introduccion:

Los microorganismos tienen la capacidad de crecer utilizando varias fuentes de

energía, algunos lo hacen utilizando la luz y otros sustratos orgánicos u inorgánicos como
carbohidratos, aminoácidos, lípidos e incluso hidrocarburos; en otras palabras requieren de
una fuente de carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno y algunos oligoelementos que
funcionan como coenzimas.
Sin embargo, solo algunos de esos sustratos pueden difundir a través de la
membrana celular con facilidad e ingresar a alguna de las vías catabólicas ya conocidas,
muchas bacterias liberan al medio enzimas necesarias para la hidrólisis de polisacáridos,
proteínas, ácidos nucleicos y lípidos; convirtiendo estos polímeros en pequeñas moléculas.
Además de la difusión facilitada; otros sustratos requieren la translocación de grupo
para su ingreso a la célula bacteriana una vez realizado este importante paso la obtención
de
energía dependerá básicamente de enzimas especializadas.
h

objetivos
determinar la especie a la cual pertenece la bacteria a trabajar, por medio de las pruebas
bioquimicas secundarias.
Estudiar las caracteristicas metabolicas por parte de la bacteria a trabajar
Lista de materiales:
TSI
Agar 15.0 Citrato de sodio 2.0
Fosfato dihidrogenado de amonio 1.0 Cloruro de sodio 5.0
Azul de bromotimol 0.08 Sulfato de magnesio 0.2
Fosfato dipotásico 1.0 pH 6.9 ± 0.2

Malonato.
Azul de bromotimol 0.025 Fofatodipotásico 0.6 Cloruro de sodio 2.0 Fosfato monopotásico
0.4 Dextrosa 0.25 Malonato de sodio 3.0 Extracto de levadura 1.0 Sulfato de amonio 2.0 pH
6.7 ± 0.2

caldo urea
Extracto de levadura 0.10 Fosfato disódico 9.50 Rojo de fenol 0.01 Urea 20.0 Fosfato
monopotásico 9.10 pH 6.8 ± 0.2

Sim
Agar 3.5 Tiosulfato de sodio 2.0 Peptona de carne 6.1 Sulfato de hierro y amonio 0.2
Peptona de caseína 20.0 pH 7.3 ± 0.2

mr
Rojo de metilo, glucosa
vp acetoina alpha naftol 5% kOH 40%

niratos.
Peptona 5.0 Extracto de carne 3.0 El nitrato de potasio 1% 1.0 pH 7.0 ± 0.2

Kia
glucosa, lactosa y rojo de fenol.
lia
Agar liina hierro y ornitina.

Mio
Agar 2.0 Peptona de gelatina 10.0 Dextrosa 1.0 Peptona de caseína 10.0 Extracto de
levadura 3.0 Púrpura de bromocresol 0.02 L- Ornitina 5.0 pH 6.5 ± 0.2

arginina:
Dextrosa 0.5 Piridoxal 0.005 Extracto de carne 5.0 Púrpura de bromocresol 0.01 Peptona
5.0 Rojo de cresol 0.005 + Aminoácido (Arginina) 1% pH 6.9±0.2

Gelatina:
gelatina.

Resultados

Prueba Interpretación Foto antes Foto Después

Sólido

Citratos (-)
Indicador azul de
bromotimol
no se observa
crecimiento y medio
de color verde.

Líquido

Ureasa (+)
color indica la
velocidad de la
hidrólisis de la
urea.

Semisolido
SIM (+)

Prueba Antes despues Resultado.

TSI Alcalino-alcalino

Kia Glucosa positivo,

lactosa negativo.

LIa

Gelatina Gelatina negativo.

Citrato Citrato negativo

Mio

Nitratos Negativa

mr positiva

vp posito

arginina

malonato negativo
Análisis de resultado
Las pruebas bioquímicas secundarias identifican el género en enterobacterias y para familia
la de bacterias no enterobacterias determina la especie presente por lo fue posible
caracterizar la bacteria que en nuestro caso fue ​P. rettgeri, l​ a cual es una bacteria gram
negativa.
La prueba de citratos en la cual estaba presente en medio de tipo sólido, es una prueba que
no necesita de la glucosa y se utiliza con el fin de verificar si la bacterias puede utilizar a
citratos de sodio como fuente de carbono y energía para su crecimiento. En el
desdoblamiento del citrato involucra diferentes enzimas que son la citratasa y citrato de
desmolasa.La literatura indica que la prueba da positiva pero no se observó un vire del
indicador azul de bromotimol por lo que no presenta la formación de hidróxido de amonio el
cual indica la alcalinidad del medio para generar esta base fuerte que por consiguiente
cambia el vire del indicador de azul de bromotimol indicando una prueba positiva.Su
coloracion es azul pero en el caso de obtener una prueba negativa como en el caso de p.
rettgeri quiere decir que la sal de amonio no es utilizada como unica fuente de nitrogeno, ya
que no se genera una produccion de alcalinidad y el agar pertenece de color verde.

La prueba de urea, es un caso particular ya que representa específicamente la especie, por

no es particular en su género providencia. Por lo que la especie rettgeri contiene en su
medio la capacidad de hidrolizar la enzima ureasa, se debe a su composición glucosa y
tripteina la cual es la explicación del crecimiento bacteriano detectado por el cambio de vire
del indicador rojo de fenol de rosa a rosa mexicano. Para la hidrólisis de los microorganismo
es necesario estar en un medio acuoso por lo cual el medio de la inoculación es líquido.

Para la prueba de gelatina: Dio negativa ya que la bacteria no presenta la enzima gelatinasa
que es la que rompe los enlaces de polipéptidos, evitando que la gelatina se haga solida.
conclusiones
Al realizar las Pruebas Bioquimicas ya antes mencionadas , se pudo determinar la familia a
la cual pertenece la bacteria que se trabajo (P. rettgeri ), de igual manera se logro estudiar
las caracteristicas metabolicas al poner en contacto a la bacteria con el medio de cultivo y
las diferentes pruebas B.Q.
Es de suma importancia conocer las reacciones que ocurren dentro del cultivo, ya que al
conocer estas reacciones se conoceran las rutas metebolicas por las cuales la bacteria
obtendra el carbohidrato.