Sede Alto Valle y Valle Medio

Carrera de odontología
Cátedra Bases de la Biología
Dra. Paula Mut
Allen

Actividad Práctica
Extracción de ADN de saliva

Nombres:
Saloha Castillo
Fernanda Graf
Sarai Guiñez Rosas
Romina Llamonao
Florencia Ruiz
Nahir Tardugno
Introducción

En el presente trabajo práctico, se evaluará la estructura del ADN, así como también
los diferentes componentes del mismo, y las tareas específicas que realiza cada
uno de ellos. Por otra parte se llevará a cabo una extracción de ADN ensayando el
método indicado por los profesores a cargo y se verificará la efectividad del mismo.
Antes de realizar el trabajo, se debe tener en cuenta algunos conceptos, para la
comprensión del mismo. A continuación se definirán algunos de ellos.
Toda materia viva está constituida por un conjunto de células, las cuales son la
unidad anatómica fundamental de todos los seres vivos. Están especializadas a
realizar funciones específicas. Dentro de cada célula, específicamente las células
eucariotas, existen estructuras ordenadas en el citoplasma, llamadas organulos, que
realizan tareas específicas. Algunas de ellas son; las ​Mitocondrias​ (respiración
celular), ​Ribosomas​ (traducción en la expresión de los genes), ​Lisosomas
(degradación), ​Núcleo​ (centro de control de la célula), etc.
Uno de estos orgánulos específicamente el Núcleo, se encuentra rodeado por una
doble membrana, llamada envoltura nuclear que lo separa del citoplasma, esto hace
la diferencia de las células procariotas con las eucariotas, ya que estas últimas
presentan el material genético organizado dentro del núcleo, representandose
enrollado, simulando la estructura de un ovillo. Como mencionamos, el material
genético (ADN), en las células eucariotas; está dentro del núcleo combinado con
una gran cantidad de proteínas, esto se le denomina cromatina la que en su forma
más pequeña sería fibra condensada, más nucleosoma y hasta llegar a el ADN.
El ADN, es una doble cadena conformada por nucleótidos llamados Adenina,
Guanina, Citosina y Timina. Estos se unen de forma complementaria para darle
estructura a la macromolécula, es decir, Adenina-Timina y Guanina-Citosina. Su
función principal es comandar a la célula para que realice correctamente sus
actividades. Además de portar el material genético, puede realizar copias de sí
mismo lo que hace que la información genética se transfiera de una célula madre a
las células hijas y de generación en generación. También codifica proteínas
adecuadas para cada célula e interviene en el control del metabolismo celular.
En este informe explicaremos la forma de extraer ADN de manera sencilla y rápida,
con materiales que se encuentran en casa. El ADN se podrá ver flotando en el
líquido.

Objetivo

El Objetivo del siguiente trabajo de laboratorio desarrollado, consiste en distinguir

visualmente el material genético (ADN), presente en las células de la saliva. Al
finalizar el experimento, los estudiantes deberan entender los conceptos de
Organización celular, Estructura de los cromosomas, Ciclo celular y el proceso de
duplicación
Materiales y Métodos

Materiales utilizados:
- 1 tubo de ensayo
- 2 vasos de telgopor tamaño mediano
- 1 escarbadiente
- Alcohol etílico
- Buffer (0,5 ml de detergente, ¼ de cucharadita de sal de mesa y 4,5ml de
agua mineral)
- 1 Jeringa con mediciones de ml.
- 1 Tupper en forma de vaso de plástico transparente con tapa
- Linterna de celular
Métodos:

Numeración de pasos Métodos

1 Se toma 2,5 mm de la solución buffer contenidas

en un recipiente plástico , utilizando una jeringa
que estaba medida en centímetros cúbicos,
mientras el donante de saliva se enjuaga la boca y
se prepara para depositarla en el vaso de telgopor.

2 Se coloca la saliva en un vaso plástico

previamente secado, se volvió a leer los
procedimientos indicados en la actividad práctica.

3 Se mezcló la saliva con el buffer cuidadosamente

utilizando un escarbadientes evitando la formación
de espuma durante 3 minutos.

4 Utilizando la jeringa se procedió a trasvasar la

mezcla del vaso al tubo de ensayo, evitando la
formación de espuma.

5 Se extrajo el alcohol del segundo vaso con una

jeringa y se procedió a insertar lentamente por las
paredes del tubo de ensayo hasta duplicar el
contenido, observándose dos fases entre estos.
Dentro del alcohol se distingue algo que acotamos
que tiene forma de hilos que al su alrededor suben
burbujas de pequeños tamaños.
Resultados

Resultados Fotos

Buffer:​ se observó que al juntar el agua,la sal y

el detergente cuidadosamente se formó una
mezcla homogénea.

Saliva:​ Se acota que tiene un color homogéneo

con un poco de espuma.

Buffer y Saliva:​ Al incorporar el buffer a la saliva

luego del tiempo de mezclado, no se logró
homogenizar completamente demostrando las
dos fases que contiene.
Buffer ,Saliva y Alcohol​: Al incorporar el alcohol
a la mezcla antes obtenida se distinguen 3 fases:
la primera; siendo el buffer con la saliva, la
segunda; el alcohol y por último la tercera; los
filamentos nubosos con pequeñas burbujas,
siendo el resultado del contacto entre los
anteriores compuestos
Discusión de los resultados:

Los investigadores genéticos utilizan muestras saliva (tanto como de sangre) para analizar
el ADN y con esto poder entender cómo prevenir o tratar enfermedades, por el efecto que
tienen en respuesta a medicamentos o tratamientos, etc. Es por esto, que…

El detergente funciona como un ácido que se interrumpe en la membrana, el

mismo contiene Lauril, sulfato de sodio, etc. que tienen la función de remover las
grasas (lípidos) y proteínas constituyentes de la membrana que rodea a la célula y
al núcleo. Una vez rota, el ADN es liberado de la célula. El alcohol separa el ADN de
otros componentes celulares, los cuales son dejados en solución acuosa.
El ADN es un ácido que cuando libera su protón que se estabiliza con la carga del
sodio de la sal para evitar que se rompa a causa de otro componente de la célula.

Conclusión:
 ​ ras realizar el experimento y observar los resultados, se llega a la conclusión de que cada
T
elemento utilizado cumple una función específica para lograr llegar al objetivo, es decir,
visualizar el ADN contenido en la saliva. Para cumplir dicho objetivo, estos elementos deben
actuar en conjunto, al mismo tiempo y en el mismo espacio.
La saliva “arrastra” las células que recubren las paredes internas de la boca. El
detergente se encarga de emulsionar los lípidos de las membranas celulares, provocando
rupturas. A su vez, la sal de encarga de evitar que las proteínas se unan al ADN, y para
finalizar, el alcohol separa el material genético de otros componentes celulares que se
encuentran en la solución acuosa. Esto último ocurre ya que las moléculas de ADN son
solubles en agua, pero al encontrarse con la sustancia del alcohol, esta se desenrolla y
precipita, visualizandose como fibras blanquecinas.
Sin embargo, el producto filamentoso que obtenemos de la extracción, no es ADN puro,
sino que también contienen fragmentos de ARN y otros contaminantes.

Bibliografia y Linkografia

- https://www.google.com/search?q=cromatina&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0
ahUKEwjk1ODp-tLhAhVLLLkGHQsOABMQ_AUIDigB&biw=1440&bih=788#imgdii=B
tWz5xFzTybqZM:&imgrc=lFPQKamhwLwsZM:

- Dra. Paula Mut, ​Apunte Bases de la biología, Unidad IV​, Odontología; 2019.

- CampbellNA, ReeceJB. ​Biología,​ 7a ed. Buenos Aires: Editorial Médica

Panamericana; 2008.