Identificación y determinación de la presencia de

celulosa haciendo comparación de 6 productos

diferentes con el plátano
LC Agudelo1,2, S. Díaz1,2, AY García1,2 y V.M. Marín1,2
1Universidad Tecnológica, Pereira, Colombia; 2Facultad de Ciencias Agrarias y Agroindustriales.

Abstract

In this laboratory practice the identification and determination of the presence of

cellulose was made by making a comparison with 6 different products (samples) of the
banana, in order to make an acknowledgment of the presence of cellulose in the cell
wall, and in natural materials and processed. The samples to be analyzed were: egg
onion catafil, banana, cork, cotton, filter paper and newspaper. The cellulose originates
compact fibers that constitute the cell wall of plant cells, giving them the necessary
rigidity. The organelles characteristic of the cell and its respective functions were
identified when exposed to said reagents, which showed their structure more
consolidated and manageable under a microscope.
The cell is confirmed as the basis of life since its organelles organized in different
structures perform vital functions such as the autotrophic nutrition process that takes
place in the chloroplasts.
The vegetal cells of banana were observed as small elongated bubbles, but being
plant cells they have a nucleus and a cell wall. Also in another sample was observed
cellulose fibers in cotton this is characterized to other fibers since they have torsion
twists as if it were a twisted ribbon, the more you fly the more mature is cotton.The
cellulose analysis was more satisfactory by comparison with the other samples and
also with bibliographic searches

Keywords: Lignin, plant cells, compact fibers, organelles.

Resumen
En esta práctica de laboratorio se hizo la identificación y determinación de la presencia de
celulosa realizando una comparación con 6 productos (muestras) diferentes del plátano, con el
fin de hacer un reconocimiento de la presencia de celulosa en la pared celular, y en materiales
naturales y procesados. Las muestras a analizar fueron: catafilo de cebolla de huevo, plátano,
corcho, algodón, papel filtro y papel periódico. La celulosa se originan fibras compactas que
constituyen la pared celular de las células vegetales, dándoles así la necesaria rigidez.
Se identificaron los organelos característicos a la célula y sus funciones respectivas de esta al
verse expuesta a dichos reactivos los cuales mostraron sus estructura más consolidada y
manejable al microscopio. Se confirma la célula como base de vida ya que sus organelos
organizados en distintas estructuras realizan funciones vitales como la nutrición autótrofa
proceso que se lleva a cabo en los cloroplastos.
Se observó las células vegetales del plátano que son como pequeñas burbujas alargadas, pero al
ser células vegetales tienen un núcleo y una pared celular. También en otra muestra se observó
las fibras de celulosa en el algodón se caracteriza esto a otras fibras ya que tienen vueltas de
torsión como si fuera una cinta torcida, mientras más vuelas tenga presente más maduro es el
algodón.
El análisis de celulosa resultó más satisfactorio mediante la comparación con las otras muestras
y además con las búsquedas bibliográficas.

Palabras claves: Lignina, células vegetales, fibras compactas, organelos.

INTRODUCCIÓN
La Celulosa es la principal componente de las paredes celulares de los árboles y otras
plantas. Es una fibra vegetal que al ser observada en el microscopio es similar a un cabello
humano, cuya longitud y espesor varía según el tipo de árbol o planta. Las fibras de algodón, por
ejemplo, tienen una longitud de 20-25 mm., las de Pino 2-3 mm. y las de Eucalipto 0,6-0,8 mm. De
igual manera, el contenido de celulosa varía según el tipo de árbol o planta que se considere.
La celulosa está constituida por una larga cadena de carbohidratos polisacáridos. La
estructura de la celulosa se forma por la unión de moléculas de ß-glucosa a través de enlaces ß-
1,4-glucosídico, lo que hace que sea insoluble en agua. La celulosa tiene una estructura lineal o
fibrosa, en la que se establecen múltiples puentes de hidrógeno entre los grupos hidroxilo de
distintas cadenas yuxtapuestas de glucosa, haciéndolas muy resistentes e insolubles al agua.
De esta manera, se originan fibras compactas que constituyen la pared celular de las células
vegetales, dándoles así la necesaria rigidez. La celulosa constituye una fuente de glucosa
prácticamente inagotable que se renueva de forma continua mediante la fotosíntesis.
La celulosa se encuentra en las frutas, las hortalizas y los cereales como constituyente
estructural de las paredes celulares, y también la producen ciertos microorganismos. Es parte de
la fibra cruda, por lo que se elimina en las heces sin haber sido aprovechada. En el arroz, el maíz
y el trigo se localiza en el pericarpio, y en el germen junto con las hemicelulosas y la lignina,
representando 1.0, 2.5 y 2.0% del grano, respectivamente. (Cruz, 2014).

MATERIALES Y MÉTODOS

Materiales
Microscopio, lámina portaobjetos y cubreobjetos, caja Petri, gotero, bisturí, pincel, papel
absorbente, papel lente, probeta de 25 ml.

1. Reactivos.
Azul de metileno 0.1% en agua destilada, safranina 0.2% en agua destilada, reactivo de
Benhren, reactivo de Mangin, hipoclorito de sodio 5%, agua destilada, aceite de inmersión, etano-
xilol.

2. Material vegetal.
Cebolla de huevo, corteza de alcomoque (corcho), plátano.

3. Otros materiales
Algodón, papel filtro, papel periódico.
Métodos

1. Tinción de celulosa presente en la pared celular de células de cebolla de huevo:

Se retiró un catafilo de cebolla de huevo, separando una capa translúcida, la epidermis. Luego
se colocó sobre el portaobjetos, agregando 1-2 gotas del reactivo de benhren o mangin (recién
preparados) y con ayuda de un pincel se esparció suavemente. Se dejó actuar por 3-4 minutos
y se cubrió con la lámina cubreobjetos secando el exceso del reactivo. Posteriormente se
realizó observaciones microscópicas en objetivos de menor a mayor aumento. Por último, se
identificó la pared celular, se dibujó y describió.

2. Tinción de celulosa presente en la Muestra de la especie en análisis (Plátano)

Se realizó un corte fino de la muestra, luego se colocó en un portaobjetos agregando 1-2 gotas
del reactivo de benhren o mangin (recién preparados) y con la ayuda del pincel se esparció
suavemente. Se dejó actuar por 3-4 minutos, Luego se cubrió con la lámina cubreobjetos y se
secó el exceso del reactivo. Posteriormente se realizó observaciones microscópicas en
objetivos de menor a mayor aumento. Por último, se identificó la pared celular, se dibujó y
describió.

3. Tinción de celulosa presente en las paredes celulares en tejidos de corteza de

alcornoque (corcho):
Se realizó varios cortes delgados de un trozo de corcho, se pasó a una caja de Petri que
contenía 10 ml de hipoclorito de sodio 5% y se dejó durante 5 minutos. Después se dejó el
corte más translúcido y se pasó al portaobjetos, adicionando una gota de la colorante
safranina y se dejó actuar por 1 minuto, se llevó nuevamente a una caja de petri que contenía
agua y se eliminó el exceso de colorante. Después se colocó el corte sobre el portaobjetos, se
cubrió con laminilla y se secó el exceso de agua. Posteriormente se realizó observaciones
microscópicas de menor a mayor aumento. Se dibujó y se describió lo observado.

Tinción de celulosa en algodón, papel filtro, papel periódico

Se dispuso de tres láminas portaobjetos y se rotuló 1, 2, 3. Con el número 1 se colocó una
pequeña partícula fibrosa de algodón, con el número 2 se colocó un trozo de papel filtro de
aproximadamente 1 cm cuadrado, con el número 3 se colocó un pedazo de papel periódico
aproximadamente de 1 cm cuadrado.
Después se agregó a cada muestra una gota de azul de metileno y se dejó actuar de 3-4
minutos, cuidadosamente se eliminó en exceso de colorante con agua destilada, se cubrió con
laminilla, se secó el agua en exceso. Se llevó a observación microscópica de menor a mayor
aumento, se dibujó y describió lo observado.
Sobre las muestras coloreadas previamente, se colocó 1-2 gotas de los reactivos de Benhren
o Mangin, se cubrió la preparación y se observó en el microscopio de menor a mayor aumento,
por último, se dibujó y describió lo observado.

Preguntas

1. ¿Cuál es la función de la celulosa y la lignina a nivel de la pared celular?

 En la celulosa se originan fibras compactas que constituyen la pared celular de las células
vegetales, dándoles así la necesaria rigidez. La fase fibrilar está formada por celulosa que se
combina en una disposición muy ordenada (mediante puentes de hidrógeno) que le otorga
propiedades cristalinas, formando fibrillas elementales que se reúnen en microfibrillas, visibles
al microscopio electro- nico. La fase amorfa está formada por hemicelulosas, compuestos
pépticos y glucoproteínas. La celulosa es el principal componente estructural de las paredes celulares
de las plantas. Los enlaces hidrógeno entre polímeros paralelos forman microfibrillas fuertes que
proveen la fuerza y rigidez requerida en las paredes celulares de las plantas, (Valenciaga, 2004).
La lignina se considera también un mecanismo de defensa importante, su biosíntesis y
deposición en paredes celulares se incrementa cuando las plantas son sometidas a estrés de tipo
biótico o abiótico. Por si misma, la lignina constituye una barrera física inicial contra el ingreso
de fitopatógenos en el hospedante y en algunos casos limita su crecimiento o los confina. Al
depositarse en las paredes celulares incrementa su resistencia a la degradación por enzimas;
limita la difusión de toxinas secretadas por el patógeno y la de nutrientes del hospedante hacia el
patógeno, constituye además una fuente para la producción de precursores tóxicos y radicales
libres. (Lagunes, Zavaleta, 2015).

2. Realice un cuadro comparativo, respecto a las formas celulares en células de corcho (muertas)
y de cebolla de huevo (vivas).

Corcho (muertas) Cebolla de huevo (vivas)

Al observar el corcho con el menor Al observar la cebolla con el menor

aumento se pueden apreciar pequeñas
celdas muy unidas entre sí, en forma de
panal y se delimitan con delgados
filamentos como los de nailon.
El tipo de membranas que se
encuentran en este tejido es la pared
celular con cavidades amplias y dobles,
pues es evidente que es la que le da el
sostén y forma a la célula, además de
que esta estructura prevalece a pesar de
que la célula está muerta.
El corcho está rodeado por membranas
de células muertas, la membrana es la
cubierta exterior de la célula, en el
corcho una vez muerta la célula, esta se
descompone y queda solo la membrana
celular, (Castellano, 2008).
aumento tienen una forma hexaédrica
(celdas) y alargadas y bastante grande,
se logra diferenciar la membrana y el
citoplasma. Son de forma alargada y
bastante grande, (Pérez, 2014)
La membrana celular se destaca muy
clara. Los núcleos son visibles, en el
interior de los mismos se puede llegar a
percibir granulaciones, son los
nucléolos.
Estas células se encuentran muy unidas
con el fin de formar un tejido difícilmente
penetrable y resistente para poder
proteger las diferentes capas de la
cebolla. Además, la forma poligonal
permite un mayor aprovechamiento del
espacio y facilita su unión. Estas células
vegetales se caracterizan por su pared
celular rica en celulosa, que les aporta
 rigidez y soporte, así como por la
presencia de cloroplastos capaces de
realizar la fotosíntesis y sus enormes
vacuolas, en las que almacena
pigmentos, enzimas, sustancias de
desecho, agua.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Tabla 1.
CEBOLLA DIBUJO OBSERVACION
Se observó que está formada
por células alargadas
poligonales, con un núcleo
pequeño en un lateral. Se
distingue bien lo que es la
membrana vegetal, el
citoplasma y se ve que está
formada por celulosa
4X
Se observó las paredes de las
células vegetales (de
celulosa), sus núcleos y se
trata de células rígidas y con
gran resistencia mecánica

40X

La celulosa fue descubierta en 1838 por el químico francés Anselme Payen, y en su estudio pudo
analizar que la celulosa era insoluble en el agua y obtuvo resultados similares a esta muestra.
En cuanto a la forma que se encuentra la celulosa es en forma de polígonos y comparando esta
forma con la de la tabla (1.3) que tiene aproximadamente formas de hexanos se deduce que en
ambas muestras poseen una pared celular la cual está conformada de celulosa y esta le da la
rigidez y la forma que en ambas son de figuras geométricas

PERIODICO DIBUJO OBSERVACION

 Se observó las fibras de
celulosa semi-alargadas lo
cual es usada para darle
resistencia al papel
periódico

40X
TABLA (1.1)
Las fibras de celulosa observadas muestran la celulosa de fibra semi-larga que se usa
principalmente para agregar resistencia a los papeles. Dependiendo de la proporción en las
mezclas se obtienen papeles para diferentes usos. Actualmente existen más de 450 variedades de
papeles según la clasificación de la International Pulp and Paper Directory.
En el papel, las fibras de celulosa individuales se conforman en una red, tal como se puede ver
en la tabla (1.1). Estas fibras se adhieren unas a otros por enlaces de hidrógeno. Estos enlaces
son débiles comparados con los enlaces iónicos y los enlaces covalentes. Comparando las
investigaciones de Somerville et al. (2004) indican cómo las fibras naturales son elementos
embebidos en una matriz polimérica de hemicelulosas, pectinas y lignina El diámetro de las
fibras varía entre 15 - 35 μm; las fibrillas están compuestas, principalmente, por MFC y su
diámetro promedio es de 40-100 nm, y en, gran medida, están constituidas por Nanofibras de
Celulosa (NFC), cuyos elementos miden de 2 a 10 nm de diámetro y están estructurados, en
esencia, de partes cristalinas con remanentes de zonas amorfas (Tejado et al, 2012)., lo cual esto
indica pierden propiedades estructurales o tienen diferencias de calidad con respecto a
productos similares elaborados con fibra virgen

PAPEL FILTRO DIBUJO OBSERVACION

Se observó las alargadas
fibras de celulosa
adicionando azul de
metileno

AZUL DE METILENO 4X
 Se observó las fibras de
celulosa en la que se
establecen múltiples puentes
de hidrógeno entre los
grupos hidroxilo de distintas
cadenas yuxtapuestas de
glucosa, haciéndolas
impenetrables al agua

MANGIN 4X
TABLA (1.2)
Las fibras de celulosa vistas en el papel filtro son más alargadas a la del papel periódico esto se debe
a que esto no es papel reciclado además se realizan diferentes métodos para el aumento
alargamiento de estas fibras para que le dé una textura más firme De acuerdo con varios autores
(O´Sullivan, 1997, Wada y colaboradores, 2001) con el tratamiento que se le da a las fibras están
organizadas de manera que el tratamiento químico degrada la estructura cristalina IE y por ello la
relación IDIE se incrementa la celulosa ID es convertida a IE por diversos métodos, especialmente
por medio de calor por tanto hay un incremento en tamaño y mayor porcentaje de obtención de
celulosa.

CORCHO DIBUJO OBSERVACION

Se observó las células del
corcho, esto se asemeja a un
panal de abejas, también se
puede ver la pared celular y
esta se conforma de celulosa

40X
TABLA (1.3)
Mientras más fina sea la lámina de corcho más visibles estarán las células, las mismas que se
asemejan a un panal de abejas. Lo visto por Robert Hooke en 1665 fue una estructura reticulada
que pudo observar en el corcho lo cual eran esqueletos de células muertas lo que se puede
concluir es que Robert si pudo observar la celulosa. En la tabla (1.3) se observa una diferencia
en cuanto a la forma en que se ve la celulosa comparándola con la tabla (1.1) y tabla (1.2) esto
se puede explicar debido al tratamiento químico que pasa la celulosa para diversos usos en la
industria.

ALGODON DIBUJO OBSERVACION

 Se observó las fibras de
celulosa en el algodón se
caracteriza esto a otras
fibras ya que tienen vueltas
de torsión como si fuera una
cinta torcida, mientras más
vuelas tenga presente más
maduro es el algodón

40X
TABLA (1.4)
El ejemplo más puro de celulosa es el algodón con un porcentaje mayor al 90%. Este posee una
textura suave, en la microfotografía se observa distintas fibras las cuales tienen distinta
madurez por el número de vueltas de torsión que contienen. Las secciones trasversales de las
fibras de algodón tienen una forma de judía o de riñón, aunque con el microscopio no se pueda
observar. La diferencia de las fibras de papel filtro mostradas en la tabla (1.2) con las fibras de
algodón es que no tiene una torsión transversal.

PLATANO DIBUJO OBSERVACION

Se observó las células
vegetales del plátano que
son como pequeñas
burbujas alargadas, pero al
ser células vegetales tienen
un núcleo y una pared
celular

10X
Se observó con mejor la
célula vegetal del plátano al
borde de esta célula se
encuentra la celulosa

40X
TABLA (1.5)
Un estudio realizado por CORPORACION UNIFICADA NACIONAL DE EDUCACION SUPERIOR en
el 2013 se puede obtener papel a partir del plátano para así reducir un poco la contaminación.

CONCLUSIONES
 Se identificó y se determinó la presencia de celulosa en nuestra muestra principal que es
el plátano.
  Se obtuvo un análisis de celulosa satisfactorio mediante la comparación con las otras
muestras.
 El algodón tiene un porcentaje muy alto de celulosa, aproximadamente 90%.
 Los diferentes reactivos se utilizaron con el fin de teñir la cantidad de celulosa habilitada
en los diferentes objetos observados en el laboratorio.

LITERATURA CITADA
Seminario de celulosa (2014), Cruz Estrada Carolina, disponible en:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Seminario-Celulosa_27101.pdf

La pared celular. Influencia de su naturaleza en la degradación microbiana ruminal de los forrajes Revista
Cubana de Ciencia Agrícola, vol. 38, núm. 4,( 2004), Valenciaga, Daiky; Chongo, Bertha, disponible en:
http://www.redalyc.org/pdf/1930/193017793001.pdf

Función de la Lignina en la Interacción Planta-Nematodos Endoparásitos Sedentarios, (2015), Erika Lagunes-

Fortiz y Emma Zavaleta-Mejía, disponible en: http://www.scielo.org.mx/pdf/rmfi/v34n1/2007-8080-rmfi-34-01-
00043-en.pdf

Libro de experimentos de biología, (2014),Glenda Perez,disponible en:

https://es.slideshare.net/gepcglendha/corcho-30456370

La célula (2008), Manuel Castellano, disponible en: https://es.slideshare.net/utebo6b/la-celula-549285

Practica de laboratorio, Universidad Técnica de Machala,(2014),Glenda Stefania Pérez Cedillo, disponible

en:https://es.slideshare.net/gepcglendha/practicas-de-laboratorio-celulas-de-la-cebolla

Preparación y observación con microscopio de células vegetales y animales, cálculo de aumentos, (2012), Elena
Blanco de Tena Dávila ,disponible en:http://ies.rosachacel.colmenarviejo.educa.madrid.org/biolo/wp-
content/uploads/4-INFOLAB-C%C3%A9lulas-elena-blanco-vox-populi.pdf