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FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
ESTUDIANTES:
I. RESUMEN
Se trabajó con 10 ml de medio de fermentación que fue glucosa 20g/l, KH2PO4 g/l, (NH4)2SO4
2.0 g/, extracto de levadura 1.0 g/l. el medio de fermentación se ajustó a un pH 4.0 con HCL al 5%
tubos Durham en cada uno de ellos y se llevó a esterilización a 121°C por 20 minutos a 15
libras/pulg2. La cantidad de etanol a adicionar al medio esterilizado en los tubos de ensayo fueron
4.0% v/v, 6.0% v/v, 8.0% v/v, 10.0% v/v, 12.0% v/v, de las cuales los ensayos se llevaron a cabo
1.1. OBJETIVOS
II. INTRODUCCIÓN
Los primeros microorganismos utilizados como fuente de proteínas, fueron las levaduras,
principalmente la Saccharomyces cerevisiae, que aún hoy día es la principal fuente de proteína
unicelular (SCP), como también se conoce a la proteína obtenida de la biomasa microbiana, con
bebidas alcohólicas.
siglo XIX y principios del XX, permitió conocer a fondo los mecanismos biológicos de
Este trabajo se propone indagar sobre la producción de alcohol y levadura, así como las tendencias
incluyendo especies patógenas para plantas y animales, así como especies no solamente inocuas
3.1.Levaduras generalidades
incluyendo especies patógenas para plantas y animales, así como especies no solamente inocuas
Las levaduras han sido utilizadas, desde la antigüedad, en la elaboración de cervezas, pan y
vino, pero los fundamentos científicos de su cultivo y uso en grandes cantidades fueron
descubiertos por el microbiólogo francés Louis Pasteur en el siglo XIX (Hernández, Maza, &
Lozano, 2003)
Se conocen cepas diferentes y específicas para cada labor (panificación, destilería, producción
Las levaduras son organismos eucariotas con gran diversidad respecto a su tamaño, forma y
color. Son consideradas hongos unicelulares y generalmente sus células son ovaladas, pero
también pueden encontrarse en forma esférica, cilíndrica o elíptica. Son mayores que las bacterias,
alcanzando un diámetro máximo de entre cuatro y cinco μm. Se reproducen por fisión binaria o
gemación y algunas pueden ser dimórficas o bifásicas y crecen como micelio bajo condiciones
ambientales especiales (Ochoa & Vázquez, 2004). Son resistentes a antibióticos, sulfamidas y
se mantiene en constante revisión, lo que ha permitido la manipulación genética de los casi 6600
% de la masa seca de la célula y sus principales componentes son polisacáridos (80-90 %),
esencialmente glucanos y mananos, con una menor contribución de quitina, además de proteínas
La mayoría de las levaduras toleran un rango de pH entre 3 y 10, pero les resulta favorable un
medio ligeramente ácido con un pH entre 4,5 a 6,5. Son capaces de competir con la bacteria
Streptococcus bovis, el principal productor de ácido láctico en el rumen, por azúcares solubles.
Las levaduras más estudiadas en el mundo son cepas provenientes de las especies:
utilis. Estas especies son consideradas como aptas para el consumo humano o GRAS (por las siglas
Saccharo (azúcar), myces (hongo) y cerevisiae (cerveza) . Es una levadura heterótrofa, que obtiene
la energía a partir de la glucosa y tiene una elevada capacidad fermentativa, puede aislarse con
facilidad en plantas y tierra, así como del tracto gastrointestinal y genital humano (Leimer &
Finguerut, 2005)
cerveza, vinos y alcohol. La levadura inactivada por temperatura se usa como fuente de
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nutrimentos en alimentación animal y humana, tanto en forma de levadura íntegra como a partir
de sus derivados.
Trehalosa NR 5 NR NR
Ácidos nucleicos
10,65* 10,8 7,41* 9,00*
y nucleótidos
Triglicéridos NR 2,5 NR NR
Esteroles NR 1 NR NR
3.2.Recuperación de levadura
constituyendo un producto muy valioso, tanto al ser recuperada para su empleo como alimento
animal (en crema o seca) como para recircularla al proceso y reiniciar la fermentación (Estévez,
2010).
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fermentativo, el esmero con que se realicen todas las operaciones y la preocupación constante para
Después de la fermentación, las levaduras son separadas por centrifugación y lavadas. Se pasan
por filtros prensas o rotatorios para disminuir el contenido de agua, hasta obtener un producto de
herméticos.
Tanto la producción de levadura como la de etanol son reacciones exotérmicas, por lo que es
temperatura cerca del valor óptimo (33 a 34 °C); de lo contrario la temperatura aumenta hasta 40
osmótico puede causar una disminución en el volumen celular, afecta además, la velocidad de
Desecación: es uno de los principales agentes que inhiben las actividades y desarrollo de los
microorganismos.
Luz: en general la luz es perjudicial para los microorganismos que carecen de clorofila, o
cualquier otro pigmento que les permita usar la energía de las radiaciones en el proceso de
fotosíntesis.
pH: el pH óptimo en el cual se desarrollan mejor los microorganismos, está entre 4 y 5. Las
levaduras tienen la ventaja de soportar, medios más ácidos, que otros microorganismos, lo que es
aprovechado en los procesos industriales para mantener el medio controlado de bacterias que
Alcohol: el efecto del etanol en la célula es una combinación de inhibición del crecimiento y
(Riegel & Kent, 2003) afirma, que no es recomendable terminar la fermentación con un grado
pH y la temperatura afectan esta inhibición.1 Hay algunas teorías acerca de la inhibición del
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del contenido de esteroles en la membrana celular y esto puede afectar el transporte de azúcares,
las enzimas del metabolismo de azúcares son inhibidas por los productos que se sintetizan durante
Hoy en día es asumido que la tolerancia al etanol depende de la habilidad de las células de
levadura para exportar etanol al medio externo, un proceso que depende grandemente de la
afuera hacia adentro de la célula es muy baja, lo cual explica el hecho de que el etanol adherido al
Los lípidos y esteroles de la membrana celular de levaduras son importantes porque ellos
fermentación anaeróbica reteniendo la vitalidad celular, por esta razón ellos son conocidos como
factores de sobrevivencia.
Muchos experimentos mostraron que la incorporación de ácido linoleíco, ergosterol u otro ácido
etanol, y permite una alta tasa de transporte de etanol hacia fuera de la célula. Cuando no se
suplementa con ácidos grasos o esteroles al medio de cultivo, la célula podría sintetizarlos cuando
hay disponible oxígeno en el medio, pero no en la total ausencia de él. Esta es la razón del
fermentativa se retrasa, por esta razón, en la elaboración de vinos es necesario una aereación
necesitar una aereación intermitente para animar el crecimiento de la levadura y así conducir sin
elevada tolerancia al etanol, durante este proceso toma lugar cambios en la composición de ácidos
El etanol y el ácido acético son bien conocidos como inhibidores del crecimiento y son usados
como agentes antimicrobianos. Por otro lado, estos compuestos son sub-productos o substratos de
citoplasma y modificación de ciertas enzimas de la glucólisis, (Pampulha & Loureiro Días, 1990).
tri-fosfatos de adenina, guanina, citidina y uridina, citado por (Otero & Almazán). La levadura
un medio particular de propagación, puede ser ajustado para resultar de significación como
4.1.MATERIALES
Matraces Erlenmeyer de 04
250ml
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4.2.PARTE EXPERIMENTAL
Preparación de inóculo
Preparar 100 ml de una solución que contenga: 0.5 % de extracto de levadura, 0.4%
cultivar 28
siguiente composición: Glucosa 20 g/L, KH2PO4 5.0 g/L, (NH4)2SO4 2.0 g/L, extracto
PROCEDIMIENTO
se colocan los tubos Durham en cada uno de ellos y se esterilizan a 121 ºC por 20 minutos
medio esterilizado en los tubos de ensayo es la siguiente: 4.0 % v/v, 6.0 % v/v, 8.0 %
se colocan los tubos Durham en cada uno de ellos y se esterilizan a 121 ºC por 20 minutos
al medio esterilizado en los tubos de ensayo es la siguiente: 0.1 % v/v, 0.2 % v/v, 0.5 %
Mediciones:
cerevisiae en los ensayos de tolerancia a etanol y ácido acético. Tomar como referencia lo
siguientes parámetros:
Donde:
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V. RESULTADOS Y DISCUSIONES
5.1.RESULTADOS
Reacciones %
durante la ETANOL
Tiempo
fermentación 4% 6% 8% 10% 12 %
1° 2° 1° 2° 1° 2° 1° 2° 1° 2°
Formación de - +++ ++ +++ + +++ +++ +++ + +
CO2
Formación de +++ + +++ ++ ++ + + + +++ +++
Film
Precipitación ++ +++ +++ ++ + +++ +++ +++ ++ ++
Formación de + +
espuma +++ ++ ++ +++ ++ + + +
Formación de - +++ - +++ -- +++ +++ +++ - -
CO2
Formación de ++ +++ +++ ++ ++ ++ ++ +++ ++ +++
Film
Precipitación +++ +++ +++ +++ ++ +++ +++ +++ +++
++++
Formación de ++ +
espuma +++ - +++ + +++ - - +
Fuente: elaboración propia
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5.2.DISCUSIONES.
ya observado por van Uden y da Cruz Duarte (1981). Esto se debe a una activación de la muerte
concentraciones de alcohol fueron en su gran mayoría intensas y moderadas y a las 48 horas con
las mismas concentraciones hubo un cambio, observándose con mayor visibilidad con
capaz de fermentar y crecer en medios con concentraciones de etanol muy superiores a las que
toleran las bacterias y otros organismos. Previamente se observó que el nivel de ploidia no afecta
células se inhiba siguiendo una curva sigmoidal, y que su temperatura máxima de crecimiento
disminuya. A concentraciones de sacarosa del 30% p/v las células producen la concentración
exclusivo del etanol producido; a concentraciones superiores, por efecto conjunto de este y la
VI. CONCLUSIONES
Se puede concluir y determinar que los tratamientos que se realizaron con etanol mostraron
variaciones en cuanto y tanto a formación de CO₂, film, precipitación y formación de espuma con
No se logró evaluar la tolerancia del ácido acético exógeno sobre Saccharomyces cerevisiae y
Bibliografía
Anon, A. (2005). Criterios de Procedimientos para la Aplicación no solo Agrícol. Nova norma
Beltran, G., Torija, M. J., Novo, M., Ferrer, N., Poblet, M., & Guillamon, J. M. (2002). Analysis
of yeast populations during alcoholic fermentation: a six year follow-up study. Systematic
Academia Publishers.
García, J., Suarez, M. A., Domenech, F. L., Blanco, G. C., & Santiesteban, C. M. (2000). Manual
Hernández, E., Maza, E., & Lozano, N. (2003). Producción de proteina unicelular mediante cultivo
Leimer, K. H., & Finguerut, J. (2005). Alternatives for the use of dried yeast and its products.
Technologists.
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Cientifica.
Ochoa, J. L., & Vázquez, r. (2004). Levaduras marinas como herramientas cientificas y
biotecnológicas. 39-50.
Otero, M. A., & Almazán, O. A. (s.f.). Las levaduras como base de una industria, diferentes
aplicaciones.
Pampulha , M. E., & Loureiro Días, M. C. (1990). Microbiol. Biotechnol. Appl., 34, 375-380.
Pron, J. (2011). Aspectos energeticos del metabolismo de glucosa Sacharomyces Cervisiae. suiza:
Academia de Microbiologia.
Rodrigo Facio.
Facultad de Quimica.
Van Dijken, J. (2007). Sistemas Reguladoras de las levaduras mas Fundamentales. Mexico:
Yamada, E. A., Alvim, I. D., & Sgabieri, V. C. (2003). Composición centesimal y valor proteico
VIII. CUESTIONARIO.
La presencia del ácido acético ha sido mencionada como una causa de reducción de la capacidad
de saccharomyces para el transporte y la retención de la tiamina [33] Así, una causa probable de
tiamina por parte de las levaduras salvajes con la producción del ácido acético que inhiben el
Otra de las principales causas de las paradas de fermentación es la toxicidad del etanol [14, 18,
34, 77, 78]. El etanol parece afectar la fluidez de la membrana plasmática de una manera completa.
Saccharomyces cerevisiae?
sodio en el medio. Además, produce etanol hasta 6.88±0,1% v/v. La agitación del medio de cultivo
Aunque las causas precisas de las fermentaciones lentas o detenidas pueden ser difíciles de
determinar, conocer la tipología de parada puede ser bastante útil para limitar el número de
posibilidades. Prestar atención al número de células viables de saccharomyces, el uso razonado del
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enfriamiento y del mantenimiento de la temperatura junto con un uso prudente de los suplementos
incompletas.
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IX. ANEXOS