DETERMINACIÓN DE TARTRAZINA EN UNA BEBIDA COMERCIAL EMPLEANDO

DIFERENTES TIPOS DE CURVAS DE CALIBRACIÓN

1
Gabriela Lopez, 2Mateo Pava
Galoarb@hotmail.com,pava.mateo@gmail.com,

1y2
Universidad Icesi, Facultad de Ciencias Naturales, Laboratorio de instrumental
23 de marzo de 2019

Resumen

El objetivo de la práctica fue el de determinar el contenido de tartrazina en una bebida comercial, para
ello, se utilizó como bebida comercial la gaseosa Sprite que contiene este tipo de colorante, al igual que
se evaluó 3 diferentes métodos de curvas de calibración (Calibración Sencilla, por adición estándar y
por patrón interno).Los resultados obtenidos en la concentración de Tartrazina para cada una de las
curvas fueron 584,21 ppm para calibración Sencilla, 197,36 ppm en calibración por adición estándar y
574,20 ppm en la calibración por patrón interno para un valor teorico de 558 ppm.

Introducción

Para la realización de esta práctica se hizo uso
de un método espectrofotométrico. Los
métodos espectrofotométricos son los métodos
de análisis más utilizados, y se basan en la
relación que existe entre la absorción de luz por
parte de un compuesto y su concentración1. Uno
de los mayores principios de este método se
basa en la ley de Beer-Lambert, la cual
establece que la disminución de la intensidad
del haz de luz incidente es proporcional al
espesor del medio. Un espectrofotómetro es
capaz de determinar, qué sustancias están
presentes en una muestra y cuantificarlas esto
lo hace mediante cálculos de longitudes de onda
observadas o en otras palabras la realización de
curvas de calibración.
Entre las curvas de calibración realizadas a
partir de los resultados se tienen: curva de
calibración sencilla la cual consiste en la
determinación de un analito, en donde sus
reactivos no interfieren con el análisis, por otra
parte se encuentra la curva de calibración por
adición estándar la cual consiste en la adición
de un volumen fijo de la muestra, a las
soluciones estándares diluyendo a un volumen
final constante, para finalizar se tiene la curva
de calibración por estándar interno la cual se
utiliza para compensar errores aleatorios y
sistemáticos como interferencias no espectrales
de componentes de la matriz 3. Las curvas de
calibración no solo consisten en la
determinación de un analito, a su vez sirven
para observar la estabilidad de compuestos
presentes en una muestra 4,como se observa en
el artículo “Sustitución de tartrazina por
betacaroteno en la elaboración de bebidas no
alcohólicas” el cual busca evaluar la viabilidad
de la sustitución de la tartrazina un aditivo
artificial que genera efectos adversos en la
salud por betacaroteno un colorante natural a
partir del uso del espectrofotómetro UV-visible
y la realización de curvas de calibración.

Metodología
Para la realización de la práctica se evaluaron 3
diferentes métodos de curvas de calibración, en
primera instancia de pesaron 0,05g de tartrazina
y se preparó la solución en un balón aforado de
50 mL. Posteriormente, se inició con la curva
de calibración sencilla en la que se usaron 6
balones de 25 mL y se adiciono con la
micropipeta los volúmenes de solución patrón
1 los cuales fueron (12,16,20,24,28 y 32 mg/L) 24 0,0135
respectivamente, además de esto se tomaron sus 28 0,024
32 0,0325
absorbancias a 431 nm.

Cabe agregar la preparación de la muestra para Tabla 2. Absorbancia de la muestra en la curva de

una calibración sencilla en la cual se tomó un calibración sencilla.
1mL de la muestra problema y se transfirió a un Absorbancia
matraz de 25 mL, completando el volumen con (431 nm)
agua destilada hasta el aforo, posteriormente se
midió su absorbancia a 431 nm Muestra 0,014
Para la curva de calibración por adición
estándar se prepararon 6 balones de 25 ml Por
a los cuales se les adiciono 1 ml de la muestra Calibración Sencilla
problema. Posteriormente el primer balón se
enraso con agua destilada, mientras que a los 0.04
y = 0.0019x - 0.0304
demás balones se les adiciono con la 0.03 R² = 0.9964

Absorbancia a 431 nm
micropipeta los volúmenes (12; 16, 20,24 , 28 0.02
)mg/L. respectivamente, seguido de esto
0.01
se completó el volumen con agua
destilada hasta el aforo, por otra parte se 0
midieron sus absorbancias a 431 nm. 0 10 20 30 40
-0.01
Por último, se realizó la curva de calibración -0.02
por patrón interno, para lo cual se utilizaron 6
-0.03
balones de 25 ml y se agregó 450 microlitros de
solución de azul de metileno al 0,01%, y se -0.04
Concentracion de Tartrazina en ppm
agregan los volúmenes de la solución patrón 1
los cuales fueron () respectivamente. Además
de esto, se tomaron las absorbancias a 431 nm Grafica 1. Calibración Sencilla, Concentración vs
y 664 nm. Absorbancia.
Por otro lado, para la preparación de la solución
problema por patrón interno, se transfirió 1 mL Este tipo de curva de calibración tiene un
de la muestra problema y 450µL de azul de comportamiento lineal por lo que al graficar
metileno al 0,01% a un matraz de 25 mL nos arrojó una ecuación lineal de la forma de
posteriormente se midió su absorbancia a 431 la Ecuación 1, la ecuación obtenida es la
nm y 664 nm.
Ecuación 2.
Cálculos y Resultados 𝑦 = 𝑚𝑥 + 𝑏 (1)
El peso tomado para la solución de Tartrzina
fue de 0,050 g. 𝑦 = 0,0019𝑥 − 0,0304 (2)
En la práctica se obtuvo los siguientes
Siendo y la absorbancia, m y b se son
resultados para los diferentes tipos de curvas de
constantes determinadas al graficar (0,0019 y
calibración.
0,0304, respectivamente) y x es la
concentración de Tartrazina. Por ende, para
obtener la concentración de analito se despeja
Tabla 1. Absorbancia de la muestra a diferentes la x y se obtiene la Ecuación 3.
concentraciones de tartrazina
𝑦−0,0304
𝑥= (3)
0,0019
Calibración Sencilla
Concentración de Absorbancia De esta forma al reemplazar la absorbancia
Tartrazina (mg/L) (431 nm) obtenida de la muestra (Tabla 2), se obtiene la
12 -0,0065 concentración a determinada absorbancia que se
16 0,0005
20 0,0095
multiplica por el factor de dilucion utilizado. Grafica 2. Calibración por Adición Estándar,
(Ecuación 4). Absorbancia vs concentración.

0,014 − 0,0304
𝑥= = 23,36 𝑝𝑝𝑚25𝑚𝑙 Para la determinación de la concentración del
0,0019
analito por este método se utiliza la Ecuación 6.
= 584.21 𝑝𝑝𝑚
𝑏
Curva de calibración por Adición Estándar 𝐶𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = (6)
𝑚
Se obtuvo las absorbancias de las concentraciones
evaluadas en la Tabla 3. Además, se evaluó la Donde, se reemplazan las variables b y m por los
solución patrón 1. valores obtenidos de la ecuación de la recta de la
Grafica 2, como se observa a continuación y se
Tabla 3. Absorbancia de la muestra a diferentes multiplica por el factor de dilución.
concentraciones de tartrazina y Solución patrón 1.
0,015
𝐶𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = = 7,89 𝑝𝑝𝑚25𝑚𝑙 =
0,0019
Calibración por Adición Estándar
197,36 𝑝𝑝𝑚 (4)

Curva de Calibración Estándar por Patrón

Concentración de Absorbancia Interno
Tartrazina (mg/L) (431 nm)
Para este método se tomó la absorbancia a dos
longitudes de ondas diferentes 431 nm y 661 nm.
(Solución Patrón 1)
12
0,0375 Además, se utilizó azul de metileno al 0,01 %. Los
resultados se muestran en la Tabla 4.
16 0,044
Tabla 4. Absorbancia a diferentes longitudes de
20 0,052 onda de la muestra a diferentes concentraciones de
tartrazina.
24 0,0605 Calibración estándar por patrón interno
Concentración Absorbancia
28 0,067 de Tartrazina Absorbancia 431 nm /664
(mg/L) nm
431 nm 664 nm
32 0,074 0 -0,0285 -0,113 -0,252
12 0,0035 0,264 0,0132
16 0,003 0,3045 0,009
Se graficaron los datos anteriores obteniendo la 20 0,012 0,278 0,043
24 0,021 0,2995 0,070
Grafica 2. 28 0,028 0,287 0,097
32 0,0375 0,285 0,131
Muestra 0,0205 0,3055 0,0671
Los datos de la Tabla 4 se graficaron obteniendo la
Calibración por Adición Grafica 3.

Estandar
0.08 y = 0.0019x + 0.015
Absorbancia a 431 nm

0.07 R² = 0.9983
0.06
0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0
0 10 20 30
Concentracion de Tartrazina en ppm
 porcentaje de error fueron 0,64%, 66,43% y
Calibración por Estandar 2,34% respectivamente,
Interno
0.15 Uno de los errores presentes durante la practica
y = 0.0063x - 0.0776
Absorbancia a 431 nm/ 661 nm

fue durante la realización de la curva de

R² = 0.9561
0.1 calibración sencilla debido a que se realizó la
primera medición hasta la muestra mas
0.05
concentrada y posteriormente se hizo una
0 segunda medición para las mismas muestras,
0 10 20 30 40 por tanto se utilizo una celda que se encontraba
-0.05 con una muestra muy concentrada para la
medición de una muestra que estaba menos
-0.1
Concentracion de Tartrazina en ppm concentrada, a pesar de que las celda fue
purgada se pudo observar como en las segundas
Grafica 3. Calibración Estándar por Patrón mediciones hubo un aumento en la absorbancia.
Interno, Absorbancia vs concentración.
Conclusiones
En este tipo de calibración se relaciona la
 A pesar de que durante las mediciones
señal del analito con la señal de estándar
se realice una purga de la celda, esto no
interno, como se representa la Ecuación 5.
significa que se elimine en un cien por
ciento todas las especies químicas que
𝑦 𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 𝑓
= 𝑥 se encontraban anteriormente.
𝑦 𝑃𝑎𝑡𝑟𝑜𝑛 𝐼𝑛𝑡𝑒𝑟𝑛𝑜 𝐶𝑃𝑎𝑡𝑟𝑜𝑛 𝐼𝑛𝑡𝑒𝑟𝑛𝑜 𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜
= 𝑚𝑥𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 (5) 
Bibliografía
Se despeja la variable que de concentración del 1. Espectrometría. (s.f.). (G.
analito y se reemplaza y se multiplica por el factor Pérez, Productor) Recuperado
de dilución (Ecuación 6). el 18 de 03 de 2019, de
https://www.espectrometria.c
𝑥𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 =
(0,0671+0,0776)
= 22,96 𝑝𝑝𝑚25𝑚𝑙 = om
0,0063
574,20 𝑝𝑝𝑚 (6)
1. Palacios, D. M. (2014).
Métodos de Calibrado.
Para la obtención de los porcentajes de error se Universidad de Los Andes
usó la siguiente ecuación. Venezuela, Departamento de
Química, Mérida
𝑉. 𝑡𝑒𝑜𝑟𝑖𝑐𝑜 − 𝑉. 𝑒𝑥𝑝 2. Mauricio Restrepo Gallego, E.
% 𝑑𝑒 𝑒𝑟𝑟𝑜𝑟 =   100
𝑉. 𝑡𝑒𝑜𝑟𝑖𝑐𝑜 V. (19 de enero de 2007).
Obteniendo el siguiente valor para la curva de Sustitución de tartrazina por
calibración sencilla. betacaroteno en la elaboracion
588 𝑛𝑚 − 584.21 𝑛𝑚 de bebidas no alcoholicas.
  100 = 0,64%
588 𝑛𝑚 LASALLISTA DE
INVESTIGACIÓN, pág. 7.
Análisis de los resultados
Se determinó la concentración de tartrazina por
tres diferentes métodos de curva de calibración
los cuales fueron calibración sencilla,
calibración por adición estándar y calibración
por estándar interno. Los resultados de