UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE MÉXICO

FACULTAD DE QUÍMICA
LICENCIATURA EN QUÍMICA EN ALIMENTOS.

ALUMNAS:
FRANCO DEL OLMO MAYTE
HERNÁNDEZ ARENAS ABIGAIL.

TEMA:

REPORTE PRACTICA 2 Esterilización y desinfección

PROFESORA:
M. EN ASS BERTHA JAUREGUI RODRÍGUEZ

ASIGNATURA:
MICROBIOLOGÍA GENERAL

SEMESTRE: 3° GRUPO: 34
 Esterilización y desinfección
Objetivo:
Preparar correctamente el material de vidrio que se va a someter a esterilización.
Seleccionar el método de esterilización adecuado a diferentes propósitos.
Evaluar el proceso de desinfección de una superficie mediante frotis y cultivo en
agar nutritivo.

Introducción:
Los microorganismos como otros seres vivos han sido capaces de adaptarse a
diferentes hábitats aún en condiciones extremas. Se han desarrollado y aplicado
diversos procesos de desinfección y esterilización para limitar su presencia o
eliminarlos.

Esterilización: Es la destrucción o eliminación completa de toda forma de vida

microbiana.
Desinfección: Es un proceso que elimina la mayoría o todos los microorganismos
sobre los objetos inanimados con la excepción de esporas bacterianas
Métodos de Esterilización:
1. Agentes Físicos

Calor Seco
Los métodos más importantes son:
a. Flameado: es un procedimiento simple y eficaz, consiste en la exposición de un
objeto a efecto de la llama hasta la incandescencia. Se esteriliza de esta forma, por
ejemplo, asas de cultivo de siembra.
b. Incineración: es el mejor sistema para esterilizar todos aquellos productos en los
que no importe su destrucción, por ejemplo, material biológico.
c. Estufa: calor seco a alta temperatura, 20 minutos a 180º, 60 minutos a 160º, siendo
suficiente la esterilización durante 60 minutos a 100-140º, se le utiliza para esterilizar
material de vidrio debidamente envuelto en papel, metal. etc.

Calor Húmedo.:

Autoclave: horno a presión, consiste en una cámara en la que el aire puede ser
sustituido por vapor de agua sometida a presión. Se opera a 121º C y 1 atm. de
presión durante 15 minutos.

Tindalización: (esterilización intermitente) consiste en someter el producto a

calentamientos intermitentes entre 56 y 100º C durante 30 minutos con lo que se
asegura destruir las formas vegetativas.

MATERIAL REACTIVOS
1 pipeta de 10 ml
 Horno de esterilización Viales de esporas de Bacillus subtilis
3 pipetas de 1.0 ml variedad Níger ATCC-9273
Autoclave (microrganismo indicador control
2 tubos de ensaye de 16 X 150 esterilización)
Mechero Fisher
2 tubos con tapón de rosca
1 matraz de 250 ml Hisopos estériles y solución salina estéril
Manta de cielo, hilaza, algodón papel
de estraza, cinta testigo, tijeras
Horno de esterilización
Autoclave
Mechero Fisher

1-. ESTERILIZACIÓN EN CALOR SECO:

Procedimos a encender la estufa y mantuvimos a 180°C y verificamos que el
material a esterilizar estuviera perfectamente limpio. Colocamos tapones de
algodón en la boquilla con la manta de cielo e hilaza. A las pipetas también se les
coloco un tapón con un pedazo de algodón. Los matraces y los tubos de ensaye
deben estar cubiertos con papel del estraza. Finalmente se coloco el material en el
horno a 180° por una hora.
 VENTAJAS DESVENTAJAS

 No es corrosivo para metales e  Requiere mayor tiempo

instrumentos. de esterilización, respecto al calor
 Permite la esterilización de húmedo, debido a la baja penetración
sustancias en polvo y no acuosas, y de del calor
sustancias viscosas no volátiles.

2-. ESTERILIZACIÓN CON CALOR HUMEDO:

Lo que realizamos en esta práctica fue envolver el material de vidrio para
esterilización por calor seco.

Posteriormente prendimos la estufa y verificamos que el agua en el autoclave haya

sido el adecuado; procedimos a colocar en el interior del autoclave las pipetas y
matraces con sus respectivos tapones y gorros de papel estraza.

Después, cerramos el autoclave, y comprobamos que la presión fuera la correcta

(15lb/in2) y la mantuvimos a esa presión durante 15 minutos. Ya trascurrido ese
tiempo dejamos enfriar lentamente para retirar la válvula:
 VENTAJAS DESVENTAJAS

Rápido calentamiento y penetración. No se permite para emulsiones con

Destrucción de bacterias y esporas en agua.
poco tiempo. Es corrosivo sobre algunos metales.
No deja residuos tóxicos.
Bajo deterioro del material expuesto.
Económico

3-. DESINFECCIÓN:

Para esta practica lo que realizamos fue lo siguiente: Marcamos las dos cajas Petri
que previamente ya contenían agar nutritivo, una la identificamos como “No
desinfectado” y la otra “desinfectado”, procedimos a tomar muestra de un lapicero
encontrado en el piso, frotamos con un hisopo estéril que previamente se
humedeció en solución salina; posteriormente desinfectamos el lapicero con cloro y
repetimos el procedimiento con el hisopo y lo transferimos al agar nutritivo.
Finalmente incubamos a 25°
VENTAJAS DESVENTAJAS

Los desinfectantes pueden matar los Los desinfectantes son residuos

gérmenes y microorganismos que no
pueden verse a simple vista. Por
ejemplo, los tipos de desinfectantes
fenólicos son muy buenos para matar
las bacterias.
peligrosos. Ellos contienen
compuestos halogenados. La mayoría
de los desinfectantes contienen en
exceso el nivel de seguridad ambiental
de 0,01 por ciento de los compuestos
halogenados.

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO:

1) ¿Cuáles son los métodos de esterilización más utilizados en

microbiología? En qué materiales se aplica cada uno

2) ¿Por qué al iniciar el calentamiento en la autoclave, debe dejarse salir

el aire antes de colocar la válvula para iniciar la esterilización?

3) Cómo se verifica un buen proceso de esterilización

4) Cuál es el fundamento de la utilización de indicadores biológicos en

un proceso de esterilización
5) Explicar la diferencia entre esterilización y desinfección