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UNIVERSIDAD DE CUENCA

LA CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO Versión:1

INFORME DE PRÁCTICAS DE: BIOQUIMICA Vigencia desde: Septiembre 2018

ESTÁTICA
Elaborado por: Valeriya Kozikova, Jorely Mora, Mateo Curso:3 G2 Revisado por: Q.F. Reina Macero. Ms.C.
Morales

Tema: Determinación de lípidos séricos y sus fracciones

Objetivos:

General:
 Describir los procedimientos adecuados para la determinación de los lípidos.
Específico:
 Conocer la significación clínica de colesterol, triglicéridos, HDL, LDL Y VLDL colesterol.

Introducción:
La determinación de lípidos séricos permite evaluar cuantitativamente los niveles de colesterol, triglicéridos, LDL,
HDL en el organismo, lo mismo que permite mantener un equilibrio adecuado de aquellos para un correcto
funcionamiento corporal. Los desequilibrios de estos, provocan enfermedades en el cuerpo humano.

Equipos Reactivos Materiales

Baño María Set de Colesterol Tubos de ensayo
Espectrofotómetro Set de Triglicéridos Gradillas
Centrífuga Set de LDL Colesterol Pipetas
Set de HDL colesterol Cubetas
Muestra de sangre: Suero
Marco Teórico:
Los lípidos, por su carácter hidrofóbico, no se encuentran circulando libres en el plasma, sino que se unen a proteínas,
formando complejos macromoleculares solubles denominados lipoproteínas. Las lipoproteínas transportan todos los
lípidos que circulan en el plasma sanguíneo: colesterol libre y esterificado, triglicéridos y fosfolípidos. Sólo una
pequeña proporción de los ácidos grasos forman parte de las lipoproteínas, ya que la mayoría de ellos circulan unidos a
la albúmina(1).

Colesterol
Elemento indispensable en la producción de esteroides, síntesis de hormonas femeninas como son los estrógenos,
principal componente de la bilis, catalizador activo de intercambios celulares, interviene activamente en la síntesis de
los andrógenos y es indispensable en la formación de membranas celulares (7).
Significación Clínica

Niveles Elevados
 Hipotiroidismo
 Diabetes incontrolada
 Síndrome nefrótico
 Hipertensión,
 Ateroesclerosis
 Estrés
 Nefrosis (7).

Niveles Bajos
 Desnutrición
 Hipertiroidismo
 Anemia perniciosa
 Enfermedad hepática (7).

Valor referencial
150-200 mg/dl
Riesgo leve 200-239 mg/dl
Riesgo elevado >240 mg/dl(2).

Triglicéridos
Forman parte de las lipoproteínas y se dividen en:
Exógenos: Que son los que le suministramos al organismo al ingerir grasas saturadas.
Endógenos: Que son los que fabrica el hígado en su proceso fisiológico al degradar los exógenos.
Son materia prima para fabricar por hidrólisis, la lipoproteína LDL. Toda lipoproteína tiene triglicéridos, pero éstos son
más abundantes en los quilomicrones y en la fracción VLDL, que representa aproximadamente la quinta parte de los
triglicéridos totales (7).
Es muy benéfico para el organismo, no tener su concentración en exceso, pues este excedente es el primer eslabón en
las alteraciones lipoproteicas que originan una de las principales causas de muerte con sus manifestaciones
cardiovasculares (7).
Significación Clínica
Su aumento puede causar ciertas disfunciones hepáticas como: cirrosis, hepatitis, obstrucción biliar, o diabetes mellitus,
causas de muerte con sus manifestaciones cardiovasculares(3).

Valores de Referencia
Hombres: 40-160 mg/dl.
Mujeres: 35-135 mg/dl(3).

Perfil lipídico
Se incluyen el HDL-c, LDL-c y VLDL colesterol los cuales se diferencian de acuerdo a su densidad, baja y alta
respectivamente.
VLDL: Transportan los TG sintetizados en el hígado (TG endógenos a los tejidos periféricos). Representan el 13% de
colesterol (6) (7).
LDL: Son la principal forma de transporte del colesterol a los tejidos. Representan el 70% de colesterol (6) (7).
HDL: Eliminan el exceso de colesterol de los tejidos y lo devuelven al hígado para su metabolismo o excreción.
Representan el 17% de colesterol (6) (7).

Significación Clínica
La dosificación de las lipoproteínas complementada con la información de colesterol y triglicéridos, dando así el perfil
lipídico y por ende el índice arterial que es una proporción que se obtiene entre la fracción de HDL y colesterol total,
misma que no debe sobrepasar 4, cifra que nos indica que estamos envejeciendo de forma fisiológica y normal. Las
cifras superiores y cercanas indican un riesgo relativo en las arterias y cifras elevadas nos indican alto riesgo (7).

Valores de Referencia

LDL Colesterol
Riesgo Bajo o nulo: menor de 129 mg/dl.
Riesgo moderado o elevado: 130-189 mg/dl.
Riesgo muy elevado: ≥190 mg/dl (4).

HDL Colesterol
40-60 mg/dl
Valores mayores de 40 mg/dl se consideran recomendables, los que se encuentran por encima de los 60 mg/dl se
consideran protectivos. Valores por debajo de los 40 mg/dl indican riesgo (5).

Procedimiento:
Colesterol
 Tubos B St D
Estándar 10ul
Muestra 10ul
Reactivo 1ml 1ml 1ml
Mezclar e incubar a 37°C por 5 Minutos
 Leer a 500 nm
 Leer la absorbancia (A) del patrón y del desconocido. El color es estable como mínimo30 minutos.
 Realizar los cálculos

Triglicéridos

Tubos B St D
Estándar 10ul
Muestra 10ul
Reactivo 1ml 1ml 1ml
Mezclar e incubar a 37°C por 5 Minutos
 Leer a 505 nm
 Medir la absorbancia del estándar y del desconocido frente al blanco de reactivo antes de 60 minutos.

HDL Colesterol

 En un tubo de kahn medir 0.5ml (500ul) de la muestra y añadir 50ul de reactivo presipitante
 Homogeneizar sin invertir 20 segundos, dejar por 30-40 minutos en el refrigerador entre 2-10 oC o a 15
minutos en Baño de agua , no colocar en el congelador.
 Centrifugar la muestra a 3000r.p.m por 15 minutos.
 Utilizar el sobrenadante límpido como muestra.
Disponer de tres tubos:

Tubos B St D
Estándar 100ul
Muestra 20ul
Reactivo 2ml 2ml 2ml
 o
Mezclar e Incubar a 37 C por 5 minutos.
 Retirar del baño y enfriar.
 Leer a 505 nm, llevando a cero con el blanco de reactivo
 Medir la absorbancia del estándar y del desconocido frente al blanco de reactivo. El color de la reacción es
estable 2 horas.
 Realizar los cálculos.

LDL Colesterol

 En un tubo de Kahn colocar 200ul de muestra y 100ul de reactivo A

 Homogenizar agitando, no invertir, por 20 segundos.
 Dejar por 15 minutos en el refrigerador entre 2-10oC o a 15 minutos en Baño de agua.
  Centrifugar la muestra a 3000r.p.m por 15 minutos.
 Separar el sobrenadante.
 Utilizar el sobrenadante como muestra.
Disponer de tres tubos:

Tubos B St D
Estándar 100ul
Muestra 20ul
Reactivo 2ml 2ml 2ml
 o
Mezclar e Incubar a 37 C por 5 minutos.
 Retirar del baño y enfriar.
 Leer a 505 nm, llevando a cero con el blanco de reactivo
 Medir la absorbancia del estándar y del desconocido frente al blanco de reactivo.
 Realizar los cálculos.

Cálculos:
Primero, calculamos el factor de cada prueba:
200 𝑚𝑔/𝑑𝑙 200 𝑚𝑔/𝑑𝑙
Colesterol= 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑒𝑠𝑡á𝑛𝑑𝑎𝑟= 0.346 = 578,03 mg/dl
200 𝑚𝑔/𝑑𝑙 200 𝑚𝑔/𝑑𝑙
Triglicéridos=𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑒𝑠𝑡á𝑛𝑑𝑎𝑟= 0.243 = 823.04
HDL-C= 457 mg/dl (ya viene dado por la casa comercial),
LDL-C= 624 mg/dl

Ahora, calculamos el desconocido:

F*absorbancia del desconocido
Colesterol= 578.03*0.231= 133.52 mg/dl
Triglicéridos= 823.04*0.098=80.65 mg/dl
HDL-C= 457*0.310=141.67 mg/dl
LDL-C= 624*0.338= 210.912 mg/dl
VLDL= TAG/5= 80.65/5=16.13 mg/dl (hay que tener en cuenta que cuando hay un valor de TAG mayor a 300 mg/dl,
no se saca el VLDL).

Conclusión:
Los niveles adecuados de lípidos séricos en el cuerpo es fundamental para mantener un equilibrio en el cuerpo humano;
un desequilibrio de los parámetros de aquel perfil, provoca enfermedades en el organismo. Los procedimientos vistos
en esta práctica permite la evaluación completa de estos parámetros para emitir un resultado correcto. En base a los
resultados de las pruebas para el perfil lipídico podemos observar que el colesterol se encuentra en cantidades más bajas
en relación a los niveles de referencia. Los triglicéridos se encuentran dentro de los valores normales. El HDL
Colesterol se encuentra en cantidades mucho más altas que los valores de referencia, y los valores de LDL Colesterol
nos indican que hay un riesgo muy elevado.
BIBLIOGRAFÍA

1. Brites FD, Rosso LAG, Meroño T, Menafra M. Lípidos y Lipoproteínas. :26.

2. inserto59.pdf [Internet]. [citado 9 de diciembre de 2018]. Disponible en:

http://www.bganalizadores.com.ar/img/inserto59.pdf?fbclid=IwAR1ZJsNL08bhlfxvFfcqvrsaDVR5r
U59c7k2EJNRLp28Fm6EvlC0ARCWYD4

3. 1001310.11.12.13.14 TRIG.pdf [Internet]. [citado 9 de diciembre de 2018]. Disponible en:

http://www.spinreact.com.mx/public/instructivo/QUIMICA%20CLINICA/LIOFILIZADOS/1001310.11
.12.13.14%20TRIG.pdf

4. ldl_colesterol_reactivo_precipitante_sp.pdf [Internet]. [citado 9 de diciembre de 2018].

Disponible en: http://www.wiener-
lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/ldl_colesterol_reactivo_precipitant
e_sp.pdf?fbclid=IwAR3OHe3-y1w_AJvGURjtzxH0hG_QtHaJmPbUxz50x2Q_ovWJF-pQPZY97X4

5. hdl_colesterol_reactivo_precipitante_sp.pdf [Internet]. [citado 9 de diciembre de 2018].

Disponible en: http://www.wiener-
lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/hdl_colesterol_reactivo_precipitan
te_sp.pdf?fbclid=IwAR0GVC7tY43TkU_kHPF8oGi_VaoqgchFUhV0dFbiBq9ZPGuPk9RiaBoqmgU

6. Elena Feduchi Canosa, Isabel Blasco Castiñeyra, Carlos Santigo Romero Magdalena, & Esther
Yañez Conde. Bioquimica Conceptos Esenciales. 1ra ed. España: Médica Panamericana.

7. Ángel Gilberto, Ángel Mauricio. Interpretación Clínica del Laboratorio. Séptima edición. Bogotá
D.C. Colombia: Editorial Medica Panamericana;2006