron la afinidad de los colorantes con la lana que las muestras teñidas
mantienen su color en intervalos aceptables después del lavado, sin la incorporación de un
pretratamiento mordentado o el uso de agentes de fijación. Los cultivos líquidos de pigmentos y
colorantes que producen hongos, incluyendo Talaromyces spp. se han utilizado para teñir telas
directamente después de la filtración del micelio y esporas [14,28,29]. Color obtenido por este
método de aplicación depende en gran medida el rendimiento de los metabolitos de color en los
medios de comunicación. Desde tales rendimiento puede variar de un lote de cultivo a otro un
control de cierre de la inoculación y el cultivo de las condiciones es necesario para lograr una
reproducibilidad del color adecuado. Por otro lado, la extracción y posterior re-solubilización de
colorantes a concentraciones específicas parece un método menos complejo para lograr la
reproducibilidad del color, que es un requisito para estandarizar la producción de productos
teñidos a nivel industrial.
En esta nota el potencial de colorantes naturales obtenidos a partir de hongos que habitan en madera
podrida se demostró en plazo de la producción, extracción, y la aplicabilidad en tejido de lana. Sin embargo,
antes de que el uso de estos colorantes naturales pueden llegar a aplicación industrial son necesarias nuevas
investigaciones en una serie de temas. Por lo tanto, es necesario descartar la presencia de metabolitos
tóxicos por medio de pruebas de toxicidad, y también mediante la determinación de la estructura química de
los colorantes. Del mismo modo, es necesario estudiar el potencial de los otros tres colorantes hongos
obtenidos en esta investigación y para aumentar la gama de colores por continuar la búsqueda de nuevas
cepas fúngicas. Además, es importante
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para estudiar los métodos para aumentar el rendimiento de los colorantes en medios líquidos con el
fin de disminuir el coste de producción, probar la aplicabilidad en otros tejidos, completar una serie
de pruebas de solidez de color, y verificar si las condiciones de teñido utilizados a escala industrial
pueden afectar el uso de estos tintes naturales. A pesar de la cantidad de investigación que todavía
es necesario llevar a cabo, la posibilidad de empleo de tintes naturales aislados fúngicos en el teñido
de telas aparece por todos los medios plausible.
Expresiones de gratitud: Este trabajo fue financiado por el Fondo para la Promoción de la Ciencia y Tecnológica
Desarrollo (FONDEF), Conicyt-Chile, a través del proyecto ID15I10105: “Pigmentos Naturales de Alto
Desempeño: una alternativa ecológica en la manufactura de telas de alta calidad”, el Centro de Biotecnología
de la Universidad de Concepción y Crossville Fabric Chile SA

Contribuciones de autor: Vicente A. Hernández y Felipe A. Galleguillos concebido y diseñado los

experimentos; Felipe A. Galleguillos y Nicole Sagredo realizó los experimentos; Vicente A. Hernández y
Á ngela Machuca analizaron los datos; Vicente A. Hernández y Ángela Machuca contribuyeron reactivos /
materiales / herramientas de análisis; Vicente A. Hernández y Ángela Machuca escribió el documento.

Conflictos de interés: Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses. Los patrocinadores
fundadores tuvieron ningún papel en el diseño del estudio; en la recogida, análisis, o interpretación de los
datos; en la redacción del manuscrito, y en la decisión de publicar los resultados.

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