Departamento de Ciencias Básicas

Taller Espectrofotometría

I. Ley de Beer

1. Las aminas (bases débiles) forman sales con el ácido pícrico (trinitrofenol) y todos los
aminopicratos exhiben un máximo de absorción a 539 nm con un coeficiente de extinción molar
de 1,25 x 104. Una muestra de 0,200g de anilina (C6H5NH2) se disuelve en 500 mL de agua. Una
alícuota de 25 mL de esa solución se hace reaccionar con ácido pícrico en un matraz volumétrico
de 250 mL diluyendo hasta el aforo. Una alícuota de 10 mL de esa solución es diluida a 100mL y
la absorbancia leída es de 0,425. ¿Cuál es el % de pureza de la anilina?

2. Una disolución de una sustancia pura Z (PM= 180,0 g/mol) de concentración 1,43X10 -4 M tiene
A= 0,572. Una disolución obtenida a partir de 0,1358 g de un preparado farmacéutico, que
contiene a la sustancia Z en 1L de agua presenta una A=0,362.

El porcentaje de %Z de la muestra es:

3. Una solución de sal de cobalto presenta un porcentaje de transmitancia igual a T=45% en una
celda de 1 cm de paso óptico a 505 nm.

¿Cuál es su concentración en ppm de Co2+ sí a esa longitud de onda la absortividad molar del ion
Co2+ es igual a 4,50? (Co 58.93 g/mol) .

4. Una solución coloreada se diluye con agua en una proporción de 1:4 y se lee la transmitancia a
λmax del colorante en una celda de 1 cm de paso óptico, obteniéndose T= 30%. Una solución patrón
del colorante de concentración 200 ppm presenta T=25% a la misma λmax y en la misma celda.
Determine la concentración (ppm) del colorante en la solución inicial.

5. Un compuesto de masa molecular 292.16 se disuelve en un matraz aforado de 5mL. Se toma

una alícuotade 1,0mL que se pasa a otro matraz de 10mL y se afora. La absorbancia a 340nm en
una celda de 1cm es de 0.427. El coeficiente de absortividad de este compuesto a 340nm es
6130M-1 cm-

¿Cuántos mg del compuesto se usaron para preparar la disolución de 5mL?

II. Aplicaciones de la Espectrofotometría

Análisis de una Mezcla

7. Las concentraciones de Fe3+ y Cu2+ en una mezcla pueden ser determinadas siguiendo una
reacción con hexacianorutenato (II), Ru(CN)64-, el cual forma un compuesto azul con Fe3+ (λ max =
550nm) y verde con Cu2+ (λmax = 396nm). Los coeficientes de absortividad molar (M-1 cm-1) para los
complejos metálicos se encuentran en la siguiente tabla.

Metal ε550 ε396

(M-1cm-1) (M-1cm-1)
3+
Fe 9970 84
Cu2+ 34 856

Cuando una muestra que contiene Fe3+ y Cu2+ es analizada en una celda de 1cm, la absorbancia a
550nm es de 0.183 y la absorbancia a 396nm es de 0.109.

Las concentraciones molares de Fe3+ y Cu2+ en la muestra son respectivamente:

Curvas de Calibración

8. El amoniaco se puede determinar espectrofotométricamente por reacción con fenol en

presencia de hipoclorito, generando un producto azul que tiene una longitud de absorción máxima
en 625nm.

Una muestra de 4.37mg de proteína se digiere químicamente para convertir su nitrógeno en

amoniaco, y a continuación se diluye a 100mL. Se pasan 10mL de la disolución resultante a un
matraz aforado de 50mL y se tratan 5mL de disolución de fenol y 2mL de disolución de hipoclorito
de sodio. Se diluye hasta 50mL y se mide la absorbancia a 625nm, en una celda de 1cm.

Como referencia se prepara una disolución estándar con 0.010 g de NH4Cl (PM 53.49 g/mol)
disueltos en 1L de agua. A continuación, 10mL de este patrón se colocan en un matraz volumétrico
de 50mL y se analiza de la misma manera que el problema. Se prepara un blanco usando agua
destilada en lugar de la muestra.

Muestra Absorbancia a 625nm

Blanco 0.140
Referencia 0.308
Problema 0.592

El porcentaje de nitrógeno en la muestra es:

9. En la cuantificación de quercetina (C15H10O7 pm= 302g/mol) en una crema antiedad se empleó
un método colorimétrico, se realizó una curva de calibración con un patrón de quercetina a las
concentraciones molares de la tabla, obteniendo la ecuación de la recta de la figura 1.

Una disolución obtenida a partir de la muestra comercial que contiene quercetina en 100mL de
agua presentó una A=0,162. Cuál es el contenido de quercetina en mg en la muestra?

10. El hierro es determinado espectrofometricamente mediante la reacción con 1,10-fenantrolina

para producir un complejo que absorbe a 510 nm. Se preparó una disolución patrón de Hierro (II)
disolviendo 0.0702 g de (NH4)2Fe(SO4)2•6H2O (PM= 392,1 g/mol) en 1 L de agua. Se prepararon
una serie de disoluciones estándar transfiriendo alícuotas de 1,5, 2,5, 5,5, y 12,0 mL de la
disolución Stock a balones aforados de 200 mL, adicionando también cloruro de hidroxilamina y
fenantrolina, y completando con agua hasta el aforo.

Una muestra es adicionada a un balón aforado de 200 mL y se trató de la igual forma. Si las
absorbancias mostradas en la tabla fueron leídas frente al blanco a 510 nm, ¿Cuántos miligramos
de Fe2+(PM= 55,85 g/mol) hay en la muestra?

Disolución Absorbancia
1 0,060
2 0,100
3 0,222
4 0,486
Muestra 0,148
11. Para realizar la determinación de hierro en muestras minerales, se utilizó un método analítico
en el cual a partir de la formación de un complejo orto-fenantrolina-hierro y su posterior
cuantificación por espectrofotometría a una λ=510nm se puede conocer el contenido de dicho
metal.

Una serie de soluciones estándar de hierro muestran los siguientes resultados:

[Fe] A

ppm (a.u.)
0.00 0
1.00 0.183
2.00 0.364
3.00 0.546
4.00 0.727

5.00mg de un mineral desconocido, fueron disueltos en 100mL de un ácido y posteriormente

fueron transferidos a un balón de 500mL y completado a volumen con agua. Después, una alícuota
de 25mL fue diluía en un balón aforado de 100mL. La absorción de la solución cuando es sometida
al mismo método analítico fue de 0.432 a.u.

El porcentaje p/p% de hierro en el mineral es: