OBSERVACION Y RECUENTO DE CELULAS SANGUINEAS

OBJETIVOS

1. Conocer los diferentes tipos de células sanguíneas y diferenciar sus funciones.

2. Observar las características morfológicas de los diferentes tipos de células

sanguíneas observadas en el microscopio óptico e identificarlas.

ENLACES RECOMENDADOS

http://teaching.anhb.uwa.edu.au/mb140/

INTRODUCCION
Las células sanguíneas forman un 40% de la composición de la sangre y existen
tres tipos: leucocitos, eritrocitos y plaquetas. Los leucocitos son células que están
principalmente en la sangre y circulan por ella con la función de combatir las
infecciones o cuerpos extraños; pero en ocasiones pueden atacar los tejidos
normales del propio cuerpo. Es una parte de las defensas inmunitarias del cuerpo
humano.

La hemoglobina es una proteína que contiene hierro lo que le da el color rojo a la

sangre, por ello el nombre de glóbulos rojos o Eritrocitos: eritro (rojo) +
citos(células).Las plaquetas son células de la sangre producidas por los
megacariocitos en la médula ósea mediante el proceso de fragmentación
citoplasmática, circulan por la sangre y tienen un papel muy importante en la
coagulación. Son los componentes celulares más pequeños de la sangre. Las
células sanguíneas las podemos identificar por medio de la realización de un
frotis.

La hematopoyesis consiste en la generación de todas las células sanguíneas a

partir de la célula troncal hematopoyética (CTH), también denominada célula
madre o célula tallo. La CTH tiene un potencial de proliferación muy amplio, y
tiene una capacidad multipotencial, es decir, tiene la capacidad de originar a
células sanguíneas de los tres linajes: mieloide, eritroide y linfoide. El estudio de la
hematopoyesis ha adquirido una gran relevancia desde hace algunos años por el
surgimiento de la terapia celular, en donde se manipula el potencial y el destino
celular para la aplicación clínica.

En la sangre se encuentran los leucocitos o glóbulos blancos que son las células
móviles del sistema inmunitario. Todos ellos difieren en cuanto a su función y
morfología. Los leucocitos no desempeñan sus funciones cuando se encuentran
en sangre, sino cuando abandonan ésta y entran a los tejidos linfoides o a las
zonas donde hay inflamación intensa. En este sentido, la sangre es un medio de
transporte, que le permite a las células sanguíneas recircular entre los diferentes
tejidos del cuerpo. Normalmente en sangre se encuentran cinco tipos de
leucocitos: monocitos, linfocitos, neutrófilos, eosinófilos y basófilos. Además de
estas células, se encuentran presentes las plaquetas, que son fragmentos
citoplasmáticos de los megacariocitos que se asientan en la médula ósea. Los
leucocitos se estudian en preparaciones coloreadas por dos razones: a fin de
determinar la apariencia normal o anormal de las células y sus porcentajes
relativos en el diagnóstico de ciertas enfermedades. El recuento de eritocitos y
leucocitos es uno de los métodos de rutina.

La sangre está formada por diversos componentes:

Glóbulos Rojos o Hematíes

Son las células sanguíneas más numerosas y la hemoglobina que contienen es la

responsable de su color rojo. Se forman en la médula ósea, que se halla dentro
de los huesos del esqueleto, desde donde son liberados en el torrente sanguíneo.

Su función es transportar el oxígeno desde los pulmones a los diferentes tejidos

del cuerpo para que las células respiren, y también eliminan los residuos
producidos por la actividad celular (anhídrido carbónico).

Glóbulos Blancos o Leucocitos

Son los encargados de proteger al organismo contra los diferentes tipos de

microbios. Cuando hay una infección aumentan su número para mejorar las
defensas. Unos se forman en la médula ósea y otros en el sistema linfático (bazo,
ganglios). Los leucocitos mas frecuentes en el tejido conectivo son les eosinofilos,
basofilos y neutrofilos.

Plaquetas

Son las células sanguíneas más pequeñas. Se producen también en la médula

ósea y viven unos 6-7 días. Las plaquetas intervienen cuando se produce una
rotura en alguna de las conducciones de la sangre. Se adhieren rápidamente al
lugar de ruptura para que cese la hemorragia, dando tiempo a la formación del
coágulo definitivo.

El Plasma

Es un líquido compuesto de agua, proteínas, sales minerales y otras sustancias

necesarias para el funcionamiento normal del organismo y en donde se
encuentran "nadando" las células sanguíneas.

Entre las sustancias de importancia que transporta el plasma están las siguientes.

 La Albúmina
Es una proteína que ayuda a mantener el agua del plasma en una
proporción equilibrada.
 Las Globulinas
Son los anticuerpos encargados de la defensa de nuestro organismo frente
a las infecciones. Su disminución acarreará una bajada de defensas.
 Factores de Coagulación
Son imprescindibles para evitar las hemorragias. La ausencia de algún
factor de coagulación puede ocasionar trastornos hemorrágicos ya que se
dificulta la formación del coágulo.
 Otras proteínas transportan sustancias necesarias para el normal
funcionamiento de las células (grasas, azúcares, minerales, etc).

CITOMETRIA

La citometría (Cito=célula, metría=medición) es el análisis de las características de

células ya sea mediante inspección al microscopio, o midiendo de manera
automatizada propiedades particulares de las células.
CITOMETRIA DE FLUJO

Es una técnica de análisis celular que implica medir las características de

dispersión de luz y fluorescencia que poseen las células conforme se las hace
pasar a través de un rayo de luz. Para poder realizar su medición las células
deben encontrarse individualmente en suspensión en un fluido.

La Citometria Permite determinar:

Inmunotipificacion: Determinar marcadores expresados en la superficie celular.

Ensayo de captura de secreción: Se ha utilizado para cuantificar la secreción de

citoquinas a partir de linfocitos T.

Determinación del contenido celular de DNA: Este análisis nos da información

además sobre la distribución de las célula en las diferentes fases del ciclo celular
(G1, S, G2 o M).

Apoptosis: Enzimas determinadas por anticuerpos marcados con fluorocromos

Fagocitosis: Bacterias marcadas fluorescentes

Aplicaciones

 Hematología : Tipificación y conteo de células , reticulocitos y análisis de

medula ósea .
 Farmacología : Estudios de cinética celular
 Inmunología : Subpoblaciones de linfocitos ,tipaje tisular
 Oncología : Diagnostico y pronostico ,monitores de tratamientos
 Microbiología : Diagnostico bacteriano y vírico ,estudios de sensibilidad a
los antibióticos
 Genética : Cariotipo y diagnostico de portador y diagnostico prenatal.
MATERIALES

 Microscopio
 Portaobjetos
 Mechero de alcohol
 Lanceta estéril
 Frasco lavador
 Alcohol absoluto
 Colorante de Wright.

PROCEDIMIENTO

1. Con la lanceta estéril realizar una punción en un pulgar.

2. Depositar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos.
 3. Colocar un portaobjetos como indica el dibujo y deslizarlo sobre toda la
superficie del porta de manera que se pueda obtener una fina película de
sangre.

4. Colocar el frotis de sangre sobre la cubeta de tinción y añadir unas gotas de

colorante Wright dejar durante 10 minutos.
5. Lavar la preparación con agua destilada.
6. Volver a lavar hasta que no queden restos de colorante.
7. Dejar secar aireando el portaobjeto.
8. Observar al microscopio.

OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA
Al microscopio se verán con un dominio predominante los glóbulos rojos, hematíes
o eritrocitos teñidos de color rojo por la eosina. No tienen núcleo y son más
delgados por el centro que por los bordes.

Estudio del frotis de Sangre Periférica

Examinar la muestra con objetivo de pequeño aumento observando la distribución

de la muestra, que debe ser homogénea. Cambiar a objetivo de inmersión (100x),
subir el condensador, abrir el diafragma y usar aceite de inmersión. Visualizar los
eritrocitos, leucocitos y plaquetas.

Se observan los diferentes leucocitos: Polimorfos nucleares ó granulocitos (PMN)

debido a la diferente forma de su núcleo y Mononucleares ó agranulocitos.

Eritrocitos: Color rosa pálido.

Plaquetas: Color violeta pálido o púrpura.

Neutrófilos: Núcleo azul oscuro. Citoplasma rosado con granulaciones rojo violeta.

Eosinófilos: Núcleo azul. Citoplasma azul, con gránulos rojo anaranjado.

Basófilos: Núcleo azul oscuro. Gránulos púrpura casi negros.

Linfocitos: Núcleo violeta. Citoplasma azul celeste.

Monocitos: Núcleo laxo violeta. Citoplasma azul celeste.

 Observe el tamaño y la forma de los núcleos (redondeado, lobulado,

endentado) en relación con el volumen total de la célula.

• Observe la apariencia del citoplasma, de los gránulos citoplasmáticos y el color

de estos (incoloro, rosado, celeste, azul oscuro). Note la apariencia de la
cromatina del núcleo, densamente teñida o pálida. También la posición del núcleo
en la célula: (central o excéntrica).

Los eritrocitos o Glóbulos Rojos: Son células anucleadas con forma de disco
bicóncavo, en su interior llevan una sustancia llamada hemoglobina (proteína que
contiene hierro), lo que le confiere el color a la sangre, especializados en el
transporte de oxigeno (O2) y dióxido de carbono (CO2) entre los tejidos y la
circulación pulmonar.

Los Trombocitos o plaquetas, son los componentes celulares más pequeños de la

sangre. Son células anucleadas encargadas de la primera fase de la coagulación,
por lo que sus funciones están limitadas al torrente sanguíneo.

Los glóbulos blancos o leucocitos se identifican fácilmente por la presencia de

núcleo, teñido de morado por la hematoxilina. Llamados así por su color a la
exposición del microscopio, su principal función es la de combatir las infecciones o
cuerpos extraños; pero en ocasiones pueden atacar los tejidos normales del
propio cuerpo. Es una parte de las defensas inmunitarias del cuerpo humano.
Los hay de varios tipos y con diversas especializaciones.

1. Linfocitos: de tamaño aproximado al de los glóbulos rojos, tienen un solo

núcleo que ocupa casi todo el glóbulo.

2. Monocitos: son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente,

núcleo grande, redondo, son los más móviles y su función principal es la
fagocitosis.

3. Polimorfonucleares: núcleo fragmentado o arrosariado. Pueden ser

eosinófilos, con abundantes granulaciones teñidas de rojo por la eosina,
neutrófilos y basófilos
Tipo de leucocitos Función Imagen

Macrófago Un macrófago destruye células

invasoras a través de un proceso
llamado fagocitosis, forman parte
de la inmunidad innata, presentan
antígenos y actúan en la
hemoestasia.

Células t Sus dos tipos de células son las

células T citotóxicas son
responsables de destruir células
infectadas por un virus o un tumor.
Las células T ayudantes trabajan
bien con los macrófagos al
adjuntarse a la célula y crear
citocinas que traen otras células al
área de infección.

Neutrófilos Son parte de los primeros

mecanismos de defensa del
cuerpo sobre todo en infección
bacteriana, son una parte de la
respuesta inflamatoria del cuerpo.
Asimismo se mueven al sitio de la
infección a través de un proceso
llamado quimiotaxis.

Eusinofilos también son parte de la

inflamación .Los eosinófilos
también juegan un gran rol en
rechazar infecciones virales ya
que llevan enzimas que
degradan la estructura del ARn
en microbios virales.

Basófilos Son los responsables del inicio de

una respuesta alérgica.
Post laboratorio
1. al observar la preparación al microscopio, ¿Qué células son más abundantes?
2. ¿Qué tipo de glóbulos blancos ves con frecuencia?
3. ¿Qué patología podría indicar ¿un numero excesivamente alto de leucocitos?
Anemia
 ciertas drogas o medicamentos
 Consumo de cigarrillo
 Infecciones, casi siempre aquellas causadas por bacterias
 Enfermedad inaflmatoria +como artritis reumatoide o alergia.

¿Un número muy bajo de linfocitos?

 Infecciones virales
 trastornos de la médula ósea
 Enfermedades neurológicas

Trastornos autoinmunes