Documenti di Didattica
Documenti di Professioni
Documenti di Cultura
ENZIMAS
Ingeniería en Biotecnología
BIOQUÍMICA MICROBIANA
REPORTE DE LA PRÁCTICA
DATOS GENERALES
Práctica 01 ENZIMAS
No.
Profesor: Ramón Cervantes Rivera
Objetivos de la práctica
Que el alumno adquiera competencias para identificar enzimas de diferentes muestras
biológicas.
Que el alumno adquiera las competencias para tratar correctamente muestras de enzimas a
analizarse posteriormente.
Que el alumno analice los efectos en el funcionamiento de las enzimas, como resultado
Justificación
La aplicación de técnicas para la identificación de enzimas en diferentes compuestos y los
factores que afectan la actividad enzimática, proporcionará a los alumnos herramientas que
incrementarán su competitividad como ingenieros biotecnólogos.
Al finalizar la práctica, el alumno debe ser Utilizar técnicas de análisis para determinar las
capaz de: características de los productos biotecnológicos
Analizar muestras biológicas para la mediante parámetros físicos, químicos.
identificación de enzimas. – Realizar el informe de los resultados de los
Comprender la utilidad de la técnica para el análisis que permitan caracterizar el producto con
análisis de enzimas de interés biotecnológico base a sus propiedades físicas, químicas y
biológicas
INTRODUCCIÓN
Una enzima es una proteína que tiene función de biocatalizador; este proceso se lleva acabo
sobre una molécula denominada como sustrato, también como aclaración, las enzimas son
específicas con el sustrato con el que reacciona, dejando que solo puede realizar el proceso
de catalizacion sobre un solo sustrato o molécula, este proceso se lleva a cabo en la parte de
la enzima llamada sitio activo que tiene características especiales para que el proceso de
catalizacion se lleve a cabo. Este proceso no afecta en si el proceso natural de la reacción
que cataliza si no que su función es el de ayudar a que el proceso se realice más rápido.
La acción de la enzima se puede ver de 2 formas:
La vía alterna que se realiza gracias a la enzima, que sin la presencia de la enzima ya
que existe una barrera virtual entre los sustrato o productos para que estos se
conviertan a productos denominada energía libre de activación, es la energía que se
requiere para su conversión de sustrato a productos y que gracias a la ayuda de la
enzima se requiere menos energía, por consiguiente también la velocidad con que la
reacción se realiza en menor que de forma natural.
El sitio activo de las enzimas contiene diferentes mecanismos químicos que facilita la
conversión de sustrato a productos, este actúa como un molde tridimensional
específico que se une al sustrato. El sitio activo contiene grupos catalíticos que 4
facilitan la reacción como una catálisis tipo acido-base donde algunos residuos de
aminoácidos proveen o aceptan protones.
El proceso enzimático tiene diferentes factores que afectan a que el proceso se realice
con mayor o menor eficacia tales como:
Concentración del sustrato: Cuando se tiene altas cantidades de sustrato en
comparación con la concentración fija de la enzima se obtiene la velocidad máxima,
donde cuando se está en forma inversa las concentraciones decrece la velocidad.
Temperatura: Un incremento en 10ºC duplica la velocidad de la reacción, hasta ciertos
límites. Pero cuando se incrementa mucho la temperatura desnaturaliza la proteína y
pierde su actividad.
pH: el pH es óptimo es 7, y un cambio en este pH afecta su actividad haciéndola
incrementar o bajar su actividad.
Cofactores: Muchas enzimas para sus procesos requieren cofactores sean activadores
o coenzimas.
CRISTALERÍA
CANTIDAD MATERIAL ESPECIFICACIONES
1 Gradilla para tubos de ensayo
15 Tubos de ensayo
1 Bulbo para pipeta
4 Pipeta 5 𝑚𝑙
1 Mechero
2 Pipetas Pasteur con bulbo
1 Pinzas para tubo de ensayo
1 Termómetro
1 Placa de porcelana
2 Goteros
2 Morteros
6
2 Perilla de seguridad
3 Vaso de precipitados
1 Pizeta 50 𝑚𝑙
Equipos requeridos
Baño maría
REACTIVOS REQUERIDOS
NOMBRE CANTIDAD S I R O
Peróxido de hidrógeno 𝐻2 𝑂2 50 𝑚𝑙 2 0 3
Solución 3 𝑀 de Hidróxido de sodio 20 𝑚𝑙 3 0 1 Corrosivo
𝑁𝑎𝑂𝐻
Solución 3 𝑀 de Ácido clorhídrico 𝐻𝐶𝑙 20 𝑚𝑙 3 0 0 Corrosivo
PARTE EXPERIMENTAL
RESULTADOS
10
La enzima se
1 80°C Nulo. desnaturalizo por el
calentamiento.
Producción de
2 37°C 1s
abundante burbuja.
Producción de
3 27°C 1 s.
abundante burbuja.
Producción de poca
4 1°C 13 s.
burbuja.
Producción de poca
5 5°C 24 s. burbuja y poca
efervescencia.
Tabla 2: Efecto de la temperatura sobre el funcionamiento de las enzimas.
Abundante burbuja.
B 1:19 s.
Separación de fase.
C 24 s Burbuja abundante.
11
peróxido de organismos.
hidrógeno.
Foto 4: Hígado a
1°C con
peróxido de
hidrogeno.
Foto 5: Hígado a
27°C con
peróxido de
hidrogeno.
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Por debajo de estos valores las Enzimas son Inhibidas, es decir, se mantienen inactivas de
tal manera que no pueden intervenir en una reacción enzimática.
8. ¿Qué le sucede a las enzimas cuando se exponen a temperaturas extremas (muy frías o
muy calientes)?
La enzima se desnaturaliza ya que a altas o bajas temperaturas, ésta pierde su estructura
terciaria, que es la que en definitiva le da la función a la enzima. Sin su estructura no está
formado el sitio activo, por lo que no tiene actividad alguna.
9. ¿Cómo se relacionan el pH y la actividad enzimática?
Si se mide la actividad enzimática a diferentes 𝑝𝐻, se puede demostrar el efecto de la
concentracion de 𝐻(protones), para la mayoria de las enzimas se encuentra entre un 𝑝𝐻 de 6
a 8 si está por debajo o por encima de estos valores la velocidad cae mas o menos
rápidamente, los cambios de 𝑝𝐻 del medio afectan el estado de ionización de ciertos grupos
funcionales en la molécula de la enzima y también en la del sustrato.
10. Las enzimas del estómago funcionan óptimamente a un pH de 2. ¿Cómo se afectaría la
digestión si el pH aumenta a 4? 13
El pH de estómago es muy acido entonces si nosotros aumentamos el pH no se realiza la
misma reacción de digestión ya que son enzimas las que llevan a cabo la digestión, sin
embargo la enzima catalasa funciona en un pH de entre 3 y 6 entonces si nosotros
aumentamos el pH del estómago la enzima funcionaria correctamente ya que se encuentra
en sus rangos de pH.
11. ¿Puede mencionar otras enzimas que actúan en nuestro cuerpo?
LIPASA PANCREÁTICA, sintetizada por la porción Exóctrina del páncreas, actúa sobre los
lípidos reduciéndolos en Glicerina (Alcohol) y Ácidos grasos simples (Glicéridos y
Triglicéridos).
LIPASA INTESTINAL, sintetizada por las glándulas intestinales, actúa sobre los Lípidos
reduciéndolos en glicerina y ácidos grasos simples.
TRIPSINA y QUIMIOTRIPSINA PANCREÁTICA, sintetizada por el Páncreas exocrino, actúa
sobre las cadenas poli peptídicas reduciéndolas en Oligopéptidos.
MALTASA, sintetizada por las glándulas intestinales, actúa sobre la Maltosa (Disacárido)
reduciéndola en 2 moléculas de Glucosa (Monosacáridos).
LACTASA, sintetizada por las glándulas intestinales, actúa sobre la Lactosa (Disacárido)
reduciéndola en Glucosa y Galactosa (Monosacáridos).
RIBONUCLEASA y DESOXIRRIBONUCLEASA, sintetizada por el Páncreas exocrino, actúa
sobre los Ácidos Nucleicos (ADN y ARN) reduciéndolos en Nucleótidos.
SACARASA, sintetizada por las glándulas intestinales, actúa sobre la Sacarosa (Disacárido)
reduciéndola en Glucosa y Fructosa (Monosacáridos).
12. ¿Qué efecto podría tener una fiebre alta prolongada sobre el funcionamiento de las
enzimas? Podría inhibir el funcionamiento de las enzimas ya que como son enzimas a una
temperatura alta estas empiezan a desnaturalizarse y por lo mismo no reaccionan
correctamente.
Durante el desarrollo de esta práctica observamos que los materiales orgánicos que
utilizamos fueron un poco complicados de triturar ya que solo utilizamos su jugo y algunos
como la papa y las setas fueron los más duros y por lo tanto los más complicados en
obtener su jugo, para obtener solamente el jugo fue necesario filtrara con gasa las muestras 14
además de exprimir para que se obtuviera todo el jugo que necesitamos. Las diferentes
temperaturas que utilizamos afectaban en la reacción con el peróxido de Hidrogeno, por ello
fue necesario de tomar las temperaturas extremas correctamente como fueron a 4°C Y 80°C
como también cuando la muestra se refrigero ya que como eran temperaturas opuestas la
reacción que provoco fue muy notoria en ambos casos. Fue necesario tomar la cantidad
exacta de peróxido para cada muestra ya que si se colocaba más o menos cantidad pudiera
que reaccionara diferente como de misma manera la persona que colocaba el peróxido tenía
que ser la misma persona para que la fuerza con la que cayera al tubo fuera la misma. Los
tiempos tomados en cada muestra fueron de ayuda para que existiera reacción ya que influía
con ello la temperatura y como ya sabemos la temperatura es necesaria para que cierta
enzima reaccione o también como es una proteína, es necesaria la temperatura para que
esta no se desnaturalice.
CONCLUSIONES
16
BIBLIOGRAFÍA
“Efecto del pH y la temperatura alta en la enzima catalasa” Elaborada por: Bióloga María del
http://www.profesorenlinea.cl/Ciencias/Hidratos_carbono_Glicogeno.html
http://mazinger.sisib.uchile.cl/repositorio/lb/ciencias_quimicas_y_farmaceuticas/schmidth02/p
arte07/07.html
http://www.uaq.mx/investigacion/difusion/veranos/memorias-
2010/12%20Verano%20Ciencia%20Region%20Centro/UAQ%20Cedillo%20Jimenez.pdf
http://mazinger.sisib.uchile.cl/repositorio/lb/ciencias_quimicas_y_farmaceuticas/schmi
dth02/parte03/01.html
http://www.infobiologia.net/2011/09/lisosomas-peroxisomas-y-vacuolas.html
http://webs.uvigo.es/mmegias/5-celulas/6-peroxisomas.php
http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/funcion%20enzima.html
17