El envejecimiento es el principal factor de riesgo para el cáncer, las enfermedades

cardiovasculares, la diabetes y los trastornos neurodegenerativos. Si bien estamos

lejos de comprender las bases biológicas del envejecimiento, las investigaciones
sugieren que el tratamiento del proceso de envejecimiento en sí mismo podría
mejorar muchas patologías relacionadas con la edad. La senescencia es una
respuesta celular caracterizada por una detención del crecimiento estable y otras
alteraciones fenotípicas que incluyen un secretoma proinflamatorio. La senescencia
juega un papel en el desarrollo normal, mantiene la homeostasis del tejido y limita
la progresión del tumor. Sin embargo, la senescencia también se ha implicado
como una causa importante de enfermedad relacionada con la edad. En este
sentido, las pruebas experimentales recientes han demostrado que la ablación
genética o farmacológica de las células sicentes prolonga la vida útil y mejora la
duración de la salud. Aquí, revisamos los enlaces celulares y moleculares entre la
senescencia celular y el envejecimiento y discutimos las nuevas vías terapéuticas
que abre esta conexión.
Introducción
El envejecimiento se caracteriza por un deterioro funcional gradual. En los
mamíferos, el envejecimiento ocurre de manera heterogénea a través de múltiples
sistemas de órganos, causando un deterioro progresivo que eventualmente resulta
en una disfunción del tejido. En consecuencia, la edad es un factor de riesgo para
muchas enfermedades, como la enfermedad cardiovascular, la demencia, la
osteoporosis, la osteoartritis, cáncer, diabetes tipo 2, fibrosis pulmonar idiopática y
glaucoma. A pesar de estos vínculos con la patología humana, nuestra comprensión
del proceso de envejecimiento sigue siendo limitada. Aunque sus causas biológicas
siguen siendo en gran parte desconocidas, los estudios en las últimas décadas han
identificado rasgos celulares y moleculares comunes asociados con el
envejecimiento. La identificación de los llamados sellos distintivos del
envejecimiento ha ayudado a conceptualizar la investigación sobre el
envejecimiento y ha dado a entender la tentadora perspectiva de retrasar las
múltiples enfermedades relacionadas con la edad al abordar el proceso del
envejecimiento.
Las marcas distintivas de envejecimiento se pueden dividir en tres categorías: (1)
primaria, o las causas del daño asociado con la edad; (2) antagónico, o las
respuestas al daño; y (3) la integración, o las consecuencias de las respuestas y los
culpables del fenotipo del envejecimiento. La senescencia, una respuesta celular
que limita la proliferación de células envejecidas o dañadas, pertenece a la clase
antagonista. Aunque la senescencia desempeña funciones fisiológicas durante el
desarrollo normal y es necesaria para la homeostasis tisular, la senescencia
constituye una respuesta al estrés desencadenada por insultos asociados con el
envejecimiento, como la inestabilidad genómica y la deserción de los telómeros,
que se caracterizan por su envejecimiento primario. También existe un vínculo
íntimo entre la senescencia y las otras características antagónicas del
envejecimiento. Por ejemplo, las células senesocéntricas muestran una mitofagia
disminuida, lo que da como resultado una red mitocondrial "vieja" defectuosa que
puede contribuir a la disfunción metabólica en la edad.
La senescencia también influye en el envejecimiento integrador. Las células madre
multipotentes somáticas facilitan la homeostasis tisular; Por ejemplo, las células
madre hematopoyéticas (HSC) renuevan el sistema sanguíneo. El agotamiento de
las células madre se produce con la edad, y la consiguiente disminución de la
funcionalidad de las células madre y su capacidad de renovación conducen al
deterioro del tejido. Por ejemplo, las HSC muestran una disminución en la tasa de
éxito del trasplante cuando están aisladas de pacientes ancianos. Esta disminución
se correlaciona con un mayor número de HSC senescentes y una inmunidad
disminuida, un menor número de células B y T ingenuas y un asesino natural
reducido Actividad celular. El declive de las células madre somáticas no se limita a
los tejidos de alta rotación. Las células madre neurales (NSC) experimentan una
funcionalidad reducida, con capacidad limitada de neurogénesis con la edad. Esto
se caracteriza por una reducción doble en los números de NSC y una proliferación
reducida, que se correlaciona con una mayor expresión de marcadores de
senescencia en las regiones donde residen las NSC. Células madre mesenquimales y
sus descendientes, células satélite, condrocitos, adipocitos, y osteoclastos, también
muestran una capacidad reducida para auto renovarse con la edad que se
correlaciona con niveles aumentados de marcadores de senescencia. Esto puede
tener un impacto en las patologías asociadas con la edad, como sarcopenia,
caquexia, osteoporosis y osteoartritis. La comunicación intracelular alterada es otro
de los distintivos integradores del envejecimiento. En particular, la inflamación
crónica de bajo nivel es un factor de complicación grave para muchas
enfermedades en las que el riesgo aumenta con la edad. Este papel perjudicial de la
inflamación está respaldado por marcadores inflamatorios como la interleucina-1
(IL-1) e IL-6 que actúan como marcadores de pronóstico para enfermedades como
la diabetes tipo 2, aterosclerosis y desglose de la función de las células madre. Las
respuestas inflamatorias son uno de los principales efectos extrínsecos de las
células senescentes, lo que sugiere que existe una relación entre la senescencia y la
comunicación intracelular alterada. El envejecimiento influye en una amplia gama
de enfermedades. Por lo tanto, apuntar a la maquinaria de envejecimiento
subyacente puede proporcionar una protección de amplio espectro contra muchas
patologías.

¿Qué es la senescencia?
La senescencia es un programa celular que induce un crecimiento estable
acompañado de distintas alteraciones fenotípicas, incluida la remodelación de la
cromatina, la reprogramación metabólica, el aumento de la autofagia y la
implementación de un complejo secretoma proinflamatorio. Estos cambios
complejos en la célula sirven en gran medida para implementar diversos aspectos
de la senescencia, como la detención del crecimiento y el secretoma de la
senescencia. A pesar de las muchas facetas de la senescencia,
La detención del crecimiento estable es su característica definitoria. Una detención
permanente es efectiva para garantizar que las células dañadas o transformadas no
perpetúen sus genomas. Esta detención del crecimiento se implementa mediante
la activación de las redes supresoras de tumores p16INK4a / Rb y p53 / p21CIP1
(Fig. 2).
Históricamente, la senescencia fue identificada por primera vez por Hayflick y
Moorhead (1961) durante el paso en serie de fibroblastos humanos. El límite a la
proliferación que impone la senescencia fue hipotetizado como una barrera para la
iniciación del cáncer. La senescencia es, de hecho, un poderoso mecanismo de
supresión tumoral. La senescencia también tiene roles fisiológicos durante el
desarrollo normal, actuando en concierto con la apoptosis para facilitar la
morfogénesis embrionaria. En los tejidos adultos, la senescencia se desencadena
principalmente como respuesta al daño, lo que permite la supresión de células
potencialmente disfuncionales, transformadas o envejecidas. La acumulación
aberrante de células senescentes con la edad da como resultado efectos
perjudiciales potenciales. En equilibrio, aunque la senescencia es un proceso
biológicamente necesario, puede tener un costo. La investigación inicial de Hayflick
y Moorhead (1961) insinuó una relación entre la senescencia y el envejecimiento,
pero el consiguiente descubrimiento de que las células senescentes se acumulan en
los tejidos envejecidos ha confirmado la hipótesis de que la senescencia en sí
misma puede impulsar el envejecimiento.

Factores que impulsan la senescencia.

Daño de los telómeros por la senescencia en el envejecimiento. En los tejidos
adultos, la senescencia interviene en respuesta a diferentes tipos de daño. Uno de
los insultos que causan senescencia es el daño de los telómeros, estructuras de
ADN altamente repetitivas ubicadas al final de los cromosomas. Los telómeros
están protegidos por un complejo multiproteico conocido como refugio. Al recubrir
el telómero, el refugio evita la activación de una respuesta al daño del ADN, lo que
evita las fusiones cromosómicas de extremo a extremo que podrían provocar una
crisis de telómero. Además, las células que carecen de componentes de refugio,
como POT1 o TRF2, sufren una respuesta aberrante de daño al ADN y una
inducción prematura de la senescencia. El problema de la replicación final es una
consecuencia de la incapacidad de las ADN polimerasas para sintetizar ADN sin una
plantilla, lo que ocurre en los telómeros. Esto da como resultado telómeros que se
acortan progresivamente con cada división del ciclo celular. Los tejidos
embrionarios evitan esta erosión al expresar la telomerasa, un complejo
ribonucleoproteína que sirve para concatenar el ADN a los extremos de los
cromosomas, lo que proporciona una plantilla para la síntesis del ADN. La división
celular repetida en tejidos adultos que carecen de telomerasa, sin embargo, da
como resultado una progresiva erosión del ADN, una reducción de la unión de
albergue y senescencia. A medida que un organismo envejece, las células acumulan
más divisiones. Esto se traduce en un aumento de la erosión de los telómeros y
senescencia. Pero aún se desconoce hasta qué punto la erosión de los telómeros
provoca la senescencia durante el envejecimiento y contribuye al proceso de
envejecimiento.
Al apoyar el papel causal de la erosión de los telómeros en el envejecimiento, la
eliminación de la telomerasa en ratones finalmente da como resultado un
envejecimiento prematuro. Este fenotipo puede rescatarse mediante la activación
transitoria de la expresión de transcripción inversa de la telomerasa en ratones
utilizando un constructo de receptor de estrógeno de transcripción inversa de la
telomerasa. Las células aisladas de estos ratones proliferan normalmente in vitro y
se reduce el deterioro en múltiples tejidos. Esta evidencia se correlaciona con
estudios que muestran que los fibroblastos o las células T derivadas de los
centenares reinician sus telómeros, lo que resulta en rejuvenecimiento
y la proliferación sostenida. De manera similar, la estimulación de células T
derivadas de HSC trasplantadas en serie da como resultado la expresión y el
rejuvenecimiento de la telomerasa. Los telómeros reducidos se asocian con
muchas patologías como la cirrosis hepática y se correlacionan con un aumento de
la mortalidad en personas mayores de 60 años. La evidencia correlativa apoya la
erosión de los telómeros como un importante impulsor de la disminución del
envejecimiento, sin embargo, esto es cuestionado por los mamíferos, como los
ratones de laboratorio (Mus musculus), cuyos telómeros no alcanzan un límite
crítico durante el envejecimiento normal. La longitud de los telómeros tampoco
predice el deterioro del envejecimiento en ratones, y destaca que los factores
alternativos también podrían impulsar el envejecimiento.

Disfunción metabólica como conductor de senescencia. Varias líneas de evidencia

sugieren que el envejecimiento es el resultado de una compleja amalgama de
daños como la disfunción metabólica y proestática. La disfunción metabólica se
relaciona con el envejecimiento a nivel organismal y molecular. Múltiples estudios
han demostrado que la restricción calórica puede retardar la disminución del
envejecimiento. Molecularmente, las vías de regulación metabólica de ajuste fino,
como la mTOR o la vía de la insulina, también se han relacionado con una mayor
duración de la vida y la vida. mTORC1 integra entradas de nutrientes y señales de
crecimiento para regular los procesos celulares generales, como la síntesis de
proteínas y lípidos, la autofagia y el metabolismo. En este sentido, mTOR es capaz
de regular el fenotipo secretor asociado a senescencia (SASP), la autofagia y la
detención del crecimiento senescente. La conexión entre autofagia y senescencia
es compleja; Si bien hay un aumento en la autofagia durante la se- cencia que sirve
para regular la producción de SASP, la inhibición de la autofagia puede inducir
senescencia a través de disfunción metabólica y proteostática, enfatizando aún
más la intrincada conexión entre el estrés metabólico y la senescencia en el
envejecimiento. Las sirtuinas constituyen otro enlace molecular entre el tabolismo
y la senescencia. Las sirtuinas son ribosiltransferasas con una amplia gama de
funciones, como la regulación del metabolismo y la reparación del ADN
(Houtkooper et al., 2012). Su papel en la senescencia es antagónico; SIRT1
desacetila p53, promueve su degradación y facilita la derivación de senescencia,
mientras que SIRT6 desacetila H3K18 para prevenir errores mitóticos y suprimir la
senescencia (Tasselli et al., 2016). Además de estas formas de daño, el estrés
general se detecta mediante otros mecanismos, como la activación de MAPK p38 o
la inducción de p16INK4a. Estas vías están reguladas al alza en respuesta al estrés
oxidativo, daño al ADN, desgaste del telómero o activación del oncogén. Al
respaldar su papel en el envejecimiento, la activación de MAPK p38 o la inducción
de p16INK4a limita el potencial proliferativo de las HSC y produce fenotipos de
generación de imágenes (Ito et al., 2006; Baker et al., 2016). En general, es
probable que la acumulación de células senescentes durante el envejecimiento
refleje un aumento gradual de diferentes tipos de daño en diferentes tejidos.
Vías que regulan la detención del crecimiento de la senescencia.
A pesar de la naturaleza multifacética de la senescencia, la inducción de la
detención del crecimiento estable es la característica definitoria de la senescencia.
Además, la detención estable es fundamental para detener la propagación de
células disfuncionales. Dos vías supresoras de tumores, p53 y p16 / Rb, son
responsables de la implementación de esta detención del crecimiento.
p53 y senescencia. Los inductores de senescencia, como el desgaste telomérico y el
estrés oncogénico u oxidativo, causan daños en el ADN. El daño en el ADN da como
resultado un aumento de la deposición de γH2Ax y 53BP1 en la cromatina que a su
vez activa una cascada de quinasa que involucra primero ATM y ATR y luego CHK1 y
CHK2, lo que finalmente resulta en la activación de p53 (d'Adda di Fagagna, 2008;
Fumagalli et al. , 2012). p53 induce la transcripción del inhibidor de la cinasa
p21CIP1 dependiente de la cibernética. A su vez, p21CIP1 bloquea la actividad de
CDK4 / 6, dando como resultado una Rb hipofosforilada y la salida del ciclo celular
(d’Adda di Fagagna, 2008). Si bien los aumentos transitorios en los niveles de p53
pueden representar un estado de reposo y activar los procesos de reparación del
ADN, durante la senescencia, existe una inducción sostenida de p53 (Salama et al.,
2014; Kruiswijk et al., 2015). Esto es un resultado del daño que se produce en las
regiones resistentes a la reparación del genoma conocidas como segmentos de
ADN con alteraciones de la cromatina que refuerzan la senescencia, como los
telómeros (Rodier et al., 2011; Fumagalli et al., 2012), que permiten una Detención
permanente del ciclo celular por inducción persistente de p21cip1. Dados los roles
clave de p53, existen capas reguladoras adicionales. Por ejemplo, la inducción de
ARF, un producto del locus INK4 / ARF, secuestra la ubiquitina ligasa MDM2,
contribuyendo al aumento de los niveles de p53. Recientemente, se ha demostrado
que la interacción entre la proteína O4 (FOXO4) de Forkhead box y p53 desempeña
un papel importante en la modulación de la localización de p53 y la actividad
transcripcional durante la senescencia (Baar et al., 2017). Es interesante que los
factores de transcripción de FOXO regulan el envejecimiento, con la actividad de
FOXO en Drosophila melanogaster, lo que lleva a un retraso en el envejecimiento
en respuesta a la alteración de la homeostasis de las proteínas y al estrés oxidativo
(Demonis y Perrimon, 2010).
El locus INK4 / ARF en senescencia. Tres supresores de tumores residen en el locus
INK4 / ARF: p16INK4a y ARF, ambos codificados por el gen CDKN2A, y p15INK4b,
que está codificado por CDKN2B. Dos de estos, p15INK4b y
p16INK4a, son CDKI, como p21CIP1, que afectan el ciclo celular al unir e inhibir
CDK4 y CDK6. En contraste, ARF inhibe MDM2, permitiendo así la comunicación
cruzada con las vías p53 / p21CIP1. A la inversa, p53 puede regular la expresión de
ARF a través de un circuito de retroalimentación negativa, como lo demuestra la
expresión elevada de ARF en fibroblastos embrionarios de ratón p53 (Harris y
Levine, 2005). Dada esta concentración inusual de tres supresores de tumores en
apenas 35 kb, este locus desempeña un papel regulador clave y frecuentemente se
encuentra mutado en el cáncer (Gil y Peters, 2006; Kim y Sharpless, 2006). Los
estudios de asociación del genoma también han identificado diversas variantes
genómicas que ocurren en el locus INK4 / ARF como los principales factores de
riesgo para la aterosclerosis, el accidente cerebrovascular y la diabetes, entre otras
patologías (Jeck et al., 2012). Sin embargo, la mayoría de estos se encuentran en
regiones no codificantes, y el mecanismo de acción preciso no está claro. El locus
INK4 / ARF se comporta como un sensor de senescencia. En células jóvenes
normales, el locus INK4 / ARF está silenciado epigenéticamente mediante la
deposición de marcas H3K27me3 representativas (Bracken et al., 2007). La metilo
de H3K27 es controlada por complejos represivos Polycomb (PRC2 y PRC1). Al
interrumpir la actividad de PRC1 o PRC2 al agotar la expresión de algunos de sus
componentes, como BMI1, CBX7 o EZH2, se elimina la p16INK4a e induce
senescencia (Jacobs et al., 1999; Gil et al., 2004; Bracken et al., 2007 ). Todavía hay
debate sobre cómo Polycomb es reclutado para el locus INK4 / ARF. Se ha
propuesto que un ARN largo no codificante, ANR IL, transcrito de forma divergente
desde el locus INK4 / ARF (Yap et al., 2010; Kotake et al., 2011), y factores de
transcripción como los de la familia de homeobox pueden contribuir a
reclutamiento de PRCs (Martin et al., 2013). A la inversa, durante la senescencia, la
histona H3K27 desmetilasa JMJD3 desempeña un papel en la eliminación de las
marcas represivas alrededor del locus INK4 / ARF, facilitando su inducción (Agger et
al., 2009; Barradas et al., 2009). La inducción de INK4 / ARF se puede observar en
tejidos durante el envejecimiento natural (Krishnamurthy et al., 2004; Burd et al.,
2013). En particular, p16INK4a se considera un biomarcador del envejecimiento.
Con excepciones (como durante la inducción de la secreción durante el desarrollo),
p16INK4a es también uno de los mejores marcadores de senescencia. Un análisis
de las vías que regulan p16INK4a muestra coincidencias con los que controlan el
desarrollo. Esto se ha argumentado para formular la teoría de que el
envejecimiento podría ser impulsado por la decadencia funcional gradual de las
vías de desarrollo (Martin et al., 2014).
El SASP
Además de la detención del crecimiento, la producción de una mezcla compleja de
factores secretados, denominada SASP o secretoma de mensajería de senescencia,
es el programa fenotípico más relevante implementado en células senescentes. Las
células senescentes secretan cientos de factores que incluyen citoquinas
proinflamatorias, quimiocinas, factores de crecimiento y proteasas (Kuilman y
Peeper, 2009; Coppé et al., 2010).
Reglamento de la SASP. Se cree que la combinación específica de factores
secretados depende del tipo de célula y del inductor senescente. Sin embargo,
muchos de los efectores clave de la SASP y su mecanismo regulatorio parecían ser
compartidos. El factor núcido κB (NF-κB) y la proteína beta de unión a CCAAT /
potenciador son los reguladores clave de la transcripción de la SASP (Acosta et al.,
2008; Kuilman et al., 2008). Daño en el ADN, p38α MAPK (Freund et al., 2011),
mTOR (Herranz et al., 2015; Laberge et al., 2015), leucemia de linaje mixto 1 (Capell
et al., 2016 ), y GATA4 (Kang et al., 2015) también pueden regular el SASP.
Recientemente, se ha sugerido la detección de la cromatina citoplásmica por la vía
cGAS / STING como un desencadenante de la inducción de SASP (Dou et al., 2017;
Glück et al., 2017). Hay capas adicionales de regulación SASP. Por ejemplo, mTOR
controla la traducción de IL-1α para regular el SASP (Laberge et al., 2015). Además,
mTOR regula indirectamente la actividad de ZFP36L1, una proteína de unión a ARN
que se une a elementos ricos en AU en el extremo 5 'de los transcritos
inflamatorios, dirigiéndolos a la degradación (Herranz et al., 2015). También hay
una remodelación global de los potenciadores en las células senescentes, y se
necesita el reclutamiento de BRD4 a supercondensadores adyacentes a los genes
SASP para su inducción (Tasdemir et al., 2016). La compleja composición de la SASP
significa que diferentes subconjuntos de la SASP, como los secretomas
proinflamatorios y TGF-β, se pueden regular de forma independiente. El brazo
proinflamatorio de la SASP está regulado por la señalización de IL-1 (Acosta et al.,
2013). IL-1α recapitula parcialmente la SASP inflamatoria in vitro, y la inhibición del
inflamasoma NLRP3, que procesa la IL-1β, puede mitigar la SASP. A la inversa, la vía
de señalización Notch yuxtacrina promueve la secreción de un secretoma
enriquecido con TGF-β.
Funciones de la SASP. El SASP es responsable de muchas de las funciones positivas
y negativas atribuidas a las células seiscentes (Fig. 3) (Kuilman y Peeper, 2009). Una
de las funciones principales de la SASP es reclutar el sistema inmunológico para
eliminar las células senescentes. El SASP media la activación y el reclutamiento de
células inmunes tanto adaptativas como innatas (Xue et al., 2007; Kang et al.,
2011). En términos generales, los efectos son positivos. Durante la iniciación del
tumor, el reclutamiento inmunitario mediado por SASP actúa como un mecanismo
supresor de tumor extrínseco (Xue et al., 2007; Kang et al., 2011), y el
reclutamiento de macrófagos es un paso clave en la resolución de la fibrosis
(Krizhanovsky et al ., 2008). En contraste, el reclutamiento mediado por SASP de
células mieloides inmunes tiene efectos inmunosupresores sobre el cáncer de
próstata y de hígado (Di Mitri et al., 2014; Eggert et al., 2016). Además, el SASP
puede estimular la tumorigénesis promoviendo
angiogénesis (p. ej., a través de VEGF y CCL5; Coppé et al., 2006; Eyman et al.,
2009) o crecimiento tumoral (p. ej., a través de GROα y Osteopontin; Krtolica et al.,
2001; Pazolli et al., 2009) , entre otros mecanismos. Los componentes específicos
del SASP tienen otras funciones fisiológicas, como contribuir a la remodelación del
tejido fibrótico, por lo que las metaloproteinasas de matriz (MMP) contribuyen a
degradar las placas fibróticas en la ECM que pueden ser benéficas en el contexto
de la fibrosis hepática y la cicatrización de la herida. Recientemente, se ha
postulado que las células senescentes que se acumulan en respuesta al daño tisular
también pueden promover la rigidez y la reprogramación (Ritschka et al., 2017). Sin
embargo, no está claro cómo esto encaja con el aumento en el número de células
senescentes, pero con la disminución del potencial de tallo observado durante el
envejecimiento. Por otro lado, los factores secretados por las células senescentes
pueden reforzar el fenotipo senescente, potencialmente exacerbando la
senescencia durante el envejecimiento. IL-8, GROα, IL-6 e IGBP-7 se encuentran
entre los componentes específicos de la SASP que refuerzan la senescencia (Acosta
et al., 2008; Kuilman et al., 2008; Wajapeyee et al., 2008). Además, las células
senescentes también pueden inducir una llamada respuesta de senescencia
paracrina (Acosta et al., 2013). Este refuerzo autocrino o transmisión paracrina de
senescencia podría explicar algunos de los efectos perjudiciales de la acumulación
aberrante de células senescentes durante el envejecimiento. Durante el
envejecimiento, se piensa que el SASP es parcialmente responsable de la
inflamación crónica persistente, también conocida como inflamado, que contribuye
a múltiples fenotipos relacionados con la edad. Esta contribución de SASP a la
inflamación está comenzando a investigarse utilizando modelos senolíticos. La
eliminación directa de células senescentes en riñón envejecido (Baker et al., 2016;
Baar et al., 2017), corazón, bazo, pulmón, hígado (Baker et al., 2016) y rodilla
osteoartrítica (Jeon et al., 2017) redujo los niveles de IL-6 e IL-1β (ambos
marcadores de inflamación crónica). Sería pertinente en futuras terapias de
envejecimiento comprender cómo aspectos específicos del SASP contribuyen al
deterioro o protección de los tejidos.
Senescencia: ¿espectador o participante en patologías relacionadas con la edad?
Si bien desde hace tiempo se sospecha la contribución de la senescencia al
envejecimiento, solo recientemente se ha confirmado la conexión. Esto ha sido
posible gracias al uso de biomarcadores moleculares de la senescencia y el
establecimiento de nuevos modelos genéticos para estudiar el papel de las células
senescentes in vivo.
Redes reguladoras de la senescencia y envejecimiento in vivo. La expresión de los
componentes del locus INK4 / ARF se correlaciona con el envejecimiento, y
p16INK4a se puede usar como un marcador de pronóstico para algunas
enfermedades relacionadas con la edad, como la FPI y la glomuloesclerosis (Melk et
al., 2004; Lomas et al., 2012). Además, p16INK4a se acumula durante el
envejecimiento. Por ejemplo, la expresión de p16INK4a aumenta con la edad en el
islote de Langerhans (Helman et al., 2016), la corteza renal (Melk et al., 2004) y el
tejido adiposo (Xu et al., 2015; Baker et al. , 2016), entre otras áreas
(Krishnamurthy et al., 2004). Su eliminación también mitiga el deterioro funcional y
el agotamiento proliferativo tras el trasplante de HSC (Janzen et al., 2006). Aunque
estos estudios sugieren que la acumulación de p16INK4a es perjudicial durante el
envejecimiento, el aumento de la dosis génica de INK4 / ARF en ratones super-p16
no produce una vida útil reducida. Los posibles efectos perjudiciales causados por
la sobreexpresión de p16INK4a pueden ser superados por sus claros beneficios
supresores de tumores, con una triple reducción en la incidencia de tumores
(Matheu et al., 2009). De manera similar, p53 - / - puede mejorar algunos de los
efectos de mutantes de progeria severos como Ku80 - / -, mTR - / - y Zmpste24 - / -
(Chin et al., 1999; Lim et al., 2000; Varela et al., 2005), pero el aumento resultante
en la tumorigénesis oscurece los aumentos potenciales en la vida útil. Los ratones
con copias adicionales de p53 o p19ARF son más resistentes a los tumores y
presentan envejecimiento tardío (García-Cao et al., 2002; Matheu et al., 2007).
Visualizando la senescencia en vivo. Uno de los mayores obstáculos para investigar
la senescencia in vivo ha sido la falta de marcadores robustos y consistentes. La
mayoría de los estudios de senescencia en tejidos envejecidos se han basado en el
uso de tinción de β-galactosidasa asociada a senescencia (SA-β-Gal) o en la falta de
marcadores proliferativos como Ki67. Sin embargo, estos pueden producir
resultados mixtos. Por ejemplo, los macrófagos muestran niveles elevados de
actividad de SA-β-Gal. El uso de marcadores de senescencia adicionales, como la
lipo-fuscin, que se acumula en el citoplasma de las células senescentes, podría
aplicarse para cerrar esta brecha (Sharpless y Sherr, 2015).
Otra herramienta útil que ha emergido es el uso de reporteros de senescencia
bioluminiscentes. Con el advenimiento de los ratones p16IN-K4a-LUC que expresan
un indicador de luciferasa bajo el control de un promotor p16INK4a, ahora hay
confirmación de que múltiples tejidos muestran un aumento exponencial
relacionado con la edad en la expresión de p16INK4a que se correlaciona con
niveles más altos de factores inflamatorios o inflamatorios. Componentes SASP
(Yamakoshi et al., 2009; Burd et al., 2013).
Evaluar las consecuencias de focalizar la se- cencia durante el envejecimiento. El
establecimiento de la causalidad de un gen en enfermedades como el cáncer suele
ser una cuestión de generar modelos de ratones adecuados o de sobreexpresión
adecuados. Para evaluar el papel de la senescencia en el envejecimiento, este
enfoque se complica por los roles supresores de tumores del locus INK4 / ARF y p53
(consulte la sección Rutas que regulan la detención de crecimiento por
senescencia). Los estudios seminales de Baker et al., Primero en ratones BubR1
progeroides (Baker et al., 2011) y luego en ratones de edad natural (Baker et al.,
2016), demostraron que al expresar un gen de suicidio inducible bajo el control de
p16INK4a promotor es posible ablacionar las células senescentes y mejorar la
duración de la salud. La eliminacion
de las células senescentes mejoraron varias afecciones asociadas con la edad,
retrasaron la formación de tumores y mejoraron los efectos secundarios de la
quimioterapia (Baker et al., 2016; Demaria et al., 2016; Baar et al., 2017). El papel
de las células senescentes positivas para p16INK4a en patologías relacionadas con
la edad se ha confirmado aún más mediante el uso de otros sistemas de ablación
de senescencia basados en p16INK4a, como los ratones p16-3MR y INK-NTR
(Demaria et al., 2014; Childs et al. al., 2016). Estos estudios finalmente han
confirmado que la senescencia causa, o al menos contribuye al envejecimiento.
Senescencia, SASP e inflamación relacionada con la edad. Hay evidencia clara que
sugiere cómo el SASP participa en la eliminación de las células premalignas o
contribuye a la progresión del tumor (Kang et al., 2011; Eggert et al., 2016). Aunque
se ha planteado la hipótesis de que el SASP es responsable de la disfunción tisular
durante el envejecimiento, todavía no tenemos pruebas directas de los roles que
puede desempeñar el SASP en el envejecimiento (Muñoz-Espín y Serrano, 2014).
Se ha encontrado que la actividad de IL-1α, IL-6, TNF y NF-κB y otros factores
inflamatorios aumentan en los tejidos con la edad y la inhibición de NF-κB confiere
resistencia a las condiciones de progeroides (Tilstra et al., 2012 ). El papel
perjudicial de la inflamación crónica durante el envejecimiento está respaldado por
los datos clínicos (Libby, 2002; Brunt et al., 2009; Dinarello et al., 2010; Balestro et
al., 2016). Los fenotipos del envejecimiento como la fragilidad (Soysal et al., 2016)
se correlacionan con un aumento de los niveles de factores proinflamatorios. El
aumento de los niveles de inflamación crónica en estos casos se denominan
colectivamente inflamados (Franceschi y Campisi, 2014). La razón de tales
aumentos en los niveles de moléculas proinflamatorias sigue siendo desconocida.
Aunque el daño acumulado y la carga antigénica de por vida pueden contribuir sin
duda a este aumento de la inflamación, la senescencia también puede ayudar a
mediar la inflamación.
Esta contribución de la senescencia a la inflamación puede ser a través de varios
efectos coalescentes, el primero a través del SASP. A medida que el daño se
acumula en los tejidos, también aumenta el número de células senescentes y su
SASP. Este proceso generalmente se resuelve mediante la eliminación de las células
senescentes por el sistema inmunológico (Kang et al., 2011). Sin embargo, en
individuos de edad avanzada, la senescencia también contribuye a una disminución
de la función inmune denominada inmunosenescencia, lo que compromete la
eliminación de las células sicentes y exacerba la inflamación. Los estudios
emergentes que utilizan sistemas genéticos o fármacos que eliminan las células
senescentes sugieren que la eliminación de las células senescentes reduce la
inflamación en los tejidos (Baker et al., 2016; Jeon et al., 2017). Los estudios
futuros deberán establecer el vínculo causal entre el SASP, la inflamación crónica y
la disfunción del tejido. Esto podría requerir la generación de nuevos modelos de
mouse que aprovechan nuestro conocimiento sobre la regulación SASP.
Aporte de la senescencia a la edad.
enfermedades relacionadas
Ahora que se ha establecido un papel causal general de la senescencia durante el
envejecimiento, el siguiente paso es identificar cómo la senescencia contribuye a
diferentes patologías relacionadas con la edad, como el glaucoma (Liton et al.,
2005) o la osteoartritis (Jeon et al., 2017; fig. 4). Gracias al uso de fármacos
senolíticos y modelos genéticos para la ablación de la senescencia, estamos
progresando rápidamente en esa tarea.
Roles opuestos a la senescencia en el cáncer. La edad es un marcador pronóstico
fuerte de supervivencia reducida en muchos cánceres (de Magalhães, 2013). La
senescencia es un fuerte mecanismo supresor de tumores que limita la iniciación
del cáncer a través de mecanismos tanto intrínsecos celulares (Collado y Serrano,
2010) como extrínsecos celulares (Kang et al., 2011). Sin embargo, existen pruebas
sólidas que sugieren que, a través del SASP, los tejidos envejecidos proporcionan
un nicho de apoyo para el cáncer (Coppé et al., 2010). Las células sénecentuarias
pueden contribuir a la progresión del tumor al aumentar el potencial proliferativo
de las células cancerosas (Krtolica et al., 2001) o contribuir a la transición del
epitelio a mesenquimal (Coppé et al., 2008). Por lo tanto, el aumento en el número
de células senescentes presentes en los tejidos envejecidos podría contribuir al
aumento de la incidencia del cáncer con la edad. En apoyo de esto, se observa un
inicio tardío en la formación de tumores cuando se eliminan las células senescentes
(Baker et al., 2016). La terapia senolítica también reduce la incidencia de
metástasis, la causa principal de muertes relacionadas con el cáncer (Demaria et
al., 2016).
Disfuncion renal. Las personas de edad suelen mostrar una tasa de filtración
glomerular y un volumen cortical reducidos que pueden provocar
glomeruloesclerosis y atrofia nefrónica, ambas asociadas con un aumento de la
expresión de p16INK4a y p53 (Melk et al., 2003, 2004). La senescencia tiene efectos
perjudiciales en la mayoría de las enfermedades renales analizadas (Sturmlechner
et al., 2017). La ablación de células senescentes protege contra la
glomeruloesclerosis y mejora la función renal en ratones de edad avanzada (Baker
et al., 2016).
Diabetes tipo 2. Uno de los mayores factores de riesgo para el desarrollo de
diabetes tipo 2 es la edad. Varios estudios de asociación genómica de la diabetes
tipo 2 han destacado las variantes en el locus INK4 / ARF, lo que sugiere un posible
vínculo entre la seorescencia y la diabetes (Zeggini et al., 2007; Jeck et al., 2012).
Además, los marcadores de senescencia y la IL-1β están elevados en células β de
ratones diabéticos (Sone y Kagawa, 2005; Dinarello et al., 2010).
Sorprendentemente, aunque la expresión de p16INK4a condujo a una disminución
en la capacidad de regeneración de las células β y predispuso a los ratones a una
diabetes leve (Krishnamurthy et al., 2006; Chen et al., 2009), los islotes β
senescentes aumentaron la secreción de insulina, por lo que no está claro
Cómo contribuye la senescencia a mantener la homeostasis de la glucosa (Helman
et al., 2016).
PF. La fibrosis es una condición patológica por la cual el tejido acumula proteínas
de la MEC como el colágeno, lo que resulta en una escarificación del tejido,
generalmente en respuesta al daño. La senescencia parece tener funciones tanto
beneficiosas como perjudiciales durante la fibrosis y la cicatrización de heridas. La
secreción de MMP, que se produce como parte del SASP, podría ayudar en la
resolución de las placas fibróticas (Craig et al., 2015). A la inversa, los fibroblastos y
los tejidos aislados de pacientes con FPI muestran niveles elevados de tinción con
SA-β-Gal y p21CIP1, lo que sugiere un vínculo con la senescencia (Yanai et al., 2015;
Schafer et al., 2017). La naturaleza perjudicial de la senescencia en la FPI se
demostró recientemente utilizando senolíticos. La eliminación de los fibroblastos
senescentes en un modelo de ratón de fibrosis pulmonar redujo la expresión de
componentes SASP profibróticos y mejoró la función pulmonar (Schafer et al.,
2017).
Enfermedad del hígado graso no alcohólico. La cirrosis es el resultado patológico de
la fibrosis hepática y la enfermedad del hígado graso no alcohólico, que a su vez es
el resultado de la esteatosis hepática, la acumulación anormal de lípidos en los
hepatocitos (Pellicoro et al., 2014; Hardy et al., 2016). La senescencia se asocia con
fibrosis hepática (Kim et al., 2013) y cirrosis (Wiemann et al., 2002). El riesgo de
desarrollar enfermedad hepática grasa no alcohólica aumenta con la edad (Hardy
et al., 2016) y se predice por la presencia de hepatocitos senescentes (Pellicoro et
al., 2014). La eliminación de las células senescentes utilizando ratones INK-ATTC
reduce la acumulación de grasa hepática (Ogrodnik et al., 2017). Sin embargo, el
papel de la senescencia en el hígado es complejo, ya que eliminar p53 o p16INK4a
aumenta la fibrosis hepática (Krizhanovsky et al., 2008). Además, las células
estrelladas hepáticas senescentes regulan a la baja el colágeno y regulan al alza las
MMP y las citoquinas que podrían remodelar las placas fibróticas y reclutar
macrófagos (Krizhanovsky et al., 2008).
Enfermedad cardiovascular. El riesgo de desarrollar aterosclerosis y cardiomiopatía
y sus respectivas condiciones, enfermedad coronaria e insuficiencia cardíaca,
aumenta con la edad. En el caso de la aterosclerosis, el papel de la senescencia se
ha confirmado utilizando modelos senolíticos (Childs et al., 2016). La ablación de
células senescentes mejoró la estabilidad de las placas y redujo tanto la incidencia
como la progresión de la formación de placa. Las células senescentes se
identificaron inicialmente en la aterosclerosis en las células del músculo liso
vascular en el sitio de la placa (Uryga y Bennett, 2016). Los estudios posteriores
mostraron que los macrófagos eran las células senescentes primarias con niveles
más altos de tinción con SA-β-Gal y la producción de SASP, lo que sugiere su
contribución clave a la enfermedad coronaria (Childs et al., 2016). La atrofia de los
cardiomiocitos es una de las causas subyacentes del infarto de miocardio en los
ancianos (Niccoli y Partridge, 2012). No está claro cómo la ablación de células
senescentes protege contra la hipertrofia de los cardiomiocitos en ratones de edad
y proporciona resistencia al estrés cardíaco (Baker et al., 2016).
Osteoartritis. El desgaste permanente de los ligamentos es un factor de riesgo
importante para el desarrollo de la artritis. La falla de los condrocitos para producir
cartílago resulta en la degradación de las articulaciones y la inmovilización. La
expresión de p16INK4a en estas células se correlaciona con la gravedad y la
progresión de la enfermedad (Price et al., 2002). Además, cuando los ratones se
sometieron a un trauma agudo para modelar osteoartritis, las células senescentes
se acumularon en el sitio de la lesión (Kuyinu et al., 2016). La eliminación de estas
células senescentes usando senolíticos resultó en una mayor funcionalidad de los
condrocitos restantes con rejuvenecimiento del cartílago poco después (Jeon et al.,
2017).
Disminución de la función inmunológica con la edad. Uno de los principales
factores de riesgo para las complicaciones en el cuidado al final de la vida es la
infección. La incapacidad del cuerpo para provocar una respuesta a las ofensas
inmunes es causada por un declive funcional en las HSC. La acumulación de HSC
senescentes con la edad contribuye al declive inmune y el bypass de senescencia
permite el rejuvenecimiento de las células madre. Curiosamente, la eliminación de
estas células restableció la funcionalidad de las HSC y aumentó el número de
células mieloides, B y T en los experimentos de trasplante (Chang et al., 2016).
Sarcopenia. Las células madre musculares (MuSC) experimentan una disminución
en su capacidad para diferenciar y facilitar la reparación del tejido muscular, que se
cree que es la causa subyacente de la pérdida de masa muscular dependiente de la
edad o la sarcopenia. Los MuSC son silenciosos a menos que se estimulen para
reparar los músculos (Gopinath y Rando, 2008). Sin embargo, con la edad, se
vuelven senescentes, regulando al alza p16INK4a (Sousa-Victor et al., 2014). La
eliminación de los MuSC sénicos aumenta la capacidad de los MuSC restantes para
formar colonias de células musculares (Chang et al., 2016). Además, la inhibición de
p38 o p16INK4a supera la senescencia de MuSC y fortalece el músculo en ratones
geriátricos (Cosgrove et al., 2014; Sousa-Victor et al., 2014).
Caquexia relacionada con la edad. La pérdida de adiposidad y la pérdida de masa
muscular en personas de edad son contribuyentes principales al desperdicio o
caquexia dependientes de la edad. El tejido adiposo blanco aislado de ratones de
edad muestra la actividad de SA-β-Gal (Baker et al., 2016). La eliminación de células
senescentes de ratones conduce a un aumento de la adiposidad y evita la pérdida
de masa en ratones de edad avanzada (Baker et al., 2016). Recientemente se ha
demostrado que el bypass de senescencia o senolisis restaura la adipogénesis y la
adipogénesis y mejora la función metabólica en ratones de edad avanzada (Xu et
al., 2015; Berry et al., 2017). Esto sugiere que las células senescentes previenen la
diferenciación de adipocitos y contribuyen a una pérdida dependiente de la edad
de la capacidad termogénica adaptativa y la disfunción metabólica.
Orientación a la senescencia durante el envejecimiento.
Debido a la naturaleza perjudicial de la senescencia en la etiología de numerosas
enfermedades, la interrupción o prevención de la senescencia puede retrasar el
deterioro de la salud durante el envejecimiento. Se ha demostrado que la
inhibición de p38, la interrupción de p53 y p16, o el alargamiento de los telómeros
benefician a los fenotipos de envejecimiento, pero conllevan una advertencia
importante, ya que pueden aumentar la incidencia de cáncer (Sharpless et al.,
2001; Ito et al. , 2006; Janzen et al., 2006; Shay, 2016). La eliminación selectiva de
células senescentes ha revelado que es una ruta más segura para dirigirse a la
senescencia durante el envejecimiento.
ABT-263, también conocida como navitoclax, es una métrica BH3 que bloquea la
interacción entre las proteínas BCL-2 antiapoptóticas y sus dianas, liberando así los
frenos en la maquinaria de muerte celular, y se ha utilizado para tratar varios
cánceres ( Rudin et al., 2012; Chang et al., 2016). Su actividad senolítica se explica
por un exceso de confianza de las células senescentes en BCL-xL y BCL-w, las cuales
están reguladas al alza durante la senescencia (Yosef et al., 2016). Sin embargo, el
uso de navitoclax como medicamento profiláctico senolítico es poco probable
debido a sus graves efectos trombocitopénicos y neutropénicos (Rudin et al.,
2012). Recientemente, se ha demostrado que la localización de p53 en el núcleo
por FOXO4 protege contra p53 que se acopla con el eje de señalización
mitocondrial p53 y la apoptosis en el mismo (Baar et al., 2017). El tratamiento de
ratones con un péptido inhibidor de FOXO4, la isoforma inversa de FOXO4 D-retro,
puede retrasar diferentes tipos de fe. Sin embargo, al igual que con navitoclax, se
debe prestar especial atención a los efectos no deseados de la isoforma inversa
FOXO4 D-retro. Por ejemplo, la expresión de p21CIP1 cayó notablemente en
células senescentes tratadas con el péptido. Los estudios iniciales con respecto a
los senolíticos son prometedores, pero aún existen muchas incógnitas con respecto
a su efectividad como terapias. Se observó que las células senescentes reaparecen
después de cesar el tratamiento senolítico en un modelo de osteoartritis (Jeon et
al., 2017). Esto podría reflejar el daño no resuelto de la cirugía de lesión del
ligamento cruzado anterior utilizada en este estudio, aunque también existe la
posibilidad de que la eliminación de células senescentes sin identificar las causas
que inducen su acumulación podría limitar los beneficios de los senolíticos. Otro
problema potencial del uso de senolíticos es una aceleración del agotamiento de
las células madre.
La población clínica en la que podrían usarse los senolíticos incluye pacientes ya
enfermos cuyo sistema inmunológico podría verse comprometido. Si las células
senescentes se eliminan y representan alrededor de 1 a 5% de las células en tejidos
envejecidos (Sharpless y Sherr, 2015), ¿a dónde van? Las células apoptóticas se
marcan a sí mismas para la fago-citosis por el sistema inmunológico con señales
especiales de "encuéntrame" y "cómeme". ¿Podemos esperar que un sistema
inmunológico que no pudo eliminar las células senescentes acumuladas de forma
anómala se infiltre y limpie los cuerpos apoptóticos? Sin la depuración de los
cuerpos apoptóticos, la necrosis secundaria podría provocar la liberación de
patrones moleculares proinflamatorios asociados con el peligro, lo que agravaría
aún más la inflamación crónica sistémica. Esto podría limitar la ventana terapéutica
efectiva para los fármacos senolíticos. Si bien estas son posibles advertencias para
las terapias senolíticas, pueden ser significativamente superadas por sus beneficios.
Además, el programa de senescencia varía a través de los tejidos, lo que aumenta
la posibilidad de identificar senolíticos "específicos del tejido", lo que podría
minimizar los efectos secundarios. Con estas incógnitas, será fundamental validar
la cinética del aclaramiento de células senescentes utilizando marcadores robustos
de la seorescencia y métodos mejorados para identificar células senescentes
(Evangelou et al., 2017). Explorar enfoques alternativos para atacar los efectos
perjudiciales de la senescencia sin recurrir a los senolíticos también puede ser
72 JCB • Volumen 217 • Número 1 • 2018
vale la pena. Uno de estos enfoques sería apuntar al SASP. Los candidatos para
suprimir o modular el SASP incluyen los inhibidores de rapamicina, BRD4, NF-κB o
p38 (Chien et al., 2011; Freund et al., 2011; Herranz et al., 2015; Laberge et al.,
2015; Tasdemir et al., 2016). Los posibles efectos secundarios de esta estrategia
podrían incluir mitigar la respuesta senescente, exacerbación de la acumulación de
células senescentes o inmunosupresión. Sin embargo, hay muchas rutas
potenciales para el desarrollo de nuevos moduladores de SASP, que pueden ser
ayudados en gran parte por mejorar nuestra comprensión de cómo se regula el
SASP.
En resumen, los últimos años han revelado un papel clave para la senescencia en el
envejecimiento. El advenimiento de poderosas herramientas genéticas y
farmacológicas para analizar esta relación debería mejorar nuestra comprensión de
los mecanismos a través de los cuales la acumulación de células de senescencia
conduce al declive fisiológico relacionado con la edad. También debe informar en el
desarrollo de nuevos enfoques terapéuticos. Además, si tiene éxito la senescencia
utilizando senolíticos u otras estrategias, como los medicamentos moduladores de
la SASP, no solo podría contribuir al tratamiento de enfermedades específicas, sino
también a mejorar la salud general de las personas de edad.