Informe de laboratorio biología general

Acción de una enzima de tejidos vegetales y animales

(Autores)

CRISTIÁN ÁLVAREZ ÚSUGA

FELIPE VELEZ RESTREPO

ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA.

UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA.
MEDELLÍN, agosto 22 de 2019.
1.Resumen
El proposito de esta practica de laboratorio fue observar el efecto de la encima
peroxidasa, que se halla presente en tejidos animales; y vegetales sobre el agua
oxigenada; ademas de comparar la accion de esta enzima con el dioxido de
manganeso sobre un mismo sustrato (agua oxigenada). Se encontro que la
temperatura es un factor deternimante sobre la accion catalitica de origen
inorganico,animal y vegetal siendo la temperatutra ambiente e inferior a 4 °C las que
presento mayor liberación de oxígeno. También es claro que el tamaño de la
partícula es determinante en la liberación de oxigeno ya que la acción de la enzima
es mucho más eficiente siendo las partículas maceradas como en el caso del
hígado macerado las que mayor oxigeno liberó.
2. Resultados
2.1. Acción de un catalizador inorgánico sobre H 2O2
Se usaron tres tubos de ensayo, uno de ellos a temperatura ambiente, otro a baño
maría y el restante en reposo sobre hielo; cada uno con una pequeña cantidad de
MnO2.
En el tubo a temperatura ambiente al adicionar H2O2 presenta una reacción
exotérmica y liberación de burbujas.
En el tubo a baño maría, al adicionar H 2O2 también se nota una liberación de
burbujas, pero mucho menos intensa que la anterior; todo lo contrario a la intensa
reacción exotérmica y liberación de burbujas que presentó el tubo en reposo sobre
hielo, frente a los dos anteriores.

A B C
Figura 1: A: MnO2 + H2O2; B: MnO2 + H2O2 (baño maría 10 minutos); C: MnO2 + H2O2 (refrigerado 10 minutos).
2.2. Acción de un catalizador orgánico de origen animal sobre H 2O2
Se añadieron pedazos de hígado a temperatura ambiente, a baño maría, en reposo
sobre hielo y macerado, a cada uno de los cuatro tubos de ensayo utilizados,
respectivamente.
Al adicionar H2O2 a cada tubo se observó que la reacción de mayor intensidad con
cantidad de liberación de burbujas como determinante fue la del tubo con el pedazo
de hígado macerado, le siguió el tubo con el pedazo que estuvo en reposo sobre
hielo, luego el pedazo a temperatura ambiente y por último el pedazo que estuvo
bajo el baño maría, que tuvo una presencia muy baja de burbujas. (Tabla 2)

A B C D

Figura 2: A: Hígado vacuno+ H2O2; B: Hígado vacuno+ H2O2 (baño maría 10 minutos); C: Hígado vacuno+ H2O2
(refrigerado 10 minutos). D: Hígado vacuno+ H2O2 (hígado macerado)

2.3. Acción de un catalizador orgánico de origen vegetal sobre H 2O2

A cuatro tubos de ensayo, se añadió un pedazo de papa a temperatura ambiente,
uno a baño maría, otro en reposo sobre hielo y otro macerado, respectivamente.
Al adicionar el H2O2, se nota que la reacción de mayor intensidad se presenta en
el tubo con el pedazo de papa macerada, le siguió el pedazo de papa que estuvo
en reposo bajo hielo, luego el pedazo a temperatura ambiente, y por último la
reacción menos intensa fue la del pedazo de papa que estuvo a baño maría. (Tabla
3).
 A B C D
Figura 3: A: papa+ H2O2; B: papa + H2O2 (baño maría 10 minutos); C: papa + H2O2 (refrigerado 10 minutos). D: papa+ H2O2
(papa macerado)

Convenciones
(-) Pocas burbujas (+) Algunas burbujas (++) Muchas burbujas

Tubo 1 2 3
Sustancia
MnO2 a T°. MnO2 a 93°C MnO2 a 3°C
ambiente
Agua
oxigenada 2 mL 2mL 2mL
Formación de
burbujas (+) (-) (++)

Tabla 2
Tubo 4 5 6 7
Hígado a T°. Hígado a Hígado a Hígado
Sustancia ambiente 93°C 3°C macerado a
T° ambiente
Agua 2 mL 2mL 2mL 2mL
oxigenada
Formación de
burbujas (+) (-) (+) > (++)
T°amb.
Resultados de la intensidad de la reacción del catalizador orgánico de origen animal con H2O2 según
cantidad de formación de burbujas.
Tabla 3
Tubo 8 9 10 11
Sustancia Papa
Papa a T° Papa a Papa a macerada
ambiente 93°C 3°C a T°.
ambiente
Agua 2ml 2ml 2ml 2ml
oxigenada
Formación
de burbujas (+) (-) (+) > T° (++)
ambiente

Resultados de la intensidad de la reacción del catalizador orgánico de origen vegetal

con H2O2 según cantidad de formación de burbujas.
2.4. Comprobación de actividad catalítica
Se tomaron los tubos de MnO2, hígado y papa, a temperatura ambiente que
estuvieron a baño maría y se agregó a cada uno 2 ml de H 2O2, en los que se notó
que la reacción obtenida en todos los tubos, fue mucho mayor en el tubo con MnO2
seguido del tubo de ensayo con papa. Lo que cabe resaltar es que al estar a
temperatura ambiente aumento la actividad catalíca de la enzima.

A B C

Figura 4: A): B de figura 1. B): B de figura 2; C): B de figura 3

3. Discusión
Las enzimas son proteínas específicas que se sintetizan en los ribosomas,
organelos encargados de sintetizar y ensamblar proteínas, ya sea para la formación
de enzimas o proteínas esenciales para todos los seres vivos que actúan como
catalizadores en muchas reacciones químicas, como la mayoría de reacciones
metabólicas, se realizan al interior de la célula, estas pueden ser catabólicas, es
decir, liberan energía, en forma calorífica o “atrapada” por moléculas como el ADP,
que se transforma en ATP que luego se emplea en la respiración celular, la
glucolisis, etc.; o anabólicas que absorben energía, y por ende no la liberan y su
actividad puede comprobarse experimentalmente mediante la identificación y
cuantificación de los productos formados en la reacción que ellas regulan, en este
caso la formación de oxígeno molecular, que se manifiesta en la formación de
burbujas. La acción de estos compuestos proteicos en una reacción
se afecta por la
variación de factores físicos y químicos tales como la temperatura la concentración
de la enzima y del sustrato.
En esta práctica se diseñan experimentos utilizando un catalizador inorgánico
(MnO2) y otro orgánico (peroxidasa). Esta última se encuentra tanto en tejidos
vegetales como animales. El MnO2 y la peroxidasa que es una enzima específica
que impide el proceso de oxidación de las sustancias, actuando como catalizadores
en la reacción de descomposición del agua oxigenada, que en el caso del tejido
vegetal de la papa y el animal del hígado, hace las veces de sustrato (molécula
sobre la que actúa la enzima), en oxígeno, que se reconoce por la producción de
burbujas y en agua. La reacción en la cual interviene la peroxidasa y el MnO 2 se
presenta de la siguiente manera:

Peroxidasa
MnO2

𝟐𝐻202 𝟐𝐻2𝑂 + 𝑂2

Con relación a la estructura química y el número inicial de moléculas, en la relación

enzima-complejo, los cambios que pueden sufrir el sustrato y la enzima, es la
disminución de la concentración del sustrato y la descomposición de su estructura
química, para pasar de reactivo a producto, gracias a la aceleración de la reacción
que ejerce un número constante de moléculas de la enzima, que no afecta la
posición de equilibrio de la reacción que catalizan, sólo que agiliza el alcance de
este equilibrio.
3.1 Catalizador inorgánico
La tendencia en esta fase experimental fue la de una relación directamente
proporcional entre la intensidad de la reacción, que en todos los casos fue
exotérmica, medida cualitativamente por la cantidad de burbujas producidas y el
aumento de la temperatura, esto nos permite suponer que la descomposición del
agua oxigenada es susceptible a las altas temperaturas.
3.2 Catalizador orgánico de origen animal
Los resultados obtenidos, nos permitieron suponer que el rango óptimo específico
de temperatura para la actividad catalítica de la enzima peroxidasa, de naturaleza
proteica, presente en el hígado, se ubica en temperaturas bajas, aproximadamente
entre 0° y 3°C, pues fue notable la reacción casi nula en el tubo que fue sometido a
baño maría; esto debido a que el aumento de temperatura causó la
desnaturalización de la enzima que al perder sus interacciones estructurales, pierde
también la organización de su estructura terciaria, promoviendo así su ineficacia
como catalizador. No obstante, el tubo que tuvo la reacción más intensa, fue el que
contenía el hígado macerado a temperatura ambiente, suponemos que es debido a
que hay una mayor superficie de contacto entre las enzimas (peroxidasas) y el
sustrato correspondiente (h2o2), es decir, las enzimas del tejido se hacen más
abundantes con el macerado, porque se extraen del interior de los tejidos y
contactan mejor y en mayor número con el peróxido de hidrógeno, haciendo más
evidente la reacción.
3.3 Catalizador de origen vegetal
En esta fase, se nota que las reacciones de la peroxidasa del tejido vegetal de los
pedazos de papa presentan la misma propensión que las observadas en el tejido
animal de los pedazos del hígado, sin embargo, en general fueron muchos menos
intensas, que las que se presentaron en el hígado, esto debido a la diferencia de
concentración, es decir, más disponibilidad de las enzimas en el tejido animal lo que
hace que la actividad enzimática se haga más intensa y veloz. 3
3.4. Comprobación de actividad catalítica
Al estar a temperatura ambiente, luego de haber dejado reposar los tubos con papa,
MnO2 e hígado que previamente se sometieron a baño de María, se agregó a cada
uno 2 ml de agua oxigenada para analizar si después de haberse sometido a
temperaturas propicias para su desnaturalización, en el caso de la peroxidasa, al
volver a una temperatura apta para su actividad catalítica, podían las enzimas
retomar su papel como acelerador de la reacción.
Al comparar las reacciones producidas de la papa y el hígado con las que se
produjeron cuando estos habían sido recién sacados del baño de María, se notó
que la reacción fue de muy baja intensidad, pero mayores a las que se presentaron
después del baño de María, lo que confirma el hecho de la reactivación de la enzima
peroxidasa, después de haber sido desnaturalizada previamente; el MnO 2 por el
contrario tubo una reacción menor que la de este mismo compuesto a baño de
María, lo que indica, que para este catalizador inorgánico la temperatura de 93°C
fue más óptima, para su actividad catalítica, que la temperatura ambiente, en la que
se agregó más sustrato.
Bibliografía:
AGUIRRE OBANDO, O.UN.; MORALS ÁLVAREZ, ED: Reconocimiento de carbohidratos.

Facultad de Educación. Consulta 27 de julio de 2010.

ANÓNIMO (1988): Fehling (Germán). Enciclopedia Universal Ilustrada Europeo-Americana,
23, 560. Madrid, Espasa-Calpe.
BABRET, A. CHAVEZ, C. Biología. Editorial Prentice Hall. Nueva Jersey.1992-
VILLEE, Claude A. Biología. McGraw-Hill. 1988