Facultad de Ciencias Básicas

Programa de Biología
USO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO EN BIOLOGÍA CELULAR.

Daniela A. Avendaño & Sharon E. Molinares

Estudiantes del Programa de Biología, Facultad de Ciencias Básicas, Universidad del Atlántico Km 7
Antigua vía Puerto Colombia
smolinares@mail.uniatlantico.edu.co

Resumen:
En esta experiencia de laboratorio se llevaron a la práctica los conceptos básicos de microscopía y cálculo
de área y volúmenes. Se midió el diámetro del campo visual de cada uno de los objetivos del microscopio,
haciendo uso del papel milimetrado se obtuvo que los diámetros de los objetivos de 4x, 10x, 40x y 100x
son aproximadamente 4 mm, 2 mm, 0.5 mm y 0.2 mm respectivamente. Vimos hilos coloridos en los
distintos aumentos y una letra a; Además se calculó el volumen aproximado de una célula de la mucosa
bucal, posterior a esto se empleó un hemocitómetro o cámara de Neubauer para realizar un conteo de
células de una muestra de levadura seca en agua destilada.
Palabras claves: Microscopia, frotis, hemocitómetro.

Introducción
La microscopia es la ciencia que se encarga de
estudiar las técnicas de manejo del microscopio
y sentar las reglas generales de observación de
tal forma que este se convierta en el principal
instrumento de apoyo para observación de
estructuras no perceptibles a simple vista.
Existen diversos tipos de microscopios
compuestos, entre ellos está el microscopio
óptico de luz que consta de cuatro sistemas: de
soporte, óptico, de iluminación y de ajuste. En
biología celular, el uso correcto del microscopio
permite llevar a cabo diversos procesos como lo
es el conteo de células o la estimación del
volumen celular.
El conteo de células es un proceso muy común
en la biología celular, consiste en determinar el
número de células presentes en un volumen
determinado. Este conteo se puede realizar de
forma analítica o manual con un hemocitómetro
o cámara Neubauer, una especie de portaobjeto
con un margen cuadriculado que permite
mediante una serie de cálculos (promedio)
realizar el conteo.
Para realizar el caculo de área y volumen celular
es importante conocer los cálculos científicos y
las técnicas de laboratorio básicas como lo son
las fórmulas de área y volumen de objetos
bidimensionales y tridimensionales, además de
los factores de conversión.
Esta práctica se realiza con el objetivo de
aprender el uso correcto del microscopio y la
aplicación de este a la biología celular.
Metodología
El primer procedimiento realizado fue la
observación de hilos de colores a distintos
aumentos para constatar las dimensiones de una
muestra, luego observamos una letra a en
posición vertical que al observarla en el
microscopio confirmábamos que la imagen que
tenemos es invertida; Nuestro segundo ejercicio
constó de la medición de los diámetros del
campo visual, para ello se posicionó un trozo de
papel milimetrado de 10x10 mm sobre un
portaobjetos, luego se adiciono agua y se llevó a
observación en 4x. Se aproximó el diámetro
comparando el campo con el papel. El mismo
proceso fue realizado con los objetivos de 10x,
40x y para el de 100x se utilizó aceite de
inmersión. Conocer los diámetros de los
objetivos fue necesario para efectuar el cálculo
de volumen en la siguiente parte.

1
 Facultad de Ciencias Básicas
Programa de Biología
Posteriormente se procedió con el montaje de
células de cebolla y mucosa bucal. Con un
bajalenguas se recogieron dos muestras de
saliva y se frotaron sobre portaobjetos diferentes
para teñirlas con azul de metileno. Al final se
escogió la muestra con células menos dispersas
para facilitar el cálculo del volumen. El
procedimiento aplicado para la medición del
volumen de la célula de la cebolla fue similar.
Para realizar el conteo de células de levadura se
fabricó una mezcla de 100ml de agua destilada
con una pequeña porción de levadura (1 gramo).
La mezcla quedo preparada para realizarla en
nuestro próximo laboratorio.

Imagen 2. Objetivo de 10x.

Resultados Mide aproximadamente 2mm.

Medición de los diámetros de los objetivos

Imagen 3. Objetivo de 40x.

Mide aproximadamente 0.5mm.
Imagen 1. Objetivo de 4x.
Mide aproximadamente 4mm.

2
 Facultad de Ciencias Básicas
Programa de Biología

Imagen 4. Objetivo de 100x.

Mide aproximadamente 2mm.

Imagen 7.
Letra a vista desde el microscopio.

Imagen 5. Objetivo de 10x.

Hilo de color azul.

Imagen 6. Objetivo de 40x.

Hilo de color rosado.

3
 Facultad de Ciencias Básicas
Programa de Biología
Solución de preguntas de la guía:

1. ¿Cuál es la diferencia entre un microscopio simple y uno compuesto?

Un microscopio simple consta de una sola lente que pueden variar el diámetro o la forma,
se usan para amplificar la imagen de un objeto y son conocidas como lupas. El
microscopio compuesto tiene una serie de lentes y utiliza luz visible como fuente de
iluminación.
2. ¿Qué importancia tiene el uso del microscopio en la Biología Celular?
El microscopio es un instrumento fundamental para estudiar aquello que no se puede ver
a simple vista y gracias a él muchas áreas de la ciencia han logrados responder preguntas,
mejorar y estudiar ese mundo microscopio que tiene tanto para ofrecernos. La biología
estudia la vida y con ayuda del microscopio se ha podido conocerla en su más mínimo
tamaño desde el ADN hasta organismos tan pequeños que no se creían existentes.
3. ¿Por qué es necesario utilizar aceite de inmersión al utilizar el objetivo del mismo
nombre?
El aceite de inmersión tiene excelentes propiedades de refracción, es decir como un índice
de refracción similar al del vidrio (RI= 1,5); eliminan casi completamente la desviación de
los rayos de luz y a su vez aumenta considerablemente la eficacia del objetivo de 100x.
4. ¿Qué significa resolución, poder de resolución y amplificación, asimismo de qué
factores depende cada uno de ellos? Presenta tus respuestas a manera de tabla.

DEFINICION FACTORES DE LOS QUE

DEPENDEN
Es la medida de la definición de
RESOLUCION la imagen; es la mínima
distancia entre dos puntos de Depende de una constante
manera que puedan que es en parte
distinguirse como dos objetos características del objeto,
por separado. de la longitud de onda de la
radiación el índice de
Es una característica numérica refracción entre el objeto y
de un sistema óptico que define la lente objetiva y del seno
su capacidad de dar imagen de del ángulo que subtiende el
PODER DE RESOLUCION detalles muy pequeños del radio de la lente objetiva
objeto. Es la distancia mínima con vértice en el objetivo.
que separa dos puntos del
objeto.

4
 Facultad de Ciencias Básicas
Programa de Biología
Es la capacidad que tiene un
microscopio de aumentar la Dependen de las lentes del
AMPLIFICACION imagen. También es una microscopio; de los oculares
relación entre el tamaño de la y de los objetivos.
imagen y el tamaño del objeto
real;

Bibliografía

 F. J. BERNIS MATEU, ATLAS DE

MICROSCOPIA
 GRANADOS R; VILLAVERDE Ma;
Microbiología tomo 1; Uso del
microscopio; paraninfo; Pérez, J; 2003
Madrid, España.
 Campbell, N; Reece, J; Biología, 2007;
Microscopia; Ed. Medica Panamericana;
Reimpresa; Madrid España
 Vázquez, G; Introducción a la
microscopia electrónica aplicada a las
ciencias básicas; Facultad de ciencias de
la universidad Nacional autónoma de
México; 2000.

5
Facultad de Ciencias Básicas
Programa de Biología