Taller biología

Ambiente y control microbiano

Nutrición, metabolismo y crecimiento microbiano

Esteban Londoño Restrepo

Universidad de Antioquia

Octubre 2018
Taller Biología General

II UNIDAD. Biotecnología microbiana

Tema: Ambiente y control microbiológico

1.¿Por qué es importante conocer los efectos ambientales sobre el crecimiento microbiano?

Porque el ambiente circundante a el crecimiento microbiano, juega una papel muy importante, ya
que debido al ambiente el crecimiento microbiano puede verse afectado, ya sea de forma positiva
o de forma negativa. Por la temperatura, por la presión, por los nutriente, y muchos otros factores
el crecimiento microbiano puede cambiar su morfología y su metabolismo.

2. ¿Cuáles son los principales factores medioambientales que determinan el crecimiento de los
microorganismos?

La temperatura, digamos que si el microorganismo esta en ambientes acuáticos el agua también

es una factor muy importante,la presion osmótica, el pH, si el microorganismo necesita la
presencia de oxigeno también es un factor importante, la radiación.

3. ¿Cómo influye la temperatura en el crecimiento microbiano? ¿Cuáles son los sistemas que se
ven más afectados al aumentar o disminuir la temperatura?

La temperatura influye importantemente en el crecimiento microbiano, ya que los

microorganismos en general tienen un rango de temperatura en el cual pueden crecer
normalmente.

De acuerdo a este margen de temperatura de crecimiento, los microorganismos se clasifican en:

Hipertermófilos: Su temperatura óptima se encuentra por encima de los 80ºC. Muchos de ellos
son arqueas.

Termófilos: Su temperatura óptima se encuentra entre 45-70ºC. Suelen ser microorganismos de

vida libre

Mesófilos: Su temperatura óptima se encuentra entre los 25-45ºC. Incluye microorganismos

patógenos y comensales del hombre y animales de sangre caliente y algunos de vida libre.

Psicótrofos: La temperatura óptima de los microorganismos de este grupo está por debajo de los
25 – 30°C incluye microorganismos de vida libre.

Psicrófilos: Su temperatura óptima de desarrollo se encuentra entre los 12 – 15°C

4. ¿Qué se entiende por temperatura cardinal?

Se entiende por temperatura cardinal aquella temperatura que afecta a la velocidad de

crecimiento, y por lo tanto al tiempo de generación. Cada bacteria (y suponiendo que el resto de
condiciones ambientales se mantienten constantes) muestra una curva característica de tasa de
crecimiento en función de la temperatura, donde se puede distinguir tres puntos característicos,
que son:
Temperatura mínima: Donde por debajo de ella no hay crecimiento.

Temperatura máxima: Donde por encima de ella tampoco existe crecimiento.

Temperatura óptima:Donde permite la máxima tasa de crecimiento (o sea, g mínimo).

5. ¿Cómo se clasifican los microorganismos teniendo en cuenta la temperatura optima para su

crecimiento? De un ejemplo en cada unos de los grupos.

Se clasifican en:

Hipertermófilos: Su temperatura óptima se encuentra por encima de los 80°C. el Methanopyrus

kandleri prospera en la dorsal central índica a 80 °C, con un récord de crecimiento a 122 °C.

Termófilos: Su temperatura óptima se encuentra entre 45-70ºC. Thermus aquaticus, Esta bacteria
vive a temperaturas comprendidas entre 50 y 80 °C

Mesófilos: Su temperatura óptima se encuentra entre los 25-45ºC. Incluye microorganismos

patógenos y comensales del hombre y animales de sangre caliente y algunos de vida libre.

Psicótrofos: La temperatura óptima de los microorganismos de este grupo está por debajo de los
25 – 30°C incluye microorganismos de vida libre. Polaromonas vacuolata, que vive en las aguas de
la Antártida; su temperatura óptima es de 4 °C y no sobrevive por encima de 14 °C.

Psicrófilos: Su temperatura óptima de desarrollo se encuentra entre los 12 – 15°C.

Methanogenium frigidum, una arquea metanógena que vive en las aguas de la Antártida

6. ¿Qué mecanismos a nivel celular han desarrollado los microorganismos para resistir
temperaturas extremas?

Pues algunas características que han desarrollado los microorganismos son:

Enzimas termo resistentes, donde algunas de estas enzimas tienen el interior de la molecula
hidrófobo. Membranas con alta concentración de acidos grasos saturados, que hacen enlaces
hidrofóbicos fuertes. Ribosomas que son termoresistentes. En Arqueas hipertermófilas los lípidos
son muy especiales: en vez de basarse en ésteres de ácidos grasos con el glicerol, se trata de
éteres de hidrocarburos unidos al glicerol. (el enlace éter es más resistente).

7. ¿Cómo se clasifican los microorganismos teniendo en cuenta el pH optima para su crecimiento?

De un ejemplo en cada unos de los grupos.

La mayoría de las bacterias pueden crecer dentro de un margen de pH de su medio, manteniendo

al mismo tiempo su pH interno óptimo prácticamente constante. Por ejemplo, Escherichia coli
puede crecer bien entre pH 6 y pH 8, pero su pH interno es siempre 7.6 o muy cercano a ese valor.
Respecto del margen normal de pH a los que crecen las bacterias, éstas se pueden clasificar en:

Neutrófilos: si crecen de modo óptimo en torno a la neutralidad (entre pH 5.5 y 8). Un ejemplo son
los glóbulos blancos.

Acidófilas: si crecen normalmente entre pH 0 y pH 5. Ejem: Estreptococos thermophilus,

Lactobacillus acidophilus.
Alcalófilos: si crecen entre pH 8.5 y pH 11.5. leucocitos.

8. ¿Qué mecanismos utilizan los microorganismos para mantener constante el pH al interior de la

célula?

Uno de los mecanismos que, al menos en neutrófilos parece controlar el pH interior es un sistema
de antiporte H+/K+: a pH ácidos, el interior celular puede quedar en principio más alcalino que el
exterior. Este sistema introduce protones en el interior y saca iones potasio. De esta manera
neutralizan el pH interior y siguen teniendo un potencial de membrana para establecer una fuerza
protón motriz que les suministre energía; si el pH interior cae en torno a 6 o 5.5, bacterias como E.
coli o S. typhimurium inducen una respuesta de tolerancia a ácidos, consistente en ATPasas
translocadoras de protones (expulsan protones al exterior) y chaperonas (proteínas celadoras)
para corregir las proteínas desnaturalizadas. Existen algunos notables procariotas cuyo pH óptimo
es muy bajo (acidófilos extremos u obligados): Algunas eubacterias del género Thiobacillus (T.
thiooxidans, T. ferrooxidans) y las arqueas de los géneros Sulfolobus, Thermoplasma y
Ferroplasma tienen su óptimo a pH 2, y generan ellas mismas estos bajos pH al oxidar sulfuros
hasta ácido sulfúrico. (Sulfolobus es un Secciones un termoacidófilo). De hecho, estas bacterias
necesitan esas altas concentraciones de H+ para mantener la integridad de sus membranas y
envueltas: a pH neutro esas envueltas se desintegran.

9. ¿Qué mecanismo utilizan los microorganismos para mantener la concentración de solutos

interna ligeramente por encima de la externa?

El mecanismo de transporte de membrana biológica donde se regula el paso de solutos, como

iones y pequeñas moléculas, a través de membranas plasmáticas, esto es, bicapas lipídicas que
poseen proteínas embebidas en ellas. Dicha propiedad se debe a la selectividad de membrana,
una característica de las membranas celulares que las faculta como agentes de separación
específica de sustancias de distinta índole química; es decir, la posibilidad de permitir la
permeabilidad de ciertas sustancias, pero no de otras.

10 Defina los siguientes términos: Actividad del agua, Presión osmótica, Halo tolerancia:

Actividad de agua: hace referencia a la cantidad de agua libre que esta disponible en los alimentos
para el crecimiento microbiano.Todos los microorganismos necesitan una cantidad de agua para
vivir, crecer y reproducirse, por eso los métodos de conservación de los alimentos, se
fundamentan en la reducción de la disponibilidad de agua, eliminándola por deshidratación,
evaporación, entre otros, fijándola por adicion de azucares o sales.

Presión osmótica: La presión osmótica es una de las cuatro propiedades coligativas de las
soluciones (dependen del número de partículas en disolución, sin importar su naturaleza). Se trata
de una de las características principales a tener en cuenta en las relaciones de los líquidos que
constituyen el medio interno de los seres vivos, ya que la membrana plasmática regula la entrada
y salida de soluto al medio extracelular que la rodea, ejerciendo de barrera de control.

Halo tolerancia: Es la adaptación por osmorregulación de los organismos vivos a condiciones de

alta salinidad.Las especies halo tolerantes tienden a vivir en zonas como los lagos hipersalinos,
dunas costeras, desiertos salinos, mares de sal interiores y manantiales. Los halófilos son un grupo
de bacterias que viven en ambientes muy salinos e incluso requieren de esa salinidad para su
supervivencia. Las halófitas son plantas superiores tolerantes a la sal.

11 ¿Cómo se clasifican los microorganismos teniendo en la disponibilidad del agua? De un ejemplo

en cada uno de los grupos.

Se clasifican en:

osmosensible no halófilo (E. Coli)

Halotolerante : Las especies halotolerantes tienden a vivir en zonas como los lagos hipersalinos,
dunas costeras, desiertos salinos, mares de sal interiores y manantiales. Los halófilos son un grupo
de bacterias que viven en ambientes muy salinos e incluso requieren de esa salinidad para su
supervivencia.ejemplo: (S. Aureus)

Halófilo: Son los organismos que viven en ambientes con presencia de gran cantidad de sales.
Ejemplo: (Vibrio fischeri)

Halófilo extremo: Requieren una concentración de sal del 15 al 36 %, aproximadamente

(halobacterium salinarum)

12 ¿Cómo se clasifican los microorganismos teniendo en la disponibilidad de

oxigeno? De un ejemplo en cada uno de los grupos.

Según su relación con el oxígeno pueden ser:

Aerobias obligadas: crecen a tensiones normales de oxígeno (21% en el aire) y lo utilizan como
aceptor final de electrones de sus cadenas respiratorias.

Microaerófilas: son aerobios que crecen a bajas tensiones de oxigeno (2-10%)

Anaerobias estrictas: no pueden vivir en presencia de oxigeno porque son toxicas para ellas.
Utilizan aceptores de electrones o bien tienen metabolismo fermentativo exclusivamente

Anaerobias aerotolerantes: pueden crecer bien tanto en presencia como ausencia de oxígeno.

Anaerobias facultativas: no precisan oxígeno para crecer pero lo hacen mejor en su presencia.

13 ¿Qué son los derivados tóxicos del O2? ¿Qué mecanismos usan los microorganismos para
contrarrestar su efecto toxico sobre las células?

Muchos organismos requieren además oxígeno molecular. Se trata de organismos que dependen
de la respiración aeróbica para cubrir sus necesidades energéticas y en los que el oxígeno
molecular funciona como agente oxidante terminal. Tales microorganismos se denominan
aerobios obligados. En el otro extremo fisiológico están aquellos microorganismos que obtienen
su energía mediante reacciones que no implican la utilización de oxígeno molecular y para los
cuales esta forma química del elemento no actúa como nutriente. Para muchos de estos grupos
fisiológicos el oxígeno molecular actúa como tóxico celular o como inhibidor del crecimiento. Tales
microorganismos son anaerobios obligados.
Una de las razones es que la tolerancia al O2 de muchos anaerobios obligados moderados
depende de su producción de enzimas superóxido dismutasa, catalasas y peroxidasas, que son
protectoras contra la toxicidad de los productos de oxidorreducción. Una teoría muy difundida es
que la exposición al O2 produce una serie de reacciones, mediada por flavoproteínas, que llevan a
la producción del radical superóxido (O2-), peróxido de hidrógeno (H2O2). Ciertos
microorganismos producen enzimas capaces de contrarrestar estos productos tóxicos, como la
SUPERÓXIDO DISMUTASA y las CATALASAS. Mediante la superóxido dismutasa (SOD) se
transforman los radicales superóxido en oxígeno molecular y peróxido de hidrógeno y el potencial
de óxido reducción.

14. ¿Cómo es el funcionamiento de la cámara GasPak para el cultivo de microorganismos

anaerobios?

La generación de H2 y CO2 por medio de una reacción química cuyos sustratos se encuentran
separados en un sobre al cual se le agrega agua, desencadenando la reacción y a combinación del
H2 y el O del aire para formar agua generan la anaerobiosis, esta reacción se cataliza utilizando
granallas de Zinc recubiertas de Paladio las cuales se encuentran depositadas en una canastilla
dentro de la jarra. Una tirilla de papel impregnada en Azul de metileno (azul en presencia de O2,
incoloro en ausencia) introducida en la Jarra es el indicador de Anaerobiosis.

15 ¿Qué se entiende por presión atmosférica y cuál es su unidad de medida?

La presión atmosférica en un punto coincide numéricamente con el peso de una columna estática
de aire de sección recta unitaria que se extiende desde ese punto hasta el límite superior de la
atmósfera. Como la densidad del aire disminuye conforme aumenta la altura, no se puede calcular
ese peso a menos que pudiera expresarse la variación de la densidad del aire en función de la
altitud o de la presión, por lo que no resulta fácil hacer un cálculo exacto de la presión atmosférica
sobre un lugar de la superficie terrestre y sus unidades de medida son atm(atmosfera),
Pa(pascales), psi (libra de fuerza por pulgada cuadrada), mmHg, torr.

16. ¿Cómo se clasifican los microorganismos teniendo en la presión del medio? De un ejemplo en
cada uno de los grupos.

PRESION HIDROSTATICA: La mayor parte de las especies bacterianas de hábitats continentales no

pueden crecer (e incluso mueren) cuando son sometidas a altas presiones (unos 600 Kg/cm2). Ello
se debe a los siguientes efectos adversos: Aumento de la viscosidad del citoplasma, disminución
de la capacidad de las enzimas de unirse a sus respectivos sustratos, interferencia en la división
celular: las bacterias se alargan, se filamentan, pero sin producción de tabique transversal.

Bacterias barotolerantes: Crecen a la presión atmosférica, pero aguantan hasta unas 500
atmósferas. Su hábitat son las aguas oceánicas, entre los 2000 y los 4000 metros de profundidad.
Ejem: La bacteria "MT 41”.

Bacterias barófilas: Crecen óptimamente a más de 400 atmósferas. Podemos distinguir entre
barófilas moderadas (facultativas) y barófilas extremas (obligadas). ejem: Shewanella benthica.
PRESION OSMOTICA: halófilos extremos: crecen en ambientes muy salinos. (15-30%). Archeas
halófilos extremos. Ejem: halobacterium salanerium.

Halófilos: Requieren bajas (6-10%) o moderadas (10-14%) concentraciones de sales para crecer.
Ejem: Vibrio fischeri

Haloalterantes: pueden soportar una reducción leve del valor Aw, ejemplo: S. Aureus.

17 ¿Qué se entiende por radiación ionizante? ¿Qué efecto tiene sobre los microorganismos a nivel
celular? ¿Qué mecanismos utilizan los microorganismos para remediar este efecto?

Son radiaciones con mucha energía que logran penetrar la materia y son capaces de extraer
electrones ligados de los átomos un ejemplo común son los rayos x, sus efectos son producidos
debido a la alteración de estas en los microorganismos produciendo la misma lisis celular y ruptura
de enlaces dentro del ADN creando a niveles más leves de efecto las mutaciones celulares.

¿En qué consiste la Ley del mínimo estado de Liebig y la Ley de la tolerancia de Shelford?

R=La Ley del Mínimo de Liebig: dice que el nutriente que se encuentra menos disponible es el que
limita la producción, aun cuando los demás estén en cantidades suficientes. De esto se deduce
que hasta el elemento más insignificante para la vida es en realidad imprescindible para ésta.

Ley de tolerancia de Shelford: la existencia y prosperidad de un organismo o especie en particular

dependen del carácter completo de un conjunto de condiciones. (“cada ser vivo presenta frente a
los factores ecológicos, unos límites de tolerancia entre los cuales se sitúa su optimo ecológico.”)

19. ¿Qué métodos se pueden aplicar para el conteo de células viables no cultivables?

Epifluorescencia: Se utiliza en muestras ambientales para estimar Nº total de bacterias (no viables,
y viables cultivables y no cultivables). Se basa en el uso de fluorocromos, como el naranja de
acridina, que tienen la propiedad de absorber luz U.V. y emitir radiaciones dentro del espectro
visible. Otros métodos lo son: conteo por caja de Petri, por filtración, por NMP, peso seco de la
célula, por turbidez y etc.

Análisis por Impedancia: Este análisis permite la detección cuantitativa y cualitativa de

microorganismos mediante la medición de la actividad metabólica de los mismos de manera
indirecta. El fundamento de la impedancia eléctrica se basa en la modificación de la conductividad
del medio de cultivo. Esto se debe a que las moléculas del medio son eléctricamente neutras o
están débilmente ionizadas, pero al ser transformadas por acción de los microorganismos, la carga
eléctrica también cambia modificando la conductividad del medio y la resistencia disminuye. Esta
reducción puede ser medida a través de dos electrodos en solución a los cuales se aplica un voltaje
eléctrico, de forma que lo que se mide es la impedancia en el campo de corriente

Electroforesis en gel con gradiente desnaturalizante (DGGE): es quizás la técnica más comúnmente
utilizada para obtener las “huellas digitales” (fingerprinting), realizada sin necesidad de cultivo en
placa. La DGGE y la TGGE (electroforesis en gel con gradiente de temperatura) están basadas en la
separación de productos de la PCR con igual tamaño, pero diferentes secuencias, característicos
de los productos de amplificación de genes ribosomales.

20. ¿Qué se entiende por Sensibilidad de quórum?

Es un mecanismo de comunicación entre bacterias que permite controlar procesos específicos,
tales como formación de biopelículas, expresión de factores de virulencia, producción de
metabolitos secundarios y mecanismos de resistencia al estrés. El lenguaje usado para la
comunicación intercelular es basado en pequeñas moléculas generadoras de señal llamadas
autoinductores.

21. ¿Qué se entiende por control biológico y cuál es su importancia?

El control biológico es un método artificial utilizado para controlar plagas, enfermedades y

malezas que consiste en utilizar organismos vivos con objeto de mantener, disponer y manipular
las poblaciones de otro organismo. Y dentro de su importancia o ventajas están: Poco o ningún
efecto nocivo colateral de los enemigos naturales hacia otros organismos, incluso el hombre, La
resistencia de las plagas al control biológico es muy rara, el control es relativamente a largo
término, con frecuencia permanente, el tratamiento con insecticidas es eliminado por completo o
de manera sustancial, la relación costo/beneficio es muy favorable. Evita plagas secundarias, no
existen problemas de intoxicaciones, se le puede usar dentro del Manejo integrado de plagas.

22 Defina los siguientes conceptos: Esterilización, Desinfección, Saneamiento, Antisepsia.

Esterilización: proceso por el cual se obtiene un producto libre de microorganismos viables. El

proceso de esterilización debe ser diseñado, validado y llevado a cabo para asegurar que es capaz
de eliminar la carga microbiana del producto o un microorganismo más resistente.

Desinfección: proceso físico o químico que mata o inactiva agentes patógenos tales como
bacterias, virus y protozoos impidiendo el crecimiento de microorganismos patógenos en fase
vegetativa que se encuentren en objetos inertes.

Saneamiento: Es el medio higiénico de promoción de la salud a través de prevención de contacto

humano con las amenazas de los desechos. Las amenazas pueden ser las agentes de enfermedad
tanto físico, microbiológico, biológico o químico.

Antisepsia: es el conjunto de procedimientos o actividades destinados a inhibir o destruir los

microorganismos potencialmente patógenos. Para la implementación de la antisepsia se usan los
biocidas, tanto en piel y tejido humanos (antisépticos) como en objetos, superficies o ambiente
(desinfectantes).

23 ¿Cómo es el proceso de muerte celular tras la exposición a un agente letal?

Puede ser: Necrosis: a necrosis ocurre de manera aguda, por una forma no fisiológica, mediante
una agresión que causa lesión en una porción importante del tejido, por ejemplo, en el centro de
un tejido infartado, en un área de isquemia o en la zona de una lesión por toxinas. El proceso de
necrosis es desencadenado por toxinas, hipoxia severa, agresión masiva y cualquier otra condición
que genere caída de ATP. Esto crea cambios que, histológicamente, están representados por
desorganización y lisis del citoplasma, con dilatación del retículo endoplásmico y las mitocondrias,
disolución de la cromatina y pérdida de la continuidad de la membrana citoplasmática y el ADN es
partido en fragmentos irregulares al azar. Debido a la pérdida de la integridad de la membrana
celular, el contenido del citoplasma es volcado al espacio extracelular, produciéndose la atracción
de células inmunes en el área, lo que genera el proceso de inflamación, en el cual los restos
celulares son eliminados por fagocitos inmigrantes.

Apoptosis: El proceso de apoptosis es desencadenado por condiciones fisiológicas o patológicas

sin pérdida de niveles de ATP, debido a que el mismo requiere de energía para su realización.
Existen dos vías principales que pueden llevar a la apoptosis: inducción positiva o externa por un
ligando unido a los receptores específicos de la membrana plasmática y la inducción negativa o
interna que ocurre por pérdida de la actividad supresora de mecanismos intracelulares. La
inducción positiva involucra ligandos que por una porción intracelular del receptor translucen al
interior una señal; esa porción intracelular es llamada dominio de muerte. La inducción negativa
se produce por pérdida de la actividad supresora a cargo de una familia de proteínas específicas
que se hallan relacionadas con la mitocondria, liberándose desde la misma citocromo C que
dispara la actividad de las proteasas, enzimas encargadas de ejecutar la apoptosis.

24 ¿Cuándo un microorganismo se considera muerto?

Se puede considerar el hecho de terminar su ciclo celular, donde entra la capacidad de desarrollo a
un microorganismo aislado, luego de dar partida a la replicación de su información genética a parir
de su ADN, y la síntesis de su funcionamiento celular, y dando lugar a la bipartición o división a dar
lugar a dos nuevas maneras de vida. Es decir que desde el punto de vista microbiológico un
microorganismo pierda la vida cuando pierde de forma irreversible la capacidad de dividirse y
mueren o sufren lisis.

25. ¿Cuáles son las condiciones que pueden afectar la actividad de un agente antimicrobiano?

1.Tamaño de la población: un mayor número de microorganismos demoran más en morir que un

número menor de ellos.

2.Composición de la población: la efectividad de un agente varía de acuerdo de acuerdo a la

naturaleza del organismo; los microorganismos varían mucho en sensibilidad.

3.Concentración o intensidad del agente microbiano: generalmente un agente más concentrado o

más intenso elimina más rápido a los microorganismos. (no siempre...etanol 70% más efectivo que
etanol 95%)

4.Duración de la exposición: mientras más tiempo este el microorganismo expuesto al agente,

mayor será el número de organismos eliminados.

5.Temperatura: un aumento de la temperatura en que se aplica el agente aumenta la efectividad

de éste.

6.Medioambiente: el medioambiente que rodea al microorganismo lo puede proteger de la acción

del agente antimicrobiano. (la materia orgánica de la comida protege a las bacterias de la
esterilización por calor).

26 ¿Cuáles son los métodos físicos más utilizados para el control microbiológico?

La temperatura, las radiaciones, desecación, liofilización, ondas sonoras, presiones osmóticas e

hidrostáticas.
27 ¿Qué efecto tiene el aumento de la temperatura en los microorganismos?

Afecta la velocidad de reacción claramente en donde esta cauda desnaturalización e inactivación

de proteínas enzimáticas esenciales, colapsa miento de la membrana citoplasmática y lisis térmica
de la bacteria.

28. ¿Qué se entiende por tiempo de reducción decimal y cuál es su utilidad para el control
microbiológico?

El tiempo de reducción decimal es el tiempo requerido para reducir la población microbiana en un

90%. Desde que la destrucción microbiana o bacteriana a cierta temperatura será eliminada y se
considera como exponencial, los tratamientos son útiles para conservar los alimentos.

29 ¿Qué indica la medida del Valor z y cuál es su utilidad para el control microbiológico?

El valor z indica el incremento en la temperatura (medida en número de grados) necesario para

que el valor D (tiempo de reducción decimal) se reduzca a la décima parte de la inicial. Los
conceptos de valores D y z son también aplicables a otros parámetros de calidad de alimentos
tales como actividades enzimáticas (por ejemplo, para la actividad peroxidasa, actividad biológica
de vitaminas, textura de alimentos o color.

30. Describa el funcionamiento de los dispositivos que se han elaborado para el control
microbiológico utilizando altas temperaturas (Autoclave, Hornos, Tanques de pasteurización) o
utilizando bajas temperaturas (neveras).

Autoclave: un recipiente de presión metálico de paredes gruesas con un cierre hermético que
permite trabajar a alta presión para realizar una reacción industrial, una cocción o una
esterilización con vapor de agua. la destrucción de los microorganismos con fines de conservación
de alimentos, medicamentos, y otros productos.

Tanques de pasteurización: Este método consiste en calentar la leche a temperaturas entre 62 y

64ºC y mantenerla a esta temperatura durante 30 minutos. La leche es calentada en recipientes o
tanques de capacidad variable (generalmente de 200 a 1500 litros); esos tanques son de acero
inoxidable preferentemente y están encamisados (doble pared); la leche se calienta por medio de
vapor o agua caliente que vincula entre las paredes del tanque, provisto este de un agitador para
hacer más homogéneo el tratamiento.

Neveras: Su función consiste en mantener, en un ambiente controlado (espacio refrigerado)

diversos fluidos y sustancias, para que los mismos se conserven en buenas condiciones (mientras
más baja sea la temperatura, menor actividad química y biológica).

31. Describa el funcionamiento de los dispositivos que se han elaborado para el control
microbiológico utilizando filtros.

Los dispositivos poseen unos poros pequeños para que los microrganismos no puedan pasar por
ellos, pero lo sufrientemente grandes para permitir el paso de liquido y gases; es una excelente
manera de reducir los microorganismos en soluciones sensibles de gases o el calor hay varios tipos
de filtración en el cual hallamos la filtración por membrana, por profundidad y nucleoporo.
32. Describa el funcionamiento de los dispositivos que se han elaborado para el control
microbiológico utilizando radiación.

Microondas: desnaturalización a partir del calor que se emplea en este.

Rayos UV: lisis celular en bacterias y en casos más leves mutaciones. Además, es poco penetrante

Ionizante: destruye hasta esporas bacterianas y células vegetativas, aunque no simpre es eficaz
contra virus.

33. ¿Qué efecto tiene la radiación en los microorganismos?

Microondas: efectos térmicos.

Rayos UV: causa roturas en el ADN

Ionizante: produce electrones y especies moleculares reactivas, degrada polímeros, es muy

penetrante

34. ¿Qué se entiende por agente microbiano?

Es aquella herramienta o técnica que se emplea para eliminar o inhibir los microorganismos de un
medio, generalmente es un producto químico.

35. ¿Qué diferencia existe en la acción de agente microbicida, un agente estático? Mencione
ejemplos de cada uno de ellos dependiendo del blanco específico.

El agente microbicida se encarga de eliminar, es decir, matar los microorganismos mientras que un
agente estático solo los inhibe; como ejemplo de agentes microbicidas tenemos: bactericidas,
fungicidas y viricidas. Y como ejemplos de agentes estáticos tenemos: bacteriostático, fungistático
y virio estático.

36. ¿Qué diferencia existe en la acción de agente bactericida, un agente bacteriostático y un

agente bacteriolítico?

Bactericida: matan a las células, pero no hay lisis, se unen fuertemente a su sitio de acción y no se
eliminan por dilución.

Bacteriostático: inhibe el crecimiento, pero las células no mueren, inhiben la síntesis de proteínas
y se unen a ribosomas; al disminuir la concentración del agente, el crecimiento es continuo.

Bacteriolítico: muerte celular por lisis y lesiones en la membrana celular.

37. ¿Qué se entiende por toxicidad selectiva? ¿Cuál es su importancia?

Es saber que agente microbiano aplica para controlar un microorganismo pero que este no
contraiga efectos colaterales a otras formas de vida que no sean agentes infecciosos, además que
no destruya o deterioré la fauna, la importancia se basa que este debe ser toxico para los agentes
infecciosos, pero no para los animales y personas ni corrosivos con los materiales.

38. ¿Qué factores que influyen sobre la efectividad de los agentes antimicrobianos?
Tamaño poblacional, composición poblacional, concentración actividad del agente microbiano,
duración de la exposición, temperatura, ambiente local.

39. ¿En qué consisten las técnicas de dilución en tubo y de difusión en agar utilizadas para calcular
la concentración mínima inhibitoria?

Es el análisis define la concentración inhibitoria mínima IMC, una serie de concentraciones

crecientes de agente antimicrobiano se prepara en el medio de cultivo. Cada tubo se inocula con
una concentración específica de organismo de prueba, seguido de un crecimiento del período de
incubación definido. medido como turbiedad, se produce en aquellos tubos con concentraciones
de agentes antimicrobianos por debajo del IMC.

Difusión en agar: El agente antimicrobiano se difunde del disco de papel al agar circundante,
inhibiendo el crecimiento de microorganismos susceptibles.

40. Nombre cinco antisépticos de uso común, su aplicación y modo de acción.

Alcohol: piel, desnaturaliza proteína y disuelve lípidos.

Compuestos con fenol: jabones, lociones, cosméticos; altera la membrana celular.

Detergentes catiónicos: jabones, lociones; interacciona con los fosfolípidos de la membrana.

Peróxido de hidrogeno: piel; agente oxidante.

Nitrato de plata: ojos de niños recién nacidos para prevenir enfermedades; precipita proteínas.

41. Nombre cinco desinfectantes y esterilizantes de uso común, su aplicación y modo de acción.

Alcohol: instrumental médico y superficies de laboratorio, desnaturaliza proteína y disuelve

lípidos.

Compuestos con fenol: alimentos y equipos de industria; altera la membrana celular.

Gas cloro: desinfectante para suministros de agua; agente oxidante.

Compuestos clorados: equipos de industria, alimentos y lácteos; agente oxidante.

Sulfato de cobre: alguicida para piscinas, suministros para el agua; precipita proteínas.

42. Mencione cinco aplicaciones industriales del uso de agentes químicos antimicrobianos.

Energía eléctrica: Evita el crecimiento de bacterias en condensadores y equipos de refrigeración.

Energía nuclear: Evitan el crecimiento de bacterias resistentes a la radiación en reactores

nucleares.

Petróleo: evitan el crecimiento de bacterias durante la recuperación, y el almacenamiento de

petróleo y sus derivados.

Textil. Evitan el bio deterioro producido por los microorganismos en tejidos expuestos en el
ambiente.

Papel: evitan microorganismos durante la producción.

43. ¿Qué se entiende por compuestos análogos a factores de crecimiento y cuál es su función en el
control microbiológico?

Sustancias químicas requeridas en el medio porque el organismo no las puede sintetizar.

44. ¿Qué se entiende por compuestos antibióticos y cuál es su función en el control

microbiológico?

Son compuestos químicos producidos por microorganismos que inhiben o matan a otros
microorganismos. Son de gran impacto en el tratamiento de enfermedades infecciosas. Algunos
han sido modificados químicamente para aumentar su eficacia. Algunos son de amplio espectro
(afectas gran variedad de microorganismos). Mayor sensibilidad en bacterias Gram +. Su origen
puede se natural o biológico y semisintético.

45. Explique cómo es el mecanismo de acción de los antibióticos.

En general los antibioticos alteran la biología de los microorganismos a los que se esta tratando de
controlar. Los antibioticos pueden: Inhibir la síntesis de la pared celular, Desorganización de la
membrana citoplasmática, Inhibición de la síntesis de proteínas, Interferencia en la síntesis y/o
metabolismo de los ácidos nucleicos(Interfiriendo la replicación del ADN,Impidiendo la
transcripción,Inhibiendo la síntesis de metabolitos esenciales), entre otros.

Taller Biología General

III UNIDAD. Biotecnología microbiana.

Tema: Nutrición Metabolismo y Crecimiento microbiano

1.¿Por qué es importante conocer el metabolismo microbiano?

Porque el metabolismo bacteriano tiene un papel muy importante en nuestras vidas y en la vida
de los demás organismos que habitan la tierra. El metabolismo es importante ya que es un
conjunto de reacciones por el cual los microorganismos van a captar su energía y su alimento para
sobrevivir, y asi interferir por ejemplo en los procesos biogeoquímicos y en procesos
indispensables para la vida humana.

2. Mencione los principales requerimientos de tipo nutricional, condiciones físicas y químicas que
los organismos requieren para llevar a cabo sus actividades metabólicas.

Principalmente la obtención de carbono para la construcción de su masa celular, pueden ser

autótrofos, heterótrofos y mixoforos. Para la conservación de su energía o en sus reacciones
biosintéticas, se obtienen de materia inorgánica y de compuestos organicos. Para la obtención de
su energía y para su crecimiento en necesario de la energía que se obtiene de agentes químicos
externos y obviamente de la energía del sol o de la luz.

3. ¿En qué consiste el proceso de nutrición?

Es una etapa de la alimentación, que consiste en el recorrido que hacen los nutrientes dentro de
nuestro cuerpo para ser degradados y así poder liberar la energía que contienen en sus enlaces
químicos. Pueden ser autótrofos (cuando el organismo tiene la capacidad de formar sus propios
alimentos al fotosintetizar )y Heterótrofa ( cuando toma los alimentos ya formados del medio).

4. ¿Cuáles son los elementos denominados macronutrientes y cuál es su utilidad?

Son aquellos nutrientes que suministran la mayor parte de la energía metabólica del organismo.
Los principales son glúcidos, proteínas, y lípidos, otros incluyen alcohol y ácidos orgánicos. Estos
proporcionan la energía y los materiales de construcción para las innumerables sustancias que son
esenciales para el crecimiento y la supervivencia de los organismos vivos.

5. ¿Cuáles son los elementos denominados oligoelementos y cuáles son sus principales funciones?

Los oligoelementos son bioelementos presentes en pequeñas cantidades en los seres vivos y tanto
su ausencia como su exceso puede ser perjudicial para el organismo, llegando a ser patológicos.
Además de los cuatro elementos de los que se compone mayoritariamente la vida (carbono,
hidrógeno, oxígeno y nitrógeno). Algunos son parte integral de los centros catalíticos en los que
suceden las reacciones necesarias para la vida. Los oligoelementos participan en la atracción de
moléculas de sustrato y su conversión en productos finales específicos. Ciertos oligoelementos
ceden o aceptan electrones en reacciones de oxidación o reducción. Varios oligoelementos tienen
funciones estructurales, proporcionan estabilidad y una estructura tridimensional a ciertas
moléculas biológicas importantes, otros ejercen funciones de regulación. Controlan procesos
biológicos importantes a través de ciertas acciones, entre ellas la activación hormonal, la unión de
moléculas con sus sitios receptores en las membranas celulares y la inducción de la expresión de
algunos genes.

6. ¿Qué diferencia existe entre los nutrientes esenciales, no esenciales y semiesenciales?

Los nutrientes esenciales se diferencian de los no esenciales en que, siendo ambos necesarios, los
primeros no pueden ser sintetizados por el organismo y han de ser ingeridos a través de la dieta,
mientras que los segundos son producidos por el organismo sin necesidad de incorporarlos de
fuera.

7. ¿Qué se entiende por metabolismo?

El metabolismo es el conjunto de reacciones que se llevan a cabo en el interior de las células de

todos los organismos. Esas reacciones se hacen responsables de convertir todos los alimentos que
ingerimos en la energía necesaria para hacer todas nuestras actividades.

8. ¿Qué diferencia existe entre los procesos catabólicos y anabólicos? De un ejemplo de cada uno
de ellos.

El catabolismo es la parte del metabolismo que consiste en la transformación de moléculas

orgánicas o biomoléculas complejas en moléculas sencillas y en el almacenamiento de la energía
química desprendida en forma de enlaces fosfato de moléculas de ATP, mediante la destrucción
de las moléculas que contienen gran cantidad de energía en los enlaces covalentes que la forman,
en reacciones químicas exotérmicas. El catabolismo es el proceso inverso del anabolismo. El
anabolismo o biosíntesis es una de las dos partes del metabolismo, encargada de la síntesis o bio
formación de moléculas orgánicas (biomoléculas) más complejas a partir de otras más sencillas o
de los nutrientes, con requerimiento de energía, al contrario que el catabolismo. En general el
catabolismo las moléculas grandes se hacen mas simples y pequeñas y en el segundo las moléculas
chicas se asocian para formar grandes moléculas. Ejm catabolismo: digestión, respiración celular,
ciclo de Krebs, etc. Anabolismo: fotosíntesis, mitosis, síntesis de proteinas.

9. ¿En qué se diferencian el catabolismo aerobio y anaerobio?

El catabolismo aerobio es una degradación total, donde los productos finales son moléculas
inorgánicas como CO2 y H2O, mientras que el catabolismo anaerobio es una fermentación que es
una degradación parcial donde producto final es una molécula orgánica done el ácido láctico en la
fermentación láctica y el etanol y el CO2- la fermentación alcohólica. El rendimiento energético de
la respiración aerobia de 1 molécula de glucosa es de unos 38 ATP, mientras que en la
fermentación es tan solo 2 ATP.

10. ¿Cómo se clasifican los microorganismos de acuerdo a la fuente de carbono, la fuente de

energía y la fuente de electrones o hidrógeno?

De acuerdo a la fuente de carbono se clasifican en: Autótrofos: organismos cuya fuente de

carbono la obtienen del CO2 del ambiente. Y Heterótrofos: organismos cuya fuente de carbono la
obtienen de otros compuestos organicos.

De acuerdo a la fuente de energía se clasifican en: Fotótrofos: organismos cuya fuente energética
es la luz. Y quimiótrofos: organismos cuya fuente energética se deriva de compuestos químicos.

De acuerdo a la fuente de electrones se clasifican en:

Los microorganismos que aceptan electrones y los que hacen reacciones de oxido-reducción

11. ¿Qué diferencia existe entre un microorganismo fotolitoautotrofo, fotoorganoheterotrofo,

quimiolitoautotrofo y quimioorganoheterotrofo? De un ejemplo de un microorganismo para cada
caso.

Los fotolitoautótrofos obtienen energía de la luz y el carbono de la fijación del dióxido de carbono,
usando compuestos inorgánicos como equivalentes reductores.ejm: Cyanobacteria (agua como
equivalente reductor).Los fotoorganotrofos obtienen energía de la luz y el carbono y los
equivalentes reductores para las reacciones biosintéticas de compuestos orgánicos. Algunas
especies son terminantemente heterótrofas, pero muchas otras pueden también fijar el dióxido de
carbono y son mixótrofas. Ejm: Chloroflexus (alterna con fotolitoautotrofía con hidrógeno). Los
qumiolitoautotrofos obtienen energía de la oxidación de compuestos inorgánicos y el carbono de
la fijación del dióxido de carbono. Ejem: bacterias nitrificantes. Los quimioorganoheterótrofos
obtienen energía, carbono y equivalentes reductores para las reacciones biosintéticas de
compuestos orgánicos. Ejem: Bacillus spp
12. Describa como se lleva a cabo una reacción de oxido-reducción. Indique en la reacción cual es
la molécula donadora y aceptora de electrones.

Se lleva a cabo cuando uno o más electrones se transfieren entre los reactivos, provocando un
cambio en sus estados de oxidación. El agente donador de electrones es el elemento químico que
tiende a captar esos electrones, quedando con un estado de oxidación inferior al que tenía, es
decir, siendo reducido. Y el agente aceptor de electrones es aquel elemento químico que
suministra electrones de su estructura química al medio, aumentando su estado de oxidación, es
decir siendo oxidado.

13. ¿Qué papel juegan las moléculas NADH, NADPH y FADH2 en el metabolismo de los
microorganismos? Describa su estructura química e identifique la forma reducida y la forma
oxidada.

el NAD+ está implicado en reacciones de reducción-oxidación, llevando los electrones de una a

otra. Debido a esto, la coenzima se encuentra en dos formas: como un agente oxidante, que
acepta electrones de otras moléculas. Actuando de ese modo da como resultado la segunda forma
de la coenzima, el NADH, la especie reducida del NAD+. es la forma reducida en la reacción de
óxido-reducción (Redox) del NADP+. Implicada en el anabolismo celular, interviene en la síntesis
de ácidos nucleicos y de lípidos. Es una coenzima que en el ciclo de Calvin, con gasto de ATP, fija el
dióxido de carbono (CO2) en carbono orgánico con liberación de oxígeno. El FAD es una coenzima
que interviene como dador o aceptor de electrones y protones (poder reductor) en reacciones
metabólicas redox; su estado oxidado (FAD) se reduce a FADH2 al aceptar dos átomos de
hidrógeno (cada uno formado por un electrón y un protón). es una molécula compuesta por una
unidad de riboflavina (vitamina B2),3 unida a un pirofosfato (PPi), éste unido a una ribosa y ésta
unida a una adenina. Por tanto, la molécula es en realidad ADP unido a riboflavina; o también AMP
unido a la coenzima FMN.

14. Mencione los principales compuestos ricos en energía que participan en el metabolismo de los
microorganismos. ¿En que radica su importancia?

R= fosfoenolpiruvato, Acetil CoA, acetil fosfato, adenosina todos estos ayudan a formar enlaces
ricos en energía (ATP).

15. Mencione los procesos anaeróbicos y aeróbicos que utilizan los microorganismos para la
producción de energía.

Procesos anaeróbicos como la fermentación y el glucolisis; y procesos aeróbicos como la cadena

de electrones y el ciclo de Krebs.

16. ¿En qué consiste el proceso denominado “Glucolisis”? Describa cada una de las reacciones que
se llevan a cabo y las enzimas que participan en el proceso. Identifique las moléculas de entrada y
las moléculas de salida del proceso completo.

Es un proceso mediante el cual una molécula de glucosa se escinde en dos moléculas de piruvato,
da como resultado dos moléculas de ATP a partir de dos moléculas de ADP y Pi y dos moléculas de
NADH a partir de NAD+. La reacción se genera como: glucosa+2ATP+2ADP+2Pi+2NAD+ = 2 Acido
puvirico+ 2ADP+4ATP+2NADH+2H (+) +2H2O.
 17. Describa los procesos de fermentación alcohólica y láctica. ¿Cuál es su importancia a nivel
industrial?

Comienza después de que la glucosa entra en la celda. La glucosa se degrada en un ácido pirúvico.
Este ácido pirúvico se convierte luego en CO2 y etanol. Los seres humanos han aprovechado este
proceso para hacer pan, cerveza, y vino. En estos tres productos se emplea el mismo
microorganismo que es: la levadura común o lo Saccharomyces cerevisae. FL…Por cada molécula
de glucosa que se oxida mediante glucólisis dos moléculas de NAD son reducidas a NADH, y se
obtienen dos piruvato y dos moléculas de ATP. En los organismos fermentadores, dada la
imposibilidad de utilizar el poder reductor generado en forma de NADH en la cadena
transportadora de electrones, se recurre a la reducción de un sustrato endógeno (esto es, un
producto del propio metabolismo), como forma de reciclar el NADH en NAD para permitir que el
glucólisis continúe y se siga generando ATP. intervienen en la fabricación del queso, yogurt, etc.

18. ¿Qué sucede en el proceso de “Descarboxilación oxidativa” que se lleva a cabo antes del inicio
del ciclo de Krebs?

El piruvato pierde dióxido de carbono para formar acetil coenzima A. Durante el proceso el grupo
carboxilo del piruvato se libera como dióxido de carbono (CO2). A este proceso de
descarboxilación lo acompaña un proceso de deshidrogenación (oxidación), mediante el cual el
resto de la molécula de piruvato termina conformando el grupo acetilo (de dos átomos de
carbono) del acetil-CoA. El aceptor último de electrones de esta secuencia de reacciones es el
NAD+, que se reduce generando NADH y H+. Cuando concluye esta etapa, el acetil-CoA ingresa al
ciclo de Krebs. Al final, las descarboxilación oxidativas o DO genera 2 moléculas de NADH, lo que
sería igual a 6 moléculas de ATP.

19. ¿En qué consiste el proceso denominado “Ciclo de los ácidos tricarboxilicos”? Describa cada
una de las reacciones que se llevan a cabo y las enzimas que participan en el proceso. Identifique
las moléculas de entrada y las moléculas de salida del proceso completo

El ciclo se puede dividir en tres etapas según el tamaño de sus intermedios, se separan entre sí por
dos reacciones de carboxilación (reacción en la que los grupos carboxilo se pierden como CO2). El
complejo piruvato deshidrogenasa forma acetil-CoA a través de la oxidación del piruvato.

20. ¿Cuál es el rendimiento energético del Ciclo de Krebs?

Aunque el ciclo de Krebs no tiene un gran rendimiento energético en forma de ATP, sí obtiene
nucleótidos reducidos de los que obtendrá más ATP posteriormente, 4CO2, 6NADH, 2FADH2,
2ATP.

21. ¿Qué diferencia existe entre proceso de fosforilación a nivel de sustrato y el de fosforilación
oxidativa?

fosforilación a nivel de sustrato: es una reacción química que se puede definir como la producción
de ATP (o GTP) a partir de ADP (o GDP) combinada a una transformación enzimática de un
sustrato, reacción en la que no está implicada la fosforilación oxidativa ni una ATP sintasa. Lo que
generalmente ocurre es que un sustrato de alta energía fosfatado, cede su fosfato de alta energía
al ADP.

Fosforilación oxidativa: es un proceso metabólico que utiliza energía liberada por la oxidación de
nutrientes para producir adenosina trifosfato (ATP). Se le llama así para distinguirla de otras rutas
que producen ATP con menor rendimiento, llamadas "a nivel de sustrato". Se calcula que hasta el
90% de la energía celular en forma de ATP es producida de esta forma.

22. Describa brevemente el proceso de fosforilación oxidativa. ¿Cuál es el rendimiento energético

de este proceso?

En el pasaje a lo largo de toda la cadena de transporte de electrones, se desprenden grandes

cantidades de energía libre que impulsan el bombeo de protones (iones H+) hacia el exterior de la
matriz mitocondrial.

23. ¿Cuál es el papel de las proteínas transportadoras de electrones y de la proteína ATP

sintetasa?

Cuando los protones pasan a través del complejo de ATP sintetasa, la energía liberada se utiliza
para formar moléculas de ATP a partir de ADP y fosfato inorgánico.

24. ¿Para qué procesos utilizan los microorganismos la fuerza motriz generada por los protones?

Genera energía en forma de ATP. Movimiento de rotación de los flagelos. Transporte activo.

25. ¿En qué consiste el proceso denominado “Fotosíntesis”? Identifique las moléculas de entrada y
las moléculas de salida del proceso completo.

la energía lumínica es capturada y se convierte en energía química y el carbono se fija en

compuestos orgánicos. De entrada, se aprecian moléculas de agua y dióxido de carbono y de salida
oxigeno más formaldehido.

26. ¿Qué diferencia existe entre proceso de fotosíntesis aerobia y anaerobia? De ejemplos de
microorganismos que llevan a cabo estos procesos.

también llamadas fotosíntesis oxigenica y anaoxigenica, la primera trata de la presencia de

oxígeno en la reacción mientras que en la segunda se sustituye este con otros elementos como
ejemplo el azufre; ejemplos claros de organismos que presente la primera son plantas, algas y
cianobacterias; mientras en el otro podemos hallar bacterias purpuras y verdes del azufre.

27- Describa las reacciones que se llevan a cabo durante la fase luminosa de la fotosíntesis.

En los procariotas fotosintéticos, que no contienen organelas internas, los tilacoides pueden
formar parte de la membrana celular, aparecen aislados en el citoplasma o constituir, como en el
caso de las cianobacterias, una compleja estructura de la membrana interna. Se convierte la
energía luminosa en química en forma de ATP y NADPH.

28. ¿Cuál es el papel de las proteínas transportadoras de electrones y de la proteína ATP

sintetasa?
el papel que proporcionan es generar una brecha o camino por donde se puedan desplazar los H+,
para esto la ATPasa funciona como catalizador de la protina y logra acelerar el proceso de
transporte de las H+.

29. Describa las reacciones que se llevan a cabo durante la fase oscura de la fotosíntesis.

a partir de H2O, CO2 y la energía de ATP se forman glúcidos. Y la reacción se forma de la siguiente
manera: 6CO2 + 6H2O = C6H12O6 + 6 O2

30. ¿En qué consiste el proceso denominado “Ciclo de Calvin”? Describa cada una de las
reacciones que se llevan a cabo y las enzimas que participan en el proceso. Identifique las
moléculas de entrada y las moléculas de salida del proceso completo.

consiste en la explicación del proceso en el que se basa ya formados el ATP y el NAD(P)H en la

primera etapa utilizan para reducir el carbono del dióxido de carbono a un azúcar simple. La
incorporación inicial deCO2 en compuestos orgánicos se conoce como fijación del carbono.

Según el ciclo inicia con la reacción de agua más dióxido de carbono y entra en el proceso de
carboxilación, generando 3- fosfoglicerato en el cual entra en otra reacción con el ATP + NADPH;
durante esto se da un producto externo del ciclo que es NADP+; y Pi + ADP, luego se genera una
reacción de reducción y se obtiene el glicerolaldehido-3-fosfato que es atacado por así decirlo por
un ATP y este provoca la regeneración del ciclo + un ADP.

31- ¿Qué se entiende por crecimiento microbiano?

Entendemos por crecimiento microbiano el aumento del número de microorganismos a lo largo

del tiempo. Por tanto, no nos referimos al crecimiento de un único microorganismo que
denominaremos ciclo celular, sino al demográfico de una población.

32. ¿Por qué es importante conocer el crecimiento de las poblaciones microbianas?

entender cómo se produce el crecimiento microbiano es importante para poder evitar o reducir
sus efectos nocivos y potenciar los beneficiosos o aplicados.

33. Explique el proceso de reproducción en procariotas. ¿Cómo se sintetiza la nueva pared celular?

A lo largo del ciclo celular tiene lugar la replicación del material genético, la síntesis de
componentes celulares, la elongación de la bacteria para alcanzar un tamaño doble de la inicial y
su división por bipartición para dar lugar a dos células hijas.

34. Defina los siguientes conceptos: generación, tiempo de generación, velocidad de crecimiento.

Generación: es el tiempo transcurrido dividido el tiempo de generación.

Tiempo de generación: es el tiempo transcurrido dividido el número de generaciones.

Velocidad de crecimiento: es el incremento de generaciones en determinado tiempo.

35. ¿En qué consiste el modelo de crecimiento en lote?

Es la forma de cultivar más evidente dependiendo de los parámetros de crecimiento: se llena un
recipiente con medio de cultivo, se inocula con una concentración inicial de biomasa Cb0 y se deja
crecer. Una vez que se detiene el crecimiento se abre el recipiente y se "cosecha" la biomasa.

En estas condiciones, un cultivo pasa por diferentes fases

36. Grafique y describa cada una de las fases del crecimiento microbiano

Latencia:Cuando una población bacteriana es inoculada en un medio fresco el crecimiento no

suele comenzar d inmediato, sino después de un tiempo llamado latencia. La fase de latencia
representa un periodo de transición para los microorganismos cuando son transferidos a una
nueva condición. En esta fase se producen las enzimas necesarias para que ellos puedan crecer en
un nuevo medio ambiente. En esta fase no hay incremento de células, pero hay gran actividad
metabólica, aumento en el tamaño individual de las células, en el contenido proteico, ADN y peso
seco de las células.

Exponencial o logarítmica:Es el periodo de la curva del crecimiento en el cual el microorganismo

crece exponencialmente, es decir que cada vez que pasa un cierto tiempo de generación la
población se duplica. Bajo condiciones apropiadas la velocidad de crecimiento es máxima. Las
condiciones ambientales afectan la velocidad de crecimiento exponencial.

Fase estacionaria: En cultivos en recipientes cerrados una población no puede crecer

indefinidamente de forma exponencial. Las limitaciones de crecimiento ocurren ya sea por
agotamiento de algún nutriente esencial, por acumulación de productos tóxicos, porque se
alcance un número de células elevado para el espacio disponible o por combinación de las causas
anteriores.

Fase de muerte: Si la incubación continua después de que una población microbiana alcanza la
fase estacionaria, las células pueden continuar vivas y seguir metabolizando, pero va a comenzar
una disminución progresiva en el número de células viables, y cuando esto ocurre se dice que la
población ha entrado en fase de muerte.
37. Resuelva:

Al tiempo 0 se tienen 10 millones de células y después de 2 horas se tienen 40 millones de

células. Calcule el tiempo de generación.

Tiempo de generación será de 30 min.

Si se tiene un tiempo de generación de 20 minutos y se inicia un cultivo con 5 células, ¿Cuántas

células se tienen en 200 minutos?

En 200 min habrá 100 celulas.

Un cultivo contiene 17x108 células y un tiempo de generación de 6 horas ¿Cuántas células

tendrá este cultivo después de 6 generaciones?

Si una población bacteriana se incrementa desde 102 hasta 1011 células en 20 horas. Calcule el
tiempo de generación.

38. ¿En qué cosiste el método de reconteo directo de células? ¿Cuáles son las ventajas y
desventajas de este método?

Recuento microscópico: Es una técnica común, rápida y barata que utiliza un equipamiento
fácilmente disponible en un laboratorio de microbiología. Para estos recuentos se utilizan
generalmente cámaras de recuentos, aunque también pueden realizarse a partir de muestras
filtradas en membranas y transparentadas o teñidas con colorantes fluorescentes (Naranja de
acridina).

La mayor dificultad del recuento en cámara es obtener reproducibilidad en el llenado de la cámara

con líquido. Otra dificultad es la adsorción de las células en las superficies del vidrio, incluyendo
pipetas. Esta adsorción es crítica en el proceso de dilución de la muestra y se minimiza al realizar
las diluciones en medios de alta fuerza iónica (solución fisiológica o medios mínimos sin fuente de
carbono).

39. Se tiene un cultivo de 5ml y de este se toman 20 μL para el conteo de células utilizando una
dilución de 1/100. Después de realizar el conteo de los 4 cuadrantes 4x4, se obtienen los
siguientes resultados: 329 células vivas y 137 células muertas. Calcule: El número de células por
mL, el número de células totales y el porcentaje de viabilidad.

40. ¿Qué diferencia existe entre el conteo de celular totales por el método de peso húmedo y el
método de peso seco? ¿Cuáles son las ventajas y desventajas de cada metodo?

El peso húmedo se obtiene a partir de una muestra en suspensión que es pesada luego de la
separación de las células por filtración o por centrifugación. La ventaja es que se usa para grandes
volúmenes de muestra. Y la principal desventaja es que el diluyente queda atrapado en el espacio
intercelular e interviene en el peso total de la muestra.

En el peso seco la cantidad total de la biomasa en una muestra puede medirse en peso seco por
unidad de volumen. La principal desventaja es que su determinación incluye no solamente
microorganismos vivos sino también microorganismos muertos.

41. Explique en qué consiste el conteo electrónico de células utilizando el contador de Coulter.
¿Cuáles son las ventajas y desventajas de este método?

Un contador Coulter típico posee uno o más microcanales que conectan dos cámaras conteniendo
una solución electrolítica sobre las cuales hay aplicada una diferencia de potencial. La solución es
forzada a fluir de una cámara a otra, arrastrando consigo las partículas en suspensión que al
atravesar el microcanal producen un breve cambio en la resistencia del líquido. El contador
detecta estos cambios en la resistencia eléctrica.

Las células, al tratarse de partículas muy poco conductoras, alteran la sección conductiva del
microcanal, causando que la resistencia entre los extremos del microcanal aumente y por lo tanto
provocando que la corriente eléctrica que atraviesa el canal disminuya por un breve período de
tiempo.Al llevar un registro de los pulsos que ocurren en la corriente eléctrica, se puede contar el
número de partículas presentes en un determinado volumen de fluido. La amplitud del cambio en
la corriente que atraviesa el microcanal se encuentra directamente relacionado al volumen de la
partícula, permitiendo medir la distribución del tamaño de las partículas contadas.

42. Defina los siguientes conceptos: Célula viable, colonia, unidad formadoras de colonias.

Celula viable: la que tiene la capacidad de formar colonias.

Colonia: es un grupo de seres vivos que son organizados y cooperando entre todos para
alimentarse, obtener energía y sobrevivir.

Unidad formadoras de colonias: es una unidad de medida que se emplea para la cuantificación de
microorganismos, es decir, para contabilizar el número de bacterias o células fúngicas viables en
una muestra líquida o sólida.

43. ¿Qué diferencia existe entre el método de extensión en placa y el método de vertido en placa
para el conteo de células?

En el método de vertido en placa, las muestras diluidas se mezclan con agar fundido y se vierten
en placa. Algunas colonias quedarán embebidas en el agar y otras creceran en la superficie. Las
colonias superficiales se extenderán y serán más grandes. En el segundo método (extensión en
placa), las muestras diluidas se siembran directamente en la superficie de la placa de agar,
extendiéndolas con avuda de un asa de Diralsky de cristal estéril. La suspensión se absorbe en el
agar, dejando las células microbianas sobre la superficie. En ambas técnicas las placas se incuban
hasta la aparición de las colonias. Como en el método de siembra por estría, no existe la seguridad
de que las colonias que aparecen en las placas sembradas por extensión o en el agar solidificado
sembrado por el método del vertido en placas sean cultivos axénicos hasta que se repita el
proceso.

44. Explique cómo se realiza el conteo de células viables utilizando membranas filtradoras.

Los filtros de membrana son filtros de superficie, que muestran una estructura microporosa
precisa. Durante la filtración las partículas mayores que los poros de la membrana son retenidas
de forma fiable en la superficie de la misma. Las particulas más pequeñas pueden pasar el filtro.

El número de coliformes totales presentes en el agua se determina mediante la filtración de

volúmenes específicos de la muestra a través de filtros de membrana. Por lo general, están
compuestos de ésteres de celulosa, típicamente con poros de 0,45 mm de diámetro que retienen
los coliformes totales y otras clases de bacterias presentes en la muestra. Después se incuban las
membranas vueltas hacia arriba en un medio selectivo. En la práctica, la técnica de filtración de
membrana ofrece resultados comparables a los que se obtienen con el método de tubos
múltiples.

45. ¿Cuáles son las ventajas y las desventajas del conteo de células viables en placa?

Debido a que una muestra no es totalmente homogénea con respecto a su composición

microbiológica, es posible que una colonia se origine de un microorganismo o de cientos de ellos,
dando en este último caso un recuento menor del real.

posible que una colonia se origine de un microorganismo o de cientos de ellos, dando en este
último caso un recuento menor del real. También es posible que muchas de las bacterias
presentes en la muestra no puedan crecer en las condiciones elegidas (pH, temperatura, medio de
cultivo, tiempo, etc.). En este caso el recuento también será inferior al real. Lo que si se sabe es
que cada colonia observada se formó a partir de por lo menos un microorganismo. Esta es una
condición necesaria y suficiente. Entonces la colonia es considera una unidad formadora de
colonia (ufc) a los efectos de los cálculos.
46. ¿En qué consiste el método de Turbidez para la medición indirecta del crecimiento de cultivos
microbianos?

47. ¿Qué se entiende por cultivo continuo? ¿Cuáles son los requerimientos para mantener un
cultivo de este tipo? ¿En qué momento el cultivo alcanza el estado de equilibrio?

48. ¿Qué diferencia existe entre un cultivo continuo y el cultivo discontinuo o por lote?

49. ¿Qué es un Quimiostato? ¿Qué factores determinan la velocidad de crecimiento y la

producción de células?

50. ¿Qué es un Turbidostato?