Modelo de un sistema de sensores potenciometricos

integrados para la deteccion de alcohol

Veronica Patricia Gonzalez Matoma (2160798)
Jose Miguel Tarazona (2160790)
Angie Milena Sanchez Mendez(2161939)
Jorge Andrés Quintero Graut (2160797)

Universidad Industrial de Santander

9 de diciembre de 2017

Resumen
Con el desarrollo de este proyecto de investigación se pretende crear un modelo de biosen-
sor que detecte la cantidad de etanol en un conductor teniendo como fuente de información
el sudor, para ello fue necesario realizar diversos análisis tanto fı́sicos como electro quı́micos
y a nivel biológico (metabolico). Finalmente fue posible lograr a nivel teórico (por medio
de ecuaciones) que el dispositivo planteado es capaz de detectar el etanol en la persona sin
importar el nivel en la concentración.

1. Introducción
Cada dı́a se presentan accidentes automovilı́sticos, una de las causas más comunes es debido a la
imprudencia de algunos conductores que se atreven a manejar en estado de embriaguez, afectando
no sólo a vida de aquel que consume si no que también la vida de inocentes. Diferentes entidades
en todo el mundo han tratado de evitarlo haciendo diversas campañas, llevando a la carcel hasta
18 años como lo estipula una ley aprobada desde el 2013 , pagando multas desde 5 o 6 salarios
minimos vigentes (a nivel de Colombia), entre otras; si embargo, a pesar de todas las consecuencias
que conducir en estado de alicoramiento trae, la tasa de muertos y heridos baja muy lentamente y
a veces no se hace notoria la diferencia.
En nuestro proyecto de investigación se planea evitar este tipo de situaciones restringiendo el acceso
de personas ebrias a un automóvil o bloquearse una vez haya ingresado por medio de un sensor
electro quı́mico que se activará por medio de la detección del etanol en la transpiración (sudor en
la piel) de la persona.

1
 3 MARCO TEÓRICO

2. Objetivos
Proponer un modelo de sensor potenciométrico para la detección de etanol.

Obetivos especı́ficos
1. Definir las dimensiones del sensor
2. Calcular el potencial en función de la masa de alcohol que el sensor recibirá cuando se ponga
en práctica.
3. Establecer la estructura y las componentes del sensor basado en fundamentos fı́sicos y elec-
troquı́micos.

3. Marco teórico
El consumo de bebidas alcohólicas por parte de los conductores a desencadena en una pro-
blemática social que afecta a todos por igual, pues es una de las principales causas de accidentes
de transido, en una población como la Colombia en la cual el consumo de este tipo de bebidas
empieza desde edades tempranas y la falta de conciencia por parte de la comunidad agudizan el
problema.

Para contrarrestar este fenómeno la normativa colombiana exige unos niveles mı́nimos de al-
coholemia1 ( concentración de alcohol en la sangre o en el aire expirado), en este control se mide
cuantos gramos de alcohol hay en un litro de sangre, o en el caso del aire se hace en miligramos
pues su concentración es menor; Como se puede ver en la cuadro: 3 en Colombia establece unos
niveles máximos, dependiendo de la forma como se realice la prueba y el nivel del conductor.

Conductor Max en la sangre Max en el aire

General2 0.5 g/l 0.25 mg/l
Profesionales3 0.3 g/l 0.15 mg/l
Novel4 0.3 g/l 0.15 mg/l

Cuadro 1: Concentración máxima de los niveles de alcohol en la sangre, según la normativa Co-
lombiana
Alcanzar estos niveles de alcoholemia es sencillo, como se muestra en el cuadro: 3 con una
pequeña cantidad de alcohol ingerido ya se da un nivel de alcoholemia considerable; para hacer el
calculo de la alcoholemia se utiliza la ecuación: 1
M
Alcoholemia = (1)
m∗R
1
su origen etimológico encontramos que proviene del Árabe Al-kohol utilizada para referirse a una sustancia
llevada hasta su esencia o un producto de la destilación y el griego Hemia que significa una cualidad en la sangre,
entonces la alcoholemia seria el alcohol presente en la sangre.

2
 3 MARCO TEÓRICO

Alcoholemia
Alcohol presente
Bebida Volumen [ml] [g/l]
[gramos]
Hombre Mujer
70 kg 60 kg
Cerveza 200 8 0.16 0.22
Vino 100 9.6 0.19 0.26
Ron, Ginebra 50 16 0.33 0.44
Whisky 50 16.6 0.34 0.46
Jerez , cava 50 8 0.16 0.22

Cuadro 2: Alcoholemia producto de algunas bebidas alcoholicas

Donde:

M: gramos de alcohol ingeridos.

m: peso en kilogramos de la persona que ingirió el alcohol.

R: Coeficiente de difusión hombre equivale a 0.7 y en el de la mujer es de 0.6

El etanol quı́micamente es un un grupo alquilo unido a un grupo hidroxilo, como los demás
alcoholes, su formula es C2 H6 O Y C2 H5 OH cuando conserva el OH caracterı́stico de los alcoholes;
su estructura molecular se puede ver el la figura: 1; cuando llega al cerebro rompe el equilibrio del
sistema neuronal, estos efectos de deben a que al ser una molécula no estéreo selectiva su facilidad
de interaccionar con los diversos sustratos5 presentes en el cuerpo es elevada.

El etanol afecta las proteı́nas receptoras involucradas en la sinapsis, mediante variaciones en loa
iones presentes en el medio extra-celular a causa de los puentes de hidrógeno que forma el grupo
hidroxilo presente en el etanol con el agua. Los neurotransmisores mas afectados son GABA y
NMDA; el GABA o ácido gamma-aminobutı́rico tiene la función inhibir o reducir la actividad
neuronal y del sistema nervioso central, [Brandon Gárate1, 2010] lo cual implica que al reducir
estas facultades el individuo vera disminuida la capacidad de reacción ante estı́mulos externos, y
esto se ve evidenciado en movimientos torpes y lentos que a la hora de conducir aumentan el nivel
de riesgo; el NMDA o (N-metil-D-Aspartato) cuando se bloquea en el hipocampo es el responsable
de los episodios de perdida de memoria.
Los efectos visibles de los cambios que causa el etanol en estos neurotransmisores se pueden
apreciar en la cuadro: 3.
5
Molécula sobre la cual actúa una enzima

3
 3 MARCO TEÓRICO

Alcoholemia Nivel de dificultad Efectos

Nivel de riesgo
[g/l de sangre] al conducir perceptibles
Plenas facultades para
0,0 Sin dificultad Nulo
conducir
La capacidad de dar respuesta
0,3 Moderado Medio
a situaciones de peligro
0,5 Moderado/Severo Dificultades en la visión Alto
Problemas en la motricidad y
0,8 Severo Alto
sensación de confianza
Alteración en los reflejos y reacción lenta
1,5 Muy alto
deficit de atención
Critico
Conducta imprevisible e imposibildad de tomar
2,5 Severo
decisiones con certeza
Perdida de la conciencia y posibilidad de un coma
3 Extremo
o incluso la muerte

Cuadro 3: Efectos en los conductores producto de la concentración de alcohol en la sangre

Alcoholes en el cuerpo humano

Figura 1: Estructura molecular del etanol

Para saber el adecuado funcionamiento a nivel fı́sico y electroquı́mico de un sensor es funda-

mental entender como se distribuye el alcohol en el organismo, la primera fase es denominada
absorción,que como su nombre lo indica inicia desde que la persona ingiere la sustancia pa-
sa a lo largo del esófago, pasa a través del estómago y llega al intestino delgado, y teniendo en
cuenta a que el alcohol no necesita digestión (debido a su peso molecular) se absorbe tal y como
fue ingerido. Gran parte se va al torrente sanguı́neo por las paredes del intestino delgado y un
pequeño porcentaje se va por medio de la mucosa de estómago, esto se logra en tan sólo cinco mi-
nutos, con esto es fácil alcanzar las máximas concentraciones en aproximadamente sesenta minutos.

4
 3 MARCO TEÓRICO

Cuando el alcohol es absorbido viaja a lo largo del torrente sanguı́neo por todo el organismo,
adentrándose con facilidad en las células de los distintos órganos y tejidos, donde es absorbido
dependiendo de la proporción de agua que posea, por ende, su efecto en el organismo depende
de su concentración en la sangre o la anteriormente mencionada alcoholemia conocida como los
gramos de alcohol puro por litro de sangre circulante. El alcohol se distribuye con facilidad hacia
el Sistema Nervioso Central, ejerciendo un efecto depresor de sus funciones, a esto se le llama
Intoxicación Alcohólica. Esta fase es conocida como distribución a travéz del organismo.

La metabolización se conoce como el proceso de transformación, mediante cambios bioquı́mi-

cos, de aquellas sustancias ingeridas en otros compuestos que el organismo puede asimilar. Uno
de estos procesos de transformación es la oxidación. Allı́ se encuentra, el hı́gado, el cual es el
encargado de más del noventa por ciento de la metabolización del alcohol, gracias a la acción de
enzimas (ADH) y co-factores (NAD, NADH), que lo transforman en compuestos asimilables como
agua (H2O) o anhı́drido carbónico (CO2) entre otros.

En este proceso de metabólico el aporte energético de una bebida alcoholico varia de los gramos
de alcohol neto presentes en ella pues un gramo de alcohol equivale a 7 kcalorias entonces puede
calcular usando la siguiente expresión:
Kcal
E(kcal) = m(g) ∗ 7 (2)
g
El porcentaje restante de alcohol que no fue metabolizado (10 %) es transmitido a la fase de
eliminación directamente, sin transformación alguna, por medio del aire espirado y la orina.
Otras cantidades pequeñas son excretadas también por la transpiración en la piel, las lágrimas y
la leche materna.

El hecho de que le alcohol sea eliminado de esta manera nos ha permitido desarrollar este pro-
yecto de investigación, y a que estas secreciones se pueden tomar como métodos que posibilitan su
detección y ası́ poder estimar de manera bastante aproximada el nivel de alcoholemia concentrado
en cada persona.

5
3.1 Sensor Electroquimico. 3 MARCO TEÓRICO

Figura 2: Metabolización del alcohol en el cuerpo humano

3.1. Sensor Electroquimico.

En general un sensor es un dispositivo que recibe y responde a una señal o estı́mulo. Un sensor
electroquı́mico es un dispositivo que responde a cambios especı́ficos en el potencial o en la corrien-
te eléctrica como consecuencia de presencia de una especie quı́mica que interactúa con él [Baeza,
2015]. Generalmente este tipo de sensores se clasifican según el mecanismo de obtención de la señal,
que puede ser una corriente eléctrica, una diferencia de potencial o la medida de la conductividad
del material; que son los amperométricos, los potenciométricos y los conductimétricos, respectiva-
mente. Como componentes de los sensores electroquı́micos se encuentra la muestra, el elemento de
reconocimiento, el transductor y la parte electrónica.

6
3.1 Sensor Electroquimico. 3 MARCO TEÓRICO

Figura 3: Componentes de un sensor electroquı́mico

En la muestra se encuentra el analito, el compuesto quı́mico que se desea medir. La presencia

del analito va a hacer que los demás componentes del sensor funcionen y puede ser un elemento,
un compuesto o un ion. Este es identificado por medio de un elemento de reconocimento, que
pueden ser anticuerpos, ácidos nucleicos, microorganismos, tejidos orgánicos y enzimas. La reac-
ciones quı́micas que ocurren entre el analito y el receptor serán ”leı́das”por el transductor, que
generalmente está compuesto por dos o tres electrodos que participan en las reacciones.

3.1.1. Los sensores electroquimicos para prevenir la accidentalidad por conductores

ebrios.
Los sensores electroquimicos han sido de gran beneficio para la humanidad. En especial, con
el fin de disminuir la accidentalidad por conductores en estado de embriaguez se han desarrollado
varios tipos de sensores, de los cuales la mayoria detectan el nivel de etanol en el aliento o de la
sangre del conductor. Muchas compañias independientes, agencias y universidades han desarrollado
sistemas integrados de sensores conectados a un dispositivo encargado de bloquear el sistema de
encendido del auto si detecta un nivel de alcoholemia por encima del permitido como el el sistema
DADSS, desarrollado por la agencia de investigacion para el transporte de EEUU e incluso sistemas
de sensores como el propuesto por el colombiano Manuel Marquez de la Universidad de Boyaca.

Figura 4: Cronologı́a de los sensores electroquimicos.

7
3.1 Sensor Electroquimico. 3 MARCO TEÓRICO

Sensores potenciométricos
Las medidas potenciométricas consisten en la determinación de una diferencia de potencial
en condiciones de circuito abierto entre un electrodo de trabajo y uno de referencia [Ruiz, 2006].
En este tipo de sensores, se establece un equilibrio iónico en la interfase del sensor, que es donde
aparece el potencial de membrana; éste se recoge en una celda electroquı́mica y se relaciona con la
composición de la muestra [del Valle Carlos Silva, 2009]. Las reacciones eléctroquı́micas presentes
en el sistema constan de la interacción entre el analito y el receptor, generalmente reacciones de
oxido-reducción, donde uno de los cátodos se encarga de recibir a los electrones que se liberan en
las reacciones, generando una diferencia de potencial entre los electrodos.

El equipamiento necesario para la medición en potenciometrı́a necesita de un electrodo selectivo,

un electrodo de referencia y un dispositivo para la medida del potencial, que necesita una resolución
de ca. 0.2 mV. Un electrodo selectivo es un sensor capaz de medir selectivamente la actividad de
una especie iónica molecular [del Valle Carlos Silva, 2009].
La relación entre la medida y las especies ara las que el electrodo es selectivo viene dada por
la ecuación de Nernst, que relaciona le potencial medido E y la actividad de la especie en una
forma logaritmica [del Valle Carlos Silva, 2009]:

2, 303RT
E = Eo + log ai (3)
zF
siendo R la constante de los gases ideales, T la temperatura absoluta, F ,la constante de Fara-
day y ai el cociente de concentración. Esta ecuación se toma en su aplicación práctica a 25 grados
centı́grados:
0,05916
E = Eo + log ai (4)
z

8
3.1 Sensor Electroquimico. 3 MARCO TEÓRICO

Figura 5: Biosensor potenciométrico de tamaño normal

Reacciones de oxido reducción

Una reacción de oxido reducción o REDOX es una reacción quı́mica en donde se transfieren
electrones entre dos especies. En este tipo de reacciones una especie va a ganar y otra va a perder
electrones. La que gana electrones es la especie reductora y la que pierde electrones es la especie
oxidante. En los sensores potenciométricos el cambio de la diferencia de potencial es ocasionado
por un exceso de cargas en uno de los cátodos producto de este tipo de reacciones, ya que la
concentración de iones en el analito aumenta. En la figura 6 se puede observar el cómo es se produce
la diferencia de potencial: El sustrato(o analito) reacciona con la enzima y cede sus electrones.
Luego existe otra reacción donde la enzima pasa los electrones al compuesto llamado mediador,
donde estos pasan hacia el electrodo, ocasionando el exceso de carga.

9
3.1 Sensor Electroquimico. 3 MARCO TEÓRICO

Figura 6: Reducción redox en el biosensor

Sensores tipo ISFET

Son sensores de estado sólido (Ion-Sensitive Field-Effect Transistor) electroquı́micos que reac-
ciona a cambios en la actividad de un ion dado [Wikipedia, 2015]. El material selectivo de iones
no no colabora con la conducción eléctrica, pero sin embargo es posible detectar la variación del
potencia en la interfase aislante-solución, definida termodinámicamente considerando la superficie
de una capa no-hidratada y de una capa aislante ideal pero selectiva a los iones que desempeña el
papel de un electrodo selectivo de iones67 .

El funcionamiento del ISFET se debe fundamentalmente a un fenómeno superficial que puede

ser explicado mediante la Teorı́a de Enlaces Locales, la Teorı́a de la Doble Capa Eléctrica y la
Teorı́a del Efecto de Campo en la estructura electrolito-óxido-semiconductor.

Modelo de la doble capa eléctrica

La sustancia lı́quida donde se encuentran disueltos los iones es la fase lı́quida del sistema
electroquı́mico. El electrodo está cubierto por un aislante, que lo que hace es generar una capa
de iones sobre el aislante para crear una especie de capacitor (ver figura8). Un aumento en la
concentración de iones sobre el aislante aumenta el campo electrico entre el electrodo y la densidad
de carga.
6
En este caso, el electrodo metálico se encuentra cubierto por un aislante.
7
[del Valle Carlos Silva, 2009]

10
3.1 Sensor Electroquimico. 3 MARCO TEÓRICO

Figura 8: Doble capa eléctrica

Figura 7: Doble capa eléctrica

Entonces, existe una interfase formada por un electrolito y un aislante. La presencia de un limite
para el electrolito genera una redistribución de cargas y de los dipolos orientables(en comparación
co la distribución de la masa de las fases). Esta redustribución constituye la base estructural de la
diferencia de potencial a travez de la interfase [del Valle Carlos Silva, 2009].En este caso, no existe
ningún aporte de cangas, en comparación con otros sistemas electrolı́ticos donde en ausencia de
este aislante el electodo se llega a cargar. En la figura 7 se puede observar cómo se pueden encontrar
a los iones disueltos en una solución acuosa y la formación de una capa de iones positivos al lado
derecho como también, una capa de electrones al lado izquierdo, debido a la inducción, generando
una campo eléctrico, muy parecido a un capacitor, como se muestra en la figura 8. También es
importante resaltar la curva de del potencial vs la distancia con respecto al electrodo, donde el
potencial decae con el inverso se la distancia.

kT β
Ψa = 2,3 (pHpzc − pH) (5)
q β+1
−qΨ0
[H + ]S = [H + ]B exp[ ] (6)
kT
∂Ψ0 kT
= −2,3 a (7)
∂pHB q
1
a= (8)
(2,3kT /q 2 )(C dif /βint ) +1

El EnFET
Los EnFETs (Enzyme modified Field Effect Transistor) son biosensores cuyo traductores un
ISFET y el receptor o elemento de reconocimiento son enzimas ı̈nmovilizadas ubicadas en men-
2

11
3.1 Sensor Electroquimico. 3 MARCO TEÓRICO

branas que se colocan sobre el aislante del ISFET [del Valle Carlos Silva, 2009]. El funcionamiento
de este tipo de sensores se muestra a continuación:

Cuando en el EnFET, mediante la membrana enzimática, entra en contacto con la sustancia, el

sustrato se acerca al Centro Activo de la enzima generándose un ajuste inducido consistente en
la unión del sustrato a su sitio de enlace en la enzima, formándose de esta manera el complejo
ENZIMA-SUSTRATO (ES); seguidamente sucede la reacción catalı́tica en donde el sustrato es
modificado generándose una caida en el gradiente de la concentración en los lugares donde se
produce la modificación quı́mica. El último paso de la reacción es el desprendimiento, en donde
el sustrato modificado, esto es, el producto generado o reactante consumido es controlado por
el ISFET que compone al dispositivo. [Cárdenas, 2008]

Figura 9: Esquema del sensor potenciométrico

Figura 10: Modelo de biosensor potenciométrico

12
 4 RECEPTORES BIOLÓGICOS

4. Receptores biológicos
Los sensores quimicos estan conformados por dos componentes basicas: un receptor y un trans-
ductor. El receptor se encarga de reconocer el analito y enviar una señal al transductor, el cual
procesa dicha informacion. [Arenya, 2004]
El receptor se denomina biologico cuando esta compuesto por un material de naturaleza biológi-
ca, usualmente son materiales con alta selectividad y capacidad de reaccion ante el analito. Este
componente puede ser: Anticuerpos, material genetico, microorganismos o enzimas.

Anticuerpos: proteinas encargadas de reaccionar ante una sustancia llamada antigeno .

Material genético: es cualquier material que tenga informacion genetica .

Microorganismos: Se refiere a organismos pequeños tales como hongos, mohos y virus que
solo se pueden observar con el uso de microscopios.

Enzimas: proteinas catalizadoras, es decir, con capacidad de aumentar la velocidad de una

reaccion quimica.

4.1. Enzimas
Las enzimas son proteinas que catalizan reacciones quimicas caracterizadas por poseer gran
capacidad catalizadora y alta selectividad, ademas de ser un material barato. El tiempo de res-
puesta es relativamente corto en comparacion con otros receptores biologicos. [Ruiz, 2006] Existen
diferentes clases de enzimas de acuerdo a la reaccion que produce:

Oxidoreductasas: catalizan reacciones de oxido-reduccion.

Transferasas: catalizan la transferencia de una molecula a otra.

Hidrolasas: catalizan reacciones de hidrolisis.

Isomerasas: catalizan reacciones de reorganizacion de la molecula para convertirla en otra.

Liasas: catalizan la division de moleculas.

Ligasas: catalizan la union de moleculas.

13
4.2 Metodos de inmovilizacion de la enzima 4 RECEPTORES BIOLÓGICOS

Figura 11: Mecanismo basico de reaccion de las enzimas y el analito

4.2. Metodos de inmovilizacion de la enzima

El uso de enzimas como receptores biologicos de los sensores ha permitido crear sensores mas
rapidos y selectivos. Sin embargo, dada la capacidad reactora de la enzima es necesario disminuir
la difusivilidad de lesta en comparacion al analito, este proceso se llama inmovilizacion. Una de
las ventajas de este procedimiento permite la reutilización de las mismas, a la vez que aumenta su
estabilidad frente a un abanico más amplio de valores de temperatura y pH. [Rodrı́guez, 2011]
Las tecnicas de inmovilizacion se dividen en: retencion fisica y retencion quimica.

4.2.1. Retencion fisica

Es la union de la enzima en diferentes matrices a traves de fuerzas fisicas como las Fuerzas
de Waals, interacciones hidrofóbicas y enlaces de hidrógeno, este proceso es reversible. [Dwevedi,
2016]
Esta se puede realizar por atrapamiento o por inclusion de membranas.

Figura 12: Mecanismo basico de reaccion de las enzimas y el analito

14
4.2 Metodos de inmovilizacion de la enzima 4 RECEPTORES BIOLÓGICOS

Atrapamiento
Es la retencion de la enzima en un material solido poroso, especificamente en monomeros como
fibras o geles liquidos. Una ventaja de este metodo es que no produce una transformacion en la
estructura de la enzima [Arroyo, 1998].

Inclusion de membranas
Microencapsulacion: Este metodo consiste en atrapar la enzima en una membrana semi-
permeable que permite el paso del sustrato con el que va a reaccionar. Las microcapsulas
tiene una forma esferica con un tamaño comprendido entre 1 y 100 µm de diámetro [Arroyo,
1998].
Reactores de membrana: En general, en esta metodologı́a, se procede inicialmente a la ad-
sorción de la enzima sobre la membrana que formará el reactor. [Arroyo, 1998]

4.2.2. Retencion quimica

Es la union de la enzima en diferentes matrices usando enlace covalente o enlaces ionicos . [Dwe-
vedi, 2016]

Figura 13: Mecanismo basico de reaccion de las enzimas y el analito

Union a soportes
Este metodo de inmovilizacion consiste en unir la enzima a un soporte mediante un tipo de
enlace quimico. Esta union se puede lograr mediante absorcion ionica o union covalente.
Absorcion ionica: Es un metodo de inmovilizacion consiste en unir la enzima a un soporte
mediante interacciones ionicas, fuerzas de Van de Waals y enalces de hidrogeno. [Arroyo,

15
 5 BIOSENSORES MINIATURIZADOS.

1998]
Aquı́, la densidad de carga superficial en la matriz es directamente proporcional la cantidad
de enzima que se une a la matriz [Dwevedi, 2016]
.
Union covalente: La enzima se une a la matriz por medio de enlaces covalentes por lo que es
necesaria la activación de grupos quı́micos del soporte para que reaccionen con nucleófilos de
las proteı́nas [Arroyo, 1998]
.

Reticulado
Reticulado: Se forma una union entre la enzima y la matriz por medio de enlaces covalen-
tes usando reactivos bifuncionales como dialdehı́dos, diiminoésteres, diisocianatos, sales de
bisdiazonio, diisocianato de hexametileno y diisocianato de tolueno.
Co-reticulado: Consiste en el entrecruzamiento de las enzimas con una proteina sin actividad
enzimatica y rica en residuos de lisina.

4.2.3. Efectos de la inmovilizacion sobre la actividad de la enzima.

Al inmovilizar una enzima se cambia el comportamiento de esta debido a que no solo se altera
su estabilidad sino que tambien su actividad enzimatica. Una evidencia de ello es que la estructura
terciaria de la enzima adquiere una mayor rigidez y se hace más resistente a la desactivación
térmica o quı́mica. [Arroyo, 1998]
Se producen efectos como el cambio de la difusividad del sustrato al dirigirse hacia la enzima a
causa de las resistencias ocasionadas por el soporte o matriz inmovilizadora. Ademas, se producen
efectos electrostaticos entre el sustrato y dicho soporte debido a sus respectivas cargas. Este efecto
puede ser de repulsion si las cargas son iguales o de atraccion si son contrarias.

5. Biosensores miniaturizados.
En los ultimos años gracias a la incipiente necesidad de obtener aparatos electronicos mas
pequeños se ha podido construir electrodos cada vez mas pequeños. En el caso de los biosensores
es posible reducir el area que ocupan los dos o tres electrodos [Ruiz, 2006]
y por lo tanto el espacio que ocupa este. Existen dos tecnologias para reducir el tamaño de los
biosensores: la tecnologia thin y thick film.
La tecnologia thin film o capa fina permite la fabricacion de transductores de tamaño muy
reducido y es empleada generalmente en la fabricacion de aparatos que contienen silicio. Una de
sus desventajas es que para su fabricacion se requiere de un ambiente libre de contaminaciones.
Esta tecnologia es muy usada para las celdas solares.
La tecnologia thick film, conocida tambien como serigrafia consiste en la deposicion de de tintas
conductoras sobre un soporte inerte que permiten reducir el tamaño de los transductores pero no
aun tamaño tan pequeño como el anterior.

16
 6 MARCO METODOLÓGICO.

6. Marco metodológico.
En este proyecto se realizo un modelo teorico de un sensor para la deteccion de etanol por
medio del sudor. En la primera fase, se definio el mecanismo de deteccion. En la segunda fase se
definio el material y las dimensiones de los componentes del sensor. En la tercera fase, se realizaron
los calculos teoricos de las reacciones que se llevarian a cabo. Finalmente, se analizaron los datos
obtenidos en la fase anterior.
En la primera fase, se eligió el tipo de sensor de acuerdo a las caracterı́sticas que debı́a tener
para cumplir el resultado esperado: el sensor debia detectar el nivel de etanol rápidamente, ser
muy pequeño y preciso.

Figura 14: Mecanismo basico de reaccion de las enzimas y el analito.

El mecanismo definido fue el siguiente: La enzima alcohol deshidrogenasa se encuentra inmo-

vilizada por medio de atrapamiento en un gel, el cual tambien absorbe el analito (etanol) hacia
el centro de accion de dicha enzima produciendo una reaccion de oxido-reduccion de manera que
se libera un ion que sera atraido por un electrodo colocado a una distancia cercana. Alrededor
del electrodo se coloca un material aislante de manera que se produce un campo inducido, el cual
genera una diferencia de potencial con un electrodo de referencia ubicado a una distancia lejana.
En la segunda fase se indentificaron los materiales que componen el biosensor mas idoneos en
funcion de las necesidades a suplir. El biosensor que se propone esta constituido por las siguientes
componentes:

Analito: Etanol, es un alcohol presente como un lı́quido incoloro e inflamable con un punto de
ebullición de 78 grados celsius, soluble en agua en cualquier proporción. El etanol es también
un lı́quido transparente e incoloro, con sabor a quemado y un olor caracterı́stico.

17
 6 MARCO METODOLÓGICO.

Enzima: Alcohol deshidrogenasa, es aquella enzima encargada de catalizar la reacción de

oxidación de un alcohol a un aldehı́do utilizando como aceptor de electrones al NADP+ y
como cofactor zinc.

Sustancia mediadora: Hidrogel, Hidrogel es una red de cadenas de polı́meros que son hi-
drofilicos, algunas veces encontrados como un gel coloidal en el cual el agua es un medio
de dispersión y un agente de hinchamiento. Los hidrogeles son redes de polı́meros naturales
o sintéticos altamente absorbentes (pueden contener hasta un 90 % de agua). Los hidroge-
les también poseen un grado de flexibilidad muy similar al tejido natural, debido a su alto
contenido de agua.

Mediador : Hierro

Figura 15: Descripción gráfica del electrodo desarollado por el método serigrafiado

Oxidación del etanol

En el sensor se va a encontrar disueltas las enzimas que van a llevar a cabo el proceso de
oxidación de del etanol. Como se ve en la figura 16, el etanol subre un proceso de doble oxidación
hasta que se produzca ácido acético. A medida que se va oxidando, habrá un exceso de protones (o
iones H + ) , quienes producen la capa de iones sobre el aislante, induciendo carga en el electrodo
de trabajo y cambiando la diferencia de potencial entre los electrodos de trabajo y de referencia,
potencial que se v a reg

18
 6 MARCO METODOLÓGICO.

Figura 16: Mecanismo basico de reaccion de las enzimas y el analito.

Figura 17: Mecanismo basico de reaccion de las enzimas y el analito.

19
 7 ANALISIS DE DATOS.

7. Analisis de datos.
Para conocer el potencial el potencial producido por la reacciones de oxidación del etanol en el
proceso metabólico al ingresar al sensor se utiliza la ecuación: 9
0,05916 0,05916
E = Eo + ( log ai ) = 0 + ( log ai ) (9)
kmq 2,53 ∗ 10 1,6 × 10−19 Cm
22

Donde:
m: Gramos de alcohol en el sensor.
k: Número de H + por gramo de etanol.
q: es la carga de un H + .
Para calcular k se realizan los siguientes cálculos:
Conocer el número de moles por gramo de etanol.
M
Nmoles = (10)
P
Donde:
Nmoles = Número de moles.
M = Masa para la cual se quiere conocer el número de moles; en este caso 1 gramo de etanol.
P = peso molecular; para el caso del etanol es de 46.08 g/mol
Entonces Nmoles es de 0.021 moles
Conocer el número de moléculas por gramo de etanol.
Nmoleculas = Nmoles ∗ Av (11)
Donde Av es el número de Avogadro o 6,023 ∗ 1023 [moléculas/moles].

De esta forma se sabe que en un gramo de alcohol hay 1,26 ∗ 1022 moléculas, y al saber que en
proceso de metabolismo se liberan 2 H + , entonces en el proceso de metabolismo de un gramo de
etanol se liberan 2,53 ∗ 1022 H + ; siendo este el valor de k

Haciendo uso de las ecuaciones 2 y 4 es posible hacer un análisis aproximado del la diferencia
de potencial producto del aumento de electrones producto de las reacciones de oxido reducción
entre el etanol y la enzima deshidrogeneasa como también, la el cociente de concentración de entre
los productos y los reactivos en las reacciones de oxidación presentes en el sustrato.
El cociente de concentración se da por la relación:

Concentración de producto [Ácido acético]

ai = m = = 1,30434 (12)
Concentracion de reactivo [Etanol]
Realizando los mismo cálculos pero entre el etanol y acetaldehido, entonces el número de inoes
de hidrógeno se reduce a la mitad, de tal forma que a toma el valor de 0.95.

20
 8 ANALISIS DE RESULTADOS.

8. Analisis de resultados.
El potencial al depender directamente de la masa de etanol presente muestra que si el proceso de
metabolismo se deja llegar hasta el ácido acético, el potencial inicial es muy elevado para pequeñas
cantidades de etanol, y el sistema tiene equilibrio al acercarse a 0 a medida que la masa aumenta,
ası́ se puede ver en la gráfica: 18.

Figura 18: Descripción gráfica del electrodo desarollado por el método serigrafiado

Cuando se controla el proceso de oxidación y se deja llegar solo hasta el acetaldehido el potencial
es muy pequeño y aumenta al igual que lo hace la masa, tendiendo a su estado de equilibrio cuando
el etanol presente supera una masa de 1.5g; esta situación se evidencia en la gráfica:19

Figura 19: Descripción gráfica del electrodo desarollado por el método serigrafiado

21
 REFERENCIAS

esto implica que que el sensor que el potencial que el sensor debe tener en cuenta para impedir
que el automóvil encienda es cuando tenga un valor de alrededor de 3−6 , lo equivale a una masa
de etanol de 0.3g presente en el sensor.

9. Conclusiones
El aumento de la masa de etanol en el sensor, produce un aumento de iones H + que son
utilizados para generar la diferencia de potencial que se va a detectar. Esta concentración de
iones son producidos por reacciones de oxido-reducción en donde el etanol al interaccionar
con la enzina alcohol deshidrogenasa oxida a la molécula de etanol, luego éste pasa a ser
acetaldehido (se tiene un ión), posteriormete por otra reacción de oxido redución se obtiene
otro ion y pasa a ser ácido acético, sin embargo, no se puede aprovechar al máximo esta
obtención de iones, debido a que si se toman lo iones de ambas oxidaciones, el potencial
no va a aumentae a medida que aumente la concentración de etanol, pero si sólo se da uso
de los iones producidos en la primera oxidación, se obtendrá un potencial proporcional a la
cantidad de etanol que llega al sensor, ppor lo tanto, es necesario controlar la reacción.

El proceso llevado a cabo para el análisis del sensor, se puede aplicar a nivel macro desarro-
llando un sistema integrado de sensores de este tipo que se puede acomodar a cualquier tipo
se superficie, lo que nos permite aplicar el sensor en zonas como el volante, la perilla de abrir
el auto e incluso la llave de abrirlo.

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