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SANTOS
2019
1. Introdução
A atividade enzimática pode ser avaliada medindo-se a velocidade
de consumo do substrato ou a velocidade de aparecimento do
produto. Esta atividade depende de vários fatores, tais como o
tempo de reação, a concentração da enzima, a concentração do
substrato, a temperatura, o pH do meio e a presença de cofatores
e/ou inibidores. Para exemplificar estes conceitos, nesta aula
prática será avaliada a atividade da amilase salivar. A α-amilase é
encontrada nos animais (sangue, saliva e suco pancreático),
plantas, fungos e bactérias. Esta enzima é um endo-amilase e
hidrolisa as ligações glicosídicas do amido, glicogênio, poli e
oligossacarídeos ao acaso. Como resultado da ação não ordenada
da amilase salivar, obtém-se rapidamente uma mistura complexa de
produtos de hidrólise que incluem: amido solúvel, maltodextrinas,
maltoses, e, eventualmente, glicose. Na boca, a amilase salivar tem
participação na digestão de carboidratos. A amilase pancreática é a
maior responsável pela digestão glicídica no duodeno. Esta enzima
é também normalmente encontrada no soro e a elevação de sua
atividade enzimática sérica pode auxiliar no diagnóstico de
diversas patologias pancreáticas (obstrução, tumores, pancreatite
aguda, etc). O amido é composto pela amilose (não-ramificada) e
amilopectina (ramificada). A amilose forma micelas hidratadas que
adsorvem IODO, presente na solução de lugol, em suas espirais
helicoidais, apresentando coloração azul-violeta.
2. Objetivos
o Avaliar a ação da amilase salivar sobre o seu substrato (amido);
3. Procedimentos
ATIVIDADE DA AMILASE SALIVAR:
1. Preparação da solução de saliva
- Um aluno do grupo doa a sua saliva em um copo descartável.
- Para diluição (1:5), adicionar em um tubo:
o 1,0 mL de saliva;
o 4 mL de água destilada;
- Reservar até o momento de uso.
2. Preparação dos tubos
- Tomar 06 tubos de ensaio limpos, nomear um deles de B (Branco)
e numerar os restantes de 1 a 5.
- Adicionar a todos os 5 tubos:
o 2 mL de água destilada;
o 2 gotas de lugol.