CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA.

Johan Jiménez Gallego, María Paula Velásquez Velásquez, José Nicolás

Llorente, María Alejandra

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA.
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA.
MONTERÍA-CORDOBA
2019

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RESUMEN

Para observar el fundamento y la naturaleza de las separaciones en

cromatografía plana, el análisis cualitativo se realizó empleando el método de
cromatografía de capa fina, el cual muestra que a medida que asciende la fase
móvil constituida por una mezcla de solvente por acción de capilaridad, arrastra
los componentes de una tinta de lapicero, a través de una capa fina. En el cual
se usaron patrones (metanol, cloroformo, acetato de etilo) para encontrar valores
estandarizados de Rf e identificar y calcular la concentración de una muestra
problema.

ABSTRACT

To observe the basis and the nature of the separations in flat chromatography,
the qualitative analysis was carried out using the thin layer chromatography
method, which shows that as the mobile phase constituted by a mixture of
solvent by capillary action rises, drag the components of a pen ink, through a
thin layer. In which standards (methanol, chloroform, ethyl acetate) were used
to find standardized Rf values and to identify and calculate the concentration of
a test sample.

INTRODUCCIÓN útiles habían probado ser en el

Cromatografía en capa fina
Aunque la cromatografía en papel ha
sido un valiosísimo factor de
progreso en todos los campos de la
biología y la química, el solo uso de
la celulosa como fase estacionaria le
impone gran limitación técnica, ya
que el papel es insatisfactorio para
todas las separaciones (por ejemplo,
sustancias hidrófobas). Por lo tanto,
los investigadores buscaron la forma
de emplear los adsorbentes, que tan
método de columna de tswett, en
una forma laminar conveniente,
análoga a la del papel. Después de
varios intentos, se desarrolló y
adopto mundialmente la
cromatografía en capa fina. En ella
se opera como sigue:
El adsorbente se mezcla con un
aglutinante, a menudo yeso; esta
mezcla se suspende en agua y se
deposita sobre una placa de vidrio o
sobre una superficie plana rígida,
metálica o de un material plástico,
por medio de un dispositivo  Sembramos las soluciones
embadurnador apropiado. Al patrones (tinta de lapicero) en
secarse, la suspensión que adherida una placa con un tubo capilar.
a la placa de vidrio, bien
directamente o por acción del  La placa fue depositada en un
aglutinante, como una capa Beacker el cual contenía el
delegada y rugosa de adsorbente en sistema (disolvente).
un espesor apropiado para la  Se tapó la solución con un vidrio
separación. La separación depende de reloj (figura 1).
de las propiedades adsorbentes de
la capa. Los aspectos técnicos
(aplicación de la muestra, desarrollo
de la placa, localización,
determinaciones cuantitativas etc.,)
de la cromatografía en papel y en
capa fina son muy parecidos.
Además de los adsorbentes
tradicionales, hay técnicas basadas
en el empleo de capas de
cambiadores iónicos, geles de
filtración y sólidos recubiertos de
líquidos. Actualmente se usan estos Figura 1.
materiales y sus combinaciones,
juntos con muchas variedades de  Se dejó en reposo hasta el
disolventes, en la separación de todo momento de la elución.
tipo de compuestos. Lo anterior hace
 Después de haber secado la
de la cromatografía en capa fina un
método analítico versátil, placa, se sometió a una solución
sensiblemente alto grado y rápido de iodo (agente revelador).
para separar en forma bien definida  Después de la revelación
compuestos estructuralmente muy sacamos las placas y se
parecidos. marcaron las manchas con lápiz.
 Como se vio que el mejor patrón
METODOLOGÍA fue el Metanol, se volvió hacer el
procedimiento anterior solo con
Para cromatografía en capa fina se metanol para observar mejor el
utilizó como disolvente; acetato de proceso de elución. (Figura 2).
etilo, metanol, cloroformo. Nota: a esta placa no se calculo
Rf porque no hubo puntos claros
 Se midió con una pipeta de
solo manchas corridas.
10mL, de acetato de etilo, luego
se midió con una pipeta de 10 ml
metanol, 10 ml cloroformo.
Posteriormente se adicionaron a
un Beacker de 100mL, esto
 constituye a la fase Móvil.
Figura 2
RESULTADOS Y DISCUSIÓN Mancha de lapicero en acetato de
etilo:
Cromatografía en capa fina;
RF: 0.36 mancha de referencia
OBSERVACION
Color de la Distancia RF
La distancia que se tomó desde la
mancha recorrida
línea de toque con respecto al borde (cm)
inferior de la placa fue de 0,5 cm, Y Negro 0.3 0.05
El intervalo que se estableció para el
recorrido durante la separación fue Fucsia 0.7 0.12
de 5.5 cm
Morado 2 0.36
Para determinar el RF en las
pruebas se utilizó la siguiente
ecuación:
Mancha de lapicero en
Rf = Distancia recorrida por el cloroformo:
compuesto / Distancia recorrida por el
disolvente RF: 0.34 mancha de referencia

Color de la Distancia RF
mancha recorrida
Mancha de lapicero en Metanol
(cm)
RF: 0.76 mancha de referencia Morado 0.18
Negro 0.27
Color de la Distancia RF
mancha recorrida Amarillo 0.34
(cm)

Morado 2.0 0.36

Rosa 2.4 0.43

Amarillo 4.2 0.76

Analizamos el efecto de la polaridad, como ya se mencionó la distancia que

nuestra muestra recorra estará en función de la polaridad, en el caso de la
practica analizamos tres casos, con tres distintos eluyentes. El cloroformo, en
este caso podemos notar que el valor de Rf es prácticamente cero, se puede
afirmar entonces que nuestras muestras son polares ya que se retuvieron en el
punto de aplicación ya que no tuvieron interacción con el eluyente que es un
compuesto no polar, de esta manera justificamos que no hayan recorrido
distancia alguna nuestras muestras ya que solo experimentaron interacciones
con la fase estacionaria , es decir, la sílica gel la cual es muy polar; el acetato
de etilo sabemos que es un compuesto medianamente polar, de acuerdo a lo
observado en los resultados encontramos que el Rf tiene valores distintos
para cada muestra sembrada pero ninguno mayor a 0.5 lo que indica que
nuestras muestras son muy polares ya que se retienen más en el punto de
aplicación. Para el metanol encontramos que en las muestras hubo un valor de
Rf mayor a 0.5, esto nos indica que estamos usando el eluyente ideal de esta
muestra y que tiene una polaridad significativa. Podemos afirmar que la
distancia recorrida dependerá de la polaridad de nuestro eluyente y de las
interacciones que tenga con nuestra muestra problema. También podemos
saber mediante el concepto de la polaridad cuando una muestra es pura, ya
que cuando la muestra es pura solo encontraremos una solo mancha en la
placa ya que todo el compuesto tiene la misma polaridad porque es un único
compuesto, en nuestro caso como las muestras no eran puras se observaron
varias manchas en el cromatograma esto nos afirma que tenemos mas de una
sustancia presente en nuestra muestra.

Elección del eluyente

CUESTIONARIO La elección del eluyente es muy

relevante pues este es de gran
importancia, ya que si se utilizan
¿qué factores influyen en una disolventes o eluyentes más polares
separación por cromatografía en estos arrastraran de manera más
capa fina? rápida los distintos componentes de
la placa, generando así una
Polaridad separación en menos tiempos.

La diferencia de velocidad con la Ausencia de aire

cual los componentes recorren la
placa se debe por lo general a la
estructura de cada molécula, así
como también a los distintos grupos
funcionales que esta tenga. Esta
La cromatografía de capa fina debe
llevarse a cabo en un lugar donde la
no existe una corriente de aire con el
fin de evitar problemas de
volatilización u obtener tiempos
muertos mayores que los tiempos de
retención y obtener problemas en los
factores de capacidad de las
distintas muestras

diferencia se debe a la polaridad Temperatura

puesto que las moléculas más
A menor temperatura la sustancia se
polares poseen una mayor retención
absorbe mejor en la fase
al absorbente o fase estacionaria y
estacionaria.
por ende migraran más lento
mientras que las que son menos Limpieza de las placas
polares saldrán de manera rápida.
Se lavan con cloroformo o metanol y
se dejan secar antes de aplicar.
¿Cuál es la finalidad de activar los
agentes absorbentes?
La actividad del absorbente influye
en el grado de emigración de la
sustancia, por lo que activar tal
capacidad de absorción es de
importancia ya que al generar las
separaciones del distinto
componente puede observase el
distinto punto activos de la placa
cromatográfica. la manera más
eficaz de activar tales absorbente es
dejar secar la placa toda la noche o
calentarla de 30 a 60 minutos a una
temperatura de (105-110)°c.
Características del soluto
 Presente una buena
solubilidad con los
componentes de la muestra a
separar
 debe ser volátil es decir debe
poseer punto de ebullición
bajos con el fin de secar las
placas de manera rápida
 No debe contener trazas de
metales(catalizadores)
 Contener un alto grado de
pureza.
 Polaridad se deben probar
cada vez con disolventes
menos polares.

 Debe encontrase en fase

Mencionas las características a liquida
tomar en cuenta del absorbente,  Debe poseer una polaridad
soluto y disolvente para una semejante a la especie
separación por ccf. absorbente
 Debe interaccionar o
experimentar una serie de
Características del absorbente fuerzas con las superficies del
absorbente (fuerzas de
 Tamaño de partícula: vanderwall)
volumen de poro, diámetro de
poro, área superficial
 Homogeneidad
CONCLUSIÓN
 Pureza
Al realizar esta práctica notamos la
Características del disolvente importancia que tiene la
 El disolvente no debe cromatografía de capa fina para
interaccionar con los separar pequeñas cantidades,
componentes de la placa con además es una de las más utilizadas
el fin de evitar retardos o en las reacciones de separaciones e
dificultad en la identificación identificación de los productos
de los componentes. formados. Es muy útil utilizar este
principio de separación para
observar diferentes situaciones de
una muestra problema como es la
pureza o la identificación de
compuestos presentes en esta
muestra de igual manera aplicamos
esto para saber cuándo una reacción
ya ha terminado o no, para lograr
observar un buen cromatograma
debemos de tomar en cuenta
siempre la polaridad tanto de
compuesto a analizar así como del
eluyente, así podremos ver las
diferencias de Rf y asegurar los
puntos anteriores por la distancia
recorrida de cada sustancia y
cuando son distintos o cuando son
las mismas.
REFERENCIAS BIBLIOFRAFICAS
[1].SKOOG, WEST, HOLLER,
Fundamentos de química analítica,
octava edición, editorial THOMSON,
2005. Pág. 1014.
[2].http://www.uco.es/organiza/depar
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C3%8DA%20DE%20CAPA%20FIN
A%20DE%20AAs.pdf
[3].xorge Domínguez .cromatografía
en papel y capa delgada, instituto
tecnológico y de estudio superior de
Monterrey, pág. 11-43.