INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA GENERAL.
“Efecto del pH y la concentración de enzima sobre la velocidad
de reacción”
Grupo 4QV2 Sección 2

Objetivos
Discusiones
Demostrar que la velocidad de la reacción
Para obtener la absorbencia de la concentración
enzimática es directamente proporcional a la
total en el experimento de concentración de
concentración de enzima.
enzima los reactivos utilizados tienen una
Analizar la importancia del pH del medio sobre diferente función en la reacción llevada a cabo,
la velocidad de una reacción enzimática y su la sacarosa es nuestro sustrato, el regulador de
efecto sobre el carácter iónico de la enzima y del acetatos es para evitar cambios bruscos en el
sustrato. pH ya solo evaluamos como afecta la
concentración de la enzima, el agua cumple con
Resultados la función de ajustar los volúmenes de los
Tabla 1. Resultado de experimento del pH diferentes tubos, se realizó la preincubacion
Absorb 0 1.239 1.365 1.776 0.73 0.517 0.324
para así lograr que la temperatura fuera la
encia 0 misma para todos los tubos, la concentración de
Azúcar 0 Fuera Fuera Fuera 7.5 5.30 3.40 enzima se varió añadiendo diferentes
reduct de la de la de la
or (µM) curva curva curva cantidades para observar el fenómeno esperado
tipo tipo tipo dejándola actuar 5 minutos.
Velocid 0 Fuera Fuera Fuera 0.75 0.53 0.34
ad de la de la de la
(Unida curva curva curva
El reactivo DNS se utilizó para detener la
des de tipo tipo tipo reaccion así evitamos la formación de más
inverta
sa
productos. El hielo también contribuye que no se
pH 5 3 4 4.5 5 6 7 siga desarrollando el color de la reacción.
De acuerdo a los resultados de concentración de
Tabla 2. Resultado de experimento de [E] enzima y analizando las gráficas observamos
que cuando la concentración de enzima
Absorbenci 0 0.252 0.268 0.558 0.684 0.996
a aumenta la velocidad lo hace de igual manera,
Azúcar 0 2.60 2.80 5.77 7.02 9.9 demostrando que la velocidad de reacción es
reductor
(µM) directamente proporcional a la concentración de
Velocidad 0 0.26 0.28 0.577 0.702 0.99 enzima esto debido a que entre mayor cantidad
(Unidades
internacion
de enzima la cantidad de sitios activos en los
ales cuales actúa el sustrato (sacarosa) son cada vez
Concentrac 0 1 2 3 4 5 más, convirtiendo los reactivos en productos en
ión de un tiempo menor. (2) Se presentaron dos puntos
enzima
(µg/2.0ml) en la (grafica 2) que fueron excluidos de la
tendencia lineal ya que discrepaban de los
demás datos esto puede ser debido a que las
mediciones echas no son exactas y el tiempo
que se dejó actuar la enzima.
De la misma manera siguiendo el mismo
Figura 1. Reacción enzimática procedimiento anterior, para nuestro
experimento del pH sobre la velocidad de
reacción se realizó cambiando la variable de pH.
Analizando los resultados gráficos se obtuvieron
resultados fuera de nuestra curva tipo los cuales
no se lograron interpolar en ella. (Grafica 1) (1)
De los resultados obtenidos y graficados se
observa el efecto que tiene el pH sobre la
velocidad de reacción incrementándose la
velocidad hasta llegar a un pH de 4.5 el óptimo,
a continuación se ve un decremento de la
velocidad al acercarse a un pH neutro.
Estos fenómenos se deben a que en un pH acido
se da generalmente la desnaturalización de las
enzima, también hay cambios de ionización en
los aminoácidos del sitio activo reduciendo su
afinidad por el sustrato o el pH puede afectar la
estructura nativa. (1)
Conclusiones
La velocidad de reacción es directamente
proporcional a la concentración de enzima.
El pH afecta la reacción enzimática, si este está
por encima o por debajo del pH óptimo de la
enzima.
El pH influye en el estado iónico de los
aminoácidos del sitio activo.
Bibliografía
Mckee. R. (2014). “Bioquímica las bases
moleculares de la vida” Ed. Mc Graw Hill 5ta
edición Pág. 194 (1)
Mathews.C. (2003) “Bioquímica”. 3ra edición. Ed
Pearson educación. Madrid (2)