 El examen de orina es un test de embarazo de tipo
cualitativo, ya que arroja un resultado de sólo una
Después de 6-12 días después de la fecundación, aparece
la hormona corionica humana (hCG).
PRUEBA DE EMBARAZO O TEST DE EMBARAZO
Es una prueba que mide a una hormona en el cuerpo
llamada gonadotropina coriónica humana (GCH), producida
durante el embarazo. Esta hormona aparece en la sangre y
en la orina de las mujeres embarazadas.
Prueba en la sangre
En la sangre Detecta cantidades más pequeñas de GCH y
puede confirmar o descartar el embarazo antes que una
prueba de orina.
DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO
Fecundación e implantación
A medida que se van produciendo las primeras divisiones
embrionarias, el ovocito se transforma en blastocisto y
desciende por la trompa hacia la cavidad uterina, llega al
útero aproximadamente al cuarto día de haber sido
fecundado, y entre el séptimo y el 14º día se produce la
implantación. Progresivamente irá creciendo y
modificándose hasta formar el embrión, mientras tanto en el
ovario se ha formado el cuerpo lúteo que es el productor de
las hormonas que mantienen la etapa inicial de la gestación.
Niveles de hCG por semana despues del Ultimo Periodo
Menstrual (UPM)
3 semanas UPM: 5 - 50 mIU/ml
4 semanas UPM: 5 - 426 mIU/ml
5 semanas UPM: 18 - 7,340 mIU/ml
6 semanas UPM: 1,080 - 56,500 mIU/ml
7 - 8 semanas UPM: 7, 650 - 229,000 mIU/ml
9 - 12 semanas UPM: 25,700 - 288,000 mIU/ml
13 - 16 semanas UPM: 13,300 - 254,000 mIU/ml
17 - 24 semanas UPM: 4,060 - 165,400 mIU/ml
25 - 40 semanas UPM: 3,640 - 117,000 mIU/ml
EXAMEN CLINICO
Examen de sangre u orina la mejor manera de detectar la
presencia de la beta hormona gonadotropina coriónica
humana (beta-GCH) en niveles suficientes como para
confirmar el embarazo en una mujer.
Cualitativo
variable, se está embarazada o no se está
embarazada.
 Existen exámenes cualitativos muy sensibles que
detectan la presencia de la hormona cuando esta
se encuentra por encima de los 25mUl/ml
Cuantitativo
 El examen de sangre es cualitativo y
cuantitativo, ya que además ofrece un valor del
nivel de la hormona beta-cGH presente en la
sangre.
 Los cuantitativos son más específicos y
sensibles, permitiendo detectar niveles muy
bajos de la hormona, hasta los 10mUl/ml
PRUEBA DE SUERO
Para saber con exactitud se puede hacer un análisis de
sangre que pueda detectar las pequeñas cantidades de la
hormona hCG que se produce durante la gestación.
Si los valores de la hCG son mayores a 5,0 mIU/ml está
embarazada.
INTERPRETACION
Negativo: Aparición de uno solo banda de color rosado o
purpura en el sitio de control (C) de reactivo esto es un
resultado negativa e indica que el nivel de HGC en la
muestra se encuentra por debajo de sensibilidad de
detección de la tira reactiva 25 m UI/ml
Positiva: Aparición de dos bandas de color rosado o
purpura, una en el sitio de control ( c) de un reactivo y otra
en el sitio de test de prueba (resultado)T de la tira reactiva.
Esto es un resultado positiva e indica que el nivel HCG en la
muestra se encuentra por encima del valor de sensibilidad
de detección de la tira reactiva 25 m UL/ml
Invalida: No aparece ninguna banda o si solo aparece una
banda en el sitio de prueba (T) de la reactiva, los reactivos
del dispositivo se han degradado o la prueba no se ha
realizado de manera correcta
Falso negativo:
 Ocurre cuando el embarazo esta aun en fase muy
inicial, habiendo niveles muy bajas de HCG
circulante
 Amenaza de aborto
 Síndrome de muerte fetal
 Niveles disminuidos de HGC asociados con un
embarazo temprano
 Reacciones toxicas
 Contaminación bacteriana
Falso positivo: puede surgir en algunas situaciones
 Si la paciente toma medicamentos que contenga
HCG (tratamiento contra la infertilidad)
 Si la paciente a abortado hace menos de 8
semanas
  Cuando presenta algunas enfermedades raras
puede producir GCH (un tumor del tejido
placentario)
 Quistes ováricas
Falso positivo: puede surgir en algunas situaciones
 Si la paciente toma medicamentos que contenga
HCG (tratamiento contra la infertilidad)
 Si la paciente a abortado hace menos de 8
semanas
 Cuando presenta algunas enfermedades raras
puede producir GCH (un tumor del tejido
placentario)
 Quistes ováricas
MÉTODOS:
Inhibición de la aglutinación (hCG en orina):
La orina de la paciente se mezcla con un antisuero (suero de
conejos inmunizados contra la hCG).
A continuación se pone en un tubo, mezclado con glóbulos
rojos de oveja, o en un porta, con partículas de látex, ambos
revestidos de hCG.
El diagnóstico de embarazo se confirma cuando no hay
aglutinación, ya que la hCG de la orina se une a los
anticuerpos del suero de conejo.
Actualmente está en desuso.
Análisis con radiorreceptores:
Es un método más sensible que el anterior, Consiste en
medir la competición de la hCG por 2 receptores marcados.
La hCG se fija a un soporte sólido que contiene anticuerpos,
seguidamente se expone un segundo anticuerpo que está
radio marcado y se unirá a la hCG. Permite detectarla desde
las 4 semanas de edad gestacional.
Radioinmunoensayo (RIA):
Se trata de una prueba sensible, ya que detecta niveles de 5
mUI/ml de β-hCG en suero sanguíneo.
La muestra problema compite con el trazador por la unión al
yodo radiomarcado (I125).
Se basa en la unión de hCG marcada con I125 con una
cantidad fija de anticuerpo específico (antihCG o anti- β-
hCG). Se incuba todo y, mediante centrifugación se separa
para determinar la radiactividad de la fracción libre de la
hCG
Enzimoinmunoensayo (ELISA):
Detecta la β-hCG en suero o plasma de forma tanto
cualitativa, como cuantitativa desde las 3 - 5 semanas, con
una sensibilidad de 25 mUI/ml. Los anticuerpos
monoclonales se unen la la GCH de la muestra.
Posteriormente se añade un segundo anticuerpo al que se
une una enzima (fosfatasa alcalina), que produce una
reacción que mostrará una coloración azulada cuya
intensidad será proporcional a la cantidad de β-hCG de la
muestra.
Test de inmunofluorescencia (ELFA):
Es el método más usado para la detección de la hCG en
plasma materna. Detecta niveles de β-hCG iguales o
superiores a 2 mUI/ml β-hCG. Se puede utilizar desde las 3 -
5 semanas.
Inmunocromatografía:
Los test caseros utilizan este método que sólo determina la
presencia o ausencia de hCG.
Tiene una sensibilidad de 25-50mUI/ml y son capaces de
detectarla desde los 4 o 5 dias de retraso.
La prueba consiste en la reacción de la hCG con anticuerpos
y posterior formación de una marca de color por
inmunocromatografía.
PRUEBA RÁPIDA PARA REAGINAS PLASMÁTICAS
(RPR)
RPR detecta la presencia de anticuerpos que reaccionan
ante la sífilis en la sangre, significa que el análisis no detecta
treponema pallidum, en su lugar detecta la presencia de
anticuerpos contra las sustancias que son producidas por las
células dañadas por la bacteria.
FUNDAMENTOS DEL METODO
En la prueba rápida para reaginas plasmáticas (RPR), las
"reaginas" presentes en el suero de individuos infectados
con Treponema pallidum, se detectan por acción de las
mismas con antígeno de cardiolipina, lecitina y colesterol
adsorbido sobre partículas de carbón.
Detectan reacciones anticuerpos generados por nuestro
cuerpo durante la infección de sífilis. Normalmente nuestro
organismo tarda cierto tiempo en producirlos tras haber
estado expuesto al patógeno, por lo que si la infección es
muy reciente es probable que no se hayan producido
PROCEDIMIENTO:
PRUEBA CUALITATIVA
Llevar a temperatura ambiente los reactivos y la muestra
antes de realizar el ensayo.
En cada uno de los círculos de la tarjeta de reacción colocar
con un gotero plástico provisto:
Muestra o Controles 1 gota (50 ul)
Con el extremo cerrado del gotero distribuir la muestra
uniformemente en todo el círculo.
Con el gotero metálico provisto, en posición vertical, agregar
en el centro del círculo:
Reactivo A 1 gota (17 ul)
PRUEBA SEMICUANTITATIVA
Efectuar diluciones seriadas 1:2, 1:4, 1:8, hasta 1:64
empleando solución fisiológica y proceder de la misma
manera que en la técnica cualitativa. El título estará dado
por la inversa de la última dilución que se observe reactiva.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
Reactivo: presencia de aglutinación visible en forma de
grumos negros sobre el fondo claro que indica presencia de
"reaginas" en la muestra.
No reactivo: aspecto gris homogéneo que indica ausencia
de "reaginas" en la muestra.
Resultado
SEGUIMIENTO DEL TRATAMIENTO
Control de la respuesta al tratamiento:
Repetir RPR a 1, 3, 6 y 12 meses tras la finalización del
tratamiento
FIEBRE TIFOIDEA
La fiebre tifoidea es una enfermedad sistémica causada
por Salmonella de serotipo typhi. Los síntomas son una
fiebre elevada, postración, dolor abdominal y un exantema
de color rosado.
Período de incubación
Por lo general es de 3 a 21 días (promedio de 10-12
días) de acuerdo al inóculo ingerido.
Período de invasión activa ocurre en una o dos semanas
después de la ingestión
Período de estado, que aparece de dos a cuatro
semanas de la ingesta.
Período de convalecencia: cuatro o cinco semanas,
mayor complicación son enfermedades metastásicas tras
bacteriemias y recaídas,
REACCIÓN DE WIDAL
La reacción de Widal es un test basado en el principio
de aglutinación antígeno-anticuerpo, donde se determina
la presencia de anticuerpos contra el antígeno O y H de
la Salmonella typhi para el serodiagnóstico de fiebre
tifoidea, sin embargo debido a su falta de especificidad,
debe ser interpretado en el contexto clínico del paciente.
Pruebas de antígeno febriles
La salmonelosis, fiebre tifoidea, brucelosis y el tifus son
enfermedades que en alguna etapa de su evolución
presentan una característica en común: fiebre.
A pesar de que el método definitivo para establecer la
etiología de estas enfermedades es a través del aislamiento
del agente patógeno, esto resulta difícil debido a que la
investigación se realiza frecuentemente en períodos tardíos
de la enfermedad y luego de una terapia antibiótica. Por ello
es de suma importancia diagnóstica la detección de los
anticuerpos específicos producidos en el curso de cada una
de estas patologías. Una prueba aislada es de escaso valor,
siendo necesarias 2 o más pruebas seriadas a fin de poner
en evidencia cambios en el título de anticuerpos. En el suero
de pacientes con fiebre tifoidea y personas vacunadas
contra esta enfermedad se detectan anticuerpos dirigidos
contra los antígenos O y H de Salmonella typhi
La importancia de la aglutinación de Widal
falsos positivos.- Paratyphi A, títulos Anti-O y Anti-H >/ 100
en un 53% y 22% de los pacientes respectivamente.
En pacientes con malaria estudiados en Nigeria con
Hemocultivos negativos a S. typhi se encontraron reacciones
de Widal positivas con títulos de 1:40, 1:80 y 1:160 en el
85%, 12% y 3% de los casos respectivamente.
falsos negativos
1.-Antibiocipalmenticoterapia temprana
2.-Uso de corticosteroides
3. Medición temprana de anticuerpos (primera semana)
4. Inmunodeficiencias adquiridas y congénitas
5. Portadores crónicos de Salmonella typhi
1. La reacción de Widal no es el “Gold estándar” para el
diagnóstico de fiebre tifoidea
2. La reacción de Widal sobre diagnóstica fiebre tifoidea
teniendo en cuenta sus numerosas reacciones cruzadas
3. Para la interpretación de la reacción de Widal se debe de
conocer la prevalencia de la fiebre tifoidea en una
determinada área.
FUNDAMENTO DE LA REACCION DE WIDAL
Estas reacciones se basan en el hecho de que cuando el
organismo humano es invadido por agentes infecciosos,
responde produciendo anticuerpo aglutinantes contra ellos
los cuales se ponen de manifiesto al entrar en contacto el
anticuerpo con el anticuerpo especifico. El título del
anticuerpo depende del tipo y curso de la enfermedad. Para
ello que ls resultados tengan un valor diagnostico el título de
ellos debe aumentar.
MATERIALES
 placas escavadas
 gradilla
 tubo sin anticoagulante
 pipeta pasteur con bulbo
 pipeta serologica de 0.1ml
 jeringa desechable
EQUIPO
Agitador
Centrifuga electrica
REACTIVOS
Anti “O” salmonella typhi
Antígeno Paratyphi “A2
Antigeno “H” Slmonella typhi
Antígeno paratyphi “B”
Antigeno Brucella aborturs
Antígeno proteus “OX-19”
PROCEDIMIENTO
Método de aglutinación rápida en placa
1.- anotar el antígeno correspondiente en la placa de vidrio
2.- depositar en cada cuadro 0.04ml de suero del paciente
para cada uno de los antígenos que se vayan a utilizar
3.- A cada gota de suero añadir una gota de cada antígeno
4.- mezclar con un aplicador limpio (utilizar un aplicador para
cada antígeno)
5.- Agitar suavemente la placa rotación (120 r.p.m) durante 2
o 3 min.
6.- observar la aglutinación con ayuda de una lámpara.
Cuando hay reacción positiva se repite la técnica con
diluciones, las uales se obtienen con el uso de las siguientes
cantidades del suero en la siguiente forma.
DIAGNOSTICO DE LA INFECCION POR EL VIRUS DE LA
INMUNODEFICIENCIA HUMANA (VIH)
El virus de la inmunodeficiencia humana (VIH, su sigla en
inglés es HIV) provoca el síndrome de inmunodeficiencia
adquirida (SIDA, su sigla en inglés es AIDS), enfermedad
que mata o altera las células del sistema inmune y destruye
progresivamente la capacidad del cuerpo de luchar contra
las infecciones y ciertos cánceres. El término SIDA se aplica
a los estadios más avanzados de la infección por VIH.
TEST DE ELISA DE PRIMERA GENERACION
Es una de las pruebas más eficaces para detectar el virus
del VIH. Se trata de un examen de sangre el cual no detecta
el virus, sino la presencia de anticuerpos que el organismo
crea para defenderse del virus. Para que sea posible
encontrar los anticuerpos en la sangre, es necesario
tomarse el examen 3-6 meses después de la última vez que
se estuvo en una situación de riesgo de adquirir el VIH.
PRINCIPIOS GENERALES
♦ Para hacer el diagnóstico de infección por VIH, se emplean
pruebas para un diagnóstico preliminar (tamizaje) y
confirmatorias, que detectan anticuerpos en muestras de
sueros.
♦ Las pruebas inmunológicas ligadas a enzimas (ELISA) se
usan para un diagnóstico preliminar basado en la detección
de los anticuerpos contra VIH.
♦ El suero o plasma son los elementos más comunes
usados para la detección de anticuerpos. Deben guardarse
congelados en el caso de que la prueba no pueda realizarse
inmediatamente luego de la recolección.
A.- ELISA DIRECTO:
Es la forma más básica de realizar la técnica. Consiste en
recoger una muestra a estudiar y ponerla en un pocillo (un
recipiente pequeño) en frente de una muestra igual pero
contaminada con el germen a estudiar, y otra muestra en la
que se sabe que no hay germen. Se aplica el anticuerpo con
la enzima en los tres pozos y se compara la muestra a
estudio con las otras dos.
B.-PRUEBA DE ELISA INDIRECTO
Se realiza de forma similar al ELISA directo, pero en este
caso se añade primero un anticuerpo sin enzima y
después uno con enzima. De esa forma, la señal que
emite el enzima es mucho más potente y la prueba es
más sensible.
•
•
• MATERIALES
• Kit ELISA para: VIH 1-2, HTLV I/II, HBsAg , Anti-
HBc, HVC, Sífilis, enfermedad de Chagas.
• Micropipetas unicanal de rango fijo y/o variable (0.5
–10, 2-20, 20 – 200, 100 – 1000 ul)
 • Micropipetas multicanal de rango fijo y/o variable de
acuerdo a lo indicado en el inserto del kit

• Tips (puntas) universales de 200 uL

• Tips (puntas) universales de 1000 uL

• Reservorios para micropipeta multicanal

• Lentes protectores para laboratorio

• Mascarillas descartables

• Lavador de microplacas ELISA

• Lector de micro placas ELISA (con filtros

adecuados a la técnica

RESULTADOS

FALSOS POSITIVOS

• Relativas al suero

• Congelaciones y descongelaciones repetidas

• Almacenamiento a temperatura subóptima

• Aspecto lipídico o turbio del suero

• Contaminación microbiana

• Sueros tratados con calor (>= 60ºC)

• Errores de extracción o identificación

FALSOS NEGATIVO

Período ventana que precede a la aparición de anticuerpos

● Infección por tipos de VIH no detectables por los

antígenos incluidos en la prueba

● Tratamiento inmunosupresor prolongado

● Trasplante de médula ósea

● Disfunciones de los linfocitos B

● Plasmaféresis, exanguinotrasfusión

● Neoplasias

● Errores de extracción o identificación

● Fallos en el principio técnico o en el proceso de fabricación

del equipo diagnóstico

● Respuestas anómalas ante la infección VIH