INSTITUTO TECNOLOGICO DE ACAPULCO

INGENIERIA EN BIOQUIMICA

ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS

M.C. DÍAZ ALDAY MIGUEL ÁNGEL

DISEÑO EXPERIMENTAL: TECNICA ECONOMETRICA

ALUMNO: GARCIA FLORES AZAEL

GRUPO: “B”

N. DE CONTROL: 14320553

28 DE AGOSTO DEL 2019

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Contenido
MARCO TEÓRICO ................................................................................................................................. 3
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ...................................................................................................... 5
HIPÓTESIS ............................................................................................................................................ 5
OBJETIVOS ........................................................................................................................................... 5
MATERIAL, EQUIPO Y SUSTANCIAS ..................................................................................................... 6
PROCEDIMIENTO (técnica ecométrica) ............................................................................................... 7
BIBLIOGRAFÍA ...................................................................................................................................... 9

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MARCO TEÓRICO

El análisis microbiológico es una herramienta fundamental para el monitoreo y control de calidad

en los distintos procesos productivos , permitiendo determinar los focos de contaminación por los
cuales se está generando un producto deficiente, además de ser clave para el manejo, monitoreo
y control de sistemas en los cuales la inocuidad de los productos sea uno de los principales
objetivos; estos análisis se realizan de manera rutinaria en muchas empresas para determinar la
aptitud en los productos generados.

La importancia de en el control microbiológico radica en que son

necesarios para el aislamiento, mantenimiento, la reproducción
y la identificación de los microorganismos.

Un medio de cultivo es el material nutritivo en el que se pueden

recuperar, multiplicar y aislar los microorganismos, así como
efectuar pruebas de susceptibilidad. Los medios de cultivo se
pueden preparar en el laboratorio a partir de cada uno de sus
constituyentes o por simple rehidratación.

Basados en la naturaleza del producto, se aplican diversos protocolos, los cuales permitirán aislar
microorganismos de interés, y que son comunes encontrar en este, si se han presentado falencias
en las etapas de procesamiento y elaboración, pudiendo llegar a ser nocivos para los
consumidores; a razón de lo anterior, los resultados obtenidos del análisis microbiológico son
determinantes.

Conociendo la gran responsabilidad que tienen los laboratorios de microbiología al dar un

dictamen final, se hace necesario realizar pruebas de verificación que certifiquen el perfecto
estado de los equipos, materiales, y reactivos que se usan a la
hora de ejecutar dichos análisis.

Para evaluar un medio de cultivo se realiza frecuentemente una

técnica llamada Método Ecométrico, el cual fue descrito por
Mosselt et al., 1983, y que permite medir la Productividad que
es la capacidad de los medios de cultivo para favorecer el
crecimiento y desarrollo de un microorganismo, esta
característica se determina a través de la comparación que se
realiza entre el medio por evaluar y un medio control (Soler,
2006). Otro aspecto es la Selectividad referida a la resistencia
que genera el medio de cultivo a la colonización por
microorganismos interferentes o indeseados ( Doyle, et al., 1997 ; Villalobos et al.,2007)

El análisis ecométrico establece la eficiencia con la cual un medio de cultivo sirve para recuperar
una cepa, mediante la comparación que se realiza entre el medio a evaluar y un medio control.
Esta técnica evalúa tanto la sensibilidad de los medios a la colonización por los microorganismos

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buscados (productividad) como también la resistencia a la colonización por las cepas
que interfieren (selectividad). Un parámetro útil para interpretar los resultados ecométricos
es el índice de crecimiento absoluto (ICA). Éste denota el último sector de la placa en el cual ha
habido un crecimiento significativo. Otro parámetro es el índice de crecimiento relativo (ICR) que
relaciona los valores de ICA del medio a evaluar con el ICA del medio control (Mossel).

Para llevar a cabo la prueba de control de calidad de medios de cultivo (Mètodo Ecométrico), se
usa como medio de referencia, aquel medio de cultivo cuya composición sea muy completa y
permita el crecimiento de un gran número de microrganismos; tales medios pueden ser: Agar
tripticasa de soya, Agar BHI, Agar nutritivo, Agar Standard plate Count.

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PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El análisis microbiológico es muy importante en distintos procesos industriales; para realizar
dichos análisis se utilizan medios de cultivos, los cuales en ocasiones pueden presentar defectos
de fábrica provocando resultados erróneos, ya sea provocando deficiencias en la productividad
(crecimiento microbiano en el medio de cultivo) y/o la selectividad (inhibición de microorganismos
no deseados).

HIPÓTESIS

La técnica ecometrica es considerada uno de los puntos críticos de control en el análisis

microbiológico. Realizando dicha técnica en los medios de cultivo se podrá corroborar la calidad
del agar, de esta manera, si el agar obtiene resultados satisfactorios, se podrá tener la seguridad
de que al realizar análisis microbiológicos se obtendrán resultados certeros

OBJETIVOS
El alumno desarrollará la destreza y habilidad para realizar la técnica ecométrica, aprenderá que
es, para que sirve dicha técnica y a interpretar sus resultados.

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MATERIAL, EQUIPO Y SUSTANCIAS

 Medio de referencia: Agar BHI o tripticasa de soya o Standard Plate Count.

 Medio prueba: depende de los medios a los que se les realice la prueba
 Cajas Petri con 20 ml de medio de cultivo
 Asa calibrada
 Caldo BHI
 Agua destilada
 Mechero
 Estufa bacteriológica
 Matraz erlen meyer
 Tubo de ensayo

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PROCEDIMIENTO (técnica ecométrica)

1. Sembrar previamente los microorganismos: el de interés y el interferente en caldo BHI e
incubar durante 18-24 horas a 37°C- (por separado).

2. Dividir la base de las cajas Petri en cuatro cuadrantes y marcar cada uno de estos, trazar
cinco estrías en cada uno de ellos y una línea en la intersección de los cuadrantes.

3. Disponer el medio prueba y medio control (en sus respectivas cajas ya autoclavados
(esterilizados) y esperar a que solidifique.

4. Con un asa calibrada de 0.1 ml tomar muestra del cultivo y proceder a sembrar de acuerdo
a la secuencia de rotulado de la caja 1,2,3,4 sin volver a tomar inóculo, realizando estrías
de forma paralela a las dibujadas en la base de la caja Petri, por último sembrar la línea
central.

5. Incubar a la temperatura, atmósfera y tiempo según sea el microorganismo

6. Transcurrido el tiempo de incubación, realizar lectura de resultados.

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Lectura de resultados

Se considera válida cualquier estría que tenga un crecimiento superior al 25% de la línea total,
teniendo cada estría (Color Azul) un valor de 0,2 y la línea central (Color Naranja) un valor de 1,
por lo tanto el valor máximo para crecimiento en este ensayo es de 5, y esto es denominado
Índice de Crecimiento Absoluto (ICA) (Tortora,1993 ; Mossel, 2003).

Por ello el Indice de Crecimiento Absoluto indica la productividad del medio de prueba, para lo
cual se considera que (Véase Tabla 1):

Tabla 1: Valores asignados para determinar la productividad de un medio de cultivo

ICA PRODUCTIVIDAD
4.5-5 ALTA
2.5-4.5 MEDIA
<2.5 BAJA
0 NO HAY PRODUCTIVIDAD

El ICA permite determinar la selectividad del medio cuando se siembra en este, el microorganismo
interferente y para ello entre menos sea el valor del ICA mayor es la selectividad del medio
(Mossel et al., 1983).

Tabla 2: Valores asignados para determinar la selectividad de un medio de cultivo

ICA SELECTIVIDAD
4.5-5 NO HAY SELECTIVIDAD
2.5-4.5 BAJA
<2.5 MEDIA
0 ALTA

Existe otro parámetro que se considera y es el Indice de Crecimiento Relativo (ICR) el cual
determina la capacidad que posee el medio de prueba para recuperar la flora, respecto al medio
de cutivo control (Mossel, 2003).
Se determina aplicando la siguiente fórmula:

ICR= ICA(PRUEBA) / ICA(CONTROL)

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BIBLIOGRAFÍA
file:///C:/Users/Neftali/Downloads/4900-17912-1-PB.pdf
https://es.scribd.com/presentation/125949886/medios-de-cultivo-pptx
https://prezi.com/apbkurtmemmx/control-de-calidad-de-los-medios-de-cultivo/
www.utp.edu.co/gestioncalidad/descarga/IDDOCWEB/5568