La sangre es una suspensión de eritrocitos, leucocitos y plaquetas en un líquido de

compleja composición, llamado, plasma. Al impedirse el mecanismo de coagulación

sanguínea pueden separarse los elementos formes de este líquido, el cual tiene un color paja
claro. Cuando la sangre se coagula se obtiene otro líquido al separar el coágulo formado, a
este líquido se le llama suero, el cual es de composición diferente al plasma. La diferencia
entre estos dos líquidos obtenidos de la sangre radica en su composición, pues al inhibir la
coagulación de la sangre se conserva el fibrinógeno en el plasma, mientras que el suero
carece del mismo por su transformación a filamentos insolubles de fibrina por la activación de
proteínas coagulantes durante la hemostasia.

La sangre fuera del sistema vascular coagula entre 3 y 7 minutos. L os anticoagulantes

permiten que los elementos formes de la sangre, permanezcan en suspensión para su
estudio. Los anticoagulantes se utilizan para obtener plasma o muestras de sangre total
y así poder realizar los recuentos celulares y estudiar las características morfológicas de las
células. Así mismo deben procurar que las células sanguíneas a estudiar se encuentren en el
estado más parecido al fisiológico, como cuando se encuentran circulando por el torrente
sanguíneo. Para ello los anticoagulantes no deben alterar la morfología de los leucocitos,
el tamaño eritrocitario, no producir hemólisis e impedir la agregación plaquetaria,
posibilitando al mismo tiempo el máximo periodo de conservación de la muestra (cerca de
24 horas a 25°C o incluso 48 horas refrigerada a 4° C).

EDTA (C10H16N2O88)
Sal disódica, dipotásica o tripotásica del ácido etilendiaminotetraacético, actuando
++
mediante un efecto quelante sobre el calcio (Ca ), impidiendo el proceso de la coagulación
al fijarlo. Este anticoagulante se utiliza fundamentalmente para la realización de recuentos
celulares, y permite además la realización del hematocrito y del frotis sanguíneo hasta dos
horas después de la extracción de la muestra. Las sales de potasio tienen la ventaja con
respecto a la de sodio, por ser más fácilmente solubles en sangre cuando las usamos a
partir del producto sólido, sin embargo, las tres sales afectan el tamaño del eritrocito,
especialmente después del almacenamiento de la sangre anticoagulada por espacio de
algunas horas. Se recomienda la sal dipotásica como anticoagulante para recolectar muestras
sanguíneas destinadas al recuento y caracterización del tamaño celular y especialmente
cuando los valores del hematocrito se requieren para la calibración de los contadores
automáticos. El K2EDTA 2H2O posee un peso molecular relativo de 404,1g; 1g quela 100 mg
de calcio iónico y el pH para una solución al 1% es de 4,8 ± 1,0. La cantidad de EDTA
dihidratado agregada a la sangre debe ser de 1,5-2,2 mg/mL de sangre total. Esta cantidad
es un compromiso entre la cantidad requerida para evitar la coagulación y la cantidad a la
cual se producen las alteraciones celulares.

Heparina
Es un anticoagulante fisiológico que actúa impidiendo que la protrombina se transforme
en trombina. Estructuralmente es un mucopolisacárido ácido. Los frotis realizados con
muestras sanguíneas anticoaguladas con heparina producen un color azulado en el fondo del
frotis y una pseudovacuolización celular, por lo tanto no se recomienda para tal fin. La
proporción adecuada es de 15-20 UI (0,1-0,2 mg) de heparina por mL de sangre.
Citrato trisódico (C6H5O7Na3)
Actúa impidiendo que el calcio se ionice, evitando así la coagulación. Se utiliza para
realizar las pruebas de Hemostasia en una proporción sangre: anticoagulante 9:1; así como
para la velocidad de sedimentación (VSG) en una proporción sangre: anticoagulante 4:1. El
citrato sódico se utiliza a una concentración de 0,105 M (3,2%) ó 0,129 M (3,8%).
Oxalato sódico (Na2C2O4)
Actúa mediante la precipitación del calcio como oxalato de calcio (CaC2O4), además de
que tiene propiedad para conservar la glucosa. Recomendado en las pruebas de coagulación
y su proporción es de 2 volúmenes de solución de oxalato sódico 0,1M en 4 volúmenes de
sangre.
Oxalato de amonio y potasio [(NH4)2C2O4:K2C2O4]

Conocido también como mezcla de Wintrobe, fue empleado durante mucho tiempo
para la realización de la biometría hemática, sin embargo dejó de emplearse al observar que
altera sensiblemente la morfología del eritrocito, alterando por tanto el volumen corpuscular
medio (VCM). Actúa por precipitación del calcio. Se emplea en forma de polvo, constituido
por 3 partes de oxalato de amonio y 2 partes de oxalato de potasio. La proporción
recomendada es de 2 mg de mezcla por mL de sangre.
Soluciones anticoagulantes conservadoras
Los factores más importantes que influyen sobre la recuperación eritrocitaria en la
sangre conservada, es la solución anticoagulante conservadora utilizada. Todas las
soluciones que se utilizan hoy en día son anticoagulantes y conservadoras, pero se habla
más de su función anticoagulante y se olvida la no menos importante de conservación. Las
distintas modificaciones que tienen lugar en la sangre durante el periodo de almacenaje
denominadas lesiones de conservación, están en relación tanto con el periodo de tiempo
como con la naturaleza de la solución anticoagulante.

Las soluciones anticoagulantes conservadoras tienen grandes cantidades de glucosa

como material energético y de citratos de sodio que previene la coagulación de la sangre.
En la actualidad existen tres soluciones de este tipo, conocidas como:
 Solución Ácido-Citrato-Dextrosa (ACD)
 Solución Citrato-Fosfato-Dextrosa (CPD)
 Solución Citrato-Fosfato-Dextrosa-Adenina (CPDA-1)
 La solución ACD se emplea fundamentalmente en Bancos de Sangre para
conservar las unidades de sangre y estudios metabólicos eritrocitarios, por
permitir una buena conservación de los hematíes. Se utiliza en una proporción
de un volumen de ACD por cada cuatro volúmenes de sangre. La proporción
de la mezcla del anticoagulante es de: Ácido Cítrico 0,9 g, Citrato disódico 2
g, Dextrosa 2 g, H2O destilada 120 mL. Permite conservar los hematíes durante
21 días entre 2-6°C.
 La solución CPD desarrollada por Gibson, tiene la ventaja sobre la ACD, de
condicionar un pH de 7,1 en la sangre colectada inmediatamente después de la
extracción, facilitando la continuación del metabolismo glicolítico celular
durante el periodo de almacenamiento; por otro lado el ion fosfato ayuda a
 la preservación de los esteres de fosfato dentro del eritrocito, por lo que
permite mantener la estabilidad de la membrana (ATP), el transporte de
oxígeno y su liberación en los tejidos (2,3-DPG).
 La solución CPDA-1 es la fórmula mejorada de CPD, ya que contiene 25% más
de glucosa y de 17,3 mg de adenina, lo cual permite la conservación de la
sangre 35 días. La adición de Adenina se derivó de experiencias previas en las
cuales se había demostrado que esta sustancia podía ser tomada por eritrocito
e incorporada en la reserva de nucléotidos celulares, utilizándola para
mantener la concentración de ATP en el eritrocito.
 La solución de CPD-Adenina ha sido recientemente mejorada al aumentar la
concentración de dextrosa y Adenina. Esta nueva versión ha sido identificada
como CPDA-2 y los ensayos clínicos muestran que la sangre completa puede
conservarse por 49 días con una sobrevida media eritrocítica de 73,6%, en
cambio, los eritrocitos concentrados duran 42 días, pero su sobrevida es de 77,9
 8,1%. No tiene efectos adversos sobre las plaquetas ni sobre los factores
plasmáticos. Esta solución es claramente superior al CPDA-1 para la
conservación de los eritrocitos concentrados. Su aprobación para ser usada en
los bancos de sangre está en consideración.