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HIDROEXTRACCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DEL ACEITE ESENCIAL DE

RUNTUWAYRA (Clinopodium weberbaueri (mansf.) Govaerts) EN


CONDICIONES DE SOBRESATURACIÓN”
Taype, F.1*; Barrial, A.2; Garcia, N.2
1,2
Docente, Departamento Académico de Ingeniería y Tecnología Agroindustrial, Universidad Nacional José María
Arguedas, Apurímac, Perú

Resumen El objetivo de este estudio fue la al uso alimentario y medicinal principalmente


extracción y caracterización del aceite esencial (por sus aceites esenciales) o como reporta
de Runtuwayra (Clinopodium Weberbaueri Mercedez et al., (2014). El uso como recurso
basado en un sistema dipolar frío/caliente dentro
(Mansf.) Govaerts). La extraíccion se realizó
del sistema medicinal tradicional; el
mediante la técnica de destilación con arrastre aprovechamiento con fines agroindustriales, es
de vapor de agua entre las presiones de 6, 10 y poco conocido excepto el estudio de Sotelo et al.,
14 psi y caracterizados los componentes por (2015) quienes reportan una experiencia respecto
cromatografía de gases acopladas a un a conocer su utilidad bactericida de C.
detector de espectrometría de masas (GC- weberbaueri en un contexto de utilidad
MS). El rendimiento de la extracción alcanzó a alimentaria.
(0.333 ± 0.04) % (P/P); Las características
Una revisión bibliográfica mostro varios reportes
fisicoquímicas oscilan a diferentes presiones; sobre la composición del aceite esencial de
la densidad (0.933 - 0.934) mg/L; la acidez Satureja spp. Estudiados en Perú, Iran y
(4.300-5.860) % ácido oleico; Índice de Argentina. (Eftekhar et al., 2012, Carhuapoma.
peróxidos (1.241-1.400) meq O2/kg AE; Índice 2007, Viturro et al., 2000, Davies. 1990 y
de refracción (1.520 - 1.530). Se identificó 28 Senatore et al., 1998).
compuestos mayoritarios, los más
El aceite esencial es un producto oloroso que en
representativos son: la Pulegona con 45.67%
su mayoría tiene una composición compleja
seguido del Isomentol con 13.85 %, el Timol (Farmacopea Europea, 2008). Cada aceite
(16.26 %), Mentona (6.05%) y Carvacrol esencial tiene un aroma, características e
(3.29%) como componentes mayoritarios identidad propios por lo que son muy diversas
respectivamente. según las sustancias que contiene. (Valdez,
2017). En las especies de Satureja indica que
Palabras clave –Deben de contener de 3 a 7 contienen componentes mayoritarios tales como
palabras o frases cortas, en orden alfabético y carvacrol, timol, γ- terpineno, p-cimeno, β-
separados por comas relacionadas con el contenido cariofileno, linalool y otros terpenoides,
del artículo, que indiquen temas importantes, isomentol, timol, metona, pulegona, pero la
preferentemente que no estén en el título. composición química y la cantidad de
componentes son distintivas entre las diferentes
I. INTRODUCCIÓN especies de Satureja aceites esenciales,
Runtuwayra (Clinopodium Weberbaueri (Ghorbanpour et al., 2017, Moein et al., 2012,
(Mansf.) Govaerts) es una planta medicinal que Adams. 2007, Carhuapoma.2007 y Viturro et al.,
crecen en los países andinos como Perú, (1) 2000).
(Viturro, 2000). Hoy conocido como Por lo tanto, en la presente investigación se
runtuwayra”. Especie que se usa estudiaron las especies: Punamuña (Satureja
tradicionalmente en medicina y en cocción una Boliviana) y Runtuwayra (Clinopodium
infusión de las hojas, se usa para aliviar dolores Weberbaueri (Mansf.) Govaerts). Siendo de
de reumatismo, mientras que los tallos también interés conocer el rendimiento en la extracción
se emplean para aliviar migrañas o dolor de de aceite esencial, características físicas,
estómago (Eminagaoglu et al., 2007). componentes químicas y ver la caracterización y
cuantificación de sustancias muy complejas que
El Clinopodium Weberbaueri (Mansf.) Govaerts pueden ser volátiles y semivolátiles”.
en particular es una especie con potencial, de II. MATERIALES Y MÉTODOS
aprovechamiento nutricional (culinario) referido

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Descripción Material vegetal Evaluación del rendimiento de AE
Las hojas frescas de Runtuwayra (Clinopodium El rendimiento del aceite esencial (% p/p) se
Weberbaueri (Mansf.) Govaerts), fueron determinó mediante la expresión:
recolectadas correspondientes a los periodos de
vegetación marzo – agosto del 2017. Plantas
silvestres ubicadas en la zona alta
Dónde: M1 es la masa final del aceite esencial;
cartográficamente se ubica a Latitud 13°36´07.89
M2 la masa inicial del follaje; y 100 es un factor
´´S y longitud 73°16´33.13´´ O, por encima de
matemático.
los 3 200 msnm de la provincia de Andahuaylas,
Composición de propiedades de aceite esencial
departamento de Apurímac, Perú.
DENSIDAD: según Método recomendado por la
NTP 319.081 (1987). La densidad es la relación
entre peso de un volumen dado de aceite
Esencial y su volumen a 20°C en g/ml, la
densidad se calcula:

Dónde:
D: Densidad
P1: Peso en g. del picnómetro conteniendo agua
destilada a 20ºC
P2: Peso en g. del picnómetro conteniendo aceite
esencial a 20ºC
P: Peso en g. del picnómetro vacío a 20ºC

Figura N°01: Runtuwayra (clinopodium weberbaueri ÍNDICE DE ACIDEZ: según Método


(mansf.) Govaerts) recomendado por la NTP 319.085 (1987).
Extracción de los aceites esenciales Determinar el Grado de Acidez, expresado como
La obtención del aceite esencial fue mediante un porcentaje de ácido oleico, según la ecuación:
equipo de destilación por arrastre de vapor
sobresaturado, diseñado por la UNAJMA. Se
pesaron 2 500 g de material vegetal y colocado Dónde: V = volumen (ml) de KOH consumidos
en la cámara extractora, y se evaluó a diferentes N = Normalidad del KOH
presiones de extracción al corriente de vapor de P= peso (g) de aceite
agua, la esencia así arrastrada fue posteriormente
condensada, recolectada y separada de la ÍNDICE DE PERÓXIDO: Método
fracción acuosa. El tiempo de extracción fue de 3 recomendado por la NTP209.006 (1968), El
horas. El aceite esencial (AE) se separó de la índice de peróxidos es la cantidad (expresada en
mezcla aceite/agua por decantación conectada a miliequivalentes de oxígeno activo por kg de
un sistema de sifón y el aceite extraído se grasa) de peróxidos en la muestra que ocasionan
purificó con sulfato de sodio saturado, y la oxidación del yoduro potásico
almacenado a temperatura ambiente en botellas Fundamento: Abrir un matraz e introducir la
de color ámbar de 20 ml, para posterior análisis navecilla de vidrio que contenga la muestra
fisicoquímico y cromatográfico. problema. Añadir 10 ml de cloroformo. Disolver
rápidamente la muestra problema mediante
agitación. Añadir 15 ml de acido acético y, a
continuación, 1 ml de solución de yoduro
potásico. Cerrar rápidamente el matraz, agitar
durante 1 minuto y mantenerlo en la oscuridad
durante 5 minutos exactamente, a una
temperatura comprendida entre 15 y 25°C.
Añadir 75 ml aproximadamente de agua
destilada. Valorar (agitando al mismo tiempo
vigorosamente) el iodo liberado con la solución
Figura N°01. Equipo extractor po de tiosulfato sódico (solución 0,002 N si se
ensamblado. presuponen valores inferiores a 12 y solución
0,01 N si se presuponen valores superiores a 12),

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utilizando la solución de almidón como de 34 m/s. La energía de la fuente de ionización
indicador. Si el resultado del ensayo en blanco fue de 70 eV con un rango de barrido de 40 –
sobrepasa 0,05 ml de la solución de tiosulfato 500 uma a 3.9 scans/s. Se inyectó 1.0 μL del
sódico 0,01 N, sustituir los reactivos. aceite diluido en n-heptano con una relación de
El índice de peróxidos (IP), expresado en split de 1:100. La identificación de los
miliequivalentes de oxígeno activo por kg de componentes del aceite se realizó por
grasa se calcula mediante la fórmula siguiente: comparación de sus espectros de masas con los
reportados en la base de datos de la librería
Wiley 6ta Edición y los índices de Kováts
Donde: reportados en Adams (2007) y Davies (1990).
V: ml de solución valorada de tiosulfato sódico
empleados en el ensayo, convenientemente Análisis estadístico.
corregidos para tener en cuenta el ensayo en Los resultados fueron analizados mediante
blanco ANOVA a un nivel de significancia de p < 0,05.
N: normalidad exacta de la solución de tiosulfato El software estadístico utilizado para el análisis
sódico empleada fue InfoStat versión 2008.
P: peso en gramos de la muestra problema
III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
ÍNDICE DE REFRACCIÓN. Según el
Método recomendado por la NTP 319.075 Describir y Rendimiento de la extracción.
(1987) El índice de refracción de una sustancia Los rendimientos de la extracción de aceite
es la relación entre la velocidad de la luz en el esencial ilustran en la Tabla 1, en ella se aprecia
aire y la velocidad en la sustancia en ensayo. que los rendimiento de extracción se encuentra
Para la luz determinada longitud de onda en el intervalo de (0.271 ± 0.040 a 0.333 ±
(generalmente se emplea la línea D del sodio, 0.042) %., se logra mayor rendimiento a 14 psi.
que tiene un doblete a 589,0 nm y 589,6 nm) el
índice de refracción de un producto viene dado Tabla 1: Rendimiento de extracción - RAE
por el seno del ángulo de incidencia dividido por (%)
el seno del ángulo de refracción 52, siendo el P (psi) Runtuhuayra
refractómetro de ABBE el instrumento más ± s
adecuado. El índice de refracción varía con la 6 0.271 ± 0.040A
temperatura, realizando las determinaciones de la 10 0.278 ± 0.033A
farmacopea a 20 ºC (Font 1995)
14 0.333 ± 0.042A
Las letras iguales significan que no existe diferencia
significativa, evaluados a través del test de Tukey

Los estudios indican, que el rendimiento de los


aceites esenciales varía con cada especie de las
plantas aromaticas, oscilando la mayoría de las
veces entre 0.2 y 2 %, (Chacón 2003). El
rendimiento de la obtención del aceite esencial
de las hojas frescas de Croton ovalifolius fue de
0,14% (Rodríguez et al, 2012 citado por López
Caracterización Cromatografía de la Cruz, 2015). Cabe resaltar, existe una
Los componentes químicos se caracterizaron a diferencia en el rendimiento de la extracción de
través de Cromatografía de gases acoplada a aceite esencial por periodo vegetativo. En el caso
espectrometría de masas (CG-EM) de Satureja sahendica Bornm el mayor
El estudio por CG-EM se realizó en un rendimiento de aceite se obtuvo al comienzo de
cromatógrafo Hewlett Packard modelo 5975B la floración 3.30 % (p/p), luego el contenido de
serie II, equipado con columna capilar Agilent aceite disminuyó a 2.28 % en la etapa de
HP-5 MS (30 m de longitud, de 0.2 mm de floración completa y más disminuyó a 1.65% al
diámetro interno, con un espesor de pared de final de la floración. (Sefidkon, 2009). En la
0.25 μm). La temperatura del puerto de presente investigación se logró obtener 0.333%.
inyección fue de 200 ºC y la del cuadrupolo 150 la muestra que se trabajaron fue en la etapa de
°C. Se utilizó helio como gas portador, a un flujo floración completa.
de 0.9 mL /min ajustado a una velocidad lineal

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Características Fisicoquímicas del AE por el CODEX (1196) quien establece límites
En la Tabla 2 aparecen los valores de la entre 1.462 a 1.472 a 20 ºC. Esto se debe
densidad, acidez, índice de peróxidos e índice de probablemente a presiones altas de extracción a
refracción correspondientes a diferentes la que fueron sometidas para la obtención del
presiones de extracción. la presión de extracción AE. Carhuapoma. (2007) reporto en su
influye significativamente en algunos datos de investigación de AE de Satureja brevicalyx el
las características fisicoquímicas, índice de refracción de 1.475, inferior a lo
El rango de densidad en las diferentes presiones señalado en esta investigación, así mismo la
fluctúa entre (0.933 - 0.941) g/mL. No obstante, presión a la cual fue sometida fueron por debajo
no existe diferencia significativa en la media de de los 6 psi.
los tratamientos. Similares datos fueron Por otra parte, la presión de extracción influye
reportados por Carhuapoma. (2007) con 0.9047 significativamente en las características
g/mL aceite esencial de Satureja brevicalyx, y fisicoquímicas de acidez concretamente a 10 psi.
Málaga. (2014) con 0,955 g/mL en aceite Con respecto al índice de peróxido, los niveles
esencial de muña (Clinopodium Bolivianum). de presión de vapor establecidos influyen
Mientras que el índice de refracción indica que significativamente, siendo a presión de 6 y 14 psi
los compuestos oxigenados aromáticos de ambos son mayores con respecto a 10 psi
AE indican valores por encima de lo establecido
Tabla 2. Composición de propiedades de aceite esencial de Clinopodium Weberbaueri
AER
Nº Características 6 psi 10 psi 14 psi
± s ± s ± s
A A
1 Densidad (mg/L) 0.933 ± 0.003 0.934 ± 0.005 0.933 ± 0.002A
Acidez (% Ácido
2
oleico) 5.860 ± 0.018A 4.300 ± 0.026B 5.858 ± 0.015A
Índice de peróxidos
3
(meq O2/kg AE) 1.400 ± 0.004A 1.241 ± 0.006B 1.359 ± 0.003C
4 Índice de refracción 1.521 ± 0.005A 1.520 ± 0.008A 1.530 ± 0.004A

Letras diferentes en la misma fila indican diferencias estadísticamente significativas entre las distintas presiones de extracción,
evaluados a través del test de Tukey.

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Con respecto al índice de refracción, la diferencia pero su contenido de este último es inferior a
de presión en la extracción de AER no influye Satureja boliviana.
(p>0.05).
AER %
Nº Compuesto
Caracterización Cromatografía de los AE 6 psi 10 psi 14 psi
Los componentes identificados en los aceites 1 Pulegona 37.83 45.67 52.76
esenciales de Clinopodium Weberbaueri se 2 Mentona 4.88 6.05 5.09
muestran en la tabla 3, Estos componentes se 3 Isomentol 11.79 13.85 13.65
determinaron mediante cromatografía de gases 4 Terpineol 0.14 0.16 -
con detector de espectrometría de masas, lo 3-Cyclohexen-1-
cual permitió estimar la presencia de 40 5 one, 2-isopropyl-5- 1.09 ˗ 1.00
compuestos bioactivos, de los cuales 28 methyl
pudieron ser identificados como analitos 6 Eucarbono 5.46 5.15 5.47
mayoritarios. Los mismos presentan 7 Cariofileno 5.46 3.82 3.87
características distintas para las diferentes 8 Germacreno 10.79 ˗ ˗
presiones de extracción de AER 9 D-Limonene 0.45 0.58 0.74
El aceite de Satureja Boliviana consiste 10 Eucaplitol 4.19 ˗ ˗
principalmente de 10 componentes abundantes en 11 beta.-Myrcene 0.33 0.34 0.28
diferentes presiones de extracción, destacándose Benzene, 1-ethyl-3- 0.30 0.29 0.16
12
así el Linalool (3.861 %), Isomentol (19.524 %), (1-methylethyl)-
Propanoic acid, 2- 0.18 0.18 0.16
Eucarbono (8.983 %), Cariofileno (6.142 %) L- 13 methyl-, 4-
Mentona (23.181 %), p-Mentona (2.491 %), α- methylphenyl ester
Cadenina (2.390 %) a 10 psi, además del Timol 14 p-Tolyl pivalate ˗ 0.56 0.53
(16.26 %) y g-Elemeno (6.24 %) a 14 psi y la Phenol, 2-methyl-5- 6.33 3.29 1.68
15
Mentona (10.859 %) a 6 psi. (1-methylethyl)-
Entre estos componentes, las cetonas son los 16 phenylmethyl ester ˗ ˗ 0.29
principales compuestos con grandes cantidades de 17 Isopulegol 0.48 0.71 0.62
Mentona (10.859 %), L-Mentona (23.181 %), p- Phenol, 2-methyl-5- 10.79 5.39 1.68
Mentona (2.491 %), y Pulegona (32.891 %). Así 18 (1-methylethyl)-,
acetate
mismo el Linalool (3.861 %) e Isomentol (19.524 ˗ ˗
19 o-Cimeno 1.54
%), son los principales alcoholes, seguido del 0.92 1.20 ˗
20 Terrein
fenol representado principalmente por el Timol
21 Caryophyllene 4.34 3.82 3.87
(16.26 %). Estos datos concuerdan con la
22 Timol 0.73 0.37 0.24
composición del aceite esencial de Satureja
23 gamma.-Elemene 4.19 2.85 2.76
brevicalyx, Satureja boliviana y Peruvian Satureja
24 g-Elemeno 4.34 2.85 2.76
reportados por Carhuapoma (2007), Viturro.
25 Acetato de carbacril 10.79 5.39 1.68
(2000) y Senatore. (1998) respectivamente. Por
25 P-Cimeno ˗ 1.23 ˗
otro lado los sesquiterpenos mayoritarios
26 Terrein ˗ 1.20 1.62
constituyen el Cariofileno (6.142 %) y
27 Carvacrol ˗ 3.29 ˗
Terpinoleno (12.48 %).
Sin embargo el aceite Clinopodium Weberbaueri 28 Isopulegona ˗ ˗ 1.19
tambien se caracteriza por el predominio de las
cetonas, nuevamente la mentona (6.05 %), La literatura disponible informa numerosos
Pulegona (52.76 %) y el Acetato de carbacril estudios sobre el aceite esencial de las especies de
(10.79 %). En este caso tambien, los fenoles se Saturejas. Los estudios muestran que el género
presentan principalmente por Carvacrol timol, satureja puede no contener fenoles (Senatore et

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al., 1998, Eftekhar et al., 2012, Ghorbanpour et Asimismo, al Director de la Escuela Profesional de
al., 2017). Las especies que contienen fenol se Ingeniería Agroindustrial por disponer los
dividen en “tipo Carvacrol” y "tipo timol", laboratorios de química y biotecnología
mientras que las especies que no contienen
fenoles se dividen en “monoterpénicos tipo REFERENCIAS.
hidrocarburos”, “monoterpénicos tipo alcoholes” Essential oils of Satureja bolivianaand S.
y “monoterpénicos tipo cetonas” (Senatore et al., Parvifolia growing in the region of Jujuy,
1998). Los aceites esenciales de Clinopodium Argentina. Viturro, C, y otros. 2000. 377-
Weberbaueri al constituirse en su composición 382., Argentina : Flavour And Fragrance
Carvacrol y timol corresponden a las especies que Journal, 2000, Vol. 15.
contienen fenol. Los fenoles son muy susceptibles
a la oxidación, por lo tanto tienen un carácter Bibliografía
marcadamente antioxidante, ya que 1. Essential oils of Satureja bolivianaand S.
experimentarán la oxidación antes que otras Parvifolia growing in the region of Jujuy,
especies susceptibles de ser oxidadas y en Argentina. Viturro, C, y otros. 377-382.,
consecuencia las protegerán frente a esos ataques Argentina : Flavour And Fragrance Journal,
oxidantes. 2000, Vol. 15.
IV. CONCLUSION
El rendimiento de extracción presenta relación
directa con la presión de extracción, encentrándose
de 0.271 ± 0.040 a 0.333 ± 0.042%.
La densidad del aceite esencial de la hierba
aromáticas, es similar a todas las presiones de
extracción no existe diferencia significativa
(p>0,05), en cuanto a la acidez, el AER, es
ligeramente variable encontrándose de 4.300 %
Ácido oleico a 10 Psi, la acidez es menor para los
AER extraídos a 6psi y 14 psi. Por otra parte, el
índice de peróxidos para el AER los niveles del
factor presión incrementa ligeramente (p<0,05), a
medida que aumenta la presión de extracción. Con
respecto a índice de refracción, las condiciones de
sobresaturación no generan ningún cambio
significativo (p>0,05).
En cuanto a la caracterización de cromatográfica de
AER se encontró componentes de relevancia
importancia como la pulegona, mentona e
isomentol compuestos organicos que se clasifica
como un monoterpeno. Asimismo, contiene
componente el timol y el carvacrol compuestos
fenólicos naturales, considerados como posibles
antioxidantes, agentes antifúngicos y
antibacteriales.

AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen a la Vicepresidencia de
Investigación de la Universidad Nacional José María
Arguedas por el financiamiento de la presente
investigación, presupuesto que fue asignado mediante el
concurso de proyectos de investigación agosto 2017
(Resolución 0233-2017-CO-UNAJMA).
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