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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD


LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.10.01-01-B


NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Manejo y uso de equipos e implementos de laboratorio.
Diluciones.

1. DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
SEMESTRE: Décimo B
DOCENTE RESPONSABLE: Segundo García Ledesma, Dr.
FECHA: 04-06 2019

2. FUNDAMENTACIÓN
La determinación de usos de reactivos y muestras biológicas en los análisis
inmunoclínicos requiere el ensayo y práctica en realizar diluciones de variadas
características y volúmenes, de ahí la necesidad de adquirir la experticia para el
correcto cumplimiento de dichos análisis.

3. RESULTADOS DEL APRENDIZAJE


Relaciona los conceptos, áreas de acción y herramientas básicas para los análisis
generales de laboratorio.

4. OBJETIVO ESPECÍFICO:
Realizar las diluciones, utilizando las herramientas que están al alcance, con esmero y
responsabilidad, para adquirir desenvolvimiento mental y destreza manual.

5. EQUIPOS, MATERIALES E INSUMOS


Muestra: agua coloreada, Lápiz graso, Guantes, Papel absorbente, pipetas y
micropipetas, tubos de ensayo.

6. PROCEDIMIENTO
# PROCEDIMIENTO OBSERVACIONES
1 Preparamos el material a emplear. Usar bata y guantes.
2 Analizamos el proceso a realizar para obtener el
resultado.
3 Rotulamos el tubo de ensayo.
4 Nos sercioramos que el reactivo esté a temperatura Usar bata y guantes.
ambiente, si no es el caso lo procedemos a calentar
con las manos mediante fricción.
5 Seleccionamos el material a utilizar. Usar bata y guantes.
6 Homogenizamos el producto obtenido. Usar bata y guantes.

7. RESULTADOS ESPERADOS
Utiliza los fundamentos teóricos para estandarizar procesos analíticos inmunoclínicos.
8. BIBLIOGRAFÍA
Apuntes en clase.

ANEXOS
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA
SALUD
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.10.01-02-B


NOMBRE DE LA PRÁCTICA: REACCIÓN INMUNOLÓGICA POR
FLOCULACIÓN, TIPIFICACIÓN SANGUÍNEA.

1. DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
SEMESTRE: Décimo B
DOCENTE RESPONSABLE: Segundo García Ledesma, Dr.
FECHA: 11-06-2019

2. FUNDAMENTACIÓN
La determinación de grupos sanguíneos del sistema A,B,O se efectúa enfrentando
los glóbulos rojos del paciente con anticuerpos monoclonales, Anti A, Anti B o Anti
AB, la aglutinación o no de los hematíes ensayados frente a cada uno de los
reactivos indica la presencia o ausencia de los correspondientes antígenos.

3. RESULTADOS DEL APRENDIZAJE


Elabora protocolos de análisis clínico inmunológicos en fluidos serológicos y evalúa
los resultados para ´plasmarlos en informes escritos.

4. OBJETIVO ESPECÍFICO:
Determinar el grupo y factor sanguíneo aplicando los recursos del laboratorio en
los compañeros de aula.

5. EQUIPOS, MATERIALES E INSUMOS


Muestra: sangre arterial.
Kits para tipificación sanguínea ANDEC.
Placas portaobjetos.
Lancetas.
Algodón.
Alcohol.
Lápiz graso.
Palillos de plástico.
Guantes.
Papel absorbente.

6. PROCEDIMIENTO

# PROCEDIMIENTO OBSERVACIONES
1 Seleccionamos los reactivos a utilizar. Usar bata y guantes.
2 Preparamos el material a emplear. Usar bata y guantes.
3 Explicamos al paciente el procedimiento a
realizar para obtener su colaboración.
4 Rotulamos la placa porta objetos. Usar bata y guantes.
5 Nos sercioramos que el reactivo esté a Usa r bata y guantes.
temperatura ambiente, si no es el caso lo
procedemos a calentar con las manos mediante
fricción.
6 Seleccionamos el dedo a puncionar, y Usar bata y guantes.
masajeamos en forma circular a fin de
acumular la sangre en el área de punción.
7 Con una torunda empapada de alcohol Usar bata y guantes.
desinfectamos el área a puncionar.
8 Puncionamos dejando caer el brazo sin ejercer Usar bata y guantes.
mucha fuerza y presionamos la última falange
del dedo para realizar una buena toma de
muestra.
9 En cada pocillo demarcado colocamos una gota Usar bata y guantes.
de sangre entera.
10 Agregamos los reactivos según el orden de Usar bata y guantes.
trabajo.
11 Con un palillo de plástico homogenizamos. Usar bata y guantes.
12 Agitamos en forma circular durante 2 minutos. Usar bata y guantes.
13 Identificamos si existe aglutinación en cada
rotulado de la placa y leemos el resultado.
14 Finalmente procedemos al reporte del
protocolo de análisis.

7. RESULTADOS ESPERADOS
Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos Biológicos.
8. BIBLIOGRAFÍA
Inserto del reactivo.

ANEXOS
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UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA
SALUD
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.10.01-03-B


NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Determinación cualitativa y semicuantitativa de la
Reacción de Widall

1. DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
SEMESTRE: Décimo B
DOCENTE RESPONSABLE: Segundo García Ledesma, Dr.
FECHA: 18-06-2019

2. FUNDAMENTACIÓN
El suero del paciente se pone en contacto con el antígeno específico. En este caso se
utilizan suspensiones de Salmonellas o Brucellas muertos. Si la muestra contiene os
anticuerpos correspondientes se producirá una aglutinación variable microscópica.

3. RESULTADOS DEL APRENDIZAJE


Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos serológicos y evalúa
los resultados para ´plasmarlos en informes escritos.

4. OBJETIVO ESPECÍFICO:
Determinar el título semicuantitativo de la reacción de Widall, mediante la ejecución de
la prueba, para evaluar el síndrome febril del paciente.

5. EQUIPOS, MATERIALES E INZUMOS


 Muestra: Sangre Venosa (suero)
 Centrifuga, Agitador de Placas y Microscopio
 Kits para determinación de la Reacción de Widall
 Placas de vidrio para reacción de widall
 Pipetas pasteur
 Palillos de plástico
 Tubos de ensayo secos
 Algodón
 Alcohol
 Lápiz graso
 Guantes
 Papel absorbente
 Jeringuilla
6. PROCEDIMIENTO
# PROCEDIMIENTO OBSERVACIONES
1 Dividir una placa de vidrio en sectores de 4cm Usar bata y guantes.
aproximadamente.
2 Empleando las micropipetas apropiada colocar Usar bata y guantes.
en estos sectores 80uL, 40uL, 20uL, 10uL, 5uL
de suero. Repetir el procedimiento para un
control positivo y negativo.
3 Colocar una gota del antígeno previamente Usar bata y guantes.
agitado sobre cada gota de suero.
4 Mezclar el suero y el antígeno utilizando una Usar bata y guantes.
varilla abarcando un área de 2cm de diámetro
aproximadamente. Debe emplearse una varilla
distinta para cada dilución del suero.
5 Agitar la placa la placa durante 2min en forma Usar bata y guantes.
circular.
6 Observar la aglutinación utilizando el Usar bata y guantes.
microscopio con lente de 10x.

7. RESULTADOS ESPERADOS
Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos Biológicos.
8. BIBLIOGRAFÍA
WIENER (s.f.). Antigenos Febriles. Obtenido de Wiener Lab. Web site:
http://www.wiener-
lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%200espanol/pcr_latex_directo_maxi
_sp.pdf

ANEXOS
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SALUD
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.10.01-04-B


NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Determinación cuantitativa y semicuantitativa de la
reacción Weil Félix.

1. DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
SEMESTRE: Décimo B
DOCENTE RESPONSABLE: Segundo García Ledesma, Dr.
FECHA: 25-06-2019

2. FUNDAMENTACIÓN
Las reacciones febriles se detectan anticuerpos en el suero del paciente contra:
salmonella, Brucela y Rikettsia. La prueba se basa en una reacción inmunológica entre
los anticuerpos séricos y el antígeno correspondiente produciendo una reacción de
aglutinación macroscópica.

3. RESULTADOS DEL APRENDIZAJE


Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos serológicos y evalúa los
resultados para ´plasmarlos en informes escritos.

4. OBJETIVO ESPECÍFICO:
Determinar el título semicuantitativo de la reacción de Weil Félix, mediante la ejecución
de la prueba, para evaluar el síndrome febril del paciente.

5. EQUIPOS, MATERIALES E INSUMOS


 Muestra: suero
 Kits de reacciones febriles
 Placa de vidrio
 Jeringuilla
 Algodón.
 Alcohol.
 Lápiz graso.
 Palillos de plástico.
 Guantes.
 Papel absorbente.
 Microscopio.
 Centrífuga.

6. PROCEDIMIENTO
# PROCEDIMIENTO OBSERVACIONES
1 Marcar la placa de vidrio correctamente Usar bata y guantes.
indicando el antígeno que se esté usando, el
reactivo y suero debe estar a temperatura
ambiente para comenzar la prueba.
Depositar en sitios diferentes de la placa las Usar bata y guantes.
2 siguientes cantidades del suero a analizar: 0.08
ml, 0.04 ml, 0.02 ml, 0.01 ml, 0.05 ml. ( el suero
debe estar totalmente claro). Agitar el antígeno a
utilizar para tener una suspensión uniforme.
Añadir 30 ul de la suspensión de antígeno a cada
una de las diferentes cantidades de suero.
Depositar en sitios diferentes de la placa las Usar bata y guantes.
3 siguientes cantidades del suero a analizar: 0.08
ml, 0.04 ml, 0.02 ml, 0.01 ml, 0.05 ml. ( el suero
debe estar totalmente claro). Agitar el antígeno a
utilizar para tener una suspensión uniforme.
Añadir 30 ul de la suspensión de antígeno a cada
una de las diferentes cantidades de suero.
Girar la placa manualmente o utilizado un Usar bata y guantes.
4 agitador mecánico(120rpm) durante 2 minutos.
Realizar la lectura utilizando una fuente de luz Usar bata y guantes.
5 directa y observar la aglutinación microscópica.
6 Se recomienda incluir controles positivo y
negativo.

7. RESULTADOS ESPERADOS
Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos Biológicos.

8. BIBLIOGRAFÍA: Inserto del reactivo.

ANEXOS
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SALUD
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.10.01-05-B


NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Determinación cualitativa y semicuantitativa de PCR

1. DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
SEMESTRE: Décimo B
DOCENTE RESPONSABLE: Segundo García Ledesma, Dr.
FECHA: 02-07-2019

2. FUNDAMENTACIÓN
La PCR se detecta en el suero por reacción con un anticuerpo específico adsorbido
sobre un soporte inerte de látex. La PCR se une a los anticuerpos adsorbidos
produciendo la aglutinación de las partículas de látex.

3. RESULTADOS DEL APRENDIZAJE


Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos serológicos y evalúa los
resultados para ´plasmarlos en informes escritos.

4. OBJETIVO ESPECÍFICO:
Determinar el título semicuantitativo de la reacción de PCR, mediante la ejecución de la
prueba, para evaluar el estado general del paciente.

5. EQUIPOS, MATERIALES E INSUMOS


 Muestra: Sangre Venosa (suero)
 Centrifuga y Agitador de Placas
 Kits para determinación de PCR.
 Placas con pocillos
 Pipetas pasteur
 Palillos de plástico
 Tubos de ensayo secos
 Algodón
 Alcohol
 Lápiz graso
 Guantes
 Papel absorbente

6. PROCEDIMIENTO

# PROCEDIMIENTO OBSERVACIONES
1 Prueba cualitativa: Usar bata y guantes.
 Equilibrar reactivos y muestras a
temperatura ambiente.
 Resuspender el Reactivo con suavidad.
 Aspirar y vaciar varias veces el
cuentagotas para asegurar su
homogeneidad antes del ensayo.
 Depositar 1 gota (50 μL) de suero
problema en uno de los círculos de la
tarjeta visualizadora.
 En círculos adicionales, depositar 1
gota de control positivo y 1 gota de
control negativo.
 Añadir a cada círculo 1 gota de
Reactivo FR-Latex, próxima a la
muestra a analizar.
 Efectuar la mezcla con ayuda de un
palillo desechable, extendiéndola de
forma que cubra por completo la
superficie interior de cada anillo.
 Emplear palillos distintos para cada
mezcla.
 Mover la tarjeta con agitador rotatorio
(100 r.p.m.) durante 2 minutos.
 Observar de inmediato con la ayuda de
una luz adecuada, la aparición de
cualquier signo de aglutinación.
2 LECTURA Usar bata y guantes.
Reacción negativa:
 Suspensión uniforme sin
cambio visible alguno, tal como
se presenta en el control
negativo.
Reacción positiva:
 Aglutinación débil o intensa,
fácilmente visible
macroscópicamente.
3 Prueba semi-cuantitativa Usar bata y guantes.
 Para cada muestra a analizar se
utilizan 6 círculos de una
tarjeta pipeteando 50 μL de
solución salina (0,9%) en cada
uno de ellos.
 Pipetear sobre el diluyente del
primer círculo 50 μL de
muestra, y empleando la misma
punta, mezclar mediante
aspiraciones y expulsiones
repetidas, transfiriendo 50 μL
de la mezcla resultante sobre el
diluyente del segundo círculo.
 Continuar con la serie de dobles
diluciones hasta el sexto círculo,
desechando los 50 μL
provenientes del mismo.
 Las diluciones finales obtenidas
serán: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32,
1:64.
 Ensayar cada una de las
diluciones tal como se describe
en los pasos 4-7 de la Prueba
cualitativa.

7. RESULTADOS ESPERADOS
Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos Biológicos.
8. BIBLIOGRAFÍA
WIENER (s.f.). PCR-látex Directo. Obtenido de Wiener Lab. Web site:
http://www.wiener-
lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%200espanol/pcr_latex_directo_maxi
_sp.pdf

ANEXOS
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UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA
SALUD
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.10.01-06-B


NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Determinación cualitativa y semicuantitativa de FR-
LATEX.

1. DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
SEMESTRE: Décimo B
DOCENTE RESPONSABLE: Segundo García Ledesma, Dr.
FECHA: 09-07-2019

2. FUNDAMENTACIÓN
El FR-Látex Test es una prueba rápida de aglutinación basada en una modificación de la
técnica de Singer1, para la detección directa y la semicuantificación en porta de los
factores reumatoideos (FR) presentes en el suero. La determinación se efectúa
ensayando una suspensión de partículas de látex recubiertos con gamma globulina
humana frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de aglutinación visible es
indicativa de la presencia o ausencia de FR en las muestras ensayadas.(RF-Latex , 2015)

3. RESULTADOS DEL APRENDIZAJE


Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos serológicos y evalúa los
resultados para ´plasmarlos en informes escritos.

4. OBJETIVO ESPECÍFICO:
Determinar el título semicuantitativo de la reacción de FR-Látex, mediante la ejecución
de la prueba, para evaluar el síndrome febril del paciente.

5. EQUIPOS, MATERIALES E INZUMOS


 Muestra: sangre arterial.
 Kit 1 vial Reactivo FR-Látex.
 Placas portaobjetos.
 Jeringuilla.
 Lancetas.
 Algodón.
 Alcohol.
 Lápiz graso.
 Palillos de plástico.
 Guantes.
 Papel absorvente.
6. PROCEDIMIENTO
1 Prueba cualitativa: Usar bata y
 Equilibrar reactivos y muestras a guantes.
temperatura ambiente.
 Resuspender el Reactivo con
suavidad.
 Aspirar y vaciar varias veces el
cuentagotas para asegurar su
homogeneidad antes del ensayo.
 Depositar 1 gota (50 μL) de suero
problema en uno de los círculos de la
tarjeta visualizadora.
 En círculos adicionales, depositar 1
gota de control positivo y 1 gota de
control negativo.
 Añadir a cada círculo 1 gota de
Reactivo FR-Latex, próxima a la
muestra a analizar.
 Efectuar la mezcla con ayuda de un
palillo desechable, extendiéndola de
forma que cubra por completo la
superficie interior de cada anillo.
 Emplear palillos distintos para cada
mezcla.
 Mover la tarjeta con agitador
rotatorio (100 r.p.m.) durante 2
minutos.
 Observar de inmediato con la ayuda
de una luz adecuada, la aparición de
cualquier signo de aglutinación.

7. RESULTADOS ESPERADOS
Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos Biológicos.
8. BIBLIOGRAFÍA
http://www.linear.es/ficheros/archivos/343_2355025cas.pdf

ANEXOS
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UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA
SALUD
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.10.01-07-B


NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Determinación cualitativa y semicuantitativa de
ASTO- LÁTEX.

1. DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
SEMESTRE: Décimo B
DOCENTE RESPONSABLE: Segundo García Ledesma, Dr.
FECHA: 16-07-2019

2. FUNDAMENTACIÓN
El ASLO-Látex Test es una prueba rápida de aglutinación en porta para la detección
directa y la semi-cuantificación de niveles clínicamente significativos de anticuerpos
anti-estreptolisina O (ASTO) en suero. La determinación se efectúa ensayando una
suspensión de partículas de látex recubierto con estreptolisina frente a los sueros
problema. La presencia o ausencia de aglutinación visible es indicativa de la presencia o
ausencia de ASTO en las muestras ensayadas a niveles significativos.

3. RESULTADOS DEL APRENDIZAJE


Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos serológicos y evalúa los
resultados para ´plasmarlos en informes escritos.

4. OBJETIVO ESPECÍFICO:
Determinar el título semicuantitativo de la reacción de ASTO, mediante la ejecución de
la prueba, para evaluar el síndrome febril del paciente.

5. EQUIPOS, MATERIALES E INZUMOS


 Muestra: sangre venoso
 jeringuilla.
 Algodón.
 Alcohol.
 Lápiz graso.
 Palillos de plástico.
 Guantes.
 Papel absorvente.
 Kit 1 vial ASTO-Látex Antígeno
 Centrifuga
 Tubos de ensayo
6. PROCEDIMIENTO

# PROCEDIMIENTO OBSERVACIONES
Prueba cualitativa I
1 Usar bata y guantes.
 Equilibrar reactivos y muestras a
temperatura ambiente (Nota 1).
 Re suspender el antígeno con suavidad.
Aspirar y vaciar varias veces el
cuentagotas para asegurar su
homogeneidad antes del ensayo.
 Depositar 1 gota (50 μL) de suero
problema en uno de los círculos de la
tarjeta visualizadora. En círculos
adicionales, depositar 1 gota de control
positivo y 1 gota de control negativo.
 Añadir a cada círculo 1 gota de Antígeno
ASTO-Latex, próxima a la muestra a
analizar.
 Efectuar la mezcla con ayuda de un
palillo desechable, extendiéndola de
forma que cubra por completo la
superficie interior de cada anillo.
Emplear palillos distintos para cada
mezcla.
 Mover la tarjeta o con agitador rotatorio
(100 r.p.m.) durante 2 minutos (Nota 2).
 Observar de inmediato con la ayuda de
una luz adecuada, la aparición de
cualquier signo de aglutinación.
Lectura
2 Reacción negativa: Suspensión uniforme sin Usar bata y guantes.
cambio visible alguno, tal como se presenta en el
control negativo. Reacción positiva:
Aglutinación débil o intensa, fácilmente visible
macroscópicamente.
Prueba semi-cuantitativa II
3 Usar bata y guantes.
 Para cada muestra a analizar se utilizan 4
círculos de una tarjeta pipeteando 50 μL
de solución salina (0,9%) en los tres
primeros y 25 μL en el cuarto.
 Pipetear sobre el diluyente del primer
círculo 50 μL de muestra, y empleando la
misma punta, mezclar mediante
aspiraciones y expulsiones repetidas,
transfiriendo 50 μL de la mezcla
resultante al tercer círculo. Mezclar de
nuevo y desechar 50 μL.
 Pipetear sobre el segundo círculo 25 μL
de muestra y empleando la misma punta,
mezclar con el diluyente en la forma
indicada.
 Transferir 25 μL de la mezcla sobre el
diluyente del cuarto círculo y mezclar.
Las diluciones finales obtenidas serán:
1:2, 1:3, 1:4, 1:6.
 Ensayar cada una de las diluciones tal
como se describe en los pasos 4-7 de la
Prueba cualitativa.
Lectura:
4 Usar bata y guantes.
Como en la Prueba cualitativa. El título de la
muestra corresponde a la máxima dilución que
presenta reactividad. La dilución siguiente debe
ser negativa (Nota 3). La tasa aproximada
(UI/mL) de ASTO presente en la muestra puede
obtenerse multiplicando la unidad mínima
detectable (sensibilidad analítica) por el título de
la última dilución positiva.

7. RESULTADOS ESPERADOS
Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos Biológicos.
8. BIBLIOGRAFÍA
http://www.linear.es/ficheros/archivos/335_2340025cas.pdf

ANEXOS
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA
SALUD
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.10.01-08-B


NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Determinación Inmunocromatográfica
semicuantitativa de PSA.

1. DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
SEMESTRE: Décimo B
DOCENTE RESPONSABLE: Segundo García Ledesma, Dr.
FECHA: 23-07-2019

2. FUNDAMENTACIÓN
El PSA presente en el suero reacciona con las partículas de látex coloidal que están
conjugada con anticuerpos monoclonales específicos contra PSA. Este complejo de
partículas coloidales- anticuerpos- PSA migra en un proceso cromatografico hacia la
zona de reacción. En esta zona, hay anticuerpos contra PSA que reacciona con el
complejo partículas de látex coloidal anticuerpos – PSA. Esta reacción origina una línea
rojal rosa.

3. RESULTADOS DEL APRENDIZAJE


Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos serológicos y evalúa los
resultados para ´plasmarlos en informes escritos.

4. OBJETIVO ESPECÍFICO:
Determinar el título semicuantitativo de la reacción de PSA, mediante la ejecución de la
prueba, para evaluar la presencia del PSA en el paciente.

5. EQUIPOS, MATERIALES E INZUMOS


 Muestra: sangre venosa.
 Jeringuilla.
 Algodón.
 Alcohol.
 Lápiz graso.
 Palillos de plástico.
 Guantes.
 Papel absorbente.
 Torniquete
 Centrifuga
 Reactivos (Spinreact)
 Cronómetro
 Cassette para diagnóstico

6. PROCEDIMIENTO

# PROCEDIMIENTO OBSERVACIONES
Toma de muestras: Deben emplearse muestras
1 de suero humanos sin diluir, frescas y libres de Usar bata y guantes.
turbidez.
A temperatura ambiente las muestras y otro
2 material necesaria para el test antes de realizar el Usar bata.
ensayo.
Extraer la placa del sobre y colocarla sobre una
3 superficie plana, para identificar la placa con los Usar bata y guantes.
datos del paciente.
Con la pipeta suministrada dispensar
4 exactamente 4 gotas (0.125 ml) en la ventana Usar bata y guantes.
circular señalada con una flecha.
5 Leer los resultados a los 5 minutos. Usar bata y guantes.

7. RESULTADOS ESPERADOS
Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos Biológicos.

8. BIBLIOGRAFÍA
http://www.spinreact.com.mx/public/instructivo/PRUEBAS%20RAPIDAS/1504020
.21%20PSA.pdf

ANEXOS
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA
SALUD
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.10.01-09-B


NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Prueba Inmunocromatográfica de GCH-h, en
sangre/suero.

1. DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
SEMESTRE: Décimo B
DOCENTE RESPONSABLE: Segundo García Ledesma, Dr.
FECHA: 30-07-2019

2. FUNDAMENTACIÓN
STICK hCG es un inmunoensayo por cromatografía de flujo lateral. El método emplea
una combinación única de conjugado anticuerpo monoclonal-colorante y anticuerpos
policlonales en fase sólida para identificar selectivamente hCG presente en las muestras,
con un elevado grado de sensibilidad. En menos de 5 minutos, pueden detectarse niveles
de hCG tan bajos como 10 mIU/ml.

Cuando se aplica una cantidad suficiente de muestra en la porción absorbente, ésta


migra por capilaridad a través de la tira. El conjugado anticuerpo-colorante se une a la
hCG formando un complejo anticuerpo-antígeno. Este complejo se une al anticuerpo
anti-hCG de la zona de reacción positiva produciendo una banda coloreada rosa cuando
la concentración de hCG es mayor de 10 mIU/ml. En ausencia de hCG, no se observa
banda alguna en la zona de reacción positiva. La mezcla de reacción continua la
migración a través de la tira hasta la zona control. El conjugado libre aún , se une a los
reactivos de la zona control formando una banda coloreada rosa, demostrando el
correcto funcionamiento del test.

3. RESULTADOS DEL APRENDIZAJE


Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos serológicos y evalúa los
resultados para ´plasmarlos en informes escritos.

4. OBJETIVO ESPECÍFICO:
Determinar el título semicuantitativo de la reacción de PSA, mediante la ejecución de la
prueba, para evaluar la presencia del PSA en el paciente.

5. EQUIPOS, MATERIALES E INZUMOS


 Muestra de sangre arterial
 TIRAS DE hCGOne step - Strips
 Algodón
 Alcohol
 Lápiz graso
 Guantes
 Papel absorbente
 Jeringuilla -Tubos secos - Contenedores para la toma de muestra
 Torniquete –Cronómetro

6. PROCEDIMIENTO

# PROCEDIMIENTO OBSERVACIONES
TOMA DE MUESTRA
1 a) Suero Usar bata y guantes.
 La muestra de suero debe ser recogida en
condiciones de laboratorio estándares
(asépticamente de tal modo que se evite
la hemólisis).
 No se requiere centrifugación ni
filtración del suero.
 Si el test se realiza dentro de las 48 horas
tras la recogida, la muestra debe
mantenerse refrigerada (2-8°C).
 Si el test se retrasa más de 48 horas, la
muestra debe congelarse. Antes de
testarla, la muestra debe descongelarse
completamente, mezclarla perfectamente
y atemperarla. Evitar congelar y
descongelar repetidamente.
 En caso de turbidez, elevada viscosidad o
presencia de partículas en la muestra de
suero, debe diluirse con el mismo
volumen de tampón diluyente (V/V)
antes de realizar el ensayo.

7. CUADROS DE RESULTADOS
Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos Biológicos.

8. BIBLIOGRAFÍA:
http://www.spinreact.com.mx/public/instructivo/PRUEBAS%20RAPIDAS/1504020
.21%20PSA.pdf

ANEXOS
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA
SALUD
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.10.01-10-B


NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Prueba Inmunocromatográfica de GCH-h, en orina.

1. DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
SEMESTRE: Décimo B
DOCENTE RESPONSABLE: Segundo García Ledesma, Dr.
FECHA: 06-08-2019

2. FUNDAMENTACIÓN
STICK hCG es un inmunoensayo por cromatografía de flujo lateral. El método
emplea una combinación única de conjugado anticuerpo monoclonal-colorante y
anticuerpos policlonales en fase sólida para identificar selectivamente hCG
presente en las muestras, con un elevado grado de sensibilidad. En menos de 5
minutos, pueden detectarse niveles de hCG tan bajos como 10 mIU/ml.
Cuando se aplica una cantidad suficiente de muestra en la porción absorbente,
ésta migra por capilaridad a través de la tira. El conjugado anticuerpo-colorante
se une a la hCG formando un complejo anticuerpo-antígeno. Este complejo se
une al anticuerpo anti-hCG de la zona de reacción positiva produciendo una
banda coloreada rosa cuando la concentración de hCG es mayor de 10 mIU/ml.
En ausencia de hCG, no se observa banda alguna en la zona de reacción positiva.
La mezcla de reacción continua la migración a través de la tira hasta la zona
control. El conjugado libre aún , se une a los reactivos de la zona control
formando una banda coloreada rosa, demostrando el correcto funcionamiento del
test.

3. RESULTADOS DEL APRENDIZAJE


Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos serológicos y evalúa
los resultados para ´plasmarlos en informes escritos.

4. OBJETIVO ESPECÍFICO:
Determinar cualitativamente la reacción de GCH-h, mediante la ejecución de la
prueba, para establecer el estado de embarazo de la paciente.

5. EQUIPOS, MATERIALES E INZUMOS


Muestra de orina.
CASETTE DE hCGO step - Strips
Algodón
Alcohol
Lápiz graso
Guantes
Papel absorbente
Jeringuilla -Tubos secos - Contenedores para la toma de muestra
Torniquete –Cronómetro

6. PROCEDIMIENTO
#
PROCEDIMIENTO OBSERVACIONES
TOMA DE MUESTRA Usar bata y
1 a. b) Orina guantes.
Para la detección óptima de
embarazos tempranos, es preferible
recoger la primera orina de la
mañana, puesto que ésta contiene la
máxima concentración de hCG. Sin
embargo, pueden usarse muestras
de orina recogidas aleatóriamente.
Debe recogerse la orina en un
contenedor limpio.
Si eI test no se realiza
inmediatamente, la muestra debe
mantenerse refrigerada (2°C – 8°C)
o en ambiente fresco (inferior a
25°C) hasta 24 horas. En tal caso,
atemperar la muestra antes de
realizar el test.
Si el test se retrasa más de 24
horas, debe congelarse la muestra.
Antes de testarla, la muestra debe
descongelarse completamente,
mezclarla perfectamente y
atemperarla. Evitar congelar y
descongelar repetidamente.

7. RESULTADOS ESPERADOS
Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos Biológicos.

8. BIBLIOGRAFÍA:
Inserto reactivo SprinR, Tiras de hCG

ANEXOS
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA
SALUD
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.10.01-11-B


NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Prueba semicuantitavia del helycobacter pylori IgG

1. DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
SEMESTRE: Décimo B
DOCENTE RESPONSABLE: Segundo García Ledesma, Dr.
FECHA: 13-08-2019

2. FUNDAMENTACIÓN
La prueba ImmunoComb® II Helicobacter pylori IgG es un EIA indirecto de fase sólida. La
fase sólida es un peine con 12 proyecciones ( "dientes"). Cada diente está sensibilizado en
dos áreas:

Punto superior - anticuerpos de cabra contra inmunoglobulina humana (Control Interno)


-antigens inferiores al contado de inactivada H. pylori
La Bandeja de Desarrollo tiene 6 filas (AF) de 12 pocillos, cada fila contiene una solución
reactiva lista para ser usada en cada etapa diferente en el ensayo. La prueba es realizada en
etapas, pasando el Peine de una fila a otra, con incubación en cada etapa.

Al comienzo de las muestras de ensayo, suero o plasma son prediluídas 01:11 y se añade al
diluyente en los pocillos de la fila A de la Bandeja de Desarrollo. A continuación se inserta el
Peine en los pocillos de la fila A. Los anticuerpos contra H. pylori, si está presente en las
muestras, se unirán específicamente a la H. pylori antígenos en el punto más bajo en los
dientes de la tarjeta (Figura 1). Al mismo tiempo, las inmunoglobulinas presentes en las
muestras son capturadas por la inmunoglobulina anti-humana en el punto superior (Control
Interno). Los componentes no unidos son lavados en la fila B. En la fila C, el anti-H.
pyloriIgG capturado en los dientes reaccionará con IgG anti-humano marcado con fosfatasa
alcalina (AP). En las dos filas siguientes, los componentes no unidos se eliminan mediante
lavado. En la fila F, la fosfatasa alcalina unida reacciona con componentes cromogénicos.
Los resultados son visibles como puntos de color azul grisáceo en la superficie de los dientes
del peine.

3. RESULTADOS DEL APRENDIZAJE


Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos serológicos y evalúa los
resultados para ´plasmarlos en informes escritos.

4. OBJETIVO ESPECÍFICO:
Determinar el título semicuantitativo de IgG anti-humano, mediante la ejecución de la
prueba, para establecer la presencia de H. pylori en la muestra analizada.

5. EQUIPOS, MATERIALES E INZUMOS


 Pipetas de precisión con puntas desechables y capacidad de 10 l , 25 ly 100 l
 Tijeras
 Cronómetro de laboratorio o reloj
 Microtubos o tiras de pocillos de microtitulación.

6. PROCEDIMIENTO

# PROCEDIMIENTO OBSERVACIONES
Preparación de la Prueba
1 Usar bata y guantes.
Tener todos los componentes, el desarrollo de
placas, tarjetas, reactivos y muestras a
temperatura ambiente y realice la prueba a
temperatura ambiente (22 ° -26 ° C).
Preparación de la Bandeja de Desarrollo
2 Usar bata y guantes.
1. Incube la Bandeja de Desarrollo en una
incubadora a 37 ° C durante 20 minutos;
o dejar a temperatura ambiente (22 ° -26
° C) durante 3 horas.
2. Cubra la mesa de trabajo con papel
absorbente para ser desechado como
desecho de riesgo biológico al final de la
prueba.
3. Mezcle los reactivos sacudiendo
suavemente la bandeja de desarrollo.
Nota: No retire la cubierta de aluminio de la
Bandeja de Desarrollo. Rómpala usando la
punta desechable de la pipeta o el perforador,
sólo cuando así se le indica por las
Instrucciones para la prueba.
Preparación de la tarjeta
3 Usar bata y guantes.
Precaución: Para asegurar el buen
funcionamiento de la prueba, no toque los
dientes del Peine.
Abra el empaque de aluminio de la tarjeta por el
borde perforado. Retire la tarjeta.
Es posible utilizar todo el Peine y la Bandeja de
Desarrollo o una parte. Para utilizar parte del
Peine:

a. Determinar el número de dientes que necesita


para analizar las muestras y controles. Se
necesita un diente para cada prueba. Cada diente
tiene impreso el número de código " 25 " del kit,
para permitir la identificación de los dientes
sueltos.
b.segundo. Doble y rompa verticalmente el Peine
o cortar con tijeras para separar el número
requerido para las pruebas (Nº de pruebas + 2
controles).

c. Devolver la parte no utilizada de la tarjeta para


el empaque de aluminio (con la bolsa desecante).
Cierre bien el empaque, por ejemplo, con un clip
de papel, para mantener la sequedad. Guarde la
tarjeta en la caja original del kit a 2 ° a 8 ° C para
su uso posterior.

7. RESULTADOS ESPERADOS
Elabora protocolos de análisis clínico-inmunológicos en fluidos Biológicos.

8. BIBLIOGRAFÍA
ORGENICS. ImmunoComb II. Helicobacter pylori IgG. 17 de julio del 2016.
Disponible en: http://www.biosystemsantioquia.com.co/images/nuestras-
marcas/immunocomb/IMMUNOCOM-H-PYLORI.pdf

ANEXOS

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