Problemario de Bioquímica y Biología Molecular

Bioenergética

1.- Calcular Gº’ a partir de las constates de equilibrio de las siguientes reacciones, catalizadas
por enzimas a 25ºC y pH 7. Determine en cada caso de que tipo de reacción se trata
ASAT
a) Glutamato + Oxalacetato ============ Aspartato + -cetoglutarato
Fosfato de
Triosa Fosfato Piridoxal K’eq = 6.8
Isomerasa

b) DHAP ============ GAP K’eq = 0.0475

Fosfofructocinasa
c) Fructosa 6P + ATP ============== Fructosa 1, 6 bis P + ADP

K’eq = 254

2.- Calcular las constantes de equilibrio a partir de Gº’ para las siguientes reacciones:
Glucosa 6
a) Glucosa 6 P + H2O ============= Glucosa + Pi Gº’ = - 13.8 kJ/Mol
fosfatasa

-galactosidasa
b) Lactosa + H2O ============= Glucosa + Galctosa Gº’ = - 15.9 kJ/Mol

Fumarasa
c) Malato ============== Fumarato + H2O Gº’ = 3.1 kJ/Mol

3.- Si se incuba una solución de Glucosa 1 P con una cantidad catalítica de fosfoglucomutasa,
ésta se transforma en Glucosa 6 P, Las concentraciones en el equilibrio son:
G1P = 4.5 X 10-3 M y G6P = 9.6 X 10-2M
Calcular Keq y Gº’ a 25 ºC.
4.- La Glucosa 1 P se transforma en Fructosa 6 P en 2 reacciones sucesivas:
G1P ====== G6P Gº’ = -7.3 kJ/Mol
G6P ====== F6PGº’ = 1.7 kJ/Mol
Calcular la constante de equilibrio para la suma de las 2 reacciones
5.- La fosforilación de la glucosa en la célula está acoplada a la hidrólisis de ATP; esto es parte
de la energía libre de hidrólisis del ATP se utiliza para efectuar la fosforilación endergónica de
la glucosa
i) Glucosa + Pi ========= Glucosa 6 P Gº’ = 13.8 kJ/Mol
ii) ATP + H2O ========== ADP + Pi Gº’ = -30.5 kJ/Mol
Calcular Keq y Gº’ globales a 25 ºC.
6.- Calcular la energía libre real (G) a 25 ºC, para la hidrólisis de ATP en ADP y H2O en el
hepatocito de rata, eritrocito humano y E. coli utilizando los valores de concentración de la
siguiente tabla

7.- Los valores de E’o para los pares redox conjugados NAD+/NADH y Piruvato/Lactato son
-0.32 y -19 V respectivamente.
Calcular Keq y Gº’ a 25 ºC.

Cinética enzimática
8.- Se determinaron los siguientes valores de velocidad para una reacción catalizada por una enzima a
pH 7.6 y a las diferentes temperaturas indicadas:

Temp °C 20 25 30 35 40 45 50
Vel mMol/s 16.4 25.12 41.70 52.73 66.1 54.50 37.05

Calcular la energía de activación de la reacción.

9.- La fosfatasa ácida hidroliza el grupo fosfato del fosfato de p-nitrilo y forma p-nitrofenol.
Los valores experimentales para esta reacción se muestran a continuación.
Conc de Sustrato mM Vo
0.50 0.075
0.75 0.090
2.00 0.152
4.00 0.196
6.00 0.210
8.20 0.214
10.00 0.230
Calcular V máx, Km, por los métodos de
a) Michaelis – Menten,
b) Lineweaver – Burk,
10.- A partir de los siguientes datos para una reacción enzimática calcular: Vmáx, Km (con y
sin inhibidor) por los métodos de Lineweaver – Burk, tipo de inhibición, La concentración del
inhibidor es 6 mM
Sustrato Vo sin inhibidor Vo con inhibidor
2.0 139 88
3.0 179 121
4.0 213 149
10.0 313 257
15.0 370 313

11.- Elabore las gráficas que permiten identificar los diferentes tipos de inhibición enzimática
por los métodos siguientes:
c) Michaelis – Menten,
d) Lineweaver – Burk,
 4.5
y = -6492.3x + 25.02
4 R² = 0.9757
3.5
3
2.5
lnVo

2
1.5
1
0.5
0
0.00315 0.0032 0.00325 0.0033 0.00335 0.0034 0.00345
1/T (K^-1)
 0.012

y = 0.0188x + 0.002
0.01

0.008

S/I
1/Vo

0.006
C/I

0.004 y = 0.0103x + 0.0021 Linear (S/I)

Linear (C/I)
0.002

0
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
1/[S]
 Michaelis-Menten
0.25

0.23

0.21

0.19

0.17
Vo

0.15

0.13

0.11

0.09

0.07
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
[S]

Lineweaver-Burk
16
14
12
10
1/Vo

8
6
y = 4.8572x + 4.0267
4 R² = 0.9922
2
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5
1/[S]